SBV对GEO短弧初轨确定误差分析 被引量：2

1

作者 李骏 安玮 周一宇 《航天控制》 CSCD 北大核心 2008年第4期21-25,共5页

SBV开创了天基光学空间目标监视的先河,其主要任务是弥补地基观测站对GEO等高轨深空目标监视能力的欠缺。空间目标监视任务中,非相关目标的初轨确定具有重要意义。本文针对SBV对GEO目标的短弧段初轨确定问题,通过对短弧段测量方程系数... SBV开创了天基光学空间目标监视的先河,其主要任务是弥补地基观测站对GEO等高轨深空目标监视能力的欠缺。空间目标监视任务中,非相关目标的初轨确定具有重要意义。本文针对SBV对GEO目标的短弧段初轨确定问题,通过对短弧段测量方程系数矩阵和初轨误差的推导分析,研究短弧段初轨计算病态性和误差特性,为天基监视系统设计提供参考。 展开更多

关键词 sbv 初轨确定 误差分析

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Heisenberg群上BV函数和SBV函数的若干特征

2

作者 宋迎清 《南京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期653-657,共5页

该文揭示了Heisenberg群 Hn 上BV函数SBV函数的弱导数作为Radon测度的几个重要分布特征并给出了BV函数成为SBV函数的一些充分条件和必要条件。

关键词 BV函数 sbv函数 HEISENBERG群 RADON测度 分布特征 变分问题 充分条件 必要条件

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SBV REGULARITY OF GENUINELY NONLINEAR HYPERBOLIC SYSTEMS OF CONSERVATION LAWS IN ONE SPACE DIMENSION 被引量：1

3

作者 Stefano Bianchini 《Acta Mathematica Scientia》 SCIE CSCD 2012年第1期380-388,共9页

The problem of the presence of Cantor part in the derivative of a solution to a hyperbolic system of conservation laws is considered. An overview of the techniques involved in the proof is given, and a collection of r... The problem of the presence of Cantor part in the derivative of a solution to a hyperbolic system of conservation laws is considered. An overview of the techniques involved in the proof is given, and a collection of related problems concludes the paper. 展开更多

关键词 hyperbolic systems conservation laws sbv REGULARITY

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PPRV、RVFV、SBV三重普通及实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用研究 被引量：4

4

作者 赵文华 李富祥 杨仕标 《现代畜牧兽医》 2021年第2期5-11,共7页

为同时检测小反刍兽疫病毒(PPRV)、裂谷热病毒(RVFV)及施马伦贝格病毒(SBV) 3种外来动物疫病病原,根据GenBank相关病毒序列设计引物及探针,建立PPRV、RVFV、SBV三重普通RT-PCR及三重实时荧光定量RT-PCR检测方法,并初步应用于临床检测。... 为同时检测小反刍兽疫病毒(PPRV)、裂谷热病毒(RVFV)及施马伦贝格病毒(SBV) 3种外来动物疫病病原,根据GenBank相关病毒序列设计引物及探针,建立PPRV、RVFV、SBV三重普通RT-PCR及三重实时荧光定量RT-PCR检测方法,并初步应用于临床检测。结果显示:所建立的PPRV、RVFV、SBV三重普通RT-PCR方法可同步特异性检测PPRV、RVFV、SBV,检测敏感度可达10~3 copies/μL DNA;对临床症状相似的羊痘、羊口疮、口蹄疫、阿卡斑、蓝舌病及鹿流行性出血热等病毒未有扩增。所建立的PPRV、RVFV、SBV三重实时荧光定量RT-PCR方法对PPRV、RVFV、SBV有特异荧光信号,检测敏感度可达10~(1.33)~10~(2.13) copies/μL DNA;而对临床症状相似羊痘、羊口疮、口蹄疫、阿卡斑、蓝舌病及鹿流行性出血热等病毒未有荧光信号。应用PPRV、RVFV、SBV三重实时荧光定量RT-PCR方法检测925份临床样本,检出一例PPRV阳性样本,经常规RT-PCR扩增及序列测定Blast确定为PPRV谱系IV型毒株。研究所建立的PPRV、RVFV、SBV三重普通RT-PCR方法和三重实时荧光定量RT-PCR方法可同步特异性检测3种病原,并初步应用于临床样本的检测。 展开更多

