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抗Her-2-scFv-SEC2融合免疫毒素的构建和功能研究(英文) 被引量:2
1
作者 徐明恺 张成刚 +3 位作者 张惠文 周亚凤 张先恩 刘丽 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第8期781-788,共8页
用基因工程方法,将金黄色葡萄球菌肠毒素 C2 与抗人表皮生长因子受体 HER-2 单链抗体 scFv-B1,以一连接短肽连接,构建融合免疫毒素 B-L-SEC2,并用改进的新型表达载体 pASK75-EX,在大肠杆菌 BL21(ED3)中表达. 以不溶性包涵体形式表达的... 用基因工程方法,将金黄色葡萄球菌肠毒素 C2 与抗人表皮生长因子受体 HER-2 单链抗体 scFv-B1,以一连接短肽连接,构建融合免疫毒素 B-L-SEC2,并用改进的新型表达载体 pASK75-EX,在大肠杆菌 BL21(ED3)中表达. 以不溶性包涵体形式表达的目的蛋白经变性后以镍离子螯和层析纯化,并以透析法进行复性. 流式细胞术和 MTT 实验结果表明,纯化复性的融合免疫毒素 B-L-SEC2,在体外具有与 HER-2 过表达的靶细胞 SK-Br-3 特异性结合的活性,并对该细胞产生显著的特异性生长抑制作用. 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素C2 抗人表皮生长因子受体HER-2 融合免疫毒素 肿瘤靶向 pASK75表达载体
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金葡素SEC2改构蛋白2M-118对AOM-DSS诱导小鼠结肠癌的干预作用 被引量:2
2
作者 王义山 李洪义 +6 位作者 王雨纯 潘梦 张晓鑫 钟小刚 曾海洋 温志腾 宋宇 《海南热带海洋学院学报》 2022年第5期111-117,共7页
初步探究金葡素SEC2改构蛋白2M-118对AOM-DSS诱导的结肠癌模型小鼠的药效学作用。将小鼠分为正常组(CTL)、AOM-DSS模型组(CRC)和2M-118腹腔注射给药组(2M-118),每组10只小鼠,以AOM-DSS诱导建立小鼠结肠癌模型,观察给药前后结肠癌小鼠状... 初步探究金葡素SEC2改构蛋白2M-118对AOM-DSS诱导的结肠癌模型小鼠的药效学作用。将小鼠分为正常组(CTL)、AOM-DSS模型组(CRC)和2M-118腹腔注射给药组(2M-118),每组10只小鼠,以AOM-DSS诱导建立小鼠结肠癌模型,观察给药前后结肠癌小鼠状态变化及粪便状况,进行DAI评分;通过HE染色观察小鼠肠组织病理学变化;称取小鼠脾重及瘤重,计算免疫器官脾脏指数及抑瘤率;采用ELISA法检测小鼠结肠组织中部分炎症因子的表达情况。结果显示,AOM-DSS模型组小鼠腹泻,血便等肠炎症状明显,且后期部分小鼠出现肛外瘤情况,各项指标与正常组相比有明显变化;2M-118组腹泻、便血等肠炎症状明显减轻,与模型组相比促炎因子IL-6和TNF-α的表达量明显下降。研究结果表明,2M-118对AOM-DSS诱导的小鼠结肠癌有一定的保护作用。 展开更多
关键词 结肠癌 sec2 2M-118 细胞因子
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金葡素SEC2改构蛋白2M-118对小鼠的致呕吐、致热毒性和免疫原性作用
3
作者 潘梦 王义山 +4 位作者 宋颖 李洪义 周锦 艾永兴 宋宇 《海南热带海洋学院学报》 2023年第2期122-128,共7页
为了探究金葡素SEC2(Staphylococcal enterotoxins C 2)改构蛋白2M-118对小鼠的致呕吐、致热毒性和免疫原性作用,将BALB/c小鼠分为正常组、2M-118腹腔给药组和灌胃给药组,每组10只;通过观察小鼠给药前后状态变化及记录小鼠体质量和体温... 为了探究金葡素SEC2(Staphylococcal enterotoxins C 2)改构蛋白2M-118对小鼠的致呕吐、致热毒性和免疫原性作用,将BALB/c小鼠分为正常组、2M-118腹腔给药组和灌胃给药组,每组10只;通过观察小鼠给药前后状态变化及记录小鼠体质量和体温,评价2M-118对小鼠的致呕吐和致热毒性;采用MTT法检测2M-118对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;由ELISA法检测小鼠给药2M-118后血清产生中和抗体的情况。结果表明,2M-118并未致小鼠呕吐或致小鼠体温升高;2M-118可以刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,促进脾组织中IFN-γ、TNF-α和IL-2等细胞因子的表达,并刺激机体产生针对2M-118的中和抗体。 展开更多
