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组蛋白H3S10及H3S28磷酸化对小鼠卵母细胞成熟的调控 被引量:1
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作者 王慧利 王婧 +2 位作者 孟春花 李静心 曹少先 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期850-856,共7页
[目的]进一步明确小鼠卵母细胞中组蛋白H3的磷酸化模式及其对卵母细胞成熟过程的调控。[方法]采用免疫荧光技术,对不同减数分裂阶段小鼠卵母细胞中组蛋白H3S10/H3S28的磷酸化状态进行了检测,在利用Aurora激酶广谱抑制剂ZM447439处理并... [目的]进一步明确小鼠卵母细胞中组蛋白H3的磷酸化模式及其对卵母细胞成熟过程的调控。[方法]采用免疫荧光技术,对不同减数分裂阶段小鼠卵母细胞中组蛋白H3S10/H3S28的磷酸化状态进行了检测,在利用Aurora激酶广谱抑制剂ZM447439处理并检测卵母细胞成熟质量的基础上,进一步检测了处理后卵母细胞H3S10/H3S28磷酸化状态、染色体排列形态及Aurora激酶自身磷酸化水平的变化情况。[结果]小鼠卵母细胞减数分裂期间,组蛋白H3S10/H3S28持续磷酸化;ZM447439处理浓度依赖性地损害了卵母细胞的成熟能力,并相应导致H3S10/H3S28磷酸化减弱直至消失、染色体排列异常及Aurora激酶A/B/C自身磷酸化水平的改变。[结论]小鼠卵母细胞减数分裂过程中组蛋白H3S10/H3S28呈磷酸化状态,ZM447439处理引起组蛋白磷酸化减弱和染色体排列异常及Aurora激酶磷酸化水平的变化并导致了卵母细胞成熟能力损害。 展开更多
关键词 卵母细胞 组蛋白磷酸化 H3S10 H3s28 AURORA激酶
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XJM-S28浮选机的工业应用 被引量:23
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作者 史英祥 《选煤技术》 CAS 北大核心 2011年第1期23-27,76,共5页
XJM-S28浮选机是我国最新研制的最大的选煤用机械搅拌式浮选机,该浮选机的关键技术参数采用相似放大方法确定,样机实测值与设计值相吻合,工业应用表明,XJM-S28浮选机设计合理,性能优良,矿浆处理能力可达800~1 000m3/h,干煤泥处理能力可... XJM-S28浮选机是我国最新研制的最大的选煤用机械搅拌式浮选机,该浮选机的关键技术参数采用相似放大方法确定,样机实测值与设计值相吻合,工业应用表明,XJM-S28浮选机设计合理,性能优良,矿浆处理能力可达800~1 000m3/h,干煤泥处理能力可达80~100 t/h。 展开更多
关键词 XJM-s28浮选机 工作原理 结构特点 工业应用
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S28-248型偏心BDC钻头的研制与应用
3
作者 田绍臣 张兆盈 赵宇新 《石油钻探技术》 CAS 2003年第5期80-81,共2页
为了提高中原油田沙3中至沙4段四开小井眼的钻井速度,有效地解决易卡钻、钻速低、成本高以及小间隙井眼固井质量差等问题,中原油田与川石·克里斯坦森金刚石钻头有限公司合作,研制开发了用于深部小井眼钻井的149.2mm的S28-248型偏... 为了提高中原油田沙3中至沙4段四开小井眼的钻井速度,有效地解决易卡钻、钻速低、成本高以及小间隙井眼固井质量差等问题,中原油田与川石·克里斯坦森金刚石钻头有限公司合作,研制开发了用于深部小井眼钻井的149.2mm的S28-248型偏心BDC钻头。详细介绍了该钻头的设计特点及现场应用情况。 展开更多
关键词 s28-248型 偏心BDC钻头 研制 机械钻速 三牙轮钻头 中原油田
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XJM-S28型浮选机技术特点及应用 被引量:2
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作者 刘春艳 《选煤技术》 CAS 2014年第6期38-41,共4页
为了适应选煤厂大型化发展对大型浮选设备的迫切需求,采用模拟放大方法,研制出单槽容积为28 m3的煤用机械搅拌式浮选机——XJM-S28型浮选机。XJM-S28型浮选机在山西焦煤集团、河北开滦集团、华晋焦煤集团等煤炭生产企业的应用实践表明,... 为了适应选煤厂大型化发展对大型浮选设备的迫切需求,采用模拟放大方法,研制出单槽容积为28 m3的煤用机械搅拌式浮选机——XJM-S28型浮选机。XJM-S28型浮选机在山西焦煤集团、河北开滦集团、华晋焦煤集团等煤炭生产企业的应用实践表明,该机对煤泥可浮性适应能力强,分选指标稳定,工艺灵活,可较好地满足大中型选煤厂浮选生产需求。 展开更多
