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O-GlcNAcylation通过调节Rack1蛋白稳定性参与SHH型髓母细胞瘤的形成
1
作者 罗静雅 高堂清 +1 位作者 杨檬檬 杨海红 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第2期55-63,共9页
目的:研究O-GlcNAcylation调节蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,Rack1)的稳定性在SHH型髓母细胞瘤(SHH type medulloblastoma,SHH-MB)形成中的功能作用。方法:选取中国人民解放军西部战区总医院临床肿瘤标本库中分子... 目的:研究O-GlcNAcylation调节蛋白激酶C受体1(receptor for activated C kinase 1,Rack1)的稳定性在SHH型髓母细胞瘤(SHH type medulloblastoma,SHH-MB)形成中的功能作用。方法:选取中国人民解放军西部战区总医院临床肿瘤标本库中分子分型所确定的SHH-MB肿瘤及癌旁组织,分析样本中Rack1和O-GlcNAcylation(O-Glc NAc)的表达水平差异。对于人源髓母细胞瘤细胞系Daoy使用糖基化转移酶(OGT)抑制剂(OSMI-1)和去糖基化转移酶(OGA)抑制剂(TM-G)进行处理,通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法和免疫荧光染色检测肿瘤细胞增殖能力。采用O-Glc NAc酶标记系统、免疫共沉淀(Co-IP)和Western blot法判断Rack1有无发生O-Glc NAc,而后通过环己酰亚胺(CHX)实验和泛素化修饰实验证实O-GlcNAcylation对Rack1蛋白水平的影响。构建敲低Rack1的髓母细胞瘤模型,通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法、免疫荧光染色和划痕实验检测肿瘤细胞增殖能力。同时通过在免疫缺陷型小鼠进行异种原位肿瘤移植进行验证,在所得组织样本中(sh-NC和shRack1)使用Western blot检测下游SHH信号通路变化。结果:Rack1和O-GlcNAcylation在SHH-MB中表达水平显著增高,且Rack1表达水平和患者生存率呈负相关关系。对Daoy细胞系使用OSMI-1、TM-G处理后,发现O-Glc NAc能明显促进Daoy细胞增殖,而抑制细胞O-GlcNAc则抑制细胞增殖。分子实验证实Rack1蛋白O-GlcNAcylation可以调节其蛋白稳定性,进而促进肿瘤细胞增殖。在Daoy细胞系敲低Rack1表达,其细胞增殖能力明显低于对照组;在动物水平方面,相较于对照组,Rack1蛋白敲低的肿瘤组织增殖受到显著抑制。并且Rack1可通过调节SHH信号通路参与SHH-MB形成。结论:O-GlcNAcylation可通过调节Rack1蛋白的稳定性进而参与SHH-MB形成。 展开更多
关键词 RACK1 O-GLCNACYLATION 细胞增殖 shh-MB
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子宫颈病变中SHh信号通路蛋白表达与高危型人类乳头状瘤病毒感染的关系探讨
2
作者 杨娜 刘禄 +4 位作者 蒲泽宴 罗启翅 李凤 魏容 梁艳丽 《临床医药实践》 2016年第3期168-171,共4页
