人骨髓核分化抗原对人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡和增殖的影响 被引量：2

1

作者 孙成良 Liu Chuanju +3 位作者 李栋 李伟 杨光 姜鹏 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期267-270,共4页

[目的]探讨人骨髓核分化抗原(MNDA)对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖及凋亡的影响。[方法]逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法定量测定Saos-2细胞中MNDA的mRNA表达差异。将MNDA基因转染Saos-2细胞,应用MTT法测定转染后的肿瘤细胞增殖,流式细胞仪定... [目的]探讨人骨髓核分化抗原(MNDA)对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖及凋亡的影响。[方法]逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法定量测定Saos-2细胞中MNDA的mRNA表达差异。将MNDA基因转染Saos-2细胞,应用MTT法测定转染后的肿瘤细胞增殖,流式细胞仪定量检测细胞凋亡程度,没有转染质粒的和转染空质粒的做为对照组。[结果]MNDA的mRNA在骨肉瘤Saos-2细胞中表达明显降低。转染MNDA后人骨肉瘤Saos-2细胞的凋亡程度高于对照组,增殖率低于对照组。[结论]转染MNDA可诱导人骨肉瘤Saos-2细胞发生凋亡,抑制骨肉瘤细胞的增殖率。 展开更多

关键词 MNDA 骨肉瘤 saos-2细胞 细胞凋亡

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苦参碱通过下调STAT3信号通路抑制骨肉瘤Saos-2细胞增殖的实验研究 被引量：5

2

作者 严小明 连福明 +1 位作者 林智勤 张维 《西部医学》 2015年第9期1286-1289,共4页

目的观察苦参碱对成人骨肉瘤Saos-2细胞增殖的调节作用及其与STAT3活化水平的联系。方法将成人骨肉瘤Saos-2细胞分为对照组(Control组)、低剂量苦参碱干预组(MAT-L干预组)及高剂量苦参碱干预组(MATH干预组)3组。使用MTT法对不同时间点(0... 目的观察苦参碱对成人骨肉瘤Saos-2细胞增殖的调节作用及其与STAT3活化水平的联系。方法将成人骨肉瘤Saos-2细胞分为对照组(Control组)、低剂量苦参碱干预组(MAT-L干预组)及高剂量苦参碱干预组(MATH干预组)3组。使用MTT法对不同时间点(0、24和48h)各组Saos-2细胞活性进行检测;使用qPCR对干预24小时后Saos-2细胞的survivin mRNA水平进行分析,使用western blot法对干预24小时后Saos-2细胞STAT3的活化水平及survivin蛋白表达水平进行分析。结果与对照组相比,给予苦参碱干预的Saos-2细胞活性呈时间依赖性和浓度依赖性下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);给予Saos-2细胞不同浓度的苦参碱干预24小时后,survivin mRNA和蛋白的表达水平及STAT3的活化水平呈浓度依赖性降低,差异均有显著统计学意义(均P<0.05)。结论苦参碱可以通过下调STAT3的活化抑制成人骨肉瘤Saos-2细胞survivin的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖。该研究为苦参碱应用于骨肉瘤及其他恶性肿瘤的临床治疗提供了实验基础。 展开更多

关键词 saos-2细胞 苦参碱 STAT3 SURVIVIN

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Smac在TRAIL诱导人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡中的作用 被引量：1

3

作者 金军 赵健 +5 位作者 李博华 张霞 张瑞萍 李晓东 钱卫珠 郭亚军 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期87-89,共3页

目的 :初步研究 Smac在 TNF相关的凋亡诱导配体 (TNF- related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导的人骨肉瘤 Saos- 2细胞凋亡中的作用。 方法 :观察细胞形态变化和以琼脂糖凝胶电泳分析 TRAIL 作用的 Saos- 2细胞 DNA片段 ,利用流... 目的 :初步研究 Smac在 TNF相关的凋亡诱导配体 (TNF- related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导的人骨肉瘤 Saos- 2细胞凋亡中的作用。 方法 :观察细胞形态变化和以琼脂糖凝胶电泳分析 TRAIL 作用的 Saos- 2细胞 DNA片段 ,利用流式细胞术及细胞计数法比较 Smac或 Bcl- 2表达不同的细胞的凋亡程度 ,同时以 Western印迹半定量检测细胞胞质内Sm ac表达水平。结果 :Saos- 2细胞在 TRAIL 的作用下出现典型的凋亡样改变。在 TRAIL 作用 Saos- 2细胞时 ,Smac在胞质中的含量明显增加。在 TRAIL 作用 2 4 h后 ,Smac在 Saos- 2细胞中过表达 ,细胞凋亡率由 1 2 .7%增加到 31 .4 %。TRAIL 作用 Saos- 2细胞 4 8h后 ,转染 Bcl- 2的细胞与转染空载体的 Saos- 2细胞相比 ,凋亡率显著降低 (由 2 4 %降至 1 5 % ) ,且胞质中Sm ac的表达水平也明显降低。 结论 :在 TRAIL 诱导的凋亡中 Sm ac起促进作用 ,Bcl- 2可以通过阻止 Sm 展开更多