关键词 大型浮选设备 XJM-s28型浮选机 模拟放大方法 技术指标
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Characterization of two constitutive promoters RPS28 and EIF1 for studying soybean growth,development,and symbiotic nodule development
5
作者 Shengcai Chen Yaqi Peng +4 位作者 Qi Lv Jing Liu Zhihua Wu Haijiao Wang Xuelu Wang 《aBIOTECH》 CSCD 2022年第2期99-109,共11页
Native promoters that can drive high and stable transgene expression are important tools for modifying plant traits.Although several such promoters have been reported in soybean(Glycine max),few of them function at mu... Native promoters that can drive high and stable transgene expression are important tools for modifying plant traits.Although several such promoters have been reported in soybean(Glycine max),few of them function at multiple growth and development stages and during nodule development.Here,we report that the promoters of 40S RIBOSOMAL PROTEIN SMALL SUBUNIT S28(RPS28)and EUKARYOTIC TRANSLATION INITIATION FACTOR 1(EIF1)are ideal for high expression of transgene.Through bioinformatic analysis,we determined that RPS28 and EIF1 were highly expressed during soybean growth and development,nodule development,and various biotic and abiotic stresses.Fusion of both RPS28 and EIF1 promoters,with or without their first intron,with the reporter geneβ-GLUCURONIDASE(uidA)in transgenic soybean,resulted in high GUS activity in seedlings,seeds,and nodules.Fluorimetric GUS assays showed that the RPS28 promoter and the EIF1 promoter yielded high expression,comparable to the soybean Ubiquitin(GmUbi)promoter.RPS28 and EIF1 promoters were also highly expressed in Arabidopsis thaliana and Nicotiana benthamiana.Our results indicate the potential of RPS28 and EIF1 promoters to facilitate future genetic engineering and breeding to improve the quality and yield of soybean,as well as in a wide variety of other plant species. 展开更多
关键词 PROMOTER Soybean(Glycine max) Ribosomal protein s28 Translation initiation factor EIF1 Constitutive expression