关键词 小反刍兽疫病毒 裂谷热病毒 施马伦贝格病毒 三重普通RT-PCR 三重实时荧光定量RT-PCR

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施马伦贝格病毒N蛋白原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量：1

5

作者 李阳 孙睿雪 +3 位作者 陈天杰 刘思彤 曹家慧 赵建军 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3877-3887,共11页

[目的]建立一种具有良好特异性和敏感性的施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)抗体间接ELISA(indirect ELISA,iELISA)检测方法。[方法]将SBV N蛋白编码基因全长序列克隆至pET-28a(+)质粒中,构建重组质粒pET-28a-SBV,利用大肠杆菌... [目的]建立一种具有良好特异性和敏感性的施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)抗体间接ELISA(indirect ELISA,iELISA)检测方法。[方法]将SBV N蛋白编码基因全长序列克隆至pET-28a(+)质粒中,构建重组质粒pET-28a-SBV,利用大肠杆菌表达系统表达目的蛋白并用His镍柱进行纯化,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定后,以纯化的SBV N蛋白作为检测抗原进行包被,建立一种iELISA方法,并对其包被条件、封闭液、封闭时间和血清孵育时间等反应条件进行优化,检测其阴阳性临界值、特异性、灵敏性和重复性。[结果]SDS-PAGE结果显示,SBV N蛋白分子质量为30 ku;Western blotting结果显示,纯化后SBV N蛋白与SBV阳性血清能产生特异性反应。本研究建立的SBV iELISA检测方法最佳条件为:SBV N抗原包被浓度4μg/mL、4℃包被12 h、1%明胶37℃封闭1 h、血清稀释度为1:200、37℃孵育1 h、1:6 000稀释的酶标二抗37℃孵育1 h,其阴阳性临界值为0.371。该iELISA检测方法仅与SBV阳性血清产生特异性反应,与牛副流感病毒3型(BPIV3)、牛轮状病毒(BRV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和阿卡斑病毒(AKAV)阳性血清均无明显交叉反应,灵敏性较高,SBV阳性血清稀释度为1:1280时仍有明显反应。批间重复试验和批内重复试验变异系数均<10%;与商品化试剂盒相比,其总符合率为94.57%。[结论]本研究建立了一种以SBV N蛋白为检测抗原的SBV iELISA方法,该方法具有良好的特异性和敏感性,能运用于SBV血清学检测,试验结果为SBV的快速诊断提供更多选择。 展开更多

关键词 施马伦贝格病毒(sbv) N蛋白 间接ELISA(iELISA) 原核表达

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天基可见光传感器卫星监视地球同步带目标的轨道设计 被引量：4

6

作者 唐毅 吴美平 +1 位作者 李显 付晓锋 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期560-566,共7页

在分析地球同步轨道目标光学特性和位置特性的基础上,确定了天基可见光(Space-Based Visible,SBV)传感器监视整个地球同步带目标的搜索栅栏位置以及搜索策略,导出搜索栅栏与观测时间和观测次数之间的关系.根据航天任务需求和SBV传感器特... 在分析地球同步轨道目标光学特性和位置特性的基础上,确定了天基可见光(Space-Based Visible,SBV)传感器监视整个地球同步带目标的搜索栅栏位置以及搜索策略,导出搜索栅栏与观测时间和观测次数之间的关系.根据航天任务需求和SBV传感器特性,确定了监视轨道的类型和参数约束条件,给出了约束条件下监视轨道的选取范围,并对其轨道观测效能进行仿真分析.仿真结果表明,通过适当选取监视轨道参数,监视轨道对地球同步带的覆盖率均可达到90%以上.如果SBV传感器视场达到4°×4°以上或搜索栅栏宽度大于40°,其覆盖率高达95%以上. 展开更多

