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甘蓝型油菜固醇载体蛋白2基因BnSCP-2的克隆与表达 被引量:1
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作者 楚璞 翟丽娜 管荣展 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期9-14,共6页
固醇载体蛋白2(SCP-2)是一类小分子碱性蛋白,参与细胞内脂质运输、脂肪酸代谢以及过氧化物酶体β-氧化等过程。利用同源序列设计引物进行PCR扩增,克隆得到甘蓝型油菜固醇载体蛋白2基因的c DNA序列,命名为BnSCP-2。BnSCP-2的开放阅读框长... 固醇载体蛋白2(SCP-2)是一类小分子碱性蛋白,参与细胞内脂质运输、脂肪酸代谢以及过氧化物酶体β-氧化等过程。利用同源序列设计引物进行PCR扩增,克隆得到甘蓝型油菜固醇载体蛋白2基因的c DNA序列,命名为BnSCP-2。BnSCP-2的开放阅读框长372bp,编码一个由123个氨基酸残基组成的蛋白质,预测的蛋白质相对分子质量为13.52kD,等电点为9.35。SCP-2蛋白氨基酸序列非常保守,系统进化分析表明BnSCP-2与拟南芥SCP-2同源性最高。荧光实时定量PCR结果表明BnSCP-2在检测的各个组织均有表达,其中花和花蕾中的表达量最高;赤霉素、细胞分裂素和脱落酸等可显著诱导幼苗中该基因的表达,推测该基因可能参与调控幼苗生长发育。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 固醇转运蛋白2 Bnscp-2基因 克隆 基因表达
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固醇转运蛋白SCP-2研究进展 被引量:2
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作者 陈苗 艾雪 +2 位作者 金松恒 江敏利 郑炳松 《浙江林学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期735-741,共7页
固醇转运蛋白(SCP-2,也称非特异性脂类转移蛋白)是一类碱性小分子蛋白质,存在于过氧化物酶体中,在体外可以增强质膜间胆固醇和脂类的运输,广泛存在于细菌、古细菌和真核生物中。大量的研究表明,它与多种物质的代谢过程有关,但由于它复... 固醇转运蛋白(SCP-2,也称非特异性脂类转移蛋白)是一类碱性小分子蛋白质,存在于过氧化物酶体中,在体外可以增强质膜间胆固醇和脂类的运输,广泛存在于细菌、古细菌和真核生物中。大量的研究表明,它与多种物质的代谢过程有关,但由于它复杂的结构和功能,其具体作用机制目前仍未被明确阐述。为此,作者着重以真核生物SCP-2家族为例,介绍了SCP-2结构域的进化、结构与功能近年来的研究进展,并对SCP-2基因家族及SCP-2蛋白应用前景作了论述。 展开更多
关键词 生物化学 固醇转运蛋白 分子结构 功能
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家族性胆固醇结石患者肝组织SCP_2蛋白的表达 被引量:7
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作者 崔云峰 崔乃强 +1 位作者 李东华 张琚 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2004年第5期376-379,共4页
目的 :研究家族遗传性胆囊胆固醇结石患者、散发性胆固醇结石结石患者和非结石患者肝组织SCP2 基因的表达情况和血脂变化。 方法 :应用Westernblot技术 ,研究了 2 8例具有家族遗传性胆囊胆固醇结石患者、30例散发性结石患者和 32例非结... 目的 :研究家族遗传性胆囊胆固醇结石患者、散发性胆固醇结石结石患者和非结石患者肝组织SCP2 基因的表达情况和血脂变化。 方法 :应用Westernblot技术 ,研究了 2 8例具有家族遗传性胆囊胆固醇结石患者、30例散发性结石患者和 32例非结石患者肝组织SCP2 的蛋白表达水平变化 ;并采用生物化学技术检测其血脂改变。 结果 :家族遗传性和散发性结石患者SCP2 蛋白表达水平较非结石组升高 ,差异有显著性 ;家族遗传性胆固醇结石SCP2 蛋白水平较散发性结石患者升高 ,差异有显著性 ;各组间血脂无显著性差别。 结论 :胆囊胆固醇结石患者肝组织SCP2 蛋白水平升高 ,SCP2 基因表达上调可能是胆囊胆固醇结石形成的重要原因 ;SCP2 展开更多
关键词 SCP2 蛋白表达 致石性胆汁 胆固醇结石 家族遗传性
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胆固醇结石患者固醇携带蛋白2基因单核苷酸多态性的检测 被引量:2
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作者 张淑坤 崔乃强 +2 位作者 崔云峰 李东华 张西波 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2004年第5期380-382,共3页