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应用分子标记鉴定盘绒茧蜂属Cotesia寄生蜂的研究
6
作者 孙星星 王凡 +5 位作者 蒋颖洁 王凯 胡积祥 李红阳 顾慧玲 张礼生 《山东农业科学》 北大核心 2025年第11期127-133,共7页
盘绒茧蜂属Cotesia寄生蜂是重要的寄生性天敌资源,能够有效控制美国白蛾、小菜蛾、甜菜夜蛾等多种农林害虫。但该属寄生蜂种类繁多,形态相似,存在较多的复合类群和近缘种。为更好地对其进行精准鉴定,本研究对采自江苏沿海地区桃园中的... 盘绒茧蜂属Cotesia寄生蜂是重要的寄生性天敌资源,能够有效控制美国白蛾、小菜蛾、甜菜夜蛾等多种农林害虫。但该属寄生蜂种类繁多,形态相似,存在较多的复合类群和近缘种。为更好地对其进行精准鉴定,本研究对采自江苏沿海地区桃园中的寄生蜂进行分类,共鉴定出5种盘绒茧蜂属寄生蜂,分别是螟蛉盘绒茧蜂Cotesia ruficrus、菜蛾盘绒茧蜂C.vestalis、二化螟盘绒茧蜂C.chilonis、粉蝶盘绒茧蜂C.glomerata和盘绒茧蜂Cotesia sp1,同时以线粒体COI与核糖体28S rDNA基因片段作为分子标记,探讨它们对盘绒茧蜂属寄生蜂物种间鉴定的准确性。研究结果表明,COI基因鉴定的准确性较高,分子鉴定结果与形态学鉴定结果一致;而28S rDNA基因鉴定的准确性较低,与形态学鉴定结果存在差异。因此,建议在鉴定盘绒茧蜂属寄生蜂物种时选用COI基因作为分子标记。 展开更多
关键词 DNA条形码 盘绒茧蜂属寄生蜂 COI 28S rDNA 鉴定 生物防治 分子标记
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基于28S rDNA序列的鲤科鱼类寄生指环虫属分子系统发育及协同进化分析
7
作者 田瀚吉 徐俊东 +3 位作者 贾婷 徐伟江 范丽仙 孟飞燕 《四川动物》 北大核心 2025年第6期624-634,共11页
单殖吸虫Monogenea具有极高的物种多样性及宿主特异性,是研究寄生虫-宿主协同进化的理想模型。本研究基于28S rDNA基因序列对指环虫科Dactylogyridae的53种物种进行系统发育分析,并结合云南地区宿主-寄生虫数据进行协同进化重建。结果显... 单殖吸虫Monogenea具有极高的物种多样性及宿主特异性,是研究寄生虫-宿主协同进化的理想模型。本研究基于28S rDNA基因序列对指环虫科Dactylogyridae的53种物种进行系统发育分析,并结合云南地区宿主-寄生虫数据进行协同进化重建。结果显示:(1)指环虫属Dactylogyrus为非单系群,中国与国外的鲤科Cyprinidae寄生类群分别形成独立分支;(2)贝叶斯系统发育树表明,寄生于鲤亚科Cyprininae的指环虫属单殖吸虫起源最早,其分化同时存在宿主内成种和宿主转移2种模式;(3)协同进化分析显示,宿主转移的发生频率显著高于宿主内成种,提示其可能是物种形成的主要驱动力。研究表明,云南地区鲤科鱼类寄生指环虫属物种形成的主要方式是宿主转移,且其进化模式受宿主亲缘关系、地理分布及寄生虫适应性共同影响,这为理解单殖吸虫-宿主协同进化机制提供了新证据。 展开更多
关键词 指环虫属 28S rDNA序列 系统发育 协同进化
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东北地区榛园内一种小蠹的外部形态特征描述及分子鉴定
8
作者 苏光祥 马晓乾 +3 位作者 马玲 马润平 曹景鑫 唐华 《北京林业大学学报》 北大核心 2025年第10期120-127,共8页
【目的】在我国东北地区的榛园内发现了1种严重危害榛树的小蠹虫,蛀食榛树主干和分枝,导致榛树大面积死亡。为弄清该小蠹的种类并为其防治提供科学依据,本研究对其进行了形态学观察及分子生物学鉴定。【方法】利用光学显微镜和扫描电子... 【目的】在我国东北地区的榛园内发现了1种严重危害榛树的小蠹虫,蛀食榛树主干和分枝,导致榛树大面积死亡。为弄清该小蠹的种类并为其防治提供科学依据,本研究对其进行了形态学观察及分子生物学鉴定。【方法】利用光学显微镜和扫描电子显微镜对该小蠹虫各虫态(卵、幼虫、蛹、成虫)的外部形态特征进行观察与描述;同时,提取其全基因组DNA,通过PCR技术扩增其28S核糖体DNA(28S rDNA)和细胞色素c氧化酶亚基I(COI)标记基因片段,将所得序列与GenBank数据库中的小蠹类昆虫的基因序列进行比对,构建系统发育树进行分子系统学分析。【结果】该小蠹雌雄个体间分化明显:雄性较于雌性明显短小,雄性成虫个体体长为(2.00±0.10)mm,雌性成虫个体体长为(3.00±0.15)mm;雄性成虫后翅退化,腹部第8背板明显外露且最后一节腹节极度膨大。形态学鉴定结果表明,该小蠹属于材小蠹族。分子鉴定结果显示,其28S rDNA和COI基因序列与北方毛胸材小蠹高度吻合,最终鉴定该种小蠹为北方毛胸材小蠹。【结论】通过形态学和分子生物学分析,确定了东北地区榛园内严重危害的小蠹虫为北方毛胸材小蠹,并观察描述了其各个发育阶段的形态特征,提供了完整的形态学数据及部分DNA分子数据。研究结果为北方毛胸材小蠹的深入研究和针对性防治措施的制定提供了理论依据。 展开更多
