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《中国药典》拟收载洋葱伯克霍尔德菌群(Bcc)检查法中标准菌株的稳定性研究
被引量:
7
1
作者
曹蕊
余萌
马仕洪
《中国药事》
CAS
2022年第7期723-735,共13页
目的:应用现有微生物分类鉴定技术手段,对《中国药典》拟收载洋葱伯克霍尔德菌群(Bcc)检查法中所选用的标准菌株进行冻存及传代稳定性考察。方法:选取美国药典USP43-NF38 Bcc检查法中的一株Bcc标准菌株ATCC25416为对照菌株。以3株拟收...
目的:应用现有微生物分类鉴定技术手段,对《中国药典》拟收载洋葱伯克霍尔德菌群(Bcc)检查法中所选用的标准菌株进行冻存及传代稳定性考察。方法:选取美国药典USP43-NF38 Bcc检查法中的一株Bcc标准菌株ATCC25416为对照菌株。以3株拟收载标准菌株和1株对照标准菌株为试验菌株,分别对这些试验菌株冻存0.5年、1年、2年的样本及连续6代的传代样本进行菌落表型观察、Biolog生化鉴定分析、16S rRNA基因测序及Ribo Printer全自动基因指纹图谱分析,并使用Bio Numerics 7.6对核糖体图谱数据进行聚类分析。结果:试验菌株在经冻存及传代后,各菌株表型无明显差异;菌株的Biolog生化鉴定结果虽略有差异,但菌株关键生化代谢属性稳定,其鉴定结果均属Bcc;同时,各菌株的16S rRNA测序结果一致;核糖体带型相似值均大于0.95。结论:在本研究考察的冻存时间及传代次数内,3株《中国药典》洋葱伯克霍尔德菌群检查法拟收载的标准菌株的表型、基因型相对稳定。
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关键词
洋葱伯克霍尔德菌群
16S
rRNA
ribo
printer
全自动基因指纹图谱鉴定系统
Biolog全自动生化鉴定系统
菌株稳定性
暂未订购
复方益肝灵制剂中检出微生物的分型溯源与产品质量评价
被引量:
7
2
作者
冯震
钟玮
+2 位作者
刘冬玲
刘浩
杨美成
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期2083-2088,共6页
目的:对复方益肝灵制剂中检出的微生物进行鉴定与分型,评估产品微生物污染的风险,评价产品质量。方法:收集整理2014年国家药品评价性抽验中,复方益肝灵制剂共计138件,经微生物限度方法学验证,对制剂中检出的微生物共36株,利用革兰染色...
目的:对复方益肝灵制剂中检出的微生物进行鉴定与分型,评估产品微生物污染的风险,评价产品质量。方法:收集整理2014年国家药品评价性抽验中,复方益肝灵制剂共计138件,经微生物限度方法学验证,对制剂中检出的微生物共36株,利用革兰染色、镜检、生化鉴定、16S rDNA测序、Ribo Printer核糖体分型等方法,进行鉴定、分型与溯源。结果:生化方法无法有效鉴定该微生物污染物;核酸测序与核糖体分型的鉴定结果一致,均为弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)。核糖体分型的类聚分析结果表明:微生物污染物可分为2个亚型,其中亚型Ⅰ包含24个菌株,菌株间同源性关系>94%,亚型Ⅱ包含12个菌株,菌株间同源性关系>99%,2个亚型之间的同源性关系仅为87.2%;菌株分型结果与产品抽样批号的比较中发现,微生物各亚型的分布、同源性关系与产品的生产时段、生产批号呈现集中性和一致性的特点。结论:该制剂生产工艺流程中存在微生物污染的风险,应在生产过程中进行微生物监控,及时排查污染隐患。本研究通过上述案例分析,拟建立非无菌制剂中微生物的鉴定与分型方法及微生物污染物调查和追溯解决方案,为非无菌制剂的质量控制、监督抽验和用药风险评估提供技术手段和数据支持。
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关键词
复方益肝灵
微生物污染
VITEK生化鉴定
16S
rDNA测序
ribo
printer
核糖体分型
分型溯源
原文传递
食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因型检测与分布研究
被引量:
4
3
作者
冯震
蒋波
+1 位作者
房蕊
杨美成
《食品安全质量检测学报》
CAS
2015年第9期3460-3467,共8页
目的对食源性致病金黄色葡萄球菌肠毒素SEA^SEJ基因型分布状况进行调查,并探讨菌株分型与肠毒素基因型分布之间的关联性。方法采用PCR方法扩增金黄色葡萄球菌及肠毒素SEA^SEJ基因型核酸片段,应用全自动微生物基因指纹鉴定系统(Ribo Prin...