关键词 SMAC TRAIL 人骨肉瘤 saos-2 细胞凋亡 凋亡诱导配体

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RNA干扰下调MBP-1对骨肉瘤Saos-2细胞生物学的影响 被引量：1

4

作者 施鑫鹤 耿晢 +4 位作者 施星臣 马克君 朱宏文 任雯 周雅丽 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期604-609,共6页

目的探讨c-myc启动子结合蛋白1(MBP-1)基因沉默对人骨肉瘤Saos-2细胞生长的影响。方法实验分为3组:正常对照组(未转染骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染错义序列组)和沉默组(转染MBP-1 sh RNA组)。设计2条MBP-1基因的RNA干扰片段及1条阴性对... 目的探讨c-myc启动子结合蛋白1(MBP-1)基因沉默对人骨肉瘤Saos-2细胞生长的影响。方法实验分为3组:正常对照组(未转染骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染错义序列组)和沉默组(转染MBP-1 sh RNA组)。设计2条MBP-1基因的RNA干扰片段及1条阴性对照si RNA,并与p SIREN-retro Q质粒连接。将重组p SIREN-retro Q质粒通过Lipofectamine 2000脂质体转染骨肉瘤Saos-2细胞。实时PCR和Western blot分别检测MBP-1表达。CCK-8法对MBP-1沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长进行检测。Western blot检测对照组和沉默组cyclin D1和cyclin E的表达。结果通过PCR扩增及测序,说明已成功构建MBP-1沉默及对照重组p SIREN-retro Q质粒。实时PCR结果显示,沉默组MBP-1 m RNA相对表达量与对照组相比显著下调(P<0.05)。Western blot结果显示,沉默组MBP-1蛋白表达量与对照组相比也显著下调。CCK-8法结果表明,沉默组细胞在48、72和96 h时增殖能力均比对照组显著升高(P<0.05)。沉默组cyclin D1和cyclin E的表达显著高于对照组(P<0.05)。结论 MBP-1基因沉默后骨肉瘤Saos-2细胞生长被明显促进,为寻找骨肉瘤基因治疗新靶点打下基础。 展开更多

关键词 骨肉瘤saos-2细胞 RNA干扰 c-myc启动子结合蛋白1 细胞生长

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人成骨样细胞SaOS-2向成骨分化过程中GNAS1基因的表达变化 被引量：1

5

作者 李兴暖 汪涛 +2 位作者 吴萍 刘建云 李卫东 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期307-310,共4页

目的:对成骨分化过程中GNAS1基因的表达进行研究.方法:对人成骨样细胞Sa OS-2进行成骨定向分化,采用茜素红染色、实时定量PCR和免疫印迹检测成骨分化效果和分化过程中GNAS1的表达变化.结果:实时定量PCR结果显示,RUNX2基因在成骨分化第3... 目的:对成骨分化过程中GNAS1基因的表达进行研究.方法:对人成骨样细胞Sa OS-2进行成骨定向分化,采用茜素红染色、实时定量PCR和免疫印迹检测成骨分化效果和分化过程中GNAS1的表达变化.结果:实时定量PCR结果显示,RUNX2基因在成骨分化第3天表达最高,之后呈下降趋势,而实时定量PCR和免疫印迹均检测到GNAS1基因在成骨分化第3天表达最低,之后呈升高趋势.结论:GNAS1基因在成骨分化过程中表达存在差异,提示对成骨细胞分化具有调控作用. 展开更多

关键词 GM4S7基因 成骨分化 人成骨样saos-2细胞

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甲状旁腺素对人成骨肉瘤细胞株SaOS-2内cAMP,IP3,Ca^(2+)的作用研究 被引量：1