关键词 空间监视 地球同步带 sbv PINCH POINTS 搜索栅栏

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评价对象及其倾向性的抽取和判别 被引量：24

7

作者 顾正甲 姚天昉 《中文信息学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期91-97,共7页

基于主观性文本的意见挖掘技术是一种在多种领域都有广泛应用的语言技术。该文把评价性语素作为研究对象,在哈尔滨工业大学的语言技术平台(LTP)对语料处理结果的基础上,利用SBV极性传递法为核心,引入指代消解、ATT链算法和互信息法对语... 基于主观性文本的意见挖掘技术是一种在多种领域都有广泛应用的语言技术。该文把评价性语素作为研究对象,在哈尔滨工业大学的语言技术平台(LTP)对语料处理结果的基础上,利用SBV极性传递法为核心,引入指代消解、ATT链算法和互信息法对语料中的评价对象进行抽取,并在对极性词进行倾向性判别时,充分考虑了不同类型的句子,以及副词、连词对极性的影响,尤其是对一般副词、贬义副词和副词"太"作了详细地探讨,最后提出了一个综合的解决方案。该方案结构层次清晰,易于理解,并且其算法复杂度较低。但由于利用的是较为浅层的句法分析结果和基于经验的语言模式方法,该文提出的方案对句法分析结果的依赖度较大。 展开更多

关键词 评价对象 倾向性 sbv极性传递法 指代消解

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施马伦贝格病在德国的流行现状及总结 被引量：3

8

作者 戈胜强 张志诚 +4 位作者 吴晓东 张永强 李金明 蔡媛 王志亮 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期646-651,共6页

施马伦贝格病是由施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)引起的,感染牛、羊等反刍动物的一种新发的虫媒病毒性传染病。该病毒感染成年动物后症状轻微,如产奶减少、发热、腹泻等;但在怀孕的特定时期感染则可能导致较严重的后果,如胎... 施马伦贝格病是由施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)引起的,感染牛、羊等反刍动物的一种新发的虫媒病毒性传染病。该病毒感染成年动物后症状轻微,如产奶减少、发热、腹泻等;但在怀孕的特定时期感染则可能导致较严重的后果,如胎畜畸形或死胎等。该病于2011年底在德国首发,随后迅速传遍欧洲。德国作为该病的首发国家,对于该病进行了详细的研究,其国内的流行趋势也最能代表欧洲的流行情况及研究进展。为此,作者就德国施马伦贝格病的流行现状进行介绍,以期为我国该病的防控提供参考。 展开更多

关键词 施马伦贝格病毒(sbv) 德国 流行现状

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基于TaqMan探针的蜜蜂囊状幼虫病病毒荧光PCR检测方法的建立和应用 被引量：13

9

作者 宋战昀 王振国 +5 位作者 冯新 刘金华 魏春艳 蔡阳 孟庆峰 周亮 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期920-925,共6页

为建立快速有效的蜜蜂囊状幼虫病检疫方法,依据TaqMan荧光标记探针技术原理,针对蜜蜂囊状幼虫病病毒保守序列,设计出一对特异性引物和一条探针,建立了一种快速检测蜜蜂囊状幼虫病病毒的荧光PCR方法。该方法对蜜蜂囊状幼虫病的检测具有... 为建立快速有效的蜜蜂囊状幼虫病检疫方法,依据TaqMan荧光标记探针技术原理,针对蜜蜂囊状幼虫病病毒保守序列,设计出一对特异性引物和一条探针,建立了一种快速检测蜜蜂囊状幼虫病病毒的荧光PCR方法。该方法对蜜蜂囊状幼虫病的检测具有较好的特异性,与蜜蜂急性麻痹病病毒、蜜蜂慢性麻痹病病毒、蜜蜂残翼病病毒和黑蜂王台病病毒之间均无交叉反应。检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μL阳性质粒,可对低病毒含量的样品进行准确检测。重复性和稳定性试验结果显示,变异系数为1.6%,说明该方法具有较好的重复性和稳定性。应用该方法对蜜蜂及蜂制品进行检测,结果显示所建立的荧光PCR检测方法4h内即可报告检测结果,该方法具有快速、灵敏、特异及重复性好等优点,适用于蜜蜂及其制品中蜜蜂囊状幼虫病病毒的快速检疫。 展开更多