目的 :检测胆固醇结石患者和非胆石患者固醇携带蛋白 2 (SCP2 )基因单核苷酸多态性 (SNP) ,并探讨SNP与胆固醇结石的关系。 方法 :应用聚合酶链式反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)银染技术并结合DNA直接测序 ,检测了 5 8例散发胆固醇... 目的 :检测胆固醇结石患者和非胆石患者固醇携带蛋白 2 (SCP2 )基因单核苷酸多态性 (SNP) ,并探讨SNP与胆固醇结石的关系。 方法 :应用聚合酶链式反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)银染技术并结合DNA直接测序 ,检测了 5 8例散发胆固醇结石病人和 5 0例非胆石病人SCP2 基因的部分启动子区、全部编码区及部分 3,未翻译区序列。 结果 :SCP2 基因第 14外显子检出变异DNA单链泳动条带。 5 8例散发胆固醇结石病人中共有 31例检测出变异DNA单链泳动带 ,突变率为5 3 4 5 % ;而 5 0例非胆石病人仅有 7例检测到变异泳动带 ,突变率为 14 0 0 % ;两组突变率差异有显著性 (χ2 =2 0 12 3,P <0 0 0 1)。部分病例PCR产物直接测序发现G2 84→A碱基颠换 ,为同义突变。 结论 :SCP2 基因 +2 84位点突变不影响SCP2 蛋白的结构和功能 ,但G2 84→A的基因型频率在胆固醇结石患者较非胆固醇结石病人为高 。 展开更多
关键词 胆固醇结石 病人 患者 基因 携带 蛋白 胆石病 碱基 PCR产物 DNA
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Cloning the sterol carrier protein 2 genes of Japanese toad (Bufo japonicus formosus) and Chinese toad (Bufo gargarizans) and its tissue expression analysis 被引量:2
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作者 Yu-Cheng JI Hui ZHUGE +2 位作者 Shan-Shan ZHANG Shu-Fang ZHANG Xian-Yu Yang 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期398-403,共6页
In this study,to clarify the bioactive polypeptides included in the skins and secretions of Bufo,we screened the Japanese toad(Bufo japonicus formosus) skin cDNA library by colony polymerase chain reaction(PCR),and ob... In this study,to clarify the bioactive polypeptides included in the skins and secretions of Bufo,we screened the Japanese toad(Bufo japonicus formosus) skin cDNA library by colony polymerase chain reaction(PCR),and obtained a transcript of 1 075 bp consisting of 1 37 bp 5′ untranslated region(UTR),515 bp 3′ UTR and a 423 bp open reading frame(ORF) encoding a polypeptide of 140 amino acid residues(GenBank accession number: KF359945).Homolog analysis showed a 70%–96% homology with sterol carrier protein-2(SCP-2) present in other animals,which is implicated in lipid metabolism of other organisms.The gene SCP-2 of Chinese toad(B.gargarizans) was cloned from a first strand cDNA of Bufo skin(GenBank accession number: KF381341) via PCR,whose encoding polypeptide has only one amino acid difference from that of Japanese toad.Tissue distribution analysis showed that SCP-2 expressed in all organs tested,though in the liver and spleen it manifested lower expression than in other organs.These findings might indicate SCP-2 being one of the active ingredients in toad skin.These findings may in turn have implications for further drug development from traditional Chinese medicine sources. 展开更多