6

作者 韩志岩 程锦轩 刘景生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期326-328,共3页

目的通过研究ｈＰＴＨ（１～３４）对人成骨肉瘤细胞株ＳａＯＳ－２胞浆内ｃＡＭＰ、ＩＰ３、Ｃａ２＋的影响，来阐明ＰＴＨ与其膜上特异受体结合后的胞浆内主要信息传递途径。方法利用蛋白竞争结合法测定胞浆内ｃＡＭＰ，以Ｆｌｕｏ－... 目的通过研究ｈＰＴＨ（１～３４）对人成骨肉瘤细胞株ＳａＯＳ－２胞浆内ｃＡＭＰ、ＩＰ３、Ｃａ２＋的影响，来阐明ＰＴＨ与其膜上特异受体结合后的胞浆内主要信息传递途径。方法利用蛋白竞争结合法测定胞浆内ｃＡＭＰ，以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为荧光指示剂，激光共聚焦显微系统显示ＳａＯＳ－２内［Ｃａ２＋］ｉ的变化，离子交换层析法测定ｈＰＴＨ（１～３４）作用下胞浆内ＩＰ３的改变。结果ｈＰＴＨ（１～３４）可使ＳａＯＳ－２胞浆内ｃＡＭＰ明显升高且与其浓度呈正相关，其最佳作用时间为１０ｍｉｎ。ｈＰＴＨ（１～３４）能迅速提高ＳａＯＳ－２内［Ｃａ２＋］ｉ，而且作用３０ｓ时ＳａＯＳ－２胞浆内ＩＰ３升高即达最高峰，未发现百日咳毒素对此现象有抑制作用。 展开更多

关键词 甲状旁腺素 成骨肉瘤细胞株 CAMP saos-2

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新型矿化胶原膜对人成骨肉瘤细胞株Saos-2生物学行为的影响 被引量：2

7

作者 韩雪 王辰 +1 位作者 姜浩 许亦权 《中华老年口腔医学杂志》 2018年第2期71-74,共4页

目的:探讨新型矿化胶原膜(the mineralized collagen membrane)对人成骨肉瘤细胞株Saos-2生物学行为的影响。方法:将人成骨肉瘤细胞Saos-2接种于矿化胶原膜表面,光镜观察细胞形态;制备胶原膜的浸提液,以正常培养基为阴性对照,Bio-gide... 目的:探讨新型矿化胶原膜(the mineralized collagen membrane)对人成骨肉瘤细胞株Saos-2生物学行为的影响。方法:将人成骨肉瘤细胞Saos-2接种于矿化胶原膜表面,光镜观察细胞形态;制备胶原膜的浸提液,以正常培养基为阴性对照,Bio-gide的浸提液为阳性对照,检测三组细胞的增殖和碱性磷酸酶(ALP)的活性。采用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析。结果:矿化胶原膜和Saos-2细胞共培养时,细胞伸展良好;随着培养时间的延长,对照组和浸提液组细胞数量不断增加,1、4、7d时三组OD值之间无显著性差异,10d时阴性对照组OD值明显高于Bio-gide组和矿化胶原膜组,但Bio-gide组和矿化胶原膜组之间无显著性差异;7d时阴性对照组ALP活性最低,Bio-gide膜组较高,矿化胶原膜组表达最高,三者间差异有统计学意义。结论:矿化胶原膜具有良好的细胞相容性。 展开更多

关键词 胶原膜 细胞培养 saos-2细胞 细胞增殖

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三氧化二砷对VEGF诱导人骨肉瘤SaOS-2细胞TRAF-2和STAT-6表达的影响 被引量：2

8

作者 吴永辉 林晓 +3 位作者 罗冬娇 钟永翔 王恩智 王鑫华 《浙江中西医结合杂志》 2016年第3期215-218,共4页

目的通过观察三氧化二砷(As2O3)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导人骨肉瘤Sa OS-2细胞肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF-2)和信号转导子与转录激活子(STAT-6)表达的影响,探讨As2O3治疗骨肉瘤的作用机制。方法分别采用CCK8法、实时荧光定量PC... 目的通过观察三氧化二砷(As2O3)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导人骨肉瘤Sa OS-2细胞肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF-2)和信号转导子与转录激活子(STAT-6)表达的影响,探讨As2O3治疗骨肉瘤的作用机制。方法分别采用CCK8法、实时荧光定量PCR法和流式细胞术测定细胞生长抑制率、TRAF2和STAT-6的表达。结果 2μmol/L的As2O3对Sa OS-2细胞的生长抑制率达57%(0.57±0.03比0)(P<0.01),使VEGF诱导作用显著降低(0.42±0.02)(P<0.05),TRAF-2及STAT-6的表达也显著下降(分别为:149.00±7.21比167.33±8.02;1.29±0.12比2.53±0.67)(P均<0.05)。结论 As2O3可能通过TRAF-2和STAT-6途径对Sa OS-2细胞的生长呈剂量相关的抑制作用。 展开更多

