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基于SLAF-Seq技术的辣椒抗炭疽病QTL定位分析及SSR分子标记开发 被引量:1
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作者 李怡斐 段敏杰 +3 位作者 黄任中 黄启中 王春萍 张世才 《南方农业学报》 北大核心 2025年第2期633-642,共10页
【目的】利用SLAF-Seq技术对辣椒抗炭疽病QTL进行定位分析,开发与炭疽病抗性QTL紧密连锁的分子标记,为辣椒抗炭疽病分子标记辅助选择育种提供理论参考。【方法】以抗病材料PPTC26-3-1-1-1-1-1和感病材料1287为亲本构建F2代群体,并采用SL... 【目的】利用SLAF-Seq技术对辣椒抗炭疽病QTL进行定位分析,开发与炭疽病抗性QTL紧密连锁的分子标记,为辣椒抗炭疽病分子标记辅助选择育种提供理论参考。【方法】以抗病材料PPTC26-3-1-1-1-1-1和感病材料1287为亲本构建F2代群体,并采用SLAF-Seq技术进行分子标记开发,构建高密图遗传连锁图谱。结合表型数据,利用复合区间作图法(CIM)对辣椒果实转色期的炭疽病抗性进行QTL分析。利用Microsatellite(MISA)在定位区间识别SSR位点。【结果】从亲本和子代样品共获得423351627条Reads,其中,来自PPTC26-3-1-1-1-1-1和1287分别为8130516和6621396条,F2代群体120个子代样品的平均Reads数量为34049987个。构建包含4671个SNP分子标记、分布于12个连锁群、总图距为1567.53 cM、平均图距为0.34 cM的辣椒高密度遗传图谱,检测到1个炭疽病抗性相关的QTL(CaR10.1),位于10号连锁群上187930592~189766111 bp物理区间内。共有23个基因定位在关联区域内,根据基因功能注释,其中1个基因编码假定晚疫病抗性蛋白同源物R1B-23异构体X2,1个基因编码PPR蛋白,可能与辣椒果实转色期炭疽病抗性相关。在关联到的QTL区间内开发出SSR分子标记T482,在F2代群体中的验证结果显示,T482引物在F2代群体单株中扩增结果与表型鉴定结果一致。F2代群体抗病和中抗单株中有53株具有抗病亲本的条带,有25株同时具有抗病亲本和感病亲本的条带;F2代群体感病单株中,有42株具有感病亲本的条带。【结论】构建高密度遗传连锁图谱,将辣椒果实转色期炭疽病抗性定位于10号连锁群,在关联区间开发出SSR分子标记T482,可初步鉴别辣椒果实转色期炭疽病抗性,同时结合针刺接种法鉴定,可提高鉴定的准确率。 展开更多
关键词 辣椒 slaf-seq 遗传图谱 炭疽病 QTL SSR分子标记
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基于SLAF-seq技术的湿加松遗传多样性和遗传结构分析 被引量:1
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作者 王哲 邓乐平 +5 位作者 龙永彬 谢威 曾明 欧阳曦 郭文冰 李义良 《林业与环境科学》 2025年第1期1-8,共8页
为了分析湿加松Pinus elliottii×P.caribaea育种群体的遗传多样性和遗传结构,并构建核心种质,辅助湿加松高世代育种,研究以台山市红岭种子园内湿加松初级种子园的50个无性系和湿加松育种园的66个优良个体为材料,通过SLAF-seq技术开... 为了分析湿加松Pinus elliottii×P.caribaea育种群体的遗传多样性和遗传结构,并构建核心种质,辅助湿加松高世代育种,研究以台山市红岭种子园内湿加松初级种子园的50个无性系和湿加松育种园的66个优良个体为材料,通过SLAF-seq技术开发126365个高质量SNP标记。遗传多样性分析结果显示,湿加松育种群体期望杂合度(He)、观测杂合度(Ho)分别为0.2806、0.2103,Nei多样性指数(H)、多态性信息含量(PIC)和香浓-维纳指数(I)分别为0.2819、0.2323和0.4419。系统发育树将所有样本分为3个大分支,群体结构最佳类群数量K=6,其中类群Q4包含的种子园样本最少。评选出了23份材料构建核心种质,遗传多样性覆盖度超过99%,分别来自6个类群,其中只有7个来自初级种子园。该研究表明湿加松育种群体具有中等的遗传多样性和多源的遗传结构,揭示了湿加松初级种子园相较于整个育种群体在遗传结构方面存在一定的缺陷。 展开更多
关键词 湿加松 slaf-seq 遗传多样性 遗传结构
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基于SLAF-Seq的燕麦种质资源遗传多样性分析和群体结构分析
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作者 康佳惠 郑敏娜 +2 位作者 杨富 王力 张知 《草地学报》 北大核心 2025年第10期3185-3193,共9页