关键词 Bufo gavgarizans Bufojaponicusformosus scp-2 cDNA cloning Tissue expression
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新疆维吾尔族胆固醇结石患者肝组织SCP_2蛋白的表达
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作者 雷阳 段绍斌 《新疆医科大学学报》 CAS 2010年第5期517-519,共3页
目的研究新疆维吾尔族(维族)与汉族胆囊胆固醇结石患者及维族非结石患者肝组织固醇携带蛋白2(SCP2)表达和血脂变化情况。方法应用Western blot技术,研究新疆维族胆囊胆固醇结石患者、汉族胆固醇结石患者和维族非结石患者各20例肝组织SCP... 目的研究新疆维吾尔族(维族)与汉族胆囊胆固醇结石患者及维族非结石患者肝组织固醇携带蛋白2(SCP2)表达和血脂变化情况。方法应用Western blot技术,研究新疆维族胆囊胆固醇结石患者、汉族胆固醇结石患者和维族非结石患者各20例肝组织SCP2的蛋白表达水平差异;并采用生物化学技术检测其血脂改变。结果维族与汉族胆囊胆固醇结石患者肝组织SCP2蛋白表达水平差异无统计学意义,维族胆囊胆固醇结石患者肝组织SCP2蛋白表达水平较维族非结石患者升高,差异有统计学意义;各组患者血脂差异无统计学意义。结论新疆维族胆囊胆固醇结石患者肝组织SCP2蛋白水平升高,SCP2表达上调可能是通过影响血脂代谢参与胆囊胆固醇结石的形成。 展开更多
关键词 SCP2 蛋白表达 胆固醇结石 Western BLOT
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鳞翅目昆虫中甾体载体蛋白-2的初步鉴定 被引量:1
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作者 吴彦艳 余学全 +1 位作者 彭建新 洪华珠 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第2期188-190,共3页
甾体载体蛋白-2(SCP-2)是介导昆虫胆固醇吸收和运输的一种重要载体蛋白,已在双翅目中被发现和鉴定。利用SDS-PAGE和western blot鉴定鳞翅目昆虫棉铃虫和粉纹夜蛾离体培养细胞中SCP-2的存在,结果表明棉铃虫中肠组织和粉纹夜蛾Tn5B1细胞... 甾体载体蛋白-2(SCP-2)是介导昆虫胆固醇吸收和运输的一种重要载体蛋白,已在双翅目中被发现和鉴定。利用SDS-PAGE和western blot鉴定鳞翅目昆虫棉铃虫和粉纹夜蛾离体培养细胞中SCP-2的存在,结果表明棉铃虫中肠组织和粉纹夜蛾Tn5B1细胞中确实存在SCP-2蛋白。 展开更多
关键词 鳞翅目昆虫 甾体载体蛋白-2 WESTERN BLOT
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棉铃虫c-Myc基因的原核表达纯化、抗体制备、时空表达谱测定与功能分析 被引量:1
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作者 索倩 孙晓燕 +6 位作者 张莹 王育婧 刘凯于 杨红 洪华珠 彭建新 彭蓉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2730-2742,共13页
细胞致瘤基因(cellular-myelocytomatosis viral oncogene,c-Myc)编码的c-Myc蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路调节相关基因的表达,近年来引起了广泛的研究关注。本研究旨在利用原核表达系统体外表达棉铃虫(Helicoverpa armigera)c-Myc(H... 细胞致瘤基因(cellular-myelocytomatosis viral oncogene,c-Myc)编码的c-Myc蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路调节相关基因的表达,近年来引起了广泛的研究关注。本研究旨在利用原核表达系统体外表达棉铃虫(Helicoverpa armigera)c-Myc(Ha-c-Myc)基因,制备多克隆抗体,明确Ha-c-Myc的时空表达模式,并探究Ha-c-Myc在调控棉铃虫胆固醇载体蛋白-2(sterol carrier protein-2,SCP-2)基因表达中的潜在作用。通过PCR扩增Ha-c-Myc基因并克隆至pET-32a(+)原核表达载体中,构建重组表达质粒pET-32a-Ha-c-Myc,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)细胞,使用IPTG诱导蛋白表达,并通过Ni2+-NTA柱纯化重组蛋白,用重组蛋白免疫新西兰兔制备抗Ha-c-Myc多克隆抗体。