关键词 骨肉瘤 saos-2细胞 AS2O3 TRAF-2 STAT-6 VEGF

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川芎嗪对骨肉瘤细胞株SaOS-2增殖及VEGF基因表达的影响 被引量：3

9

作者 王君 魏义勇 《上海中医药大学学报》 CAS 2011年第3期92-94,共3页

目的:探索川芎嗪对骨肉瘤细胞株SaOS-2增殖及血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因表达的影响,为采用中医药治疗骨肉瘤奠定理论基础。方法:复苏人骨肉瘤细胞株SaOS-2,当细胞生长至融合时传代。实验分为空白对照组及5%、10%、15%川芎嗪干预组... 目的:探索川芎嗪对骨肉瘤细胞株SaOS-2增殖及血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因表达的影响,为采用中医药治疗骨肉瘤奠定理论基础。方法:复苏人骨肉瘤细胞株SaOS-2,当细胞生长至融合时传代。实验分为空白对照组及5%、10%、15%川芎嗪干预组。采用CCK-8检测川芎嗪对细胞增殖的抑制情况;RT-PCR检测VEGF基因的表达。结果:CCK-8检测结果表明,在不同时间点、不同浓度的川芎嗪对SaOS-2细胞的生长均有抑制作用,并随着川芎嗪浓度的增高,其作用时间越长、抑制作用越明显(P<0.05);RT-PCR表明,川芎嗪各组之间没有明显有效的抑制VEGF基因的表达(P>0.05),但从数值上分析可发现随着川芎嗪浓度的增高,VEGF基因的表达呈降低的趋势。结论:川芎嗪可以有效地抑制骨肉瘤细胞株SaOS-2的增殖,但不能有效抑制VEGF的基因表达。 展开更多

关键词 川芎嗪 saos-2 细胞增殖 血管内皮细胞生长因子

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N端截短的视网膜母细胞瘤基因对人骨肉瘤细胞株SaOS-2生长的影响 被引量：1

10

作者 李扬 乔慧 +3 位作者 邓家德 张萌 朱全胜 丘钜世 《中国骨肿瘤骨病》 2004年第2期95-99,共5页

目的 研究N端截短的视网膜母细胞瘤基因(Rb^(66))对骨肉瘤细胞Saos-2生长的影响。方法 构建携带Rb^(66)cDNA片段的真核细胞表达载体pcDNA3-1-Rb,用脂质体LIPOFECTAMIME^(TM)2000将真核表达载体pcDNA3-1-Rb、空载体对照pcDNA3-1转染至SaO... 目的 研究N端截短的视网膜母细胞瘤基因(Rb^(66))对骨肉瘤细胞Saos-2生长的影响。方法 构建携带Rb^(66)cDNA片段的真核细胞表达载体pcDNA3-1-Rb,用脂质体LIPOFECTAMIME^(TM)2000将真核表达载体pcDNA3-1-Rb、空载体对照pcDNA3-1转染至SaOS-2细胞中。RT-PCR及免疫细胞化学检测转染后SaOS-2中Rb^(66)mRNA及蛋白的表达;观察细胞形态的改变;测定细胞倍增时间及生长曲线的改变;流式细胞仪检测对细胞周期的影响。结果 成功地将N端截短的Rb^(66)cDNA导入骨肉瘤细胞SaOS-2中,并在mRNA及蛋白水平获得了表达。转染后的SaOS-2细胞胞浆展开,细胞核浆比例变小;Rb^(66)导入后,SaOS-2细胞生长减慢,群体倍增时间延长,细胞周期呈现G_1期阻滞。结论 Rb^(66)可通过阻止细胞G_1→S期进展而抑制骨肉瘤细胞SaOS-2的增殖。 展开更多

关键词 N端截短 视网膜 母细胞瘤基因 骨肉瘤细胞株 saos-2生长 细胞周期 瘤细胞

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人骨髓核分化抗原对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖侵袭的影响

11

作者 孙成良 Liu Chuanju +3 位作者 李栋 张伟 杨光 姜鹏 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期1203-1207,共5页