目的对食源性致病金黄色葡萄球菌肠毒素SEA^SEJ基因型分布状况进行调查,并探讨菌株分型与肠毒素基因型分布之间的关联性。方法采用PCR方法扩增金黄色葡萄球菌及肠毒素SEA^SEJ基因型核酸片段,应用全自动微生物基因指纹鉴定系统(Ribo Printer)对菌株进行分型和类聚状况分析。结果分离的24个待测菌株可分为6个亚型,各亚型均匀分布;待测10种肠毒素基因型中,SEI型、SEG型、SEA型和SEB型的出现频率较高,分别占54.2%、41.7%、37.5%和25.0%,同时表达两种以上肠毒素基因型的比率约50%,SEG型和SEI型肠毒素的表达分布具有协同性;金黄色葡萄球菌的溯源性特点与肠毒素分布规律一致。结论食源性金黄色葡萄球菌肠毒素呈现多基因型协同表达的特点,各菌株亚型与肠毒素基因型分布之间存在一定的关联性。
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关键词
金黄色葡萄球菌
肠毒素
全自动微生物基因指纹鉴定系统
基因分型
原文传递
枳壳细菌污染状况及溯源分析
被引量:
4
4
作者
霍晓菲
刘卫德
+1 位作者
刘绪平
章红
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期324-333,共10页
目的:考察枳壳果实、药材、饮片的微生物污染水平,并对其污染细菌进行分离鉴定、溯源。方法:参考2020年版《中华人民共和国药典》通则1108《中药饮片微生物限度检查法》,对枳壳中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌总数以及控制菌...
目的:考察枳壳果实、药材、饮片的微生物污染水平,并对其污染细菌进行分离鉴定、溯源。方法:参考2020年版《中华人民共和国药典》通则1108《中药饮片微生物限度检查法》,对枳壳中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌总数以及控制菌进行检查,采用PCR技术、RP技术对枳壳中检出的细菌进行菌株鉴定并通过BN软件溯源。结果:各阶段的微生物数量需氧菌总数及霉菌和酵母菌总数排序均为切片饮片、果实、麸炒饮片、药材。10批检出耐胆盐革兰氏阴性菌,但均未超过1×10^(4)cfu·g^(-1),未检出大肠埃希菌和沙门菌。共鉴定菌株50株,其中芽孢杆菌是该药材中的优势菌种,检出条件致病菌阪崎克罗诺肠杆菌、恶臭假单胞菌、肺炎克雷伯菌等。结论:为降低饮片中微生物负载,可尝试通过控制润药工艺参数如温度、水活度等方法防止微生物大量繁殖。果实到药材假单胞菌存在有同源性,而该类菌可能因为不耐热在饮片中并未分离到;阪崎克罗诺肠杆菌仅在饮片中存在,且占比高达50%,该菌可能是加工过程中由生产设备或环境或水体污染所致;另外,值得注意的是麸炒后的3批饮片中均存在条件致病菌肺炎克雷伯菌,应注意控制该类微生物污染,以保障枳壳质量安全。
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关键词
枳壳
微生物限度检查
同源性分析
ribo
printer
微生物基因指纹系统
16S
rDNA
原文传递
题名
《中国药典》拟收载洋葱伯克霍尔德菌群(Bcc)检查法中标准菌株的稳定性研究
被引量:
7
1
作者
曹蕊
余萌
马仕洪
机构
烟台大学
中国食品药品检定研究院
出处
《中国药事》
CAS
2022年第7期723-735,共13页
文摘
目的:应用现有微生物分类鉴定技术手段,对《中国药典》拟收载洋葱伯克霍尔德菌群(Bcc)检查法中所选用的标准菌株进行冻存及传代稳定性考察。方法:选取美国药典USP43-NF38 Bcc检查法中的一株Bcc标准菌株ATCC25416为对照菌株。以3株拟收载标准菌株和1株对照标准菌株为试验菌株,分别对这些试验菌株冻存0.5年、1年、2年的样本及连续6代的传代样本进行菌落表型观察、Biolog生化鉴定分析、16S rRNA基因测序及Ribo Printer全自动基因指纹图谱分析,并使用Bio Numerics 7.6对核糖体图谱数据进行聚类分析。结果:试验菌株在经冻存及传代后,各菌株表型无明显差异;菌株的Biolog生化鉴定结果虽略有差异,但菌株关键生化代谢属性稳定,其鉴定结果均属Bcc;同时,各菌株的16S rRNA测序结果一致;核糖体带型相似值均大于0.95。结论:在本研究考察的冻存时间及传代次数内,3株《中国药典》洋葱伯克霍尔德菌群检查法拟收载的标准菌株的表型、基因型相对稳定。
