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大豆脂肪酶SDP1生物信息学分析和基因编辑
1
作者 谷心如 刘新宇 +5 位作者 韩旭达 赵长江 费志宏 魏金鹏 徐晶宇 李佐同 《大豆科学》 北大核心 2025年第2期53-63,共11页
三酰甘油脂肪酶(Suger-dependent1,SDP1)是一种脂解酶,在植物发育过程中发挥重要作用。为发掘大豆SDP1基因的生物学功能,利用生物信息学分析方法对大豆GmSDP1基因的进化关系、保守基序和启动子区域的顺式作用元件等进行分析。利用基因... 三酰甘油脂肪酶(Suger-dependent1,SDP1)是一种脂解酶,在植物发育过程中发挥重要作用。为发掘大豆SDP1基因的生物学功能,利用生物信息学分析方法对大豆GmSDP1基因的进化关系、保守基序和启动子区域的顺式作用元件等进行分析。利用基因编辑技术创制大豆gmsdp1-1^(CR)突变体,对其编辑事件、含油量以及脂肪酸含量进行分析。结果表明:4个大豆GmSDP 1基因与双子叶植物亲缘关系较近,保守结构域和蛋白二级结构高度相似,启动子区域含有抗逆境胁迫以及激素相关的调控元件。对GmSDP1在不同组织部位的表达量分析发现,GmSDP1在子叶、叶片和花等部位表达较高。运用CRISPR-Cas9基因编辑技术创制大豆Willimas 82品种的gmsdp1-1^(CR)突变体,设计1条靶向目的基因GmSDP1-1的特异靶点,构建pGES201-GmSDP1-1敲除载体。毛根转化试验的阳性大豆毛状根编辑效率达到56.52%。大豆稳定转化的T_(1)代基因编辑阳性植株编辑效率为1.5%,选取gmsdp1-1^(CR)突变体做进一步表型分析表明,油酸含量极显著降低,亚麻酸含量极显著升高。研究结果为深入研究GmSDP1基因的功能和调控机制提供了参考依据。 展开更多
关键词 大豆 sdp1基因 CRISPR/Cas9技术 生物信息学分析 组织特异性表达
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回火工艺对SDP1Cu塑料模具钢组织与力学性能的影响
2
作者 陈旋 符蓉 +5 位作者 宗林 吴明辉 冒新国 李欣欣 翟庆华 何西娟 《金属热处理》 北大核心 2025年第5期181-189,共9页
利用扫描电镜、透射电镜和洛氏硬度计,研究了回火温度和时间对不同淬火基体组织的SDP1Cu钢组织和力学性能的影响。结果表明,在回火过程中,随着回火温度从350℃升高到600℃,马氏体淬火组织钢的硬度从42.50 HRC(350℃×1 h)下降到32.0... 利用扫描电镜、透射电镜和洛氏硬度计,研究了回火温度和时间对不同淬火基体组织的SDP1Cu钢组织和力学性能的影响。结果表明,在回火过程中,随着回火温度从350℃升高到600℃,马氏体淬火组织钢的硬度从42.50 HRC(350℃×1 h)下降到32.00 HRC(600℃×1 h),回火温度超过550℃,随着回火时间的延长,硬度急剧下降;回火温度从350℃升高到600℃,贝氏体淬火组织钢的硬度先上升后下降,在475℃回火2 h时达到硬度峰值39.50 HRC;回火温度选择500℃,回火2~20 h可以使两种淬火组织的硬度差值降低到±0.5 HRC,获得良好的硬度均匀性。马氏体组织钢以回火软化为主,主要变化为板条回复、碳化物析出;贝氏体组织钢的组织演化以析出强化为主,主要发生M/A岛的分解、M_(23)C_(6)型碳化物的析出和富铜相的析出。 展开更多
关键词 塑料模具钢 sdp1Cu钢 回火 马氏体 贝氏体 硬度均匀性
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陆地棉GhSDP1及其启动子的克隆与表达分析 被引量：3
3
作者 刘萌萌 韩立军 +2 位作者 刘宝玲 薛金爱 李润植 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期34-43,共10页
三酰基甘油脂肪酶(SDP1)是催化三酰甘油降解的关键酶,在植物油脂代谢调控中起着重要作用。克隆棉花SDP1并研究其在3种胁迫下的表达分析,为解析棉花SDP1的生物学功能提供依据。以陆地棉品种冀丰1271为试材,克隆GhSDP1编码序列和上游启动... 三酰基甘油脂肪酶(SDP1)是催化三酰甘油降解的关键酶,在植物油脂代谢调控中起着重要作用。克隆棉花SDP1并研究其在3种胁迫下的表达分析,为解析棉花SDP1的生物学功能提供依据。以陆地棉品种冀丰1271为试材,克隆GhSDP1编码序列和上游启动子序列;利用PlantCARE分析GhSDP1启动子区顺式作用元件;qRT-PCR检测逆境胁迫下GhSDP1的表达谱;通过烟草瞬时表达pGhSDP1启动子+GUS载体检测启动子活性。结果表明,GhSDP1的编码序列为2 541 bp,其在盐、低温和干旱胁迫下呈差异表达模式。pGhSDP1除具有启动子所必需的TATA-box和CAAT-box等基本顺式作用元件外,还含有多个与光响应、激素响应及逆境应答等相关的顺式作用元件。棉花pGhSDP1启动子能驱动GUS蛋白高效表达,具有较强的启动子活性。研究揭示了棉花GhSDP1参与胁迫应答的新功能。 展开更多