[目的]探讨人骨髓核分化抗原(MNDA)对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖及侵袭的影响。[方法]逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法定量测定Saos-2细胞中MNDA的mRNA表达差异。将MNDA基因转染Saos-2细胞,MTT法测定检测细胞增殖程度的改变,Transwell小室法... [目的]探讨人骨髓核分化抗原(MNDA)对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖及侵袭的影响。[方法]逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法定量测定Saos-2细胞中MNDA的mRNA表达差异。将MNDA基因转染Saos-2细胞,MTT法测定检测细胞增殖程度的改变,Transwell小室法测定肿瘤细胞侵袭能力的改变。没有转染质粒的和转染空质粒的Saos-2做为对照组。[结果]MNDA的mRNA在骨肉瘤Saos-2细胞中表达明显降低。转染MNDA的人骨肉瘤Saos-2细胞的增殖率低于对照组,并且抑制能力随时间延长抑制而增加,侵袭穿透能力减弱。[结论]人骨肉瘤转染MNDA可抑制肿瘤细胞的增殖,降低肿瘤细胞的侵袭穿透能力。 展开更多

关键词 MNDA 骨肉瘤 saos-2细胞 细胞增殖 细胞侵袭

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Smac对骨肉瘤细胞系Saos-2生长及耐药性的影响

12

作者 金军 赵健 +5 位作者 张霞 张瑞萍 石梅 李晓东 吕岩 郭亚军 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1225-1227,共3页

目的:观察Smac表达对骨肉瘤细胞Saos-2生长和耐药性的影响。方法:构建smac和反义smac表达载体pcDNA-smac 和pcDNA-anti-smac,G418筛选出分别稳定转染pcDNA-smac和pcDNA-anti-smac的骨肉瘤细胞Saos-2。利用流式细胞仪检测各转染细胞的细... 目的:观察Smac表达对骨肉瘤细胞Saos-2生长和耐药性的影响。方法:构建smac和反义smac表达载体pcDNA-smac 和pcDNA-anti-smac,G418筛选出分别稳定转染pcDNA-smac和pcDNA-anti-smac的骨肉瘤细胞Saos-2。利用流式细胞仪检测各转染细胞的细胞周期分布;绘制各细胞在6 d内的生长曲线以观察各细胞生长情况的变化。同时采用MTT法检测各转染Saos-2细胞对依托泊苷的敏感性。结果:与转染空载体pcDNA3.0的Saos-2细胞相比,转染反义smac的Saos-2细胞G1/G0期比例升高,细胞生长自第4天起明显加快。转染smac的Saos-2细胞的细胞周期及生长曲线无明显差别;依托泊苷作用细胞后,与转染空载体pcDNA3.0的Saos-2细胞相比,转染反义smac的Saos-2细胞的存活率增高;而转染smac的Saos-2细胞的存活率降低。结论:抑制Smac在细胞中表达,可使Saos-2细胞生长加快,增强对依托泊苷的耐受性,Smac在细胞中的过表达可提高Saos-2对依托泊苷的敏感性。 展开更多

关键词 SMAC 骨肉瘤 细胞系 saos-2细胞 细胞生长 耐药性

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不同官能团对骨肉瘤Saos-2细胞生物学特性的影响

13

作者 何鹏 周幸 +7 位作者 流小舟 丛宇 徐海栋 樊根涛 周光新 施鑫 吴苏稼 赵建宁 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第7期703-707,共5页

