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小麦T型细胞质雄性不育恢复基因Rf6的ISSR标记分析 被引量:23
1
作者 关荣霞 郭小丽 +2 位作者 刘冬成 曹双河 张爱民 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1297-1301,共5页
以小麦T型恢复系 2 114和不育系ND4 4A配制杂交组合 ,并以 14 7株个体组成的F2 分离群体作为恢复基因的标记群体。用 4 3个ISSR引物对两个亲本进行了扩增 ,发现 18个引物能在两者间产生明显的多态性 ,其中引物UBC 80 8、UBC 84 8在 2个... 以小麦T型恢复系 2 114和不育系ND4 4A配制杂交组合 ,并以 14 7株个体组成的F2 分离群体作为恢复基因的标记群体。用 4 3个ISSR引物对两个亲本进行了扩增 ,发现 18个引物能在两者间产生明显的多态性 ,其中引物UBC 80 8、UBC 84 8在 2个亲本间以及可育池和不育池间都能产生一致、稳定的多态性。用这 2个引物在F2群体中进行扩增。经连锁分析 ,证明这 2个标记与小麦T型细胞质雄性不育恢复基因Rf6连锁 ,遗传距离分别为7.9cM和 4 .9cM。用 181对SSR引物对两个亲本进行扫描 ,其中有 34.3%SSR引物能在亲本间扩增出多态性 ,但没找到与Rf6连锁的SSR标记。对ISSR、SSR等方法在小麦中的多态性比例进行了比较 ,发现ISSR具有更高的多态性 ,特别是在外源基因的检测中能提供更丰富的遗传信息。 展开更多
关键词 T型细胞质雄性不育 小麦 ISSR标记 恢复基因rf6 多态性 基因连锁
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水稻细胞质雄性不育恢复基因Rf6功能标记开发及微核心种质中Rf6基因的筛选 被引量:3
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作者 徐雪 王英 +5 位作者 邹礼平 魏朗 彭方 黄文超 段俊枝 姚国新 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第2期12-15,共4页
核恢复基因Rf6是红莲型杂交水稻特有的新恢复基因,为了寻找更多具有Rf6恢复基因的种质,以扩展红莲型杂交水稻的恢复系来源,组配更多优良杂交品系,利用Rf6及其等位基因的序列差异,开发Rf6基因的功能标记,并利用该标记对中国水稻微核心种... 核恢复基因Rf6是红莲型杂交水稻特有的新恢复基因,为了寻找更多具有Rf6恢复基因的种质,以扩展红莲型杂交水稻的恢复系来源,组配更多优良杂交品系,利用Rf6及其等位基因的序列差异,开发Rf6基因的功能标记,并利用该标记对中国水稻微核心种质进行PCR扩增,筛选具有Rf6恢复基因的种质。结果表明,在324 bp插入片段(Rf6较其等位基因插入324 bp)两侧设计引物(正向引物:5'-ATGACAAGAGGACCAGCGATGCAATGG-3',反向引物:5'-ATTCTTGCAGAGATAGACCATGAGCGTG-3'),利用该引物可扩增出条带清晰且无杂带的差异片段,可用于Rf6基因的鉴定。利用该标记在197份中国水稻微核心种质中筛选出22份具有Rf6恢复基因的种质,可为拓宽红莲型杂交水稻的恢复系来源提供材料。 展开更多
关键词 红莲型水稻 恢复基因rf6 微核心种质
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The Application of ISSR Markers to Identify the Fertility Restorer Gene Rf6 in T. timopheevii Cytoplasmic MaleSterile Wheat(Triticum aestivum) 被引量:1
3
作者 GUAN Rong-xia, GUO Xiao-li, LIU Dong-cheng, CAO Shuang-he and ZHANG Ai-min(College of Crop Science , China Agricultural University, Beijing 100094 , P.R.China College of Biology,China Agricultural University, Beijing 100094 , P. R . China Institute of Genetics and Developmental Biology,Chinese Academy of Sciences , Beijing 100101 , P. R . China ) 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2002年第10期1089-1093,共5页