关键词 北方毛胸材小蠹 形态特征 28S rDNA基因 COI基因 分子鉴定
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新型稀土固体超强酸S_2O_8^(2-)/Sb_2O_3/La^(3+)的制备与再生 被引量:4
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作者 舒华 郭海福 +2 位作者 吴文胜 吴燕妮 闫鹏 《精细石油化工》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期12-16,共5页
以金属醇盐水解法制得前氧体 Sb_2O_3,采用浸渍法制备了稀土固体超强酸 S_2O_8^(-2)/Sb_2O_3/La^(3+)催化剂,以催化合成乙酸苄酯为探针反应考察了催化剂的制备条件。结果表明:以1.5 mol/L 的(NH_4)_2S_2O_8 和ω[La(NO_3)_3]=2.71%的 La... 以金属醇盐水解法制得前氧体 Sb_2O_3,采用浸渍法制备了稀土固体超强酸 S_2O_8^(-2)/Sb_2O_3/La^(3+)催化剂,以催化合成乙酸苄酯为探针反应考察了催化剂的制备条件。结果表明:以1.5 mol/L 的(NH_4)_2S_2O_8 和ω[La(NO_3)_3]=2.71%的 La(NO_3)_3混合液浸渍锑前氧体,经110℃烘干,于500℃焙烧3 h 所得催化剂活性较好。采用了 TG/DTA 考察了催化剂的失活原因,其最佳再生方法是:用无水乙醇洗涤,500℃焙烧再生。 展开更多
关键词 固体超强酸 s28^2-/Sb2O3/La^3+ 再生失活 三氧化二锑
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中国发现赫美跳小蜂属及一新记录种
10
作者 侯卓凡 赵慧峰 +2 位作者 宫淑琴 曹纯 陈业 《中国森林病虫》 北大核心 2025年第6期30-34,共5页
鉴定采自云南西双版纳热带雨林冠层的小蜂时,发现跳小蜂科中国新记录属赫美跳小蜂属Hemileucoceras及一中国新记录种长角赫美跳小蜂Hemileucoceras longicornis Hayat,2003。提供该属的鉴别特征,详细描述了长角赫美跳小蜂形态特征,并附... 鉴定采自云南西双版纳热带雨林冠层的小蜂时,发现跳小蜂科中国新记录属赫美跳小蜂属Hemileucoceras及一中国新记录种长角赫美跳小蜂Hemileucoceras longicornis Hayat,2003。提供该属的鉴别特征,详细描述了长角赫美跳小蜂形态特征,并附上高清形态特征图。基于长角赫美跳小蜂28S rDNA-D2基因序列构建系统发育树,结果显示在现有的分子数据库下Hemileucoceras与卵跳小蜂属Ooencyrtus亲缘关系较近。研究标本保存于廊坊师范学院生命科学学院生物标本馆内。 展开更多
关键词 跳小蜂科 赫美跳小蜂属 长角赫美跳小蜂 新记录 28S rDNA
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Redescription and phylogenetic assessment of Tanaisia atra(Nezlobinsky,1926)(Digenea:Eucotylidae),a parasite of the urinary system of birds
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作者 Sergei A.Vlasenkov Mikhail Yu.Shchelkanov Sergey G.Sokolov 《Zoological Systematics》 2025年第2期159-169,共11页
