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应用CRISPR/Cas9系统编辑水稻SBE3基因获得高抗性淀粉水稻新品系 被引量：19
1
作者 白建江 张建明 +4 位作者 朴钟泽 方军 李刚燮 王亚 杨瑞芳 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1510-1516,共7页
SBE3是位于水稻第2号染色体上的水稻淀粉分支酶基因,该基因表达量的降低引起水稻抗性淀粉(resistant starch,RS)含量的提高。本研究应用CRISPR/Cas9系统对SBE3基因进行编辑,根据基因编码区序列(CDS)在第8外显子区域设计长度为20 bp的引... SBE3是位于水稻第2号染色体上的水稻淀粉分支酶基因,该基因表达量的降低引起水稻抗性淀粉(resistant starch,RS)含量的提高。本研究应用CRISPR/Cas9系统对SBE3基因进行编辑,根据基因编码区序列(CDS)在第8外显子区域设计长度为20 bp的引导序列,化学合成引导序列并构建成sgRNA,将其插入到Cas9质粒骨架载体中,转化农杆菌。通过农杆菌介导的遗传转化方法将构建好的p CAMBIA1300:SBE3sgRNA:Cas9表达载体转入水稻受体材料沪LPR18中。使用PCR扩增转基因阳性植株中含有CRISPR/Cas9靶点的片段并测序验证,确定12个突变单株,其中2个是纯合型,通过后代分离,得到没有潮霉素基因筛选标记的SBE3纯合突变单株,测定其抗性淀粉含量高达10%以上。以上结果表明,本研究已经通过CRIPR/Cas9技术获得稳定的高抗性淀粉水稻纯合突变体材料,为高抗性淀粉育种提供了新的种质资源和创建方法。 展开更多
关键词 水稻 sbe3 CRISPR/Cas9 抗性淀粉
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SBE3温度传感器时间常数测量和测试方法的研究 被引量：6
2
作者 廖和琴 田雨 高坤 《海洋技术学报》 2017年第6期54-58,共5页
针对在海洋观测领域得到广泛认可的海鸟SBE3高精度温度传感器进行时间常数测量和测试方法的研究。研发设计了时间常数测量装置来对SBE3温度传感器的动态特性进行测试。开展了1 m/s运动速度下的时间常数测量,不同运动速度和时间常数关系... 针对在海洋观测领域得到广泛认可的海鸟SBE3高精度温度传感器进行时间常数测量和测试方法的研究。研发设计了时间常数测量装置来对SBE3温度传感器的动态特性进行测试。开展了1 m/s运动速度下的时间常数测量,不同运动速度和时间常数关系的研究,并且对不同温差梯度和时间常数的关系也进行了实验研究。通过对大量的实验数据进行分析,测试结果显示,SBE3温度传感器在运动速度为1 m/s时时间常数为64.8 ms,与海鸟公司标称值65 ms相比,绝对偏差0.2 ms,相对偏差0.3%。不同运动速度下的时间常数关系与国际公开文献上的研究结论一致。 展开更多
关键词 sbe3 温度传感器 时间常数 动态特性
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回交重组自交系中SSⅢ-1、SBE3和PUL基因对稻米蒸煮食味品质的影响 被引量：2
3
作者 许顺菊 向珣朝 +4 位作者 康翠芳 龙小林 苏文丽 杨博文 吴家富 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1978-1988,共11页
该研究利用颗粒结合淀粉合成酶基因(Wxb)与可溶性淀粉合成酶Ⅱa基因(SSⅡ-3)均相同的籼型光温敏核不育系‘广占63S’和潜力恢复系CG173R为亲本,经过回交和多代自交,以构建的回交重组自交系(BILs)BC1F10代株系为供试材料,分析各株系的基... 该研究利用颗粒结合淀粉合成酶基因(Wxb)与可溶性淀粉合成酶Ⅱa基因(SSⅡ-3)均相同的籼型光温敏核不育系‘广占63S’和潜力恢复系CG173R为亲本,经过回交和多代自交,以构建的回交重组自交系(BILs)BC1F10代株系为供试材料,分析各株系的基因型组成及其蒸煮食味品质(ECQs)和RVA谱,以解析与品质相关微效基因的遗传效应。