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棉花GhSKIP35基因的克隆与表达分析 被引量:5
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作者 刘凯 张华崇 +2 位作者 齐放军 张文蔚 简桂良 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期111-117,共7页
以中植棉KVlSSH文库为基础,从陆地棉中植棉KVl中克隆出来泛素途径SK/P35基因.命名为Gh.SKIP35。该基因的开放阅读框全长为1863个核苷酸,编码620个氨基酸,含有1个ANK保守结构域。进化分析表明,GhSKIP35蛋白与甜橙(Citrussinensi... 以中植棉KVlSSH文库为基础,从陆地棉中植棉KVl中克隆出来泛素途径SK/P35基因.命名为Gh.SKIP35。该基因的开放阅读框全长为1863个核苷酸,编码620个氨基酸,含有1个ANK保守结构域。进化分析表明,GhSKIP35蛋白与甜橙(Citrussinensis)的SKIP35蛋白相似性最高。qRT—PCR分析显示:在接种大丽轮枝菌V991菌系后初期GhSKIP35基因表达量激增,12h便可达到顶峰,24~48h逐渐下降,推测它在陆地棉抗黄萎病早期防卫反应中起重要作用。利用VIGS(Virusinducedgenesilencing)技术,在中植棉KVl中成功地沉默GhSKIP35基因;对沉默棉株接种大丽轮枝菌V991鉴定显示,其病情指数为50.75,而野生型的中植棉KVl和转化空载体棉株的病情指数分别为9.38和11.54。GhSKIP35基因沉默后,中植棉KVl对黄萎病的抗性丧失,表明GhSKIP35基因在陆地棉抗黄萎病的过程中起重要作用。 展开更多
关键词 棉花 大丽轮枝菌 skip35 QRT-PCR VIGS
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