为了解不同群体间的遗传多样性及群体变异关系,为燕麦(Avena sativa L.)种质创新提供遗传背景依据,本研究以不同地理来源的98份燕麦种质资源为材料,利用特异性位点扩增片段测序技术(Specific Length Amplified Fragment Sequencing,SLAF... 为了解不同群体间的遗传多样性及群体变异关系,为燕麦(Avena sativa L.)种质创新提供遗传背景依据,本研究以不同地理来源的98份燕麦种质资源为材料,利用特异性位点扩增片段测序技术(Specific Length Amplified Fragment Sequencing,SLAF-Seq)在全基因组范围筛选单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)分子标记。结果表明:基于1470.85 Mb高质量测序数据,共检测到626992个SLAF标签(平均测序深度10.81x),开发出516005个多态性位点,筛选获得8109634个高质量群体SNP,整体杂合率达2.82%;SNP标记在27条染色体上非随机分布,其中,第4号和第5号染色体存在显著富集区;群体结构分析显示本研究中燕麦群体遗传多样性水平较高,群体间遗传分化程度较大,除S_(9)(‘张莜15号’)与S_(8)(‘白燕2号’)、S_(17)(‘白燕20号’)、S_(23)(‘固燕1号’)具有中高水平的近亲关系,S_(70)(‘青海444’)与S_(83)(201430-8-1)、S_(69)(‘饲草10号’)、S_(82)(201406-12)具有中高水平的近亲关系,其余各种质资源间的亲缘关系较远。 展开更多
关键词 燕麦 slaf-seq SNP 遗传多样性分析 群体结构分析
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基于SLAF-seq的广西八角种质资源遗传多样性分析
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作者 李金梅 钟雨 +7 位作者 陈建桦 明如宏 姚绍嫦 李良波 谭勇 黄荣韶 姚春 黄鼎 《广西植物》 北大核心 2025年第4期730-740,共11页
八角作为广西重要的特色经济林木之一,其遗传多样性较为丰富。为揭示广西八角种质资源遗传多样性,该研究运用SLAF-seq技术,对源自广西不同地理区域的53份八角居群样本及42份人工筛选的优良种质样本的单核苷酸多态性(SNP)位点进行了深入... 八角作为广西重要的特色经济林木之一,其遗传多样性较为丰富。为揭示广西八角种质资源遗传多样性,该研究运用SLAF-seq技术,对源自广西不同地理区域的53份八角居群样本及42份人工筛选的优良种质样本的单核苷酸多态性(SNP)位点进行了深入挖掘;基于SNP多态性,对这些八角样本进行了群体遗传结构和遗传多样性分析。结果表明:(1)从95份八角样本中,共获得1588 Mb测序数据和643690个SLAF标签,其中包含74434个多态性SLAF标签,经过滤后得到2690564个群体SNP。(2)95份八角样本可分为2个类群,其中桂北、桂西及部分桂中部地区居群样本聚为类群Ⅰ;42份人工筛选优良种质与桂南、桂东及部分桂中地区的居群样本聚为类群Ⅱ。(3)桂北地区居群的遗传多样性最高,其次依次为桂东、桂中、桂西和桂南地区居群样本,而人工筛选的八角优良种质的遗传多样性最低。综上认为,该研究基于SLAF-seq开发的SNP分子标记,能够有效地分析广西不同地区居群样本及人工筛选的优良种质的遗传多样性,为广西八角的种质资源保护、利用及优良种质筛选提供了重要的理论参考。 展开更多
关键词 八角 slaf-seq SNP 遗传结构 遗传多样性
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基于SLAF-seq技术的山桐子SSR标记开发及应用 被引量:3
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作者 邱文明 严莉 +7 位作者 仝铸 苏春莉 何秀娟 肖翠 王泽琼 周明芹 袁龙义 孙中海 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第12期3929-3938,共10页
为开发山桐子(Idesia polycarpa Maxim.)简单序列重复(simple sequence repeat,SSR)分子标记,本研究构建了山桐子特异性位点扩增片段测序(specific-locus amplified fragment sequencing,SLAF-seq)数据库。基于多态性SLAF标签序列,利用M... 为开发山桐子(Idesia polycarpa Maxim.)简单序列重复(simple sequence repeat,SSR)分子标记,本研究构建了山桐子特异性位点扩增片段测序(specific-locus amplified fragment sequencing,SLAF-seq)数据库。基于多态性SLAF标签序列,利用MISA程序识别到SSR位点30121个,SSR的发生频率为6.16%。SSR序列中包括3451种基元重复类型,其中单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸为优势重复基元,SSR位点数分别为22191(73.67%)、3184(10.57%)和1338(4.44%)。单核苷酸中A/T类型比例最高,为22117(73.42%);二核苷酸和三核苷酸中以TA/AT(1743;5.79%)和AA~(A,G,C,T四种碱基均可)(233;0.77%)重复比例最高,78.52%的SSR长度主要在10~15 bp之间。为验证SSR的可靠性,随机设计合成100对SSR引物,经PCR分析,其中96对引物能扩增出预期条带,35对引物能扩增出多态性条带。选择6对多态性引物对30份山桐子样品进行遗传分析,聚类结果很好地反映出样品来源、地理分布和资源特征。以上结果表明本研究开发的SSR标记成本低、多态性高,未来可用于山桐子种质资源分析、遗传图谱构建和分子辅助育种等研究。 展开更多