利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)法检测棉铃虫不同发育时期(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)和预蛹期不同组织(中肠、脂肪体、头部和表皮)中Ha-c-Myc基因的表达水平。设计合成Ha-c-Myc siRNA并转染棉铃虫Ha细胞,通过qRT-PCR分析Ha-c-Myc基因的RNA干扰后棉铃虫Ha-c-Myc基因和HaSCP-2基因mRNA表达的情况。结果表明,本实验构建了pET-32a-Ha-c-Myc重组质粒,在大肠杆菌中获得了高效表达的、大小约为65 kDa的可溶性Ha-c-Myc蛋白。经纯化得到纯度较高的蛋白,免疫新西兰兔制备了多克隆抗体,免疫印迹实验(Western blotting)表明抗体的特异性较好,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分析显示抗体具有较高的效价。qRT-PCR实验发现Ha-c-Myc基因在棉铃虫各发育阶段均有表达,在幼龄和大龄幼虫及预蛹中表达量较高,其中预蛹的表达量最高。组织表达结果显示,Ha-c-Myc基因在预蛹不同组织均有一定表达但存在差异,在中肠部位具有高表达,而在表皮和脂肪体表达水平较低。RNA干扰的结果显示,Ha-c-Myc表达的敲降对HaSCP-2基因的转录有较大影响,导致HaSCP-2基因的相对表达水平显著性降低了50%。上述研究表明,利用pET-32a(+)原核表达系统可以有效地表达可溶性Ha-c-Myc蛋白,并且制备高质量的抗Ha-c-Myc多克隆抗体。RNA干扰证明在中肠组织高表达的Ha-c-Myc能促进HaSCP-2基因的转录表达,在棉铃虫的脂质代谢中具有重要作用。本实验结果有助于深入研究Ha-c-Myc在棉铃虫中的潜在功能及其作用机理,为探究绿色农药的新型作用靶标提供实验数据。 展开更多
关键词 棉铃虫 Ha-c-Myc 原核表达 scp-2 时空表达谱 RNA干扰 脂质代谢
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紫云英汁液单细胞蛋白发酵工艺研究 被引量:2
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作者 李永泉 贺筱蓉 +2 位作者 赵小立 翁醒华 周红军 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 1995年第1期90-94,共5页
紫云英汁液含有10%的糖和2.66%的有机氮化物,稀释成5倍后,以假丝酵母Candida arboro As2.566为生产菌进行单细胞蛋白发酵,通过单因素搜索和正交试验对发酵工艺进行了优化,结果表明:较优培养基为初糖2.5%、酵母粉0.15%、(KH)_2PO_40.... 紫云英汁液含有10%的糖和2.66%的有机氮化物,稀释成5倍后,以假丝酵母Candida arboro As2.566为生产菌进行单细胞蛋白发酵,通过单因素搜索和正交试验对发酵工艺进行了优化,结果表明:较优培养基为初糖2.5%、酵母粉0.15%、(KH)_2PO_40.2%、MgSO_4 0.05%,初始pH值=5,发酵温度30℃,接种量5%。在2L发酵罐中验证,酵母浓度最高达10.53g干重/L,基质生长得率为0.522g菌体/g基质,基质转化率为81%。本研究对于高糖植物的生物量利用具有较重要的意义。 展开更多
关键词 紫云英汁液 单细胞蛋白 发酵 阿保利假丝酵母
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土壤酸化作用对磺胺氯哒嗪吸附行为的影响 被引量:4
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作者 曾庆辉 王雨薇 李莉 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期359-365,共7页
参照OECD guideline 106批平衡方法研究酸化作用对磺胺氯哒嗪在黑土中的吸附动力学、吸附热力学以及有机质和离子强度对其吸附的影响。结果显示:酸化作用下磺胺氯哒嗪在黑土中吸附平衡时间为12 h,准二级动力学方程拟合的酸化黑土中的吸... 参照OECD guideline 106批平衡方法研究酸化作用对磺胺氯哒嗪在黑土中的吸附动力学、吸附热力学以及有机质和离子强度对其吸附的影响。结果显示:酸化作用下磺胺氯哒嗪在黑土中吸附平衡时间为12 h,准二级动力学方程拟合的酸化黑土中的吸附速率常数(k_2)为216.275 5 mg/(g·h),大于对照黑土中的15.722 2 mg/(g·h);从吸附热力学结果看,酸化作用明显提高磺胺氯哒嗪与黑土的结合能力,其吸附量与温度呈负相关;从吸附自由能(ΔG)结果看,其吸附过程是以物理吸附为主的自发反应,但酸化作用使|ΔG|增大,体系更稳定且更易进行自发反应;添加有机质可以增加黑土对磺胺氯哒嗪的吸附,但在酸化黑土中增加效果不如对照黑土;磺胺氯哒嗪在黑土中的吸附能力随背景溶液Ca^(2+)浓度增大而减小,酸化作用下使其与Ca^(2+)产生竞争关系,离子浓度越大竞争能力越强,黑土对磺胺氯哒嗪的吸附量则越少。 展开更多