目的肿瘤假体置换是目前治疗骨肉瘤的常用手段,功能化假体的设计和应用是目前研究的热点方向。肿瘤细胞周围微环境对肿瘤的增殖、活力和凋亡等行为起重要作用。探讨不同的官能团对细胞生物学特性影响。方法通过自组装技术在金片表面接... 目的肿瘤假体置换是目前治疗骨肉瘤的常用手段,功能化假体的设计和应用是目前研究的热点方向。肿瘤细胞周围微环境对肿瘤的增殖、活力和凋亡等行为起重要作用。探讨不同的官能团对细胞生物学特性影响。方法通过自组装技术在金片表面接枝不同的化学基团(-CH_3、-COOH、-NH_2、-OH),测定接触角和X线光电子谱确定其表征,采用早期扫描电镜、DAPI、CCK-8法、死/活细胞染色、流式细胞检测仪等方法观察不同官能团对骨肉瘤Saos-2细胞的黏附、增殖、活力、凋亡的影响。结果 -CH_3、-NH_2、-OH、-COOH基团的表面接触角分别为(103.0±10.1)°、(58.5±5.7)°、(13.5±0.5)°和(19.1±2.8)°。电镜下可见骨肉瘤Saos-2细胞在含有-NH_2和-COOH基团的材料表面伸展较大,细胞贴壁展开,形态不规则,大多呈梭形和盘状,细胞间突起相互连接紧密;细胞在含有-OH基团的材料表面铺展面积相对较小,细胞形态基本正常,而含有-CH3基团的材料表面细胞的黏附数量明显较少,不同的官能团对Saos-2细胞黏附、增殖率影响的顺序从大到小依次为-COOH≥-NH_2>-OH■-CH_3;而对Saos-2细胞凋亡率和毒性的顺序-CH_3■-OH>-NH_2>-COOH;不同的官能团对细胞凋亡的影响从大到小依次为-CH_3(19.1%)■-OH(7.2%)>-NH_2(4.3%)>-COOH(2.9%)。结论含有-CH_3基团的材料不利于细胞的黏附和增殖,并对细胞的凋亡有一定的促进作用。 展开更多

关键词 自组装膜 官能团 骨肉瘤 saos-2 生物学特性

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原花青素对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖的影响及机制研究

14

作者 李灿 江波 +1 位作者 李瑞生 张文静 《实用药物与临床》 CAS 2015年第2期126-130,共5页

目的研究原花青素体外对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖的影响及其作用机制。方法体外培养人骨肉瘤Saos-2细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;PI染色法检测细胞凋亡率;ELISA法检测Caspase-9、Caspase-12、Survivin含量;Bradford法检测SOD、M DA含量... 目的研究原花青素体外对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖的影响及其作用机制。方法体外培养人骨肉瘤Saos-2细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;PI染色法检测细胞凋亡率;ELISA法检测Caspase-9、Caspase-12、Survivin含量;Bradford法检测SOD、M DA含量。结果 PC在48 h和72 h对Saos-2细胞的体外增殖均具有抑制作用,并具有浓度和时间依赖性;40、80、160μg/m L浓度的PC均诱导Saos-2细胞凋亡;促进Caspase-9和Caspase-12蛋白表达,抑制Survivin蛋白表达;增加细胞内SOD的活性,降低M DA的含量。结论 PC可抑制Saos-2细胞的增殖,可能与其增加机体的抗氧化功能及启动死亡受体通路、内质网通路、线粒体通路这三条途径诱导细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 原花青素 saos-2细胞 CASPASE-9 CASPASE-12 Survivin SOD MDA

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骨肉瘤Saos-2细胞Set7/9基因沉默及基因治疗靶点构建 被引量：1

15

作者 施星臣 耿哲 施鑫鹤 《甘肃医药》 2016年第9期646-649,共4页

目的:构建沉默的人Set7/9的真核表达载体,筛选其稳定转染的骨肉瘤Saos-2细胞株,评价干扰效果以及对骨肉瘤相关基因表达和细胞增殖的影响,为临床骨肉瘤基因治疗提供新靶点。方法:依据靶向序列,构建人Set7/9基因的sh RNA和对照载体,稳定... 目的:构建沉默的人Set7/9的真核表达载体,筛选其稳定转染的骨肉瘤Saos-2细胞株,评价干扰效果以及对骨肉瘤相关基因表达和细胞增殖的影响,为临床骨肉瘤基因治疗提供新靶点。方法:依据靶向序列,构建人Set7/9基因的sh RNA和对照载体,稳定转染骨肉瘤细胞Saos-2。应用Real-time PCR以及Western-blot方法检测其基因和蛋白质水平,确定该基因的沉默情况。结果:构建载体Set7/9-sh RNA,Real-time PCR和Western-blot结果显示,沉默后Set7/9基因和蛋白表达明显被抑制,而与其相关的Sirt1、Suv39h1蛋白表达水平提高,细胞增殖率增加。结论:沉默Set7/9基因后,上调与其相关的Sirt1和Suv39h1蛋白表达水平,Set7/9基因在骨肉瘤Saos-2细胞系中可能调控其的表达。此外,细胞增殖效率增加表明Set7/9具有抑制骨肉瘤Saos-2细胞增殖的作用。 展开更多

关键词 Set7/9 saos-2细胞 WESTERN-BLOT

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银杏内脂B对人骨肉瘤Saos-2细胞的抑制作用研究

16

作者 章磊 孙畅 +2 位作者 流小舟 吴苏稼 黎承军 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第2期107-113,共7页