关键词 山桐子 简单序列重复(SSR) 简化基因组测序(slaf-seq)
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基于SLAF-Seq的阿拉比卡咖啡遗传多样性分析 被引量:1
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作者 李学俊 王步天 +7 位作者 赵猛 施学东 陈治华 谢纯 卢云峰 董相书 马银波 葛宇 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1583-1593,共11页
【目的】采用特异性位点扩增片段测序(SLAF-Seq)技术对阿拉比卡咖啡种质资源进行遗传多样性分析,明确本地咖啡种质遗传背景,为阿拉比卡咖啡新品种选育提供理论依据。【方法】以国内外40份阿拉比卡咖啡和4份非阿拉比卡咖啡(外类群对照)... 【目的】采用特异性位点扩增片段测序(SLAF-Seq)技术对阿拉比卡咖啡种质资源进行遗传多样性分析,明确本地咖啡种质遗传背景,为阿拉比卡咖啡新品种选育提供理论依据。【方法】以国内外40份阿拉比卡咖啡和4份非阿拉比卡咖啡(外类群对照)种质资源为材料,采用SLAF-Seq技术对其进行SNP标记开发及系统发育、群体遗传结构及主成分分析。【结果】所有供试咖啡属种质资源测序共获得220.54 Mb数据,测序样品平均Reads数量为5012189条,测序平均Q30为95.90%,平均GC含量为39.48%。定位到参考基因组的Clean reads占所有Clean reads总数的百分比平均为95.05%。从44份咖啡属种质资源中共检测到214254个SLAF标签,平均每份样品SLAF标签数量为140742。SLAF标签在每份样本中的分布数量为46234~171026个。共开发出1186433个群体SNP分子标记,每个样品的SNP分子标记数目为381105~903823个,SNP分子标记完整度为32.12%~76.18%,杂合率为6.23%~17.49%。阿拉比卡咖啡SNP分布具有一定的区域集中性,主要集中在1c~11c这套来自其中一个亲本卡尼弗拉咖啡(中粒种)染色体组上。系统发育、群体遗传结构及主成分3种聚类结果显示,阿拉比卡咖啡铁皮卡型、阿拉比卡咖啡波邦型和含有Catimor的类群被明显区分开来独立成群,并明确了18份阿拉比卡咖啡种质的遗传背景。【结论】40份阿拉比卡咖啡主要分为铁皮卡型类群、波邦型类群和含有Catimor商品种质的类群。采用SLAF-Seq技术所开发的SNP分子标记可准确分析阿拉比卡咖啡资源遗传多样性。 展开更多
关键词 阿拉比卡咖啡 遗传多样性 slaf-seq SNP 系统发育 群体遗传结构 主成分分析
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Karyotype establishment and development of specific molecular markers of Aegilops geniculata Roth based on SLAF-seq
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作者 Yongfu Wang Jianzhong Fan +5 位作者 Hong Zhang Pingchuan Deng Tingdong Li ChunhuanChen Wanquan Ji Yajuan Wang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第12期3953-3965,共13页
The constant evolution of pathogens poses a threat to wheat resistance against diseases,endangering food security.Developing resistant wheat varieties is the most practical approach for circumventing this problem.As a... The constant evolution of pathogens poses a threat to wheat resistance against diseases,endangering food security.Developing resistant wheat varieties is the most practical approach for circumventing this problem.As a close relative of wheat,Aegilops geniculata,particularly accession SY159,has evolved numerous beneficial traits that could be applied to improve wheat.In this study,we established the karyotype of SY159 by fluorescence in situ hybridization(FISH)using the oligonucleotide probes Oligo-pTa535 and Oligo-pSc119.2 and a complete set of wheat–Ae.geniculata accession TA2899 addition lines as a