目的:研究Hedgehog(Hh)信号通路蛋白亚家族SHh与高危型人类乳头状瘤病毒(HPV)在女性宫颈病变中相互作用的机制。方法:选择进行子宫颈项目体检及就诊的女性180例,其中阴性宫颈上皮组织40例,宫颈上皮内瘤变(CIN)80例和宫颈鳞状细胞癌(SCC... 目的:研究Hedgehog(Hh)信号通路蛋白亚家族SHh与高危型人类乳头状瘤病毒(HPV)在女性宫颈病变中相互作用的机制。方法:选择进行子宫颈项目体检及就诊的女性180例,其中阴性宫颈上皮组织40例,宫颈上皮内瘤变(CIN)80例和宫颈鳞状细胞癌(SCC)60例,应用免疫组化技术及HPV检测,并进行数据分析。结果:SHh信号各组表达为阳性以上者,SCC组96.7%,CINⅡ-Ⅲ组72.5%,CINⅠ组37.5%,正常组无表达。高危型HPV阳性检出率SCC组95.0%,CINⅡ-Ⅲ组52.5%,CINⅠ组27.5%,正常组5.0%。结论:宫颈病变类型中以CIN及宫颈癌SHh信号通路蛋白表达为主,且高危型HPV检出率高,SHh有望成为宫颈癌靶向治疗新靶点,高危型HPV检测已成为宫颈癌筛查及诊断中的重要项目。 展开更多
关键词 子宫颈 shh 高危型HPV 靶向治疗 筛查 诊断
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儿童髓母细胞瘤组织脑视蛋白3表达与预后的关系
3
作者 陈举林 刘文 +1 位作者 王猛 汪永新 《中华实用诊断与治疗杂志》 2024年第1期47-51,共5页
目的 观察髓母细胞瘤患儿癌组织脑视蛋白3(OPN3)表达情况,探讨OPN3表达与预后的关系。方法 2010年1月—2019年12月新疆医科大学第一附属医院行手术治疗髓母细胞瘤患儿61例,取手术切除癌组织,采用免疫组织化学SP法检测OPN3表达。将61例... 目的 观察髓母细胞瘤患儿癌组织脑视蛋白3(OPN3)表达情况,探讨OPN3表达与预后的关系。方法 2010年1月—2019年12月新疆医科大学第一附属医院行手术治疗髓母细胞瘤患儿61例,取手术切除癌组织,采用免疫组织化学SP法检测OPN3表达。将61例患儿依据OPN3表达情况分为OPN3阳性组38例和OPN3阴性组23例,比较2组髓母细胞瘤分子分型、病变部位、合并脑积水及肿瘤转移率、手术切除程度、Ki-67指数等;多因素logistic回归分析髓母细胞瘤患儿OPN3阳性表达的影响因素。随访1~10年,记录61例患儿肿瘤复发和生存情况,比较OPN3阳性组与OPN3阴性组总生存期和无进展生存期。61例患儿中生存21例为生存组、死亡40例为死亡组,比较生存组与死亡组分子分型、病变部位、合并脑积水及肿瘤转移率、手术切除程度、Ki-67指数、OPN3表达及术后放、化疗情况;多因素Cox回归分析髓母细胞瘤患儿术后死亡的影响因素。结果 (1)OPN3阳性组SHH型比率(65.8%)高于OPN3阴性组(34.8%)(χ^(2)=6.814,P=0.033),病变位于小脑半球比率(7.9%)低于OPN3阴性组(34.8%)(χ^(2)=8.681,P=0.031),性别比例、年龄、Ki-67指数、手术切除程度、合并脑积水及肿瘤转移率与OPN3阴性组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。SHH型是髓母细胞瘤OPN3阳性表达的危险因素(OR=18.56,95%CI:2.846~121.020,P=0.002)。(2)随访至2021年12月,中位随访23(11,40)个月,死亡40例中OPN3阳性表达29例,OPN3阴性表达11例;肿瘤复发5例中OPN3阳性表达2例,OPN3阴性表达3例。OPN3阳性组总生存期[17(7,34)个月]、无进展生存期[15(6,32)个月]均短于OPN3阴性组[40(29,73)、40(25,73)个月](χ^(2)=4.407,P<0.001;χ^(2)=4.117,P<0.001)。(3)死亡组OPN3阳性表达(72.5%)、SHH型(62.5%)比率均高于生存组(42.9%、38.1%)(χ^(2)=17.706,P<0.001;χ^(2)=9.953,P=0.009),术后放疗(32.5%)、化疗(20.0%)比率均低于生存组(85.7%、76.2%)(χ^(2)=12.820,P<0.001;χ^(2)=15.694,P<0.001),性别比例、年龄、病变部位、手术切除程度、合并脑积水及肿瘤转移率与生存组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。SHH型(HR=2.590,95%CI:1.073~6.252,P<0.001)、OPN3阳性表达(HR=6.918,95%CI:2.787~17.174,P<0.001)是髓母细胞瘤患儿术后死亡的危险因素。结论 SHH型髓母细胞瘤OPN3阳性表达率高,OPN3阳性表达者术后易复发、预后差;SHH型、OPN3阳性表达是髓母细胞瘤患儿预后不良的影响因素。 展开更多