Eucotylidae is a family of microphalloid digeneans parasitising as adults in the urinary system of birds.There are few molecular data on members of this family,and phylogenetic relationships of its genera and species ... Eucotylidae is a family of microphalloid digeneans parasitising as adults in the urinary system of birds.There are few molecular data on members of this family,and phylogenetic relationships of its genera and species are still unclear.Here we present new morphological and molecular data on a eucotylid species Tanaisia atra(Nezlobinsky,1926).Specimens of T.atra were found in Eurasian Coot Fulica atra Linnaeus,1758 in European and Asian parts of Russia and examined using optical and SEM microscopy and molecular techniques.We report the presence of a well-developed cirrus sac and different types of tegumental scales in this species for the first time.All molecular markers used in our study(ITS2 region,28S rRNA and cox1gene)indicate that T.atra isolates from European and Asian parts of Russia are conspecific.In phylograms based on ITS2 region and 28S rRNA gene sequences,T.atra clustered with other Tanaisia spp. 展开更多
关键词 Cirrus sac Fulica atra tegumental scales TREMATODES ITS2 28S rDNA
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曲领棘缘吸虫的28S序列扩增及进化分析
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作者 金振华 罗尊 +3 位作者 高忠燕 张显光 张备 王丽坤 《今日畜牧兽医》 2025年第9期3-5,共3页
为了鉴定丹顶鹤体内的一种棘口吸虫,本试验采用PCR方法对其核糖体大亚基(28S)基因序列进行扩增,测序结果在NCBI上进行BLAST,初步确定种属。使用DNAstar 5.0软件对28S序列进行碱基含量与偏好性分析。使用Megalign软件对同属吸虫28S基因... 为了鉴定丹顶鹤体内的一种棘口吸虫,本试验采用PCR方法对其核糖体大亚基(28S)基因序列进行扩增,测序结果在NCBI上进行BLAST,初步确定种属。使用DNAstar 5.0软件对28S序列进行碱基含量与偏好性分析。使用Megalign软件对同属吸虫28S基因序列进行相似性分析。使用MEGA 7.0、Clustal X和Paup软件进行序列比对,并以28S序列为标记基因采用最大似然法构建进化树。结果显示,分离的棘口吸虫28S序列长度为1070 bp,其28S序列偏向GC碱基,AT含量为43.74%,GC含量为56.26%,其中A、G、T、C的含量分别为19.35%、33.74%、24.39%和22.52%。同源性分析结果显示,本试验吸虫28S序列与曲领棘缘吸虫(GenBank登录号:MZ409803,KT956913,AF184260)28S序列的同源性为99.81%,与曲领棘缘吸虫(GenBank登录号:MZ409804)28S序列的同源性为99.72%。进化分析结果显示,本试验中的吸虫与曲领棘缘吸虫和E.cinctum聚集在了一个小分支,说明其亲缘关系较近。根据同源性分析结果和进化分析结果,鉴定为本试验中的棘口吸虫为曲领棘缘吸虫,与其他棘缘属吸虫亲缘关系较近。 展开更多
关键词 丹顶鹤 曲领棘缘吸虫 28S序列 分子鉴定 进化分析
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大连松木中假古德伊滑刃线虫形态和分子鉴定
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作者 马欣欣 赵亚津 顾建锋 《植物检疫》 2025年第3期29-34,共6页