关键词 蜜蜂 囊状幼虫病病毒 TAQMAN探针 荧光PCR检测 检疫

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施马伦贝格病毒核衣壳蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备 被引量：12

10

作者 张永宁 吴绍强 +6 位作者 吕继洲 冯春燕 王彩霞 袁向芬 邓俊花 林祥梅 Wernike Kerstin 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1629-1636,共8页

本研究旨在表达施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)的核衣壳蛋白(N),进而制备其多克隆抗体。以SBV(BH80株)的RNA为模板,RT-PCR扩增N基因序列,并将其克隆至原核表达载体pET-28a-c(+)中,获得pET-28a-SBV-N重组质粒。经酶切和测序鉴... 本研究旨在表达施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)的核衣壳蛋白(N),进而制备其多克隆抗体。以SBV(BH80株)的RNA为模板,RT-PCR扩增N基因序列,并将其克隆至原核表达载体pET-28a-c(+)中,获得pET-28a-SBV-N重组质粒。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达HisSBV-N融合蛋白。在非变性条件下用Ni-NTA柱纯化His-SBV-N,并以此为抗原免疫新西兰大白兔制备多抗。经免疫亲和层析纯化后,利用Western blot和间接免疫荧光对多抗进行鉴定。结果表明:(1)His-SBV-N融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中同时以可溶性和包涵体2种形式表达,相对分子质量约为30ku;(2)制备的多抗效价高达1∶64 000。该多抗不仅能与His-SBV-N融合蛋白发生特异性反应,而且还能识别SBV的不同毒株,但与布尼亚病毒科内亲缘关系最近的沙门达病毒(Shamonda virus)、道格拉斯病毒(Douglas virus)和赤羽病病毒(Akabane virus)的核衣壳蛋白存在交叉反应。His-SBV-N融合蛋白及其多抗的成功制备,为施马伦贝格病血清学检测方法的建立奠定了物质基础。 展开更多

关键词 施马伦贝格病毒 核衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体 免疫亲和层析

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囊状幼虫病病毒的流行及其感染治疗 被引量：8

11

作者 沈克飞 曹联飞 +3 位作者 曹兰 任勤 谭方明 张邑帆 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第9期954-957,共4页

目的调查重庆、浙江和云南蜜蜂幼虫囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)的感染率,并观察抗微生物肽(amicrobial peptide)小分子阳离子六肽(short cationic hexapeptides,SP6)对人工感染的中蜂囊状幼虫病的治疗效果。方法采用RT-PCR法检... 目的调查重庆、浙江和云南蜜蜂幼虫囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)的感染率,并观察抗微生物肽(amicrobial peptide)小分子阳离子六肽(short cationic hexapeptides,SP6)对人工感染的中蜂囊状幼虫病的治疗效果。方法采用RT-PCR法检测重庆、浙江和云南蜜蜂幼虫SBV的感染率。将SP6溶于糖水,隔天饲喂1次SBV人工感染的发病中华蜜蜂蜂群,连续给药9次,测定蜂群幼虫死亡率,评价其对感染的防治效果。结果重庆和浙江中蜂幼虫SBV感染率分别为85.6%和4.76%,云南西方蜜蜂幼虫SBV感染率为6.67%;重庆和浙江西方蜜蜂幼虫及云南中蜂幼虫未检出SBV。0.1%SP6给药组能极显著地降低SBV感染蜂群的幼虫死亡率,防治效果达到74.48%。结论在重庆、浙江和云南地区均检出SBV,但SBV在不同地区对蜜蜂种群的危害程度不同,在重庆中蜂群广泛流行。SP6对SBV感染中蜂有良好的防治效果,具有药物开发价值。 展开更多