reference.Using specific-locus amplified fragment sequencing(SLAF-seq)technology,400 specific markers were established for detecting the SY159 chromosomes with efficiencies reaching 81.5%.The SY159-specific markers were used to classify the different homologous groups of SY159 against the wheat-Ae.geniculata addition lines.We used these specific markers on the 7Mg chromosome after classification,and successfully confirmed their suitability for studying the different chromosomes of SY159.This study provides a foundation for accelerating the application of SY159 in genetic breeding programs designed to improve wheat. 展开更多
关键词 Aegilops geniculata Roth chromosome karyotype analysis FISH slaf-seq specific molecular marker
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基于SLAF-seq技术的甘薯SNP位点开发 被引量:31
8
作者 苏文瑾 赵宁 +3 位作者 雷剑 王连军 柴沙沙 杨新笋 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期27-34,共8页
【目的】单核苷酸多态性(SNP)是基因组中最普遍的遗传变异,是构建遗传图谱、完成分子标记辅助育种的一种非常重要的遗传标记。新一代高通量测序平台为SNP位点的检测提供了强有力的技术支持。多倍体作物通常表现为基因组序列大且重复比例... 【目的】单核苷酸多态性(SNP)是基因组中最普遍的遗传变异,是构建遗传图谱、完成分子标记辅助育种的一种非常重要的遗传标记。新一代高通量测序平台为SNP位点的检测提供了强有力的技术支持。多倍体作物通常表现为基因组序列大且重复比例高,一直以来多倍体作物的SNP位点挖掘面临巨大的挑战。【方法】共收集300份甘薯种质资源,利用SLAF-seq测序技术进行测序。首先以马铃薯基因组为参照,通过生物信息学分析进行实验方案的系统设计,筛选特异长度的DNA片断,构建SLAF-seq文库。后通过高通量测序的方式获得海量序列,进而通过软件分析比对,获得多态性SLAF标签,最后在多态性SLAF标签上开发大量特异性SNP位点。【结果】对照拟南芥的测序数据与其参考基因组进行比对的结果表明,双端比对效率在本试验中为87.71%,酶切效率为93.22%,说明本试验SLAF建库正常。通过测序共产生498.14 Mb的读长数据,测序后各样品所获得的读长数目在441 595—2 731 920范围内,其中,冀薯4号获得的数据量最大,共计获得2 731 920个读长,对照拟南芥数据量最小,共计获得441 595个读长。测序质量值Q30的范围在88.37%—90.67%,样品3043 Q30测序值仅为87.31%,样品鄂紫1号Q30测序值为91.31%,所有样品Q30值均在80%以上。测序获得GC含量的范围在37.23%—38.09%,样品苏薯9号和浙薯2号存在极端值,样品苏薯9号的GC含量在39.80%,样品浙薯2号GC含量在37.10%,所有样品GC含量均值为37.64%,GC含量普遍不高,说明达到测序要求。本研究共计获得597 094个SLAF标签,样品的平均测序深度为11.77×,其中多态性SLAF标签260 000个,占SLAF标签总数的43.54%。根据所获得的260 000个多态性SLAF标签来统计SNP位点信息,共计获得795 794个群体SNP位点。【结论】共获得498.14Mb的读长数据,597 094个高质量的SLAF标签,260 000个多态性SLAF标签,从260 000个多态性SLAF标签上共计开发获得795 794个高质量SNP位点。表明SLAF-seq技术可以很好地应用于甘薯SNP位点的开发,其效率远远高于SSR、AFLP、RAPD等分子标记技术。从全基因组范围获得的SNP位点可以进一步的用来完成后续群体进化分析和特异性SNP标记的开发。 展开更多
关键词 甘薯 slaf-seq SNP位点 高通量测序 分子标记
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基于SLAF-seq技术开发长穗偃麦草染色体特异分子标记 被引量:31
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作者 陈士强 秦树文 +5 位作者 黄泽峰 戴毅 张璐璐 高营营 高勇 陈建民 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期727-734,共8页