关键词
洋葱伯克霍尔德菌群
16S
rRNA
ribo
printer
全自动基因指纹图谱鉴定系统
Biolog全自动生化鉴定系统
菌株稳定性
Keywords
Burkholderia cepacia Complex
16S rRNA
ribo
printer
automatic genetic fingerprint identification system
biolog automatic biochemical identification system
strain stability
分类号
R95 [医药卫生—药学]
暂未订购
题名
复方益肝灵制剂中检出微生物的分型溯源与产品质量评价
被引量:
7
2
作者
冯震
钟玮
刘冬玲
刘浩
杨美成
机构
上海市食品药品检验所
出处
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期2083-2088,共6页
文摘
目的:对复方益肝灵制剂中检出的微生物进行鉴定与分型,评估产品微生物污染的风险,评价产品质量。方法:收集整理2014年国家药品评价性抽验中,复方益肝灵制剂共计138件,经微生物限度方法学验证,对制剂中检出的微生物共36株,利用革兰染色、镜检、生化鉴定、16S rDNA测序、Ribo Printer核糖体分型等方法,进行鉴定、分型与溯源。结果:生化方法无法有效鉴定该微生物污染物;核酸测序与核糖体分型的鉴定结果一致,均为弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)。核糖体分型的类聚分析结果表明:微生物污染物可分为2个亚型,其中亚型Ⅰ包含24个菌株,菌株间同源性关系>94%,亚型Ⅱ包含12个菌株,菌株间同源性关系>99%,2个亚型之间的同源性关系仅为87.2%;菌株分型结果与产品抽样批号的比较中发现,微生物各亚型的分布、同源性关系与产品的生产时段、生产批号呈现集中性和一致性的特点。结论:该制剂生产工艺流程中存在微生物污染的风险,应在生产过程中进行微生物监控,及时排查污染隐患。本研究通过上述案例分析,拟建立非无菌制剂中微生物的鉴定与分型方法及微生物污染物调查和追溯解决方案,为非无菌制剂的质量控制、监督抽验和用药风险评估提供技术手段和数据支持。
关键词
复方益肝灵
微生物污染
VITEK生化鉴定
16S
rDNA测序
ribo
printer
核糖体分型
分型溯源
Keywords
Yiganling oral tablets
microbial contamination
VITEK biochemical identification
16S rDNA sequencing
ribo printer
ribo
typing
molecular
ribo
typing and tracing
分类号
R917 [医药卫生—药物分析学]
原文传递
题名
食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因型检测与分布研究
被引量:
4
3
作者
冯震
蒋波
房蕊
杨美成
机构
上海市食品药品检验所
出处
《食品安全质量检测学报》
CAS
2015年第9期3460-3467,共8页
基金
国家食源性致病菌风险监测项目~~
文摘
目的对食源性致病金黄色葡萄球菌肠毒素SEA^SEJ基因型分布状况进行调查,并探讨菌株分型与肠毒素基因型分布之间的关联性。方法采用PCR方法扩增金黄色葡萄球菌及肠毒素SEA^SEJ基因型核酸片段,应用全自动微生物基因指纹鉴定系统(Ribo Printer)对菌株进行分型和类聚状况分析。结果分离的24个待测菌株可分为6个亚型,各亚型均匀分布;待测10种肠毒素基因型中,SEI型、SEG型、SEA型和SEB型的出现频率较高,分别占54.2%、41.7%、37.5%和25.0%,同时表达两种以上肠毒素基因型的比率约50%,SEG型和SEI型肠毒素的表达分布具有协同性;金黄色葡萄球菌的溯源性特点与肠毒素分布规律一致。结论食源性金黄色葡萄球菌肠毒素呈现多基因型协同表达的特点,各菌株亚型与肠毒素基因型分布之间存在一定的关联性。
