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DNA甲基转移酶抑制剂SGI-1027对人肝细胞癌细胞增殖及凋亡的影响 被引量：1
1
作者 孙宁 张佳林 +2 位作者 张城硕 焦奥 陈保民 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期807-811,共5页
目的探讨SGI-1027对肝细胞癌细胞增殖及凋亡的影响。方法给予不同浓度(0、5、10、15、20、25、30和35μmol/L)的SGI-1027处理Huh7细胞24 h后,MTS法检测SGI-1027对Huh7细胞增殖活性的影响。实验组Huh7细胞中加入SGI-102730μmol/L,对照组... 目的探讨SGI-1027对肝细胞癌细胞增殖及凋亡的影响。方法给予不同浓度(0、5、10、15、20、25、30和35μmol/L)的SGI-1027处理Huh7细胞24 h后,MTS法检测SGI-1027对Huh7细胞增殖活性的影响。实验组Huh7细胞中加入SGI-102730μmol/L,对照组Huh7细胞中仅加入等量0.1%DMSO;碘化丙啶染色和流式细胞仪检测SGI-1027对Huh7细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞仪检测SGI-1027对Huh7细胞凋亡的影响;TUNEL染色观察SGI-1027处理后Huh7细胞形态变化。结果 SGI-1027在Huh7细胞中的IC_(50)为27.3μmol/L,SGI-1027能够抑制Huh7细胞增殖,并呈剂量依赖性。SGI-1027不影响Huh7细胞周期;SGI-1027能够诱导Huh7细胞凋亡,对照组和实验组的凋亡率分别为(3.242±0.204)%和(46.57±2.512)%(P<0.05)。TUNEL染色观察对照组细胞呈圆形,而实验组细胞呈典型凋亡表现,对照组和实验组凋亡细胞百分率分别为(1.077±0.407)%和(58.24±8.427)%(P<0.05)。结论 SGI-1027能够抑制Huh7细胞增殖,并且能够诱导其凋亡。 展开更多
关键词 DNA甲基化 DNA甲基转移酶抑制剂 sgi-1027 肝细胞癌
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新型DNA甲基转移酶抑制剂SGI-1027对尤文肉瘤细胞增殖抑制的实验研究 被引量：2
2
作者 王立国 李岩 +2 位作者 李雷明 赵建淞 李旭 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第21期3051-3055,共5页
目的:探讨新型DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂SGI-1027对尤文肉瘤SK-N-MC和SK-ES-1细胞系增殖和凋亡的影响。方法:细胞活性分析测定细胞增殖状况。流式细胞计数法测量细胞周期的改变。实时定量PCR和Western blot检测DNMT1、DNMT3a和DNMT3b... 目的:探讨新型DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂SGI-1027对尤文肉瘤SK-N-MC和SK-ES-1细胞系增殖和凋亡的影响。方法:细胞活性分析测定细胞增殖状况。流式细胞计数法测量细胞周期的改变。实时定量PCR和Western blot检测DNMT1、DNMT3a和DNMT3b以及抑癌基因p16、p21的mRNA和蛋白水平的变化以及凋亡剪切产物cleaved PARP的表达。结果:SGI-1027明显抑制尤文肉瘤细胞增殖,诱导G2期细胞增加并可见sub G1峰,cleaved PARP表达增加。DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的mRNA水平不变,但DNMT1蛋白水平明显下调;p16和p21的mRNA和蛋白水平上调。结论:新型DNA甲基转移酶抑制剂SGI-1027能够抑制DNMT1活性,激活抑癌基因p16和p21,发挥对尤文肉瘤细胞凋亡诱导作用。 展开更多
关键词 sgi-1027 尤文肉瘤 DNA甲基化
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甲基化转移酶抑制剂SGI-1027对肺腺癌细胞迁移侵袭抑制及SPG20基因甲基化调节作用观察
3
作者 赵宝山 孙光蕊 +3 位作者 黄景涛 韩晓丽 梁宗英 王敏 《山东医药》 CAS 2024年第27期6-9,共4页
目的分析甲基化转移酶抑制剂SGI-1027对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力的抑制作用及痉挛性截瘫-20(SPG20)基因甲基化水平的调节作用,以探讨甲基化转移酶抑制剂对肺腺癌细胞迁移、侵袭的影响及机制。方法以不同浓度甲基化转移酶抑制剂SGI-... 目的分析甲基化转移酶抑制剂SGI-1027对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力的抑制作用及痉挛性截瘫-20(SPG20)基因甲基化水平的调节作用,以探讨甲基化转移酶抑制剂对肺腺癌细胞迁移、侵袭的影响及机制。方法以不同浓度甲基化转移酶抑制剂SGI-1027作用于肺腺癌A549细胞,MTT法测算细胞增殖活力,筛选得到SGI-1027最佳作用浓度为7.5μmol/L,作为后续实验的作用浓度。将A549细胞分为SGI-1027组和二甲基亚砜(DMSO)组,SGI-1027组培养基中加入SGI-1027培养,对照组培养基中加入DMSO培养。两组培养48 h时,采用划痕愈合实验观察细胞迁移能力,Transwell小室实验观察细胞侵袭能力;采用qRT-PCR法检测细胞DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)、SPG20 mRNA,焦磷酸测序法检测细胞SPG20基因甲基化水平,Western blotting法检测细胞DNMT3b、SPG20蛋白。结果培养48 h时,与DMSO组比较,SGI-1027组细胞迁移距离小、穿膜细胞数少(P均<0.05)。与DMSO组比较,SGI-1027组DNMT3b mRNA及蛋白相对表达量下降,SPG20 mRNA及蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。SGI-1027组SPG20基因甲基化率较DMSO组降低(P<0.05)。结论甲基化转移酶抑制剂SGI-1027可抑制肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力,降低细胞SPG20基因甲基化水平;SGI-1027可能通过下调细胞内SPG20基因甲基化水平进而抑制肺腺癌细胞的迁移、侵袭能力。 展开更多