长穗偃麦草1E及7E染色体上带有重要的抗赤霉病基因,开发大量相关染色体特异分子标记有助于准确定位抗性基因及获得可用于辅助育种紧密连锁的标记。基于SLAF-seq技术,获得了368个长穗偃麦草1E染色体特异片段,随机选取80个特异片段设计引... 长穗偃麦草1E及7E染色体上带有重要的抗赤霉病基因,开发大量相关染色体特异分子标记有助于准确定位抗性基因及获得可用于辅助育种紧密连锁的标记。基于SLAF-seq技术,获得了368个长穗偃麦草1E染色体特异片段,随机选取80个特异片段设计引物,开发了20个长穗偃麦草1E染色体特异分子标记、2个长穗偃麦草基因组特异分子标记及26个其他特异分子标记,效率达60%。用这些特异标记能稳定检测出不同小麦-长穗偃麦草衍生材料中的1E染色体或片段。通过标记与优良性状的共分离特性,获得与相关基因紧密连锁的标记,将为小麦抗性育种中的分子标记辅助选择提供依据。 展开更多
关键词 长穗偃麦草 slaf-seq技术 染色体特异分子标记 小麦赤霉病 分子标记辅助选择
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基于SLAF-seq技术的葡萄种质遗传多样性分析 被引量:18
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作者 李贝贝 张恒 +4 位作者 姜建福 张颖 樊秀彩 房经贵 刘崇怀 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2109-2118,共10页
利用简化基因组测序技术(SLAF-seq)对304份葡萄种质进行测序,最终获得466618个SLAF标签,其中多态性SLAF标签392374个。通过序列分析,获得481192个有效单核苷酸(SNP)多态标记,并基于这些SNP分析和构建了304个葡萄种质的群体结构和系统发... 利用简化基因组测序技术(SLAF-seq)对304份葡萄种质进行测序,最终获得466618个SLAF标签,其中多态性SLAF标签392374个。通过序列分析,获得481192个有效单核苷酸(SNP)多态标记,并基于这些SNP分析和构建了304个葡萄种质的群体结构和系统发生树。结果表明,SLAF-seq技术能高效、低廉地开发出大量可用于群体遗传分析的SNP标记。通过构建进化树分析发现,欧亚种、欧美杂种及野生种葡萄彼此分开,其中姊妹系品种及具有亲子代关系的品种各自聚在一起,中国葡萄地方品种与国外古老葡萄品种的亲缘关系最近,且起源及遗传背景不详的古老葡萄品种与野生种的亲缘关系较改良品种更近。该结果可为后期进一步研究葡萄的起源进化提供参考,同时为构建SNP指纹数据库提供了基础数据。 展开更多
关键词 葡萄 slaf-seq SNP 遗传多样性
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基于SLAF-seq技术分析甜、糯玉米种质遗传多样性 被引量:12
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作者 李余良 索海翠 +4 位作者 韩福光 刘建华 胡建广 高磊 李武 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期71-78,共8页
利用简化基因组测序技术SLAF-seq,对国内外引进选育的81份鲜食甜、糯玉米自交系进行遗传多样性分析。结果表明,共获得803 058个SLAF标签,其中,多态性SLAF标签373 764个。通过序列分析,获得169 128个有效单核苷酸(SNP)多态标记,利用这些... 利用简化基因组测序技术SLAF-seq,对国内外引进选育的81份鲜食甜、糯玉米自交系进行遗传多样性分析。结果表明,共获得803 058个SLAF标签,其中,多态性SLAF标签373 764个。通过序列分析,获得169 128个有效单核苷酸(SNP)多态标记,利用这些SNP标记分析和构建了81份鲜食甜、糯玉米资源的群体结构和系统发生树,并将其分为2个群。结果表明,简化基因组测序技术SLAF-seq能高效、低廉地开发出大量SNP标记,是作物种质资源群体遗传分析的有效工具。研究结果为甜玉米不同基因的聚合、温-热种质杂交育种、鲜食甜、糯玉米亚种间杂交育种提供依据,有利于鲜食甜、糯玉米自交系的高效利用、品种选育及杂种优势群的建立。 展开更多
关键词 甜、糯玉米 种质 slaf-seq SNPs标记 遗传多样性
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苹果属植物种质多样性的SLAF-seq分析 被引量:11
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作者 高源 王大江 +3 位作者 王昆 丛佩华 李连文 朴继成 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1869-1882,共14页