在大连开展松林中松材线虫调查时,从濒死马尾松中分离到一种滑刃属线虫群体,均为雌虫。该种线虫形态学主要鉴定特征为虫体细长,侧线4条,排泄孔位于神经环前或神经环对应位置,尾呈圆锥形,略腹弯,尾端有2~4个小突起,呈星状尾尖突。该大连... 在大连开展松林中松材线虫调查时,从濒死马尾松中分离到一种滑刃属线虫群体,均为雌虫。该种线虫形态学主要鉴定特征为虫体细长,侧线4条,排泄孔位于神经环前或神经环对应位置,尾呈圆锥形,略腹弯,尾端有2~4个小突起,呈星状尾尖突。该大连群体28S rRNA D2/D3序列与GenBank中假古德伊滑刃线虫序列相似度达99%以上,系统发育树显示大连线虫种群与假古德伊滑刃线虫聚在一个分支上。经形态特征比较和28S rRNA D2/D3基因序列分析,将该线虫鉴定为假古德伊滑刃线虫。这是我国关于该种线虫存活于松木中的首次报道。 展开更多
关键词 马尾松 形态特征 28S rRNA 假古德伊滑刃线虫 鉴定
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基于DNA序列的12种粉蚧亲缘关系分析 被引量:26
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作者 何衍彪 万宣伍 +4 位作者 詹儒林 孙光明 刘映红 许再福 赵艳龙 《热带作物学报》 CSCD 2011年第12期2324-2330,共7页
对菠萝洁粉蚧、新菠萝灰粉蚧、大洋臀纹粉蚧、柑橘臀纹粉蚧、康氏粉蚧、榕树粉蚧、热带蔗粉蚧、扶桑绵粉蚧、湿地松粉蚧等9种粉蚧(14个种群)rDNA 18S、28S进行测序,结合GenBank中同源序列,通过对12种粉蚧的18S、28S序列进行多重排比和聚... 对菠萝洁粉蚧、新菠萝灰粉蚧、大洋臀纹粉蚧、柑橘臀纹粉蚧、康氏粉蚧、榕树粉蚧、热带蔗粉蚧、扶桑绵粉蚧、湿地松粉蚧等9种粉蚧(14个种群)rDNA 18S、28S进行测序,结合GenBank中同源序列,通过对12种粉蚧的18S、28S序列进行多重排比和聚类,探讨rDNA 18S、28S用于粉蚧系统进化分析及粉蚧分子鉴定的可行性。序列分析结果表明:rDNA18S、28S序列比较保守,适合于菠萝洁粉蚧、新菠萝灰粉蚧、康氏粉蚧、热带蔗粉蚧、扶桑绵粉蚧、湿地松粉蚧、长尾粉蚧等粉蚧种间的分子鉴定;但柑橘臀纹粉蚧、大洋臀纹粉蚧、无花果臀纹粉蚧的rDNA 18S、28S序列具有高度相似性,18S、28S不适合用于这3个近缘种的分子鉴定,其mtDNA COI序列变异率相对较高,可作为其分子鉴定的依据;而榕树粉蚧2个种群rDNA 18S、28S序列遗传距离约0.014,该蚧虫可能是至少含有2个隐存谱系或姊妹种的复合种。该结果为我国粉蚧的遗传进化和分子鉴定提供了参考。 展开更多
关键词 粉蚧科 核糖体18S/28S基因 线粒体COI基因 亲缘关系
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不同发育阶段杉木人工林对土壤微生物群落结构的影响 被引量:38
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作者 刘丽 段争虎 +4 位作者 汪思龙 胡江春 胡治刚 张倩茹 王书锦 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2417-2423,共7页
采用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE),分析土壤细菌16SrDNA和土壤真菌28SrDNA特异性片段多态性,研究了不同发育阶段杉木人工林对土壤微生物群落结构的影响。结果表明:土壤微生物群落结构随着杉木人工林的发育年龄而改变,杉木人工林土壤微生... 采用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE),分析土壤细菌16SrDNA和土壤真菌28SrDNA特异性片段多态性,研究了不同发育阶段杉木人工林对土壤微生物群落结构的影响。结果表明:土壤微生物群落结构随着杉木人工林的发育年龄而改变,杉木人工林土壤微生物群落多样性和丰富度随杉木生长发育显著增加(P<0.05),但均显著低于次生阔叶林(P<0.05);聚类分析表明,不同发育阶段杉木人工林土壤真菌群落相似性均<60%,而土壤细菌群落相似性最高可达65%,由此可推测不同发育阶段杉木人工林土壤真菌群落结构变化较土壤细菌群落结构变化剧烈;相关性分析表明,不同发育阶段杉木人工林土壤速效氮、碳氮比与土壤微生物群落多样性显著相关(P<0.05)。本研究表明,长期种植单一杉木人工林能够通过改变土壤理化性质来影响土壤微生物群落组成,进而影响森林生态系统养分循环,导致人工林林分生产力下降。 展开更多
关键词 杉木林 土壤微生物群落 16S RDNA 28S RDNA PCR-DGGE