关键词 sec2 2M-118 细胞因子 免疫原性
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改进YOLOv5s的无人机视角下小目标检测算法 被引量:15
4
作者 刘涛 高一萌 +1 位作者 柴蕊 李政通 《计算机工程与应用》 CSCD 北大核心 2024年第1期110-121,共12页
无人机视角的小目标图像具有目标分布密集、类别不均衡以及特征不明显的特点,导致目标检测任务中出现漏检、误检的问题。针对这些问题,提出一种改进YOLOv5s小目标检测方法,以达到提高目标检测准确率与精确度的目的。重新聚类锚框,更精... 无人机视角的小目标图像具有目标分布密集、类别不均衡以及特征不明显的特点,导致目标检测任务中出现漏检、误检的问题。针对这些问题,提出一种改进YOLOv5s小目标检测方法,以达到提高目标检测准确率与精确度的目的。重新聚类锚框,更精确地锁定检测区域。更改骨干网络结构,在空间金字塔池化层增加卷积,保证充分获取检测目标特征。同时,将网络结构中的C3模块替换成融合通道注意力机制的轻量级SEC2f模块,以提升网络对于小目标检测的局部特征捕获能力。融合解耦检测头,结合自适应锚框计算,有效提取目标区域的特征。在相同参数、相同环境条件下,在DOTA数据集上和VisDrone数据集上检测精度分别提升6.1%、5.2%,表明改进方法在小目标检测任务上的有效性;在公开数据集voc2007+2012上做通用性对比实验,结果表明改进算法具有通用性。 展开更多
关键词 YOLOv5s 聚类算法 sec2f模块 空间金字塔池化 解耦检测头
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一种结合包检测与流检测的SECS2流量识别方法 被引量:1
5
作者 唐璇 严明 万仕贤 《计算机应用与软件》 北大核心 2024年第9期127-135,共9页
要对网络数据包所采用的应用层协议进行识别,保证半导体生产环境的安全,使用传统的基于服务端口和特征字的识别方式都具有一定的局限性,无法达到所需的准确度。针对这种情况,提出一种基于HSMS(High Speed Message Services)头部信息和SE... 要对网络数据包所采用的应用层协议进行识别,保证半导体生产环境的安全,使用传统的基于服务端口和特征字的识别方式都具有一定的局限性,无法达到所需的准确度。针对这种情况,提出一种基于HSMS(High Speed Message Services)头部信息和SECS2数据本身固定模式的识别模型,结合深度包检测、深度流检测、机器学习等技术对SECS2流量进行识别。实验结果表明,该模型能有效地识别SECS2数据包,误判率仅为0.598 8%,相比传统识别方式,误判率降低了29.469 6%。 展开更多
关键词 SECS2 HSMS 流量识别 深度包检测 深度流检测
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金葡菌肠毒素C_2的克隆表达及其生物学活性 被引量:5
6
作者 薛乔 应跃斌 +3 位作者 潘映秋 李丹曦 孙红颖 陈枢青 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期406-411,共6页
目的克隆金葡菌肠毒素C2全长基因,构建SEC2的表达载体,实现其可溶性表达,并对纯化的rSEC2蛋白的生物学活性进行研究。方法通过聚合酶链式反应(polym erase chain reaction,PCR)从金葡菌FR I1230菌株基因中得到肠毒素SEC2的基因,将其克... 目的克隆金葡菌肠毒素C2全长基因,构建SEC2的表达载体,实现其可溶性表达,并对纯化的rSEC2蛋白的生物学活性进行研究。方法通过聚合酶链式反应(polym erase chain reaction,PCR)从金葡菌FR I1230菌株基因中得到肠毒素SEC2的基因,将其克隆至融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌进行表达并对融合蛋白进行亲和色谱纯化。通过考察重组SEC2对淋巴细胞的增殖作用及其对肿瘤细胞杀伤活性的影响,对其超抗原活性和免疫学活性进行研究。结果得到正确的肠毒素SEC2基因序列并得到高效表达的融合蛋白,MTT法结果表明,重组SEC2表现出良好的促淋巴细胞增殖活性,且能够增强淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结论本研究成功克隆了SEC2基因,表达并纯化出具有抗肿瘤生物学活性的重组SEC2蛋白,为进一步对其分子抗肿瘤作用机制进行研究以及构建靶向抗肿瘤融合蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 GST-sec2 超抗原 融合表达 大肠杆菌 MTT法