关键词 囊状幼虫病病毒 蜜蜂 抗微生物肽 小分子阳离子六肽 防治效果

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施马伦贝格病研究进展 被引量：10

12

作者 张永宁 吴绍强 林祥梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1029-1037,共9页

施马伦贝格病是自2011年夏季以来在欧洲新发的一种虫媒性病毒病,其病原为施马伦贝格病毒,主要感染绵羊、牛和山羊等反刍动物,可导致成年家畜生产性能下降,怀孕母畜发生流产、产死胎或畸形胎儿。截至目前,中国尚未出现相关疫情。笔者将... 施马伦贝格病是自2011年夏季以来在欧洲新发的一种虫媒性病毒病,其病原为施马伦贝格病毒,主要感染绵羊、牛和山羊等反刍动物,可导致成年家畜生产性能下降,怀孕母畜发生流产、产死胎或畸形胎儿。截至目前,中国尚未出现相关疫情。笔者将从病原学、流行病学、临床症状、发病机制与病理变化、检疫与诊断、预警与防控等方面对取得的最新研究进展进行概述,以期增强人们对该病的认识,并为中国有关部门采取恰当的防控措施提供科学依据。 展开更多

关键词 施马伦贝格病 施马伦贝格病毒 虫媒性病毒病 检疫 防控

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施马伦贝格病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及其特性分析 被引量：7

13

作者 张永宁 吴绍强 +3 位作者 Kerstin WERNIKE 吕继洲 冯春燕 林祥梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期289-293,共5页

目的制备施马伦贝格病毒(SBV)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAb)并分析其特性。方法将SBV N基因分别构建至pET-28a-c(+)和pMAL-c5X载体中,在大肠杆菌中诱导表达带组氨酸标签的融合蛋白His-SBV-N和带麦芽糖结合蛋白(MBP)标签的融合蛋白MBP-... 目的制备施马伦贝格病毒(SBV)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAb)并分析其特性。方法将SBV N基因分别构建至pET-28a-c(+)和pMAL-c5X载体中,在大肠杆菌中诱导表达带组氨酸标签的融合蛋白His-SBV-N和带麦芽糖结合蛋白(MBP)标签的融合蛋白MBP-SBV-N,分别用镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)树脂和直链淀粉树脂纯化两种蛋白;用纯化的His-SBVN免疫BALB/c小鼠制备mAb,以MBP-SBV-N为包被抗原间接ELISA筛选分泌mAb的杂交瘤细胞和测定mAb效价,利用蛋白G琼脂糖凝胶从腹水中纯化mAb;应用Western blot和间接免疫荧光分析mAb的反应性和特异性。结果筛选并纯化出1株抗SBV的mAb(命名为1F2),效价为1∶32 000,重链亚型为IgG2α,轻链为κ;1F2既能与重组SBV N蛋白发生反应,又能识别SBV,但与布尼亚病毒科内亲缘关系较近的沙门达病毒、道格拉斯病毒和赤羽病病毒的N蛋白存在交叉反应,而与裂谷热病毒N蛋白无交叉反应。结论成功制备了抗SBV核衣壳蛋白的mAb,为SBV的血清学检测提供了工具。 展开更多

关键词 施马伦贝格病毒 核衣壳蛋白 原核表达 单克隆抗体

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重庆中华蜜蜂囊状幼虫病病毒多聚蛋白基因分子特性分析 被引量：4

14

作者 沈克飞 曹兰 +3 位作者 郑华 杨柳 张邑帆 张素辉 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期959-965,共7页