Inter-simple sequence repeat (ISSR) analysis was carried out on a F2 population of 147 plants derived from a cross between a wheat male fertility restorer line 2114 and a male sterile line ND44A. Out of 43 primers exa... Inter-simple sequence repeat (ISSR) analysis was carried out on a F2 population of 147 plants derived from a cross between a wheat male fertility restorer line 2114 and a male sterile line ND44A. Out of 43 primers examined, 18 primers produced distinguishable, polymorphic bands between the two parents. Linkage analysis in the mapping population showed that two markers UBC-808 and UBC-848 were closely linked with the restorer gene Rf6 of the Triticum timopheevii CMS system. The distance between the two markers and the restorer gene was 7.9 cM and 4.9 cM, respectively. Also two parents were screened with 181 pairs of SSR primers, of which, 34.3% showed polymorphisms. But no locus was found linked with the restorer gene. Compared with the SSR technique, the ISSR approach used in the experiment provided more information and proved to be a valuable method to identify alien fragments. 展开更多
关键词 WHEAT Restorer gene rf6 ISSR marker SSR marker
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水稻HL-CMS育性恢复蛋白的原核表达及纯化
4
作者 傅静 谭艳平 +1 位作者 刘学群 王春台 《湖北农业科学》 2015年第23期6047-6051,共5页
将水稻目地基因Rf6连接到载体PMD-18T上,测序正确后将目的片段连接到含有GST标签的p GEX-6P-1原核表达载体上,确认正确的重组质粒转化到BL21菌株;通过LB培养至对数生长期后,加入IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot检测是否诱导... 将水稻目地基因Rf6连接到载体PMD-18T上,测序正确后将目的片段连接到含有GST标签的p GEX-6P-1原核表达载体上,确认正确的重组质粒转化到BL21菌株;通过LB培养至对数生长期后,加入IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot检测是否诱导出目的条带,并且经过Glutathione Resin亲和层析系统纯化及检测。结果表明,20℃,4 h,0.3 mmol/L IPTG条件下可诱导出可溶性蛋白,经纯化得到可溶性带GST标签的融合蛋白。 展开更多
关键词 水稻 恢复基因(rf6) 融合蛋白GST-rf6 原核表达
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基于OMAP的车载多媒体处理平台的DSP端软件设计
5
作者 韩澄宗 朱善安 《电子器件》 CAS 2006年第3期951-954,共4页
OMAP芯片是TI公司推出的具有双核结构的微处理器,目前已经广泛地应用于无线通信领域。针对OMAP的结构特点,平台的ARM端运行Montavista Linux操作系统,主要进行无线网络通信和人机界面交互等任务;DSP端运行DSP/BIOS操作系统,用于音频编... OMAP芯片是TI公司推出的具有双核结构的微处理器,目前已经广泛地应用于无线通信领域。针对OMAP的结构特点,平台的ARM端运行Montavista Linux操作系统,主要进行无线网络通信和人机界面交互等任务;DSP端运行DSP/BIOS操作系统,用于音频编解码等实时数值运算。DSP端应用程序在RF6框架的基础上,着重对数据处理模块、底层驱动模块等进行了设计。该平台具有很好的扩展性,目前已经开发了MP3下载播放、IP电话用户终端等车载应用。 展开更多