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一种快速分离纯化金葡萄球菌肠毒素C_2的方法 被引量:2
7
作者 李洪义 陈彦竹 +2 位作者 杨宏丽 陈晓辉 毕开顺 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期574-578,共5页
目的建立一种简单快捷的方法,用来从金黄色葡萄球菌的发酵液(以下简称金葡液)中纯化分离肠毒素C2(staphylococcal enterotoxin C2,SEC2)。方法金葡液首先经超滤浓缩,之后再分别经阳离子交换层析和阴离子交换层析进行选择性分离SEC2,用SD... 目的建立一种简单快捷的方法,用来从金黄色葡萄球菌的发酵液(以下简称金葡液)中纯化分离肠毒素C2(staphylococcal enterotoxin C2,SEC2)。方法金葡液首先经超滤浓缩,之后再分别经阳离子交换层析和阴离子交换层析进行选择性分离SEC2,用SDS-PAGE电泳、HPLC法检测纯度及相对分子质量,飞行质谱测定精确分子质量,对其进行N-端氨基酸序列分析。结果分离得到的SEC2电泳纯及色谱分析纯度均达到质量分数98%以上,经各项理化指标检测均与文献一致,在等电点上表现出微不均匀性,等电点pI为7.49和6.74,该蛋白的分子质量为27.58 ku,N-端氨基酸序列分析与文献报道的SEC2序列一致(ESQPDPTPDELHKSS),最大吸收波长为277.5 nm。结论用该方法得到的SEC2纯度高,回收率质量分数高达50%,适宜于大批量制备SEC2。 展开更多
关键词 金葡菌肠毒素C2(sec2) 阴离子交换层析 阳离子交换层析 微不均匀性
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CSe_2和SeC_2的基态结构与抗氧化活性
8
作者 阮文 《井冈山大学学报(自然科学版)》 2014年第4期31-34,共4页
采用B3LYP/6-311+g(d)方法,计算CSe2和SeC2得到CSe2基态为gX∞1~,属于D∞h构型,SeC2基态为11~AX,属于C2v构型。CSe2和SeC2基态的能隙分别为4.5837和2.1543 eV,用同样方法计算的水分子基态的能隙为9.1899 eV,分别为CSe2和SeC2基态... 采用B3LYP/6-311+g(d)方法,计算CSe2和SeC2得到CSe2基态为gX∞1~,属于D∞h构型,SeC2基态为11~AX,属于C2v构型。CSe2和SeC2基态的能隙分别为4.5837和2.1543 eV,用同样方法计算的水分子基态的能隙为9.1899 eV,分别为CSe2和SeC2基态能隙的2.1和4.3倍。结合CSe2和SeC2基态的绝热电离势和电子亲和能,可见CSe2和SeC2基态的最低空轨道相对容易接受电子,体现了较强的抗氧化活性。比较而言,SeC2比CSe2的抗氧化活性更强一些。 展开更多
关键词 CSe2和sec2 能隙 绝热电离势和电子亲和能 抗氧化活性
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金黄色葡萄球菌肠毒素C2的基因克隆、表达及其生物学活性 被引量:13
9
作者 徐明恺 张成刚 +1 位作者 周亚凤 张先恩 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期275-281,共7页