目的探讨银杏内脂B(GB)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响以及潜在机制。方法将人骨肉瘤Saos-2细胞分别在含300、600和1200μmol/L GB的培养液中培养24、48和72 h,采用CCK-8法检测Saos-2细胞的增殖情况,流式细胞仪检测Saos-2... 目的探讨银杏内脂B(GB)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响以及潜在机制。方法将人骨肉瘤Saos-2细胞分别在含300、600和1200μmol/L GB的培养液中培养24、48和72 h,采用CCK-8法检测Saos-2细胞的增殖情况,流式细胞仪检测Saos-2细胞凋亡率,Transwell小室迁移与侵袭实验检测GB对Saos-2细胞迁移和侵袭能力的影响;提取GB处理后Saos-2细胞的mRNA和蛋白,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、MMP-2和MMP-9的基因及蛋白表达水平,Western blotting法检测Erk和Akt磷酸化及cleaved-caspase-3水平。结果 GB能明显抑制Saos-2细胞的增殖,且呈时间和浓度依赖性,600和1200μmol/L GB可诱导Saos-2细胞凋亡,GB对Saos-2细胞的迁移及侵袭的抑制作用呈浓度依赖性;GB可升高Bax mRNA和蛋白水平,但降低Bcl-2、MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白水平;高浓度GB能抑制Erk和Akt的磷酸化且升高cleaved-caspase-3水平。结论 GB具有抑制Saos-2细胞增殖及迁移侵袭和诱导细胞凋亡作用,其机制可能与抑制Erk和Akt磷酸化有关。 展开更多

关键词 人骨肉瘤saos-2细胞 银杏内脂B 增殖 凋亡 侵袭

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ULBP3基因转染提高人外周血NK细胞对人成骨肉瘤Saos-2细胞的杀伤活性

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作者 王宏 王玲 +3 位作者 李建军 徐莘香 王丽颖 于永利 《中国骨肿瘤骨病》 CAS 2004年第3期167-171,共5页

目的　观察ULBP3基因转染对人外周血NK细胞对Saos -2细胞杀伤活性的影响。方法　用RT -PCR方法从人成骨肉瘤组织中提取ULBP3基因 ,构建pcDNA3真核表达质粒 ,以Lipofectamine为载体转染人成骨肉瘤Saos-2细胞 ,用percoll密度梯度离心法分... 目的　观察ULBP3基因转染对人外周血NK细胞对Saos -2细胞杀伤活性的影响。方法　用RT -PCR方法从人成骨肉瘤组织中提取ULBP3基因 ,构建pcDNA3真核表达质粒 ,以Lipofectamine为载体转染人成骨肉瘤Saos-2细胞 ,用percoll密度梯度离心法分离人外周血NK细胞作为效应细胞 ,以Saos -2细胞和转染ULBP3基因的Saos-2细胞作为靶细胞 ,进行体外杀伤实验 ,比较两组的特异性杀伤率。结果　在效靶比为 3 0∶1时人外周血NK细胞对转染ULBP3基因的Saos-2细胞的特异性杀伤率明显高于对照组。结论　ULBP3基因转染能提高人外周血NK细胞对人成骨肉瘤Saos-2细胞的杀伤活性。 展开更多

关键词 ULBP3 基因转染 外周血NK细胞 成骨肉瘤 saos-2 细胞活性

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TAp73γ在Saos-2细胞中定量诱导体系的建立

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作者 郑湘予 庞霞 +1 位作者 张岚 陈奎生 《肿瘤基础与临床》 2006年第4期273-275,共3页