利用简化基因组测序技术—特异性位点扩增片段测序技术(Specific-locus amplified fragment sequencing,SLAF-seq)对509份苹果属植物种质进行测序,获得586454个SLAF标签,其中多态性SLAF标签463612个;经过序列比对,根据完整度>0.94、... 利用简化基因组测序技术—特异性位点扩增片段测序技术(Specific-locus amplified fragment sequencing,SLAF-seq)对509份苹果属植物种质进行测序,获得586454个SLAF标签,其中多态性SLAF标签463612个;经过序列比对,根据完整度>0.94、次要等位基因频率(MAF)>0.05,过滤筛选得到46460个多态性单核苷酸(SNP)位点;基于这些SNP位点构建苹果属植物不同种的系统发生树并分析主成分。结果表明,通过SLAF-seq技术能够在全基因组范围内快速开发高通量的SNP标记,并直接用于苹果属植物种质资源遗传多样性研究中。34种509份苹果属植物的多样性水平较高(He=0.318,I=0.488,Ae=1.520),在多于1份试材的种群中,变叶海棠的遗传多样性水平最高,中国苹果的遗传多样性水平最低。综合聚类分析和主成分分析结果表明,供试苹果属植物分为5个基本的类群,Ⅰ山荆子类群,Ⅱ苹果属植物野生种类群,Ⅲ苹果栽培品种类群,Ⅳ以中国苹果、八棱海棠、花红、楸子和海棠花为主的类群,Ⅴ新疆野苹果类群。野生种丽江山荆子、山楂海棠、陇东海棠、变叶海棠、花叶海棠、滇池海棠和沧江海棠聚类比较紧密,栽培种之间的亲缘关系相对较近,栽培品种与东方苹果和森林苹果等野生种聚在一起,新疆野苹果与中国原产苹果属栽培种的亲缘与起源演化关系有待于进一步考究。 展开更多
关键词 苹果属 slaf-seq SNP 遗传多样性
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基于SLAF-seq技术构建亚麻高密度遗传图谱 被引量:10
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作者 高凤云 斯钦巴特尔 +6 位作者 张辉 贾霄云 伊六喜 周宇 李强 叶应福 侯建华 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期334-341,共8页
为大量开发SNP用于构建亚麻高质量的连锁遗传图谱,以亚麻品系R43为母本,LH-89为父本,通过杂交构建F2群体,采用SLAF-seq技术,对两个亲本和F2群体100个个体进行高通量测序、SNP标记的开发及亚麻高密度遗传图谱的构建。对参考基因组进行电... 为大量开发SNP用于构建亚麻高质量的连锁遗传图谱,以亚麻品系R43为母本,LH-89为父本,通过杂交构建F2群体,采用SLAF-seq技术,对两个亲本和F2群体100个个体进行高通量测序、SNP标记的开发及亚麻高密度遗传图谱的构建。对参考基因组进行电子酶切预测,最终确定使用HaeⅢ和RsaⅠ酶,酶切片段大小在314~414bp的序列定义为SLAF标签。其次,对基因组DNA进行酶切和SLAF文库构建。最后通过高通量测序获得测序数据,进行多态性SLAF的鉴定和SNP标记的发掘,采用High Map软件构建亚麻高密度遗传图谱。通过高通量测序,共获得196.29M reads,平均质量Q30为81.95%,平均GC含量为38.64%。通过生物信息学分析,共获得260 380个SNP标记,其中有4 547个SNP为高质量SNP标签,用于标记的定位和图谱的构建。共构建15个连锁群,总图距为2 632.94c M,标记间的平均距离为0.92c M。这是在亚麻中首次应用SNP标记构建的高密度遗传图谱,为亚麻的遗传研究和分子标记辅助育种奠定了基础。 展开更多
关键词 亚麻 slaf-seq技术 高通量测序 SNP标记 高密度遗传图谱
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基于SLAF-seq技术鉴定甘蓝型油菜叶缘裂刻性状候选基因 被引量:10
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作者 涂玉琴 张洋 +3 位作者 辛佳佳 涂伟凤 汤洁 戴兴临 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期426-435,共10页
叶缘裂刻性状是甘蓝型油菜遗传育种的理想形态标记。叶缘裂刻性状变异材料的创建对丰富甘蓝型油菜叶片形态和优良品种改良至关重要。本研究以甘蓝型油菜常规品种中双11和甘蓝型油菜叶缘裂刻新品系Y176为亲本(通过甘蓝型油菜与菜远缘杂... 叶缘裂刻性状是甘蓝型油菜遗传育种的理想形态标记。叶缘裂刻性状变异材料的创建对丰富甘蓝型油菜叶片形态和优良品种改良至关重要。本研究以甘蓝型油菜常规品种中双11和甘蓝型油菜叶缘裂刻新品系Y176为亲本(通过甘蓝型油菜与菜远缘杂交获得),从F2群体中分别挑选出叶缘裂刻和正常叶形的植株各50株,构建了两个极端性状混池DNA文库,借助SLAF-seq-BSA技术,挖掘甘蓝型油菜叶缘裂刻性状相关候选基因。共开发出177941个SLAF标签,通过分析SLAF标签的多态性,共获得150168个SNP,其中亲本间共获得128200个SNP。对ED方法和SNP-index方法得到的关联区域进行综合分析,获得1个与目标性状紧密关联的候选区域,位于甘蓝型油菜A10染色体上的14528149~17353693区域,总长度为2.83 Mb,约有666个编码基因。与前人研究定位在同一染色体上,但本研究定位的区间与前人研究不同,说明本研究存在控制叶缘裂刻新基因的可能性大。并对该区域内基因进行功能注释,其中666个注释到NR数据库;517个注释到SwissProt数据库;587个注释到GO数据库;151个注释到KEGG通路;258个注释到COG数据库,对候选基因进行注释有助于进一步分离相关基因。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 叶缘裂刻 slaf-seq 候选基因
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基于SLAF-seq技术的木薯SNP标记开发 被引量:9
