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银加强胶体金技术检测牛副结核病IgG_1抗体的研究 被引量：6
1
作者 金鑫 鲁承 +2 位作者 朱永哲 金明姬 李命九 《中国兽医科技》 CAS CSCD 1999年第2期10-12,共3页
建立了胶体金标记羊抗兔ＩｇＧ检测牛副结核病ＩｇＧ１抗体的银加强胶体金技术（ＳＥＣＧＡ），其抗原包被浓度为２０μｇ／ｍＬ，被检血清稀释度为１∶１６０，被检血清、兔抗牛ＩｇＧ１、金标羊抗兔ＩｇＧ的作用时间分别为１０，２０... 建立了胶体金标记羊抗兔ＩｇＧ检测牛副结核病ＩｇＧ１抗体的银加强胶体金技术（ＳＥＣＧＡ），其抗原包被浓度为２０μｇ／ｍＬ，被检血清稀释度为１∶１６０，被检血清、兔抗牛ＩｇＧ１、金标羊抗兔ＩｇＧ的作用时间分别为１０，２０和６０ｍｉｎ；封闭液的浓度、作用时间和作用温度分别为含２０ｇ／Ｌ明胶ｐＨ７．４的０．０１ｍｏｌ／ＬＴＢＳ，３０ｍｉｎ和３７℃；被检血清、兔抗牛ＩｇＧ１和金标羊抗兔作用之后用洗涤液洗涤时间和次数分别为每次５ｍｉｎ３次，每次５ｍｉｎ２次，每次５ｍｉｎ１次；显影时间为１５ｍｉｎ，定影时间为２ｍｉｎ；凡着色很深、呈均匀一致的灰黑色斑点，且与背景反差强者为强阳性；着色淡，与背景反差小者为弱阳性；不着色者为阴性。用本法检测３９６份疫区牛血清中抗副结核分枝杆菌ＰＰ抗原ＩｇＧ１抗体，其结果对粪便培养阳性牛的检出率为９２．３％；对粪便培养阴性牛的检出率为４．０％；经可靠的检验方法验证，本法的可信度至少达９６．０％（４４／４６）。 展开更多
关键词 牛 副结核病 IgG1抗体 secga
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银加强胶体金技术检测猪细小病毒的研究 被引量：23
2
作者 黄瑜 甘孟侯 刘尚高 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期239-244,共6页
本研究首次成功地建立了检测猪细小病毒（ＰＰＶ）抗原的银加强胶体金检测法（ＳＥＣＧＡ），并确定了操作流程中的最佳试验条件。应用该法对纯化ＰＰＶ抗原的最低检出量为０．３１２５ｎｇ／点，其敏感性分别为间接Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ... 本研究首次成功地建立了检测猪细小病毒（ＰＰＶ）抗原的银加强胶体金检测法（ＳＥＣＧＡ），并确定了操作流程中的最佳试验条件。应用该法对纯化ＰＰＶ抗原的最低检出量为０．３１２５ｎｇ／点，其敏感性分别为间接Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和ＨＡ的８倍和１０００倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明ＳＥＣＧＡ具有较高的特异性。２０份样本ＳＥＣＧＡ的检测结果与病毒分离和鉴定结果完全相符。ＳＥＣＧＡ和间接Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对７７份样本检测的阳性率分别为８３．１％和８０．５％，其阳性符合率为９６．９％。研究结果表明本法具有经济、敏感性、特异性强等优点，可用于ＰＰＶ感染的特异诊断。为胶体金技术应用于畜禽传染病的诊断和研究奠定基础。 展开更多
关键词 猪 细小病毒 银加强胶体金 检测
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银加强胶体金探针检测鸡减蛋综合征病毒的研究 被引量：32
3
作者 程安春 汪铭书 +2 位作者 廖德惠 陈孝跃 钟妮娜 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第7期9-11,共3页
本研究首次报道应用银加强胶体金探针检测鸡减蛋综合征（ＥＤＳ７６）病毒获得成功。经初步提纯后的ＥＤＳ７６病毒免疫兔制备高免血清，按常规方法提取兔抗ＥＤＳ７６病毒的ＩｇＧ，成功地建立了检测ＥＤＳ７６病毒抗原的银加强胶体金... 本研究首次报道应用银加强胶体金探针检测鸡减蛋综合征（ＥＤＳ７６）病毒获得成功。经初步提纯后的ＥＤＳ７６病毒免疫兔制备高免血清，按常规方法提取兔抗ＥＤＳ７６病毒的ＩｇＧ，成功地建立了检测ＥＤＳ７６病毒抗原的银加强胶体金探针法（ＳＥＣＧＰＡ），并确定了操作程序的最佳试验条件为：兔抗ＥＤＳＶＩｇＧ工作浓度为１４００，金标记羊抗兔ＩｇＧ的工作浓度为１２０，银染色的时间为１５ｍｉｎ。用该法对提纯的ＥＤＳ７６病毒（ＥＤＳＶ）抗原的最低检出量为０．１１７１９μｇ／ｍｌ。以此法检测了人工感染的５０只鸡采集的样本，对卵巢、输卵管峡部、咽喉部、软壳蛋的阳性率均为１００％，粪便阳性率为９２％，而检测鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌等鸡源病毒和细菌样品时全部呈阴性反应。研究结果表明，该法具有快速、准确、操作简便、敏感性高、易于判读、特异性强、重复性好等优点。 展开更多
关键词 检测 减蛋综合征 病毒 鸡病 SECGPA
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银加强金标免疫技术在鸡传染性支气管炎病毒检测中的应用 被引量：5
4
作者 王泽霖 王新卫 +2 位作者 刘守川 陈少渠 杨卫华 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期201-205,共5页