关键词 磺胺氯哒嗪 酸化作用 黑土 吸附 有机质 CA^2+
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胆固醇结石病人肝组织固醇携带蛋白2 mRNA的表达 被引量:8
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作者 张淑坤 崔乃强 +2 位作者 李东华 张艳萍 汤新之 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2003年第7期423-425,共3页
目的 研究胆固醇结石病人和非胆固醇结石病人肝组织SCP2 mRNA的表达情况。方法 应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,研究了 36例胆固醇结石病人和 30例非胆固醇结石病人肝组织SCP2 mRNA的表达水平。结果 胆固醇结石组SCP2 mRNA... 目的 研究胆固醇结石病人和非胆固醇结石病人肝组织SCP2 mRNA的表达情况。方法 应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,研究了 36例胆固醇结石病人和 30例非胆固醇结石病人肝组织SCP2 mRNA的表达水平。结果 胆固醇结石组SCP2 mRNA表达水平较非胆固醇结石组升高 ,差异有显著性。结论 胆固醇结石病人肝组织SCP2 mRNA表达水平升高 ,SCP2 基因表达过度可能是胆固醇结石形成的重要原因。 展开更多
关键词 胆固醇结石 肝组织 固醇携带蛋白2 基因表达 发病机制
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Sterol carrier protein 2: A promising target in the pathogenesis of atherosclerosis
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作者 Can Xu Heng Li Chao-Ke Tang 《Genes & Diseases》 SCIE CSCD 2023年第2期457-467,共11页
Atherosclerosis, the underlying pathophysiological basis of cardiovascular disease, has been recognized as a lipid-driven chronic inflammatory disease. Sterol carrier protein 2 (SCP-2) is a 13-kDa non-specific lipid-t... Atherosclerosis, the underlying pathophysiological basis of cardiovascular disease, has been recognized as a lipid-driven chronic inflammatory disease. Sterol carrier protein 2 (SCP-2) is a 13-kDa non-specific lipid-transfer protein expressed by various tissues and cells, such as liver, heart, vascular smooth muscle cells (VSMCs), and macrophages. SCP-2 has an extensive role in cardiovascular and metabolic diseases. Recently, SCP-2 was reported to promote the development of atherosclerosis by regulating lipid metabolism and peroxidation, endocannabinoid metabolism, vascular inflammation, and fatty acid metabolism. In this review, we summarized the recent advances regarding the role of SCP-2 in the pathogenesis of atherosclerosis and tried to provide a rationale for future investigation and a better understanding of the biological functions of SCP-2 in atherosclerotic cardiovascular disease. 展开更多
关键词 ATHEROSCLEROSIS Fatty acid metabolism Lipid metabolism scp-2 Vascular inflammation
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