关键词 车载设备 OMAP 嵌入式系统 rf6
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茶籽中脂肪酸的组成及其生物活性脂肪酸对高糖胁迫下RF/6A细胞生长的影响 被引量:12
6
作者 于海宁 单伟光 +1 位作者 Undurti N DAS 沈生荣 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期419-425,共7页
采用气相色谱(GC)对茶籽的脂肪酸组成进行分析,并研究了活性脂肪酸对高浓度葡萄糖胁迫下RF/6A细胞生长的影响及其与葡萄糖对RF/6A细胞脂肪酸代谢的调节。结果表明,油酸与亚油酸为茶籽中含量最高的脂肪酸;而茶籽中脂肪酸的组成与其品种... 采用气相色谱(GC)对茶籽的脂肪酸组成进行分析,并研究了活性脂肪酸对高浓度葡萄糖胁迫下RF/6A细胞生长的影响及其与葡萄糖对RF/6A细胞脂肪酸代谢的调节。结果表明,油酸与亚油酸为茶籽中含量最高的脂肪酸;而茶籽中脂肪酸的组成与其品种和产地有密切关系。亚油酸与亚麻酸对高浓度葡萄糖诱导的RF/6A细胞过度增殖有抑制作用。亚油酸、亚麻酸及棕榈酸对RF/6A细胞的脂肪酸代谢均具有调节作用。 展开更多
关键词 茶籽 脂肪酸 RF/6A细胞 高糖胁迫
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脂联素对视网膜血管内皮细胞缺氧损伤的保护作用及机制研究 被引量:7
7
作者 姚国敏 古丽努尔·买买提 +2 位作者 李蓉 邓颖 焦聪 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期1320-1324,共5页
目的:研究脂联素对缺氧损伤的恒河猴脉络膜/视网膜内皮(RF/6A)细胞的保护作用及相关机制。方法:将体外培养的RF/6A细胞随机分为对照组、缺氧损伤(CoCl2刺激诱导24h)组和缺氧损伤+脂联素(5、50、100μmol/L脂联素预处理6h)组。采用MTT法... 目的:研究脂联素对缺氧损伤的恒河猴脉络膜/视网膜内皮(RF/6A)细胞的保护作用及相关机制。方法:将体外培养的RF/6A细胞随机分为对照组、缺氧损伤(CoCl2刺激诱导24h)组和缺氧损伤+脂联素(5、50、100μmol/L脂联素预处理6h)组。采用MTT法检测细胞活力,选择合适的脂联素内皮细胞保护作用浓度,并采用Western blot检测凋亡相关因子Bax、Bcl-2的表达情况,同时测定细胞内活力氧簇(ROS)的表达水平。结果:与对照组相比,缺氧损伤组和各浓度脂联素预处理的RF/6A细胞活力均下降(均P<0.01);与缺氧损伤组相比,各浓度脂联素预处理后细胞活力均显著增加(均P<0.05),其中50μmol/L脂联素是较为合适的保护作用浓度。与对照组相比,缺氧损伤组细胞活力降低,Bax蛋白表达量升高,Bcl-2蛋白表达量降低,ROS生成增加(P<0.01);与缺氧损伤组相比,脂联素预处理后细胞活力增加,Bax蛋白表达量降低,Bcl-2蛋白表达量增加,ROS生成减少(P<0.01)。结论:脂联素可明显减轻缺氧造成的视网膜血管内皮细胞损伤和凋亡,其机制可能与脂联素减轻氧化应激有关。 展开更多
关键词 脂联素 RF/6A细胞 缺氧 氧化应激 细胞活力 凋亡
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基于OMAP5912双核架构的嵌入式系统及其应用 被引量:2
8
作者 李飞娟 李娟 朱善安 《电工技术》 2006年第7期11-14,共4页
详细介绍了OMAP5912处理器的软硬件架构,ARM和DSP间通讯应用程序DSP/BIOS的设计,以及ARM和DSP端编程。
关键词 OMAP ARM DSP rf6嵌入式
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高糖环境对视网膜血管内皮细胞自噬的影响及机制 被引量:4
9
作者 姚国敏 李蓉 +3 位作者 姚杨 杜军辉 王小娣 邓颖 《临床眼科杂志》 2019年第4期361-366,共6页
目的研究高糖培养环境对恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(RF/6A)自噬的影响及机制。方法将体外培养的RF/6A细胞随机分为对照组、高糖组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+高糖组,对照组细胞在无糖培养基中培养,高糖组细胞在培养基中加入25mMD-glucos... 目的研究高糖培养环境对恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(RF/6A)自噬的影响及机制。