关键词 陆地棉 sdp1 启动子 载体构建 GUS染色
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SDP1塑料模具钢锻造过程组织演变的数值模拟 被引量：5
4
作者 王笑驰 左鹏鹏 吴晓春 《锻压技术》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期16-28,共13页
为改善SDP1塑料模具钢锻造过程中的粗晶问题,利用Deform软件建立了SDP1塑料模具钢锻造过程中的组织演变模型,通过有限元模拟以及元胞自动机的方法研究了不同工艺参数以及两镦两拔工艺对锻造过程中组织演变的影响。结果表明:锻造温度为1... 为改善SDP1塑料模具钢锻造过程中的粗晶问题,利用Deform软件建立了SDP1塑料模具钢锻造过程中的组织演变模型,通过有限元模拟以及元胞自动机的方法研究了不同工艺参数以及两镦两拔工艺对锻造过程中组织演变的影响。结果表明:锻造温度为1100℃时,锻件内部晶粒细小均匀,动态再结晶和晶粒长大的影响达到平衡,平均晶粒尺寸保持在40~50μm;随着压下量和压下速度的增加,晶粒细化显著,但过大易使锻件损坏;送给量为50%~60%时拔长效果最佳,满足拔长效率和晶粒尺寸的要求;经过两镦两拔处理后,锻件整体的平均晶粒尺寸为5~20μm,说明两镦两拔工艺能够有效地细化晶粒尺寸。所得结果对于SDP1塑料模具钢的实际生产具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 sdp1塑料模具钢 锻造 组织演变 两镦两拔工艺 晶粒尺寸
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基于CRISPR-Cas9的拟南芥基因编辑后代鉴定技术的优化 被引量：3
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作者 李子文 刘言 +2 位作者 吕梦洋 高凯莉 张海荣 《河南农业科学》 北大核心 2021年第4期17-21,共5页
利用CRISPR-Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats-CRISPR-associated nuclease 9)系统对植物进行定点编辑的技术已经日渐成熟,但对于被编辑植株后代的鉴定依旧费时费力,以拟南芥SDP1(Sugar-dependent 1)基... 利用CRISPR-Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats-CRISPR-associated nuclease 9)系统对植物进行定点编辑的技术已经日渐成熟,但对于被编辑植株后代的鉴定依旧费时费力,以拟南芥SDP1(Sugar-dependent 1)基因为编辑对象,优化编辑植株后代的鉴定方法。对SDP1基因序列进行分析表明,SDP1基因外显子上含有PAM(Protospacer adjacent motif)序列,且其上游合适的酶切位点有4个,选择第二外显子上含有最常见的SacⅠ酶切位点的20 bp序列作为基因敲除的靶位点,构建了CRISPR-SDP1-Cas9载体,实现对SDP1基因的定点编辑。对经过潮霉素筛选的T1株系DNA进行酶切鉴定和测序峰图分析,选出SacⅠ酶切为3条带的杂合编辑植株,随机挑选的71株T1植株中有24株发生了杂合编辑,编辑效率为16.9%。在48株T2转基因植株中有5株发生了纯合编辑,经测序编辑位点均为SacⅠ酶切位点上碱基插入。综上,选用待编辑基因上PAM序列附近合适的酶切位点作为编辑靶点,通过酶切和测序峰图分析来鉴定后代植株,相比于传统方法对后代植株提取DNA、PCR扩增靶位点、连接T载体后进行多次测序,此方法方便、快捷且经济实用,为CRISPR-Cas9基因编辑后代鉴定提供了简单、快捷的方法。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas9 拟南芥 基因编辑 酶切鉴定 sdp1
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