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淮稻5号的真菌多样性及其储藏过程中可培养的优势真菌 被引量:19
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作者 都立辉 和肖营 +2 位作者 刘凌平 袁建 鞠兴荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1371-1381,共11页
【目的】从传统形态学和分子生物学两方面对2013年的淮稻5号中分离的真菌进行鉴定,并研究淮稻5号在不同储藏条件下优势菌株的演变规律,为该品种稻谷储藏过程中的真菌种属研究及霉变防控提供参考。【方法】淮稻5号中的可培养真菌通过采... 【目的】从传统形态学和分子生物学两方面对2013年的淮稻5号中分离的真菌进行鉴定,并研究淮稻5号在不同储藏条件下优势菌株的演变规律,为该品种稻谷储藏过程中的真菌种属研究及霉变防控提供参考。【方法】淮稻5号中的可培养真菌通过采用孟加拉红和马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)两种培养基,按照国标GB4789.15—2010的操作获得。将采自4个不同地区的淮稻5号混匀,分别调节其水分含量为14.5%和18.5%后放入25℃人工气候箱内模拟储藏,逐月取出模拟储藏的稻谷样品进行传统培养以确定可培养的优势真菌。真菌的种属分别通过菌落、菌丝及孢子的形态学观察,对照《中国真菌志》等参考文献确定;同时通过PCR分别扩增相应真菌的内转录间隔区(ITS)和28S rDNA的部分序列,连接T载体后测序,通过构建系统发育树进而确定真菌的种属。【结果】从4个地区的2013年淮稻5号稻谷中共分离得到33株真菌,主要为青霉(Penicillium)、曲霉(Aspergillus)和镰刀菌(Fusarium)等菌属,其中青霉属与曲霉属最多,分别为16株和15株,分别占分离所得菌株的48.5%和45.5%,表明青霉和曲霉是2013年淮稻5号稻谷中可培养真菌的优势菌属。而镰刀菌属的真菌仅2株,仅占分离所得菌株的6%。模拟储藏的结果表明,水分含量为14.5%的淮稻5号在25℃条件下储藏6个月时出现优势菌株,为橘灰青霉(Penicillium aurantiogriseum),并且该优势菌在模拟储藏的第7、8个月持续存在。水分含量为18.5%的淮稻5号在25℃条件下储藏7个月时出现优势菌株,为酵母菌,且该优势菌在模拟储藏8个月时依然存在。【结论】2013年淮稻5号中分离获得33株真菌,主要包括16株青霉、15株曲霉以及2株镰刀菌,表明青霉和曲霉是2013年淮稻5号稻谷中的优势菌属。不同水分含量的稻谷在储藏过程中可能出现不同的优势菌株。 展开更多
关键词 稻谷 储藏 真菌 ITS 28S 区系
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提取北方土壤真菌DNA的一种方法 被引量:24
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作者 吴敏娜 张惠文 +2 位作者 李新宇 苏振成 张成刚 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期611-616,共6页
由于土壤理化性质的复杂性和真菌细胞壁结构的特殊性,从土壤样品中提取真菌基因组DNA比较困难。中国北方土壤与其它地区土壤相比有其自身的特点,因此,有必要优化一种适合于北方土壤真菌DNA提取的方法。本实验向灭菌黑土中分别投加12种... 由于土壤理化性质的复杂性和真菌细胞壁结构的特殊性,从土壤样品中提取真菌基因组DNA比较困难。中国北方土壤与其它地区土壤相比有其自身的特点,因此,有必要优化一种适合于北方土壤真菌DNA提取的方法。本实验向灭菌黑土中分别投加12种在系统分类上差别较大的真菌,以传统土壤总DNA提取方法及纯菌DNA提取方法为基础,分别与蜗牛酶,纤维素酶进行组合、优化,得到7种不同的土壤真菌基因组DNA提取方法。利用真菌28SrDNA通用引物U1/U2-GCPCR-DGGE分析方法分别考察了7种不同方法所提取土壤真菌基因组DNA的多样性和代表性。结果表明:1)液氮研磨,纤维素酶、蜗牛酶和溶菌酶(浓度分别为6、3和1mg.ml-1)37℃作用60min,2%SDS于65℃裂解30min;2)-65℃~65℃冻融3次,纤维素酶、蜗牛酶和溶菌酶(浓度分别为6、3和1mg.ml-1)37℃作用180min,2%SDS于65℃裂解30min的组合具有较好的提取效果。利用后一种方法分别对3种理化性质差异较大的中国北方自然土壤样品真菌DNA进行提取并分析,表明所提取土壤基因组DNA真菌特异性PCR-DGGE图谱条带丰富,该方法可用于多种北方土壤真菌多样性研究。 展开更多