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作者 俞奔驰 韦丽君 +2 位作者 雷开文 宋恩亮 马崇熙 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1029-1037,共9页
开发大量木薯(Manihot esculenta)特异分子标记可促进木薯种质资源中优良基因的挖掘和利用。本研究以39份木薯种质资源为材料,利用特异性位点扩增片段测序(specific-locus amplified fragment sequencing,SLAF-seq)技术进行测序,结果显... 开发大量木薯(Manihot esculenta)特异分子标记可促进木薯种质资源中优良基因的挖掘和利用。本研究以39份木薯种质资源为材料,利用特异性位点扩增片段测序(specific-locus amplified fragment sequencing,SLAF-seq)技术进行测序,结果显示:本次实验双端比对效率为90.83%,酶切效率为91.18%;通过测序获得304.30 Mb的读长数据,各样本读长范围在2 123 094~15 102 046之间,对照数据量最小,仅395 790个读长;样品测序质量值(Q_(30))在95.62%~96.60%之间,均在95%以上;GC含量在41.27%~44.96%之间,平均GC含量为42.89%,对照的GC含量为42.93%。本研究共开发出725 220个SLAF标签,样本的平均测序深度为20.98倍(×),多态性SLAF标签446 789个,共得到2 504 553个群体SNP标记。可见,SLAF-seq技术适用于木薯SNP位点的开发,其效率较高。 展开更多
关键词 木薯 分子标记 slaf-seq SNP
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基于SLAF-seq技术的金花茶SNP标记开发及遗传分析 被引量:14
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作者 刘凯 李开祥 +2 位作者 韦晓娟 梁文汇 王坤 《经济林研究》 北大核心 2019年第3期79-83,共5页
为了解金花茶种质的遗传关系,利用SLAF-seq测序技术对在不同地区收集的25份金花茶种质与山茶科其他5份种质进行测序。以猕猴桃基因组为参照,对金花茶基因组DNA酶切构建SLAF-seq文库,利用SLAFseq测序技术对其进行高通量测序、SNP标记开... 为了解金花茶种质的遗传关系,利用SLAF-seq测序技术对在不同地区收集的25份金花茶种质与山茶科其他5份种质进行测序。以猕猴桃基因组为参照,对金花茶基因组DNA酶切构建SLAF-seq文库,利用SLAFseq测序技术对其进行高通量测序、SNP标记开发及其进化关系分析,在多态性SLAF标签上开发特异性SNP位点,最后根据SNP位点构建25份金花茶种质与山茶科其他5份种质的进化树。最终共开发1471113个SLAF标签,其中多态性SLAF标签有69597个;共得到443819个群体SNP位点,其中高一致性的群体SNP位点119452个。遗传分析结果表明,金花茶种群的遗传多样性水平较高,可分成2个大的类群,其中第2类群包含了全部收集的金花茶种质,其又可分为3个亚族,这3个亚族的分化有明显的地域特征。第1亚族主要是来源于越南的金花茶品系,第2亚族由2个越南的金花茶品系和5个中国的金花茶品系组成,第3亚族全部由来源于中国的金花茶品系组成。研究结果从基因组水平揭示不同地区金花茶种质之间的遗传关系,所开发的SNP位点可进一步用于金花茶种群的进化分析、重要性状的关联分析等。 展开更多
关键词 金花茶 slaf-seq SNP 遗传分析
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基于SLAF-seq技术的甘薯种质资源群体遗传进化分析 被引量:7
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作者 李慧峰 黄咏梅 +4 位作者 李彦青 滑金锋 吴翠荣 范继征 陈天渊 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第12期2390-2396,共7页
基于简化基因组测序技术对122份甘薯种质资源进行分析,开发SNP位点并将其应用于种质资源群体结构和遗传进化分析。结果表明,从122份甘薯种质资源中共获得563.18 Mb读长,不同材料的读长数量在1 419 809~8 392 785范围之间。测序质量值Q30... 基于简化基因组测序技术对122份甘薯种质资源进行分析,开发SNP位点并将其应用于种质资源群体结构和遗传进化分析。结果表明,从122份甘薯种质资源中共获得563.18 Mb读长,不同材料的读长数量在1 419 809~8 392 785范围之间。测序质量值Q30在90.61%~96.82%之间,平均Q30为92.78%。测序获得的GC含量在36.46%~40.33%之间,平均GC含量为38.17%,对照GC含量为40.72%。根据测序结果共开发出高质量的SLAF标签2388759个,平均测序深度为17.45’。其中,多态性的SLAF标签77761个,占SLAF标签总数的3.26%。根据所获得多态性SLAF标签统计SNP位点信息,共计获得129 063个群体SNP位点。遗传进化分析表明122份种质资源可以分为3个大类,分类结果与它们的地理来源无直接关系,聚类结果可为甘薯育种亲本组配和杂种优势利用提供科学依据。 展开更多
关键词 甘薯 种质资源 slaf-seq 遗传进化分析