【目的】分析地处中国南方的重庆地区中华蜜蜂Apis cerana cerana(简称"中蜂")囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)(Ac SBV-S.Chn-CQ)的遗传特性。【方法】采用RT-PCR法对采自重庆23个区县的阳性中蜂幼虫进行SBV多聚蛋白基因... 【目的】分析地处中国南方的重庆地区中华蜜蜂Apis cerana cerana(简称"中蜂")囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)(Ac SBV-S.Chn-CQ)的遗传特性。【方法】采用RT-PCR法对采自重庆23个区县的阳性中蜂幼虫进行SBV多聚蛋白基因扩增、序列测定和序列分析,采用邻接法(neighbor-joining method)基于基因组和基因组片段SB11-SB12构建系统进化树,使用RDP3检测SBV的基因重组。【结果】Ac SBV-S.Chn-CQ与中国南方中蜂SBV(Ac SBV-S.Chn)其他分离株、越南北部东方蜜蜂A.cerana SBV(Ac SBV-N.Vie)、越南北部西方蜜蜂A.mellifera SBV(Am SBV-N.Vie)、韩国东方蜜蜂SBV(Ac SBV-S.Kor)的同源性较高。Ac SBV-S.Chn-CQ在结构蛋白编码区域存在连续51个核苷酸缺失,在非结构蛋白编码区域有3个不连续的核苷酸缺失,与Ac SBV-N.Vie,Am SBV-N.Vie和Ac SBV-S.Kor核苷酸缺失相同。Ac SBV-S.Chn-CQ与Ac SBV-S.Chn-FZ,Ac SBV-N.Vie,Am SBV-N.Vie和Ac SBV-S.Kor在亚洲基因型中形成一亚型,亚型内检测到重组事件。【结论】推测Ac SBV-S.Chn-CQ与SBV-N.Vie和Ac SBVS.Kor可能来自一个共同祖先。 展开更多

关键词 中华蜜蜂 囊状幼虫病病毒 多聚蛋白基因 核苷酸缺失 系统进化

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检测施马伦贝格病毒核酸的荧光定量RT-PCR方法 被引量：4

15

作者 张永宁 吴绍强 +5 位作者 吕继洲 冯春燕 王彩霞 邓俊花 袁向芬 林祥梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1824-1829,共6页

根据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因节段设计一对引物和TaqMan探针,建立了检测SBV核酸的荧光定量RT-PCR方法。通过优化反应体系和反应条件,该方法对101~107半数组织培养感染量(TCID50)的SBV核酸呈现良好的线性关系。利... 根据施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)S基因节段设计一对引物和TaqMan探针,建立了检测SBV核酸的荧光定量RT-PCR方法。通过优化反应体系和反应条件,该方法对101~107半数组织培养感染量(TCID50)的SBV核酸呈现良好的线性关系。利用德国FLI制备和保存的SBV核酸阳性(n=140)、SBV核酸阴性(n=132)和辛波血清群相关病毒核酸样品(n=16),对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了验证。结果表明,所建立方法与FLI研制的SBV荧光定量RT-PCR具有相近的敏感性,两者对140份SBV核酸阳性样品的检测符合率达96.4%(135/140);可灵敏地检测出1TCID50的SBV RNA,并具有良好的重复性;除道格拉斯病毒(Douglas virus)外,与辛波血清群相关病毒核酸无交叉反应。用该方法对采自内蒙古呼和浩特市某养殖场的绵羊血清(n=47)和澳大利亚进口绵羊血清(n=47)的RNA进行了检测,结果未发现SBV核酸阳性样品。SBV荧光定量RTPCR检测方法的建立为应对施马伦贝格病提供了有效的检测手段。 展开更多

关键词 施马伦贝格病毒 核酸 引物 TAQMAN探针 荧光定量RT-PCR

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中华蜜蜂囊状幼虫病毒北京分离株VP1蛋白基因序列特征及原核表达 被引量：2

16

作者 李薇 黄家兴 +4 位作者 Abebe Jenberie WUBIE 薛菲 国占宝 周婷 徐书法 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期495-502,共8页