关键词
金黄色葡萄球菌
肠毒素
全自动微生物基因指纹鉴定系统
基因分型
Keywords
Staphylococcus aureus
enterotoxin
ribo printer
genotyping
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
原文传递
题名
枳壳细菌污染状况及溯源分析
被引量:
4
4
作者
霍晓菲
刘卫德
刘绪平
章红
机构
江西省药品检验检测研究院、国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心
江西中医药大学
出处
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期324-333,共10页
基金
江西省重点研发计划项目(20192BBGL70052)
国家自然科学基金(81960715)。
文摘
目的:考察枳壳果实、药材、饮片的微生物污染水平,并对其污染细菌进行分离鉴定、溯源。方法:参考2020年版《中华人民共和国药典》通则1108《中药饮片微生物限度检查法》,对枳壳中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌总数以及控制菌进行检查,采用PCR技术、RP技术对枳壳中检出的细菌进行菌株鉴定并通过BN软件溯源。结果:各阶段的微生物数量需氧菌总数及霉菌和酵母菌总数排序均为切片饮片、果实、麸炒饮片、药材。10批检出耐胆盐革兰氏阴性菌,但均未超过1×10^(4)cfu·g^(-1),未检出大肠埃希菌和沙门菌。共鉴定菌株50株,其中芽孢杆菌是该药材中的优势菌种,检出条件致病菌阪崎克罗诺肠杆菌、恶臭假单胞菌、肺炎克雷伯菌等。结论:为降低饮片中微生物负载,可尝试通过控制润药工艺参数如温度、水活度等方法防止微生物大量繁殖。果实到药材假单胞菌存在有同源性,而该类菌可能因为不耐热在饮片中并未分离到;阪崎克罗诺肠杆菌仅在饮片中存在,且占比高达50%,该菌可能是加工过程中由生产设备或环境或水体污染所致;另外,值得注意的是麸炒后的3批饮片中均存在条件致病菌肺炎克雷伯菌,应注意控制该类微生物污染,以保障枳壳质量安全。
关键词
枳壳
微生物限度检查
同源性分析
ribo
printer
微生物基因指纹系统
16S
rDNA
Keywords
Aurantii Fructus
microbial limit test
homology analysis
ribo printer
microbial gene fingerprinting system
16S rDNA
分类号
R917 [医药卫生—药物分析学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
《中国药典》拟收载洋葱伯克霍尔德菌群(Bcc)检查法中标准菌株的稳定性研究
曹蕊
余萌
马仕洪
《中国药事》
CAS
2022
7
暂未订购
2
复方益肝灵制剂中检出微生物的分型溯源与产品质量评价
冯震
钟玮
刘冬玲
刘浩
杨美成
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
7
原文传递
3
食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因型检测与分布研究
冯震
蒋波
房蕊
杨美成
《食品安全质量检测学报》
CAS
2015
4
原文传递
4
枳壳细菌污染状况及溯源分析
霍晓菲
刘卫德
刘绪平
章红
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
4
原文传递
已选择
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参考文献
引证文献
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