采用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG,建立了一种对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)进行检测的银加强金标免疫技术(SECGA).先将抗原点样于硝酸纤维素膜(NCM)中央,封闭后浸于40×稀释的IBV单抗中作用10min,洗涤后再浸于体积比为1:4稀释的金标... 采用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG,建立了一种对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)进行检测的银加强金标免疫技术(SECGA).先将抗原点样于硝酸纤维素膜(NCM)中央,封闭后浸于40×稀释的IBV单抗中作用10min,洗涤后再浸于体积比为1:4稀释的金标羊抗鼠IgG溶液中作用1h,银染10min后观察,在膜上出现灰黑斑点的为阳性结果,反之,不出现斑点为阴性结果.SECGA对IB抗原最低测量值为0.703ng·点-1(约2μL),对含毒尿囊液的最低检测为102..9EID50.结果表明,IB VM41毒株在鸡胚中繁殖时以36～54h检测含毒量最高;SPF鸡感染3d后可从气管粘液中检出病毒.SECGA检测抗原可用于IBV早期检测,具有群特异性,快速、敏感、简便,不需特殊设备,结果易判定等优点,尤适于基层实验室或现场应用. 展开更多
关键词 免疫技术 病毒检测 鸡传染性支气管炎病毒 硝酸纤维素膜 胶体金标记 SPF鸡 早期检测 检测抗原 现场应用 IgG IBV 体积比 测量值 B抗原 尿囊液 含毒量 特异性 实验室 稀释 斑点 单抗 鸡胚 毒株 羊
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单抗介导的银加强金标免疫技术检测传染性支气管炎病毒 被引量：1
5
作者 王新卫 何宏轩 +2 位作者 王泽霖 吴艳云 王承民 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期394-398,共5页
利用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG，建立了一种银加强金标免疫技术（SECGA）检测IB抗原。检测抗原时先将抗原点样于硝酸纤维素膜（NCM）中央，封闭后浸于l：40IBV单抗中作用10min，洗涤后再浸于1：4金标羊抗鼠IgG液中作用1h，银染10min后... 利用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG，建立了一种银加强金标免疫技术（SECGA）检测IB抗原。检测抗原时先将抗原点样于硝酸纤维素膜（NCM）中央，封闭后浸于l：40IBV单抗中作用10min，洗涤后再浸于1：4金标羊抗鼠IgG液中作用1h，银染10min后观察，在膜上出现灰黑斑点的为阳性结果，反之，不出现斑点为阴性结果。SECGA对IB抗原最低检测量为0．703ng／点（2μL），对含毒尿囊液的最低检测量为10^2.9EID50，检测IBV M41在鸡胚中繁殖时以36-54h含毒量最高；检测SPF鸡气管粘液，至少于感染后3d内检出病毒。结果表明，SECGA检测抗原可用于IBV早期诊断，具有群特异性、快速、敏感、简便，不需特殊设备、结果易判定等优点，尤适于基层实验室或现场应用。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 单克隆抗体 胶体金 银加强胶体金检测技术
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IBV抗体的银加强金标免疫技术检测
6
作者 王新卫 王岩 +2 位作者 方丽云 王泽霖 夏平安 《中国农学通报》 CSCD 2007年第5期32-36,共5页
【研究目的】建立可在临床上检测鸡传染性支气管炎抗体的银加强金标免疫技术(SECGA);【方法】将胶体金标记纯化的兔抗鸡IgG,然后将IBV纯化抗原包被于NCM上(0.4ug/片),封闭后在膜片上滴加不同稀释度(10×2X)的血清,作用10分钟,洗涤... 【研究目的】建立可在临床上检测鸡传染性支气管炎抗体的银加强金标免疫技术(SECGA);【方法】将胶体金标记纯化的兔抗鸡IgG,然后将IBV纯化抗原包被于NCM上(0.4ug/片),封闭后在膜片上滴加不同稀释度(10×2X)的血清,作用10分钟,洗涤后浸于1:4金标兔抗鸡IgG液中作用60分钟,再银染10分钟观察结果;【结果】SECGA能检出IB阳性血清的抗体>10×27,而不与ND、EDS76、IBD阳性血清发生有意义的交叉反应(抗体滴度<10×22)。对鸡IgG的最小检测量为0.88ng。用SECGA、气管环中和试验、ELISA试验检测IB抗体有明显的相关性;【结论】银加强金标免疫技术(SECGA)可用于IB抗体的检测,具有敏感、特异、简单、快速、适于现场诊断等优点,适宜于广大基层单位使用。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 抗体 胶体金 银加强胶体金检测技术
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