结果显示:(1)双亲在焦磷酸化酶大亚基基因(AGPlar)、分支酶基因Ⅲ(SBE3)、脱分支酶基因(PUL)、可溶性淀粉合成酶Ⅰ基因(SSⅠ)和可溶性淀粉合成酶SSⅢ-1基因(SSⅢ-1)的基因位点存在差异。(2)SSⅢ-1、SBE3和PUL基因分别在BC1F10代株系中存在单基因分离,SSⅢ-1和SBE3基因、SSⅢ-1和PUL基因在BC1F10代株系中均存在双基因的分离。(3)不同基因型及其互作与蒸煮食味品质(ECQs)中的表观直链淀粉含量(AAC)、胶稠度(GC)以及RVA谱的部分特征值存在显著或极显著的效应。(4)SSⅢ-1单基因只对AAC有极显著影响;SBE3基因和SSⅢ-1基因互作对AAC有极显著影响,对峰值时间(PeT)、成糊温度(PaT)、GC有显著性影响;PUL基因和SSⅢ-1基因互作对PeT、PaT和回复值(CSV)有极显著影响,对最高粘度(PKV)、热浆粘度(HPV)、崩解值(BDV)、冷浆粘度(CPV)、消减值(SBV)、AAC和GC有显著影响。研究表明,在Wxb和SSⅡ-3基因背景下,参与淀粉合成的微效基因SSⅢ-1与SBE3和SSⅢ-1的互作效应极显著影响水稻AAC,SBE3和SSⅢ-1的互作效应与PUL和SSⅢ-1的互作效应显著影响GC,PUL和SSⅢ-1的互作效应极显著影响PaT,这些发现将对改良稻米品质和加快水稻优质育种具有重要意义。 展开更多
关键词 水稻(Oryza SATIVA L.) 回交重组自交系(BILs) SSⅢ-1基因 sbe3基因 PUL基因
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复合调控Wx与SBE3基因对水稻籽粒直链淀粉含量的影响 被引量：1
4
作者 唐秀丽 周玉琼 +2 位作者 郑丽莉 江海洋 朱苏文 《激光生物学报》 CAS CSCD 2012年第1期16-21,共6页
颗粒淀粉合成酶(GBSS)和淀粉分支酶3(SBE3)是淀粉合成过程中的两个关键酶,这两个酶主要由Wx和SBE3两个基因分别控制,它们的表达量直接影响直链淀粉和支链淀粉的含量比例。为了探讨水稻淀粉关键酶基因Wx过量与SBE3干涉复合表达对直链淀... 颗粒淀粉合成酶(GBSS)和淀粉分支酶3(SBE3)是淀粉合成过程中的两个关键酶,这两个酶主要由Wx和SBE3两个基因分别控制,它们的表达量直接影响直链淀粉和支链淀粉的含量比例。为了探讨水稻淀粉关键酶基因Wx过量与SBE3干涉复合表达对直链淀粉含量的影响,构建了Wx过量表达与SBE3干涉结合的多基因表达载体,并通过农杆菌介导的方法将其导入日本晴水稻中。经过PCR检测分析获得了65株转基因阳性植株,半定量RT-PCR检测表明转基因株系中Wx基因表达量明显增加,而SBE3基因表达量显著减少。转基因株系籽粒透明度明显降低,直链淀粉含量比野生型的平均高45%,但是千粒重变化不大,与野生型相当。遗传分析表明这些转基因株系多数可稳定遗传。 展开更多
关键词 水稻 直链淀粉 WX sbe3 RNA干涉 过量表达
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RNAi沉默淀粉分支酶sbe3基因对水稻直链淀粉的影响 被引量：10
5
作者 陈忠正 郭健 +2 位作者 李斌 文海涛 赵亮 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第7期291-295,共5页
本研究利用RNAi技术,通过RT-PCR方法克隆出水稻淀粉分支酶sbe3基因片断,经两步组装法将sbe3基因片断分别正向、反向组装入pRNAi-ubi,成功构建sbe3基因RNAi转化载体pRNAi-ubi/sbe3。在农杆菌介导下,对粳稻中花11未成熟胚诱导的愈伤组织... 本研究利用RNAi技术,通过RT-PCR方法克隆出水稻淀粉分支酶sbe3基因片断,经两步组装法将sbe3基因片断分别正向、反向组装入pRNAi-ubi,成功构建sbe3基因RNAi转化载体pRNAi-ubi/sbe3。在农杆菌介导下,对粳稻中花11未成熟胚诱导的愈伤组织进行转化,通过PCR、Southern杂交鉴定获得一批转基因植株。半定量RT-PCR鉴定出转化苗T1代种子中sbe3基因表达被明显抑制,但只引起转基因水稻胚乳中直链淀粉含量少量的提高,说明采用RNAi仅沉默sbe3基因对水稻胚乳直链淀粉含量没有显著影响。 展开更多