【目的】研究中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)VP1蛋白的分子进化特征及遗传多样性。【方法】利用RT-PCR方法,克隆了8株CSBV北京分离株VP1蛋白的基因编码区。【结果】序列分析表明,VP1蛋白基因编码区开放阅读框长945 ... 【目的】研究中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)VP1蛋白的分子进化特征及遗传多样性。【方法】利用RT-PCR方法,克隆了8株CSBV北京分离株VP1蛋白的基因编码区。【结果】序列分析表明,VP1蛋白基因编码区开放阅读框长945 bp,编码315个氨基酸,推测编码蛋白的相对分子量和等电点分别为35.42 kDa和9.23,具有亲水性和免疫原性。序列同源性分析表明,不同年份CSBV北京分离株VP1蛋白氨基酸序列间差异较小,仅个别氨基酸存在差异。北京分离株与辽宁分离株及越南分离株VP1核苷酸序列一致性达93%,与印度及韩国分离株VP1核苷酸序列一致性达92%,与英国分离株VP1核苷酸序列一致性最低,为88%。序列分析同时表明,CSBV北京分离株VP1蛋白序列存在特有的序列特征,同其他地区分离株比较,北京分离株VP1蛋白序列中存在着氨基酸的插入突变。序列替换率分析表明,亚洲型分离株间序列替换率低于亚洲分离株与欧洲分离株间的替换率。构建原核表达载体pEASY-E1-VP1,经IPTG诱导,CSBV VP1蛋白在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)pLysS菌株中表达。【结论】本研究提示CSBV不同分离株基因序列存在变异,结果为进一步研究CSBV致病性分化的分子机理奠定了基础。 展开更多

关键词 中华蜜蜂 囊状幼虫病毒 VP1蛋白 系统进化 原核表达

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云南边境地区3种外来动物疫病流行情况及病原特性研究 被引量：4

17

作者 赵文华 李富祥 +1 位作者 尹伟 杨仕标 《动物医学进展》 北大核心 2021年第12期31-37,共7页

为评估云南边境地区外来动物疫病的风险状况,了解小反刍兽疫(PPR)、裂谷热(RVF)和施马伦贝格(SB)等3种重要外来动物疫病的流行情况,在云南昆明辖区内某大型牲畜交易市场及某规模化奶牛养殖合作社采集绵羊、山羊、牛、马及驴等不同动物... 为评估云南边境地区外来动物疫病的风险状况,了解小反刍兽疫(PPR)、裂谷热(RVF)和施马伦贝格(SB)等3种重要外来动物疫病的流行情况,在云南昆明辖区内某大型牲畜交易市场及某规模化奶牛养殖合作社采集绵羊、山羊、牛、马及驴等不同动物鼻拭子样本及血液样本258份(包含境外家畜),应用已建立的PPRV/RVFV/SBV三重实时荧光定量RT-PCR方法进行检测。检测结果显示,在258份样本中,检测到PPRV核酸阳性样本1份,未检测到RVFV/SBV核酸阳性样本。对PPRV核酸阳性样本,应用普通RT-PCR扩增F-H基因接头位置序列和进一步核苷酸序列测序确定其为PPRV谱系Ⅳ型毒株,与2013年新疆伊犁山羊毒株(KM091959)及2014年吉林家养山羊毒株(KM816619)核苷酸同源性最高,达到99.2%。结果提示,云南边境地区交易的山羊中携带PPRV;未检测到RVFV和SBV。 展开更多

关键词 小反刍兽疫病毒 裂谷热病毒 施马伦贝格病毒 核酸检测 风险评估

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施马伦贝格病毒核衣壳蛋白的表达及单克隆抗体制备 被引量：1

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作者 张永宁 宋姗姗 +1 位作者 吴绍强 林祥梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1280-1286,共7页

为表达与纯化具有天然构象的施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)核衣壳(N)蛋白,并制备其单抗(McAb),本研究在SBV-N基因的N端加入6个组氨酸(6×His)标签后,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac^(TM)1中,构建重组供体质粒pFastB... 为表达与纯化具有天然构象的施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)核衣壳(N)蛋白,并制备其单抗(McAb),本研究在SBV-N基因的N端加入6个组氨酸(6×His)标签后,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac^(TM)1中,构建重组供体质粒pFastBac-His-SBV-N。将pFastBac-His-SBV-N转化DH10Bac E.coli,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒rBacmid-His-SBV-N。将rBacmid-His-SBV-N转染Sf9昆虫细胞制备表达His-SBV-N融合蛋白的重组杆状病毒,借助Ni-NTA琼脂糖纯化重组杆状病毒感染Sf9细胞中的His-SBV-N蛋白。以纯化的HisSBV-N免疫BALB/c小鼠制备McAb,利用ELISA叠加试验检测McAb抗原识别位点的异同,并采用高碘酸钠法对识别不同抗原表位的McAb进行辣根过氧化物酶(HRP)标记。最终获得了4株识别不同抗原表位的McAb(2A11、2E1、4H11和6E12)并进行了HRP标记;亚型鉴定表明,2A11为IgG1亚型,2E1、4H11和6E12均为IgG2b亚型;间接免疫荧光试验证实,4株McAb均能够识别稳定表达SBV-N蛋白的BHK-21细胞系;Western blot进一步表明,HRP标记的4株McAb均与His-SBV-N蛋白发生特异性反应。His-SBV-N融合蛋白及其McAb的成功制备,为施马伦贝格病血清学检测方法的建立提供了良好的生物材料。 展开更多