目的利用Tet-On基因表达系统建立Saos-2/Tet-On/TAp73γ细胞株,通过强力霉素(Doxycycline,Dox)定量诱导TAp73γ基因的表达。方法将质粒pRevTet-On、pRevTRE-Luc和pRevTRE-TAp73γ分别转染PT67细胞,产生相应的逆转录病毒。RevTet-On病毒... 目的利用Tet-On基因表达系统建立Saos-2/Tet-On/TAp73γ细胞株,通过强力霉素(Doxycycline,Dox)定量诱导TAp73γ基因的表达。方法将质粒pRevTet-On、pRevTRE-Luc和pRevTRE-TAp73γ分别转染PT67细胞,产生相应的逆转录病毒。RevTet-On病毒感染Saos-2细胞,经G418选择培养基进行培养并感染RevTRE-Luc,再应用荧光素酶活性检测筛选出高诱导倍数的Saos-2/Tet-On细胞克隆。最后该细胞株感染RevTRE-TAp73γ病毒,用强力霉素筛选出阳性细胞,在不同浓度Dox诱导下用Western blot分析Saos-2/RevTet-On/TAp73γ细胞中TAp73γ的表达。结果Saos-2/RevTet-On克隆5当培养基中Dox浓度达到2·5mg/L时,荧光素酶相对活性值为5·3×106RLU/s,去除Dox时荧光素酶活性最弱,背景最低。Western blot结果显示在Saos-2/Tet-On5细胞中TAp73γ蛋白表达随着Dox浓度的增加而增加。结论建立了Saos-2/Tet-On及Saos-2/Tet-On/TAp73γ细胞株,可利用四环素衍生物定时定量调整Saos-2细胞中TAp73γ基因的表达,为研究TAp73γ细胞内协同作用因子、进一步阐明细胞内p73蛋白的生物学行为提供了一个理想的研究平台。 展开更多

关键词 TET-ON 基因表达系统 TAp73γ saos-2

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COX-2抑制剂对人骨肉瘤SaoS-2细胞VEGF和bFGF表达的影响

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作者 席雅文 唐晓卿 +1 位作者 廖瑛 唐正午 《南华大学学报（医学版）》 2007年第4期521-524,共4页

目的探讨COX-2抑制剂celecoxib对人骨肉瘤SaoS-2细胞株VEGF和bFGF表达的影响。方法间接免疫荧光流式细胞术和Western Blot法检测细胞COX-2、VEGF、bFGF的表达状况。结果COX-2抑制剂celecoxib呈浓度依赖性地抑制人骨肉瘤SaoS-2细胞株COX-... 目的探讨COX-2抑制剂celecoxib对人骨肉瘤SaoS-2细胞株VEGF和bFGF表达的影响。方法间接免疫荧光流式细胞术和Western Blot法检测细胞COX-2、VEGF、bFGF的表达状况。结果COX-2抑制剂celecoxib呈浓度依赖性地抑制人骨肉瘤SaoS-2细胞株COX-2、VEGF、bFGF的表达。结论抑制COX-2的表达及由此引起的VEGF和bFGF蛋白表达降低,在COX-2抑制剂抗骨肉瘤的机制中可能具有一定作用。 展开更多

关键词 COX-2 CELECOXIB saos-2细胞 VEGF BFGF

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蜂毒素对骨肉瘤Saos-2细胞系HIF-1α及VEGF表达的影响 被引量：2

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作者 饶武 李玉梅 +2 位作者 陈永强 邓廉夫 王君 《上海中医药大学学报》 CAS 2013年第6期63-66,共4页

目的:研究低氧条件下蜂毒素(melittin)对骨肉瘤Saos-2细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨蜂毒素抗骨肉瘤细胞血管生成的机制。方法:分别设空白对照组和低氧对照组,以及加入终浓度为2、4、8μg/ml的... 目的:研究低氧条件下蜂毒素(melittin)对骨肉瘤Saos-2细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨蜂毒素抗骨肉瘤细胞血管生成的机制。方法:分别设空白对照组和低氧对照组,以及加入终浓度为2、4、8μg/ml的蜂毒素组;采用免疫印迹试验(Western-blot)检测细胞HIF-1α蛋白表达,逆转录RT-PCR检测HIF-1α和VEGF mRNA转录水平的变化。结果:与空白对照组比较,低氧对照组细胞中HIF-1α的蛋白表达及VEGF的mRNA表达均明显升高(P<0.05);蜂毒素组细胞的HIF-1α蛋白表达明显低于低氧对照组(P<0.05),并具有剂量依赖性;蜂毒素组细胞的VEGF mRNA水平明显低于低氧对照组(P<0.05),且有剂量依赖性。结论:模拟的低氧条件可以诱导骨肉瘤Saos-2细胞系中HIF-1α通路的激活;蜂毒素通过抑制HIF-1α蛋白水平的表达、影响其通路中下游基因VEGF mRNA水平的表达而抑制骨肉瘤Saos-2细胞中低氧诱导的HIF-1α通路的激活。由此推断蜂毒素可能通过此途径抑制骨肉瘤血管的生成,达到抗肿瘤的效果。 展开更多

关键词 蜂毒素 骨肉瘤 saos-2细胞系 缺氧诱导因子-1Α 血管内皮生长因子

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