利用PCR技术从金黄色葡萄球菌的基因组DNA中克隆SEC2全长基因,PCR产物与pGEM-T载体连接,经测序证实后进行亚克隆,构建其表达载体pET-28a-SEC2,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达成熟重组蛋白(rSEC2),纯化rSEC2蛋白并对其生物学活性进行研究. ... 利用PCR技术从金黄色葡萄球菌的基因组DNA中克隆SEC2全长基因,PCR产物与pGEM-T载体连接,经测序证实后进行亚克隆,构建其表达载体pET-28a-SEC2,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达成熟重组蛋白(rSEC2),纯化rSEC2蛋白并对其生物学活性进行研究. 结果表明:成功克隆了SEC2全长基因,测序证实该基因共717 bp,编码239个氨基酸,与GenBank中收录的SEC2成熟蛋白质序列完全一致,SEC2基因登录GenBank(Accession number:AY450554);构建了SEC2的表达载体pET-28a-SEC2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效可溶性表达,可溶性的rSEC2经Ni2+亲和层析纯化达到电泳纯,纯化的rSEC2蛋白经蛋白质印迹检测,并能有效刺激人外周血单个核细胞的增殖,被rSEC2刺激的外周血单个核细胞在体外对肿瘤细胞的生长有显著的抑制作用. 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素C2 克隆表达 生物学活性
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高压下新型MAX相M_(2)SeC(M=Zr,Hf)的密度泛函理论研究
10
作者 何鑫 田辉 +5 位作者 王健 陈万蕾 魏兆旋 刘金程 齐东丽 沈龙海 《高压物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期11-23,共13页
基于密度泛函理论的第一性原理,研究了压力对新型MAX相Zr_(2)SeC和Hf_(2)SeC晶体结构、弹性、电子和热力学性质的影响。弹性常数和声子计算表明,两种化合物在0~40 GPa压力范围内具有稳定结构。与大多数MAX相不同,Zr_(2)SeC和Hf_(2)SeC沿... 基于密度泛函理论的第一性原理,研究了压力对新型MAX相Zr_(2)SeC和Hf_(2)SeC晶体结构、弹性、电子和热力学性质的影响。弹性常数和声子计算表明,两种化合物在0~40 GPa压力范围内具有稳定结构。与大多数MAX相不同,Zr_(2)SeC和Hf_(2)SeC沿a轴方向比沿c轴方向更容易被压缩,外部压力对Zr_(2)SeC晶体结构的影响比Hf_(2)SeC更显著。电子结构计算表明,Zr_(2)SeC和Hf_(2)SeC具有金属性质,压力的升高降低了Zr_(2)SeC和Hf_(2)SeC在费米能级处的电子态密度,因此提高了Zr_(2)SeC和Hf_(2)SeC的稳定性。此外,弹性模量、泊松比和各向异性指数等均随着压力的升高而增大。在0~40 GPa压力范围内,相同压力下Hf_(2)SeC的弹性模量大于Zr_(2)SeC,表明高压下Hf_(2)Se具有比Zr_(2)SeC更强的抗断裂和抗变形能力。热力学性质计算表明,Zr_(2)SeC和Hf_(2)SeC在0~40 GPa压力范围内具有较高的熔化温度。 展开更多
关键词 M_(2)SeC 高压 第一性原理 晶体结构 电子结构
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葡萄球菌肠毒素C2的研究进展 被引量:2
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作者 谷丽维 朱庆 +2 位作者 王君 江华 李建春 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期794-797,共4页
葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin,SE)是一种外源性超抗原,仅需微量即能高效刺激T淋巴细胞增殖,促使其产生细胞毒作用,并释放大量的细胞因子,引发机体自身免疫应答。大量研究表明,SE是一种很有前途的新型肿瘤免疫治疗制剂,目... 葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin,SE)是一种外源性超抗原,仅需微量即能高效刺激T淋巴细胞增殖,促使其产生细胞毒作用,并释放大量的细胞因子,引发机体自身免疫应答。大量研究表明,SE是一种很有前途的新型肿瘤免疫治疗制剂,目前国内已将SEC2应用于肿瘤患者的治疗及对肿瘤患者在进行放化疗时防止白细胞降低。该文综述了SEC2在生物学活性、结构特性、抑制肿瘤细胞生长作用等方面的研究进展。 展开更多
关键词 sec2 细菌超抗原 抗肿瘤作用
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