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基于SLAF-seq技术的闽楠SNP标记开发及遗传多样性分析 被引量:6
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作者 李娟 林建勇 +3 位作者 欧汉彪 刘雄盛 姜英 梁瑞龙 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第13期4517-4524,共8页
利用简化基因组测序技术SLAF-seq,对广泛分布在长江以南地区8个省份的33份闽楠种质进行SNP标记开发、指纹图谱构建和遗传多样性分析。本研究对各样品的测序数据进行统计,共获得107.52 Mb Clean Reads数据,每个样品的SNP标记数目介于3090... 利用简化基因组测序技术SLAF-seq,对广泛分布在长江以南地区8个省份的33份闽楠种质进行SNP标记开发、指纹图谱构建和遗传多样性分析。本研究对各样品的测序数据进行统计,共获得107.52 Mb Clean Reads数据,每个样品的SNP标记数目介于309012-540030之间,样本平均测序质量值Q30为93.78%,平均GC含量为40.90%。共获得1072115个SLAF标签,其中多态性SLAF标签275389个。通过序列分析,获得121352个有效的单核苷酸多态性标记(SNP);经过指纹图谱严格的过滤条件,筛选出3452个SNP位点作为指纹图谱SNP。利用开发的SNP分子标记,将33份闽楠种质资源分为3个亚群,这3个亚群分别包含材料为Q1:17个,Q2:11个,Q3:5个。通过进一步过滤,获得270个核心SNP标记作为指纹图谱的核心标记,可用于品种种质的鉴定。研究结果表明,简化基因组测序技术SLAF-seq能高效、低廉地开发出大量SNP标记,是一种适用于闽楠种质资源遗传分析的有效工具;利用筛选出的核心SNP分子标记构建闽楠DNA指纹图谱,为SNP分子标记应用于闽楠种质鉴定、闽楠品种改良与优质品种选育提供依据,也有利于闽楠种质的高效利用及杂种优势群的建立。 展开更多
关键词 闽楠 slaf-seq SNPs标记 指纹图谱 遗传多样性
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基于SLAF-seq技术的山西省地方梨品种的SNP分析 被引量:5
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作者 白牡丹 郝国伟 +2 位作者 张晓伟 杨盛 郭黄萍 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1020-1027,共8页
利用简化基因组测序技术SLAF-seq测序对30个山西省地方梨品种群体结构与亲缘关系进行分析,旨在为梨育种及其资源利用提供参考。通过序列分析,获得603177个SLAF标签,其中多态性的SLAF标签302703个,共得到2140079个群体SNP。利用这些SNP... 利用简化基因组测序技术SLAF-seq测序对30个山西省地方梨品种群体结构与亲缘关系进行分析,旨在为梨育种及其资源利用提供参考。通过序列分析,获得603177个SLAF标签,其中多态性的SLAF标签302703个,共得到2140079个群体SNP。利用这些SNP标签分析可得30个梨品种可以分为两大类。通过构建进化树发现,‘金梨’与‘大黄梨’虽田间性状比较相似,但在进化树上显示两者亲缘关系较远,可以断定二者为不同梨品种。 展开更多
关键词 slaf-seq SNP 群体结构 进化树
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基于SLAF-seq技术的红心火龙果SNP位点开发及遗传分析 被引量:12
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作者 俞超 陈煜 +2 位作者 汪财生 陈佳怡 金从标 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期591-596,共6页
为分析不同品种红心火龙果的遗传关系,本研究采集国内14种红心火龙果品种,通过生物信息学分析进行实验方案的系统设计,将所提取基因组进行酶切,筛选特异长度的DNA片断,构建SLAF-seq文库后进行高通量测序,将获得的序列进行分析比较后得... 为分析不同品种红心火龙果的遗传关系,本研究采集国内14种红心火龙果品种,通过生物信息学分析进行实验方案的系统设计,将所提取基因组进行酶切,筛选特异长度的DNA片断,构建SLAF-seq文库后进行高通量测序,将获得的序列进行分析比较后得到多态SLAF标签,在此标签基础上进一步开发特异性SNP位点,最后建立14种红心火龙果品种的进化树。本研究共开发159 560个SLAF标签,样品的平均测序深度为5.26×;共得到120 294个群体SNP,其中高一致性的群体SNP 51 859个。12种红心火龙果聚类结果发现,样品1、2、6、8、10同缘关系相近;样品3、5、7、9同缘关系相近;样品4、14同缘关系相对较近。研究表明应用SLAF-seq技术开发分子标记的效率比ISSR、RAPD、AFLP等常规技术更高。12种红心火龙果的聚类结果从基因组水平揭示不同地区品种之间的遗传分化关系,为火龙果种质的保护和遗传改良提供参考。 展开更多
关键词 红心火龙果 slaf-seq SNP位点 遗传分析
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