关键词 真菌 中国北方 28S RDNA DNA提取 多样性 PCR—DGGE
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切梢小蠹属昆虫分类鉴定方法 被引量:23
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作者 李霞 张真 +2 位作者 曹鹏 王鸿斌 韩平定 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期110-116,共7页
采用形态学和分子生物学相结合的方法,建立一套快速、准确鉴定切梢小蠹的特征系统。利用鞘翅斜面第2沟间部的瘤状颗粒和刻点分布、鞘翅斜面刚毛长短和前胸背板刻点及刚毛分布3种特征,在体视显微镜放大30倍条件下可实现切梢小蠹虫的准确... 采用形态学和分子生物学相结合的方法,建立一套快速、准确鉴定切梢小蠹的特征系统。利用鞘翅斜面第2沟间部的瘤状颗粒和刻点分布、鞘翅斜面刚毛长短和前胸背板刻点及刚毛分布3种特征,在体视显微镜放大30倍条件下可实现切梢小蠹虫的准确鉴定。通过形态鉴定为同种的小蠹虫在利用28Sr DNA序列片段构建的系统发育树上能首先聚在一起,并且切梢小蠹属昆虫种下、种间和种上的遗传距离分布在3个不重叠的范围内,利用28Sr DNA基因构建切梢小蠹属分子鉴定体系是理想的方法之一。通过系统发育树的聚类分析或遗传距离比较均可实现种类鉴定。 展开更多
关键词 切梢小蠹属 形态特征 分类检索表 28S RDNA
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两种新贝尼登虫28SrRNA序列分析及其亲缘关系探讨 被引量:7
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作者 张纹 王军 +2 位作者 苏永全 丁少雄 杨文川 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期116-122,共7页
采用一对特定引物对形态相近的单殖吸虫新贝尼登虫和梅氏新贝尼登虫的基因组DNA进行PCR扩增,获得其28SrRNA的350bp左右的特异片段.测序后经软件分析发现两者同源的337bp序列仅存在一个碱基的差异,遗传相似度达99 70%,甚至高于不同海... 采用一对特定引物对形态相近的单殖吸虫新贝尼登虫和梅氏新贝尼登虫的基因组DNA进行PCR扩增,获得其28SrRNA的350bp左右的特异片段.测序后经软件分析发现两者同源的337bp序列仅存在一个碱基的差异,遗传相似度达99 70%,甚至高于不同海区不同宿主梅氏新贝尼登虫间99 41%的相似度,与贝尼登虫属3个虫种的同源序列间的遗传差异度为2 08%~11 73%.通过UPGMA和MP聚类分析也可看出,新贝尼登虫和梅氏新贝尼登虫的遗传相似性是极为相近的.虽然两种新贝尼登虫的形态特征和遗传多样性极为相似,但它们是否同属于一个种还不能确定,需要经进一步的形态系统比较和更多的基因分析才能得出客观的、公认的结果. 展开更多
关键词 28S RRNA 贝尼登虫 序列分析
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球孢白僵菌释放后在森林系统中定殖及持续控虫作用的证据 被引量:12
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作者 赵学球 蔡守平 +3 位作者 王四宝 王林 樊美珍 李增智 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期84-88,共5页
在皖南马尾松林中使用球孢白僵菌无纺布菌条接种式放菌防治松褐天牛。在放菌前进行球孢白僵菌本底调查,在放菌后半年内采集该菌感染的各种僵虫,得到87株分离物。利用28SrDNA-PCRⅠ型内含子标记技术,测定放菌后释放菌株的回收率。结果表... 在皖南马尾松林中使用球孢白僵菌无纺布菌条接种式放菌防治松褐天牛。在放菌前进行球孢白僵菌本底调查,在放菌后半年内采集该菌感染的各种僵虫,得到87株分离物。利用28SrDNA-PCRⅠ型内含子标记技术,测定放菌后释放菌株的回收率。结果表明,在87株球孢白僵菌中有66株与释放菌株的核型相同,占75.86%。半年中平均回收率为81.7%(75%-90.9%之间),这表明释放菌株已在该生态系中定殖,对松褐天牛种群发挥持续控制作用。在放菌前后球孢白僵菌种群结构有所变化,释放菌株有取代土著菌株优势地位的趋向。 展开更多
关键词 接种式放菌 种群 Ⅰ型内含子 28S RDNA
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