关键词 水稻 淀粉分支酶3 RNA干涉 直链淀粉
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芡实SBE3基因克隆及其生物信息学分析
6
作者 王前 严洪楷 +4 位作者 邵永芳 景宗慧 刘莉成 鲍锞 吴啟南 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第19期6346-6355,共10页
芡实的主要组成成分是淀粉,淀粉分支酶SBE3能够调控支链淀粉的合成,为了深入研究芡实SBE3基因的功能与调控机制,本研究克隆出芡实淀粉分支酶SBE3基因并对其进行相关生物信息学分析。通过提取芡实种子总RNA,采用RT-PCR方法克隆芡实SBE3基... 芡实的主要组成成分是淀粉,淀粉分支酶SBE3能够调控支链淀粉的合成,为了深入研究芡实SBE3基因的功能与调控机制,本研究克隆出芡实淀粉分支酶SBE3基因并对其进行相关生物信息学分析。通过提取芡实种子总RNA,采用RT-PCR方法克隆芡实SBE3基因,利用软件和在线网站对该基因及其编码氨基酸序列的理化性质、蛋白质结构、系统发育树和启动子等进行生物信息学分析与预测。获得EfSBE3基因全长2830bp,开放阅读框长2736bp,编码911个氨基酸;预测其为亲水性蛋白,无跨膜区,无信号肽。系统进化分析表明该序列与同科植物睡莲亲缘关系最近,启动子分析共预测出10类顺式作用元件。本研究结果可为芡实分子育种提供理论依据。 展开更多
关键词 芡实(Euryale ferox Salisb.) sbe3 基因克隆 生物信息学分析
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3个与稻米食味品质相关重要基因分子标记及检测方法的建立 被引量：2
7
作者 谢米雪 许言福 +1 位作者 龚峙妍 李建粤 《上海农业学报》 CSCD 2015年第2期56-59,共4页
直接在同时影响稻米胶稠度和糊化温度两项食味品质指标的基因SBE3和ISA以及影响稻米胶稠度的基因AGPiso重要多态性位点上建立分子标记:SBE3(+3 577)、ISA(-1 499)和AGPiso(-511)。检测结果显示:这3个分子标记可以分别用来区别SBE3、ISA... 直接在同时影响稻米胶稠度和糊化温度两项食味品质指标的基因SBE3和ISA以及影响稻米胶稠度的基因AGPiso重要多态性位点上建立分子标记:SBE3(+3 577)、ISA(-1 499)和AGPiso(-511)。检测结果显示:这3个分子标记可以分别用来区别SBE3、ISA和AGPiso基因的基因型。 展开更多
关键词 水稻 食味品质 分子标记 sbe3 ISA AGPiso
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SBE 3海水温度传感器动态响应停振问题研究
8
作者 武昕竹 王朋朋 +1 位作者 孟庆军 尹玉利 《气象水文海洋仪器》 2021年第1期1-4,14,共5页
文章针对SBE 3海水温度传感器存在的停振现象,通过重复实验和排除实验进行了系统地测量研究,发现停振时间间隔远大于传感器所标定的时间常数,极大地影响了海洋测量结果的准确性。重复实验和排除实验的数据分析结果表明,SBE 3系列海水温... 文章针对SBE 3海水温度传感器存在的停振现象,通过重复实验和排除实验进行了系统地测量研究,发现停振时间间隔远大于传感器所标定的时间常数,极大地影响了海洋测量结果的准确性。重复实验和排除实验的数据分析结果表明,SBE 3系列海水温度传感器的停振时间间隔与传感器的运动速度无关,而与温度阶跃呈线性关系,温度阶跃越大,停振时间就越长,且不同传感器的停振时间间隔与温度阶跃的线性关系基本一致。SBE 3海水温度传感器的停振现象是传感器自身产生的,与测试设备的F/V模块无关。 展开更多
关键词 传感器动态特性 停振现象 SBE 3海水温度传感器
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