关键词 甲基化转移酶抑制剂 sgi-1027 甲基化转移酶 DNA甲基转移酶3B 痉挛性截瘫-20 肺腺癌
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氯乙醛致HepG2细胞染色体损伤及DNA甲基化相关机制研究
4
作者 王静 赵晓田 +2 位作者 李树元 王龙美 仇玉兰 《山西医科大学学报》 2025年第5期461-468,共8页
目的探究氯乙醛致HepG2细胞染色体损伤及DNA甲基化的相关机制。方法本研究从氯乙醛染毒和甲基化转移酶抑制剂(SGI-1027)干预两方面进行人肝癌HepG2细胞体外实验。氯乙醛染毒实验设置空白对照组、低剂量氯乙醛组(2.25μmol/L)、中剂量氯... 目的探究氯乙醛致HepG2细胞染色体损伤及DNA甲基化的相关机制。方法本研究从氯乙醛染毒和甲基化转移酶抑制剂(SGI-1027)干预两方面进行人肝癌HepG2细胞体外实验。氯乙醛染毒实验设置空白对照组、低剂量氯乙醛组(2.25μmol/L)、中剂量氯乙醛组(4.5μmol/L)和高剂量氯乙醛组(9μmol/L),分别染毒24 h和48 h;SGI-1027干预实验设置溶剂对照组(DMSO)、SGI-1027组(10μmol/L)、氯乙醛组(4.5μmol/L)和氯乙醛+SGI-1027组(4.5μmol/L氯乙醛+10μmol/L SGI-1027),染毒24 h。采用CCK-8检测不同浓度氯乙醛和SGI-1027对细胞存活率的影响;免疫荧光法检测γ-H2AX荧光强度反映DNA双链断裂的程度;Western blot检测DNA损伤修复相关基因BRIP1、TOP3、RAD52和CtIP的蛋白表达水平。结果高、中、低剂量氯乙醛分别对HepG2细胞染毒24 h和48 h,γ-H2AX荧光强度均增加,且γ-H2AX的荧光强度随着氯乙醛浓度的增加而增加(P<0.05);BRIP1蛋白的表达水平,在染毒24 h无明显改变,而染毒48 h仅高剂量组高于对照组(P<0.05);高剂量氯乙醛染毒24 h和48 h后TOP3蛋白表达水平均呈下降趋势(P<0.05);低剂量染毒后RAD52和CtIP蛋白表达水平升高(P<0.05),高剂量染毒24 h后CtIP蛋白表达降低(P<0.05)。与氯乙醛组相比,氯乙醛+SGI-1027组γ-H2AX荧光强度降低(P<0.05),CtIP和BRIP1蛋白的表达明显增加(P<0.05),而RAD52和TOP3蛋白的表达显著降低(P<0.05)。结论氯乙醛能够导致HepG2细胞DNA发生断裂,这与DNA损伤修复基因RAD52和CtIP蛋白的低表达相关,其中CtIP的低表达与高甲基化有关。 展开更多
关键词 氯乙烯 氯乙醛 DNA损伤修复 DNA甲基化 DNA甲基转移酶 sgi-1027
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DNA甲基转移酶抑制剂对结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期影响的体外研究 被引量：3
5
作者 王建军 杜耀武 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2016年第4期304-309,共6页
目的探讨DNA甲基转移酶抑制剂SGI-1027对结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法取对数生长期LoVo细胞,实验组加入终浓度分别为0.1、1、5、10μmol/L SGI-1027的培养液,对照组用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基同步培养。MTT法... 目的探讨DNA甲基转移酶抑制剂SGI-1027对结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法取对数生长期LoVo细胞,实验组加入终浓度分别为0.1、1、5、10μmol/L SGI-1027的培养液,对照组用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基同步培养。MTT法检测SGI-1027作用于LoVo细胞24、48、72 h的增殖抑制率;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;SGI-1027处理后每个浓度收集细胞1×10-6个,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙啶（PI）双染或PI单染流式细胞术分别检测SGI-1027处理后的细胞凋亡率和细胞周期时相分布情况;Western blotting检测SGI-1027对PI3K/Akt通路的影响。结果倒置相差显微镜观察显示,随SGI-1027浓度和作用时间的增加,LoVo细胞的凋亡形态学改变更为显著。除0.1μmol/L SGI-1027处理24 h后的LoVo细胞增殖抑制率与对照组无差异外,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,SGI-1027对LoVo细胞的增殖抑制作用不断增强。与对照组比较,SGI-1027（0.1-10μmol/L）处理LoVo细胞24、48h的凋亡率均升高,且各浓度间的差异均有统计学意义（P〈0.05）。与对照组比较,1-10μmol/L SGI-1027处理后G0/G1期细胞比例及PTEN水平均高于对照组,S期和G2/M期细胞比例及Akt水平均低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论SGI-1027可抑制LoVo细胞的增殖并诱导细胞凋亡及G0/G1期阻滞,可能与其抑制PI3K/Akt通路激活有关,且SGI-1027作用的时间和浓度均对LoVo细胞恶性行为有影响。 展开更多
关键词 DNA甲基转移酶抑制剂 sgi-1027 结肠癌 增殖 凋亡 细胞周期
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