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结核分枝杆菌Rv2318及其表位肽免疫原性研究
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作者 范雪亭 刘海灿 +7 位作者 王瑞欢 李马超 万康林 赵丽丽 王瑞白 郭溢 李桂莲 赵秀芹 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第10期999-1004,共6页
目的分析结核分枝杆菌Rv2318蛋白及其T/B表位肽免疫原性,探索其作为结核疫苗候选抗原的可能。方法利用生物信息法预测Rv2318的T/B表位,表位肽(Rv2318p)及Rv2318基因合成后分别克隆至pET-32a载体表达纯化。Rv2318和Rv2318p经皮下多点免疫... 目的分析结核分枝杆菌Rv2318蛋白及其T/B表位肽免疫原性,探索其作为结核疫苗候选抗原的可能。方法利用生物信息法预测Rv2318的T/B表位,表位肽(Rv2318p)及Rv2318基因合成后分别克隆至pET-32a载体表达纯化。Rv2318和Rv2318p经皮下多点免疫BALB/c小鼠,利用ELISA法检测血清中特异性抗体滴度。分离脾淋巴细胞,用ELISA法和流式细胞技术分别检测分泌细胞因子水平及T细胞增殖情况。结果经分析Rv2318的T/B表位主要位于10-130和350-410位氨基酸。Rv2318和Rv2318p均以包涵体形式表达,通过镍亲和层析获得高纯度的目的蛋白,分子量分别约为68 kD和42 kD。抗原经梯度透析复性后分别配伍佐剂免疫BALB/c小鼠,免疫结果显示Rv2318和Rv2318p均可显著提高小鼠特异性IgG和亚型抗体滴度,且Rv2318p显著高于Rv2318(P<0.0001,n=6)。同时,Rv2318p提高IgG2a/IgG1的比值,诱导更强Th1类免疫应答。Rv2318及其表位肽均可提高IL-2和IL-6的表达(P<0.01,n=6),尤其是IL-6的表达。Rv2318p还刺激小鼠分泌更多IFN-γ,约为Rv2318组的3倍。此外,Rv2318及其表位肽均可提高机体CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的比例,且表位肽更好促进T淋巴细胞的增殖。结论Rv2318和Rv2318p均可诱导小鼠的体液免疫和细胞免疫应答,且Rv2318p诱导Th1型细胞免疫应答,提示Rv2318表位肽更具成为结核疫苗候选抗原潜力,为结核病新型疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 rv2318 表位肽 免疫原性
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