关键词 施马伦贝格病毒 核衣壳蛋白 杆状病毒表达载体 昆虫细胞 单克隆抗体

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猪瘟病毒与辛德毕斯病毒成熟和释放特征的比较研究 被引量：1

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作者 王镇 梁凤霞 +1 位作者 翟中和 丁明孝 《电子显微学报》 CAS CSCD 1999年第5期496-502,共7页

电镜下观察了二种有囊膜的正链 ＲＮＡ 病毒——猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）与辛德毕斯病毒（ＳｂＶ）感染的宿主细胞。在ＳｂＶ ６Ｋ 蛋白突变株感染的ＢＨＫ－２１ 细胞中，可清楚地显示病毒从细胞质膜出芽与释放的过程，并在细胞质中积累... 电镜下观察了二种有囊膜的正链 ＲＮＡ 病毒——猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）与辛德毕斯病毒（ＳｂＶ）感染的宿主细胞。在ＳｂＶ ６Ｋ 蛋白突变株感染的ＢＨＫ－２１ 细胞中，可清楚地显示病毒从细胞质膜出芽与释放的过程，并在细胞质中积累了大量的核衣壳。在ＣＳＦＶ 感染的Ｍ ＰＫ 细胞中首次观察到较多的病毒核衣壳与成熟的病毒粒子，因而有可能对其成熟与释放方式的不同进行比较研究。此外。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 辛德毕斯病毒 病毒 成熟 释放

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囊状幼虫病病毒衣壳蛋白肝素结合基序鉴定及其抗感染作用分析

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作者 沈克飞 曹兰 +3 位作者 徐登峰 许国洋 杨金龙 罗文华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1465-1470,1475,共7页

目的鉴定囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)药物结合口袋蛋白2(drug-binding pocket protein 2,Dbpp2)的肝素结合基序,并测定肝素结合基序及其衍生肽的抗SBV感染活性。方法采用在线软件对Dbpp2进行二级结构预测和同源建模,以搜索肝素... 目的鉴定囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)药物结合口袋蛋白2(drug-binding pocket protein 2,Dbpp2)的肝素结合基序,并测定肝素结合基序及其衍生肽的抗SBV感染活性。方法采用在线软件对Dbpp2进行二级结构预测和同源建模,以搜索肝素结合基序,利用肝素琼脂糖珠检测SBV、Dbpp2及其肝素结合基序突变体与肝素的结合能力、肝素结合基序抑制Dbpp2结合肝素的能力,并检测肝素结合基序及其衍生肽对SBV感染的中华蜜蜂(Apis cerana cerana)幼虫的治疗效果。结果SBV和Dbpp2可结合肝素,Dbpp2 C-端暴露在表面的富含碱性氨基酸的柔性环(KPANRPRR)为肝素结合基序,该基序可抑制Dbpp2结合肝素。KPANRPRR及其衍生肽KPAARPRR、KPRN-RPRR、KPRARPRR、KPRWRPRR、KPRWRPRRW均具有降低SBV感染导致幼虫死亡率的作用,其中,KPRARPRR的治疗效果最佳。结论本研究为阐明SBV-氨基萄聚糖(glycosaminoglycan,GAG)相互作用奠定了基础,也为基于相互作用开发治疗SBV感染的多肽提供了参考。 展开更多

关键词 囊状幼虫病病毒 衣壳蛋白 药物结合口袋 肝素结合基序

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