关键词 髓母细胞瘤 脑视蛋白3 shh型 预后
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肠型与弥漫型胃癌中Sonic hedgehog与Wnt3A/β-catenin的表达 被引量：3
4
作者 刘先勇 王建宁 +5 位作者 仇伟 李加虎 周宇 王玉红 张若梅 孟春芹 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期248-254,共7页
目的:观察音猬因子(Shh)、Wnt3A/β-catenin(β-连环蛋白)及分泌型卷曲相关蛋白-1(Sfrp1)在慢性浅表性胃炎(CSG)、肠型胃癌(IGC)及弥漫型胃癌(DGC)中表达特点,并研究它们的相关性,初步揭示这两种胃癌有完全不同的发病机制.方法:运用免... 目的:观察音猬因子(Shh)、Wnt3A/β-catenin(β-连环蛋白)及分泌型卷曲相关蛋白-1(Sfrp1)在慢性浅表性胃炎(CSG)、肠型胃癌(IGC)及弥漫型胃癌(DGC)中表达特点,并研究它们的相关性,初步揭示这两种胃癌有完全不同的发病机制.方法:运用免疫组织化学法、Western Blotting方法检测30例CSG(作为对照组)、42例IGC及42例DGC标本中Shh、Wnt3A/β-catenin及Sfrp1蛋白表达特点,比较每种蛋白在各组中表达的差异,并分析它们之间的相关性.结果:免疫组织化学法检测发现:Shh主要表达在细胞浆和细胞膜.在CSG中Shh多阳性或强阳性表达;在IGC中,Shh大多表达减少,呈弱阳性表达,部分甚至不表达;在DGC中,Shh多呈强阳性表达.Shh在3组之间的表达有统计学差异(H=46.064,P<0.001).CSG中Shh表达水平明显高于IGC(P<0.001),显著低于DGC(P<0.05).Shh在DGC中表达水平显著高于IGC(P<0.001).在CSG中,β-catenin主要表达在细胞膜,细胞浆一般不染色或局部淡染,胞核不染色.在IGC中,β-catenin表达水平显著增高,并可观察到胞质与胞核中异位表达,但在DGC中却表达显著减少,有一些甚至不表达.β-catenin在3组之间的表达有统计学差异(H=38.629,P<0.001).β-catenin在CSG中表达水平显著低于IGC(P<0.05),显著高于DGC(P<0.001).β-catenin在IGC中表达显著高于DGC(P<0.001).蛋白免疫印迹试验检测发现:Shh在3组之间的表达有统计学差异(F=739.731,P<0.001).与CSG组比较,Shh蛋白在IGC组表达水平显著减少,在DGC组表达水平显著增高;与DGC组比较,Shh蛋白IGC表达水平显著降低.各组间比较均有显著统计学差异(P<0.001).β-catenin在3组之间的表达有统计学差异(F=253.540,P<0.001).与CSG组比较,β-catenin蛋白在IGC组表达水平显著增高,在DGC组表达水平显著降低;与DGC组比较,β-catenin蛋白在IGC组表达水平显著增高,各组间比较均有显著统计学差异(P<0.001).Shh与β-catenin在IGC与DGC中表达呈负相关(P<0.001).Wnt3A与Sfrp1在3组中多不表达.结论:从CSG到IGC发展进程中,Shh减少,可能打破了Shh与Wnt两个信号通路在胃腺体中的动态平衡,β-catenin表达水平增高,且部分从细胞膜转移至细胞核表达,激活了经典Wnt通路,导致了IGC发生;从CSG到DGC发展进程中,Shh表达显著增多,可能与DGC发病密切相关. 展开更多
关键词 音猬因子 Β连环蛋白 弥漫型胃癌 肠型胃癌 相关性
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