方法将体外培养的RF/6A细胞随机分为对照组、高糖组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+高糖组,对照组细胞在无糖培养基中培养,高糖组细胞在培养基中加入25mMD-glucose进行培养,3-MA+高糖组用5mg/ml3-MA预处理1.5h,然后置于含25mMD-glucose的培养基中继续培养。培养48h后,采用Westernblot法检测各组细胞的自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、Atg5及关键信号通路蛋白PI3K、AKT、mTOR的表达,采用可表达mCherry-GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒感染细胞,激光共聚焦显微镜下观察细胞内自噬的变化。结果①对照组、高糖组、3-MA+高糖组细胞中的LC3B-II/LC3B-I值、Atg5值分别为(0.19±0.02、0.58±0.06和0.43±0.04)和(0.35±0.05、0.96±0.06和0.83±0.06),组间总体比较差异均有统计学意义(LC3B-II/LC3B-I:F=55.58,P=0.000;Atg5:F=100.35,P=0.000)。高糖组细胞中LC3B-II/LC3B-I值和Atg5值均明显高于对照组和3-MA+高糖组,差异均有统计学意义(均P<0.05),3-MA+高糖组的LC3B-II/LC3B-I值和Atg5值均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。②对照组、高糖组、3-MA+高糖组细胞中的PI3K值、AKT值和mTOR值分别为(0.93±0.06、0.94±0.07和0.89±0.07)、(0.95±0.05、0.94±0.04和0.90±0.02)和(0.81±0.04、0.82±0.04和0.80±0.02),组间总体比较差异均无统计学意义(均P>0.05);三组磷酸化蛋白p-PI3K值、p-AKT值和p-mTOR值分别为(0.74±0.02、0.40±0.02和0.70±0.02)、(0.87±0.02、0.47±0.02和0.77±0.06)和(0.76±0.03、0.38±0.02和0.70±0.02),组间总体比较差异均有统计学意义(p-PI3K:F=249.92,P=0.000;p-AKT:F=100.94,P=0.000;p-mTOR:F=218.21,P=0.000)。高糖组细胞中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR值均明显低于对照组和3-MA+高糖组,差异均有统计学意义(均P<0.05),3-MA+高糖组的p-PI3K、p-AKT和p-mTOR值均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。③对照组细胞浆中出现较弱的GFP(绿点)和mCherry(红点)荧光信号,高糖组黄点(红绿荧光融合)和红点明显多于对照组,自噬增强;3-MA+高糖组黄点和红点较高糖组减少,自噬减弱。结论高糖环境通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活RF/6A细胞自噬。 展开更多
关键词 自噬 高糖 RF/6A PI3K/AKT/MTOR
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鱼精蛋白体外抑制RF/6A细胞中血管内皮生长因子表达的研究 被引量:1
10
作者 曲超 马平 +3 位作者 余雨枫 董巍 董丹丹 胡建斌 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期170-173,共4页
目的研究鱼精蛋白对体外培养的RF/6A细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制作用。方法建立RF/6A细胞的正常及缺氧培养模型,在上清液中加入鱼精蛋白,质量浓度分别为10、20、40、80、160μg/mL。在细胞培养的0、24、48、72、96、120h取... 目的研究鱼精蛋白对体外培养的RF/6A细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制作用。方法建立RF/6A细胞的正常及缺氧培养模型,在上清液中加入鱼精蛋白,质量浓度分别为10、20、40、80、160μg/mL。在细胞培养的0、24、48、72、96、120h取上清液行ELISA检测,定量分析细胞的VEGF表达情况。在培养96h时,取出细胞铺片行免疫病理学检测,检测VEGF与受体的结合状况。结果在10~80μg/mL的范围内,鱼精蛋白的抑制作用与质量浓度成正比,80μg/mL为最佳的抑制质量浓度。缺氧条件下RF/6AVEGF的表达量始终高于正常氧浓度条件下;正常和缺氧状态下,鱼精蛋白均可以明显抑制VEGF的表达,不同组的差异有统计学意义(F=7.85,P=0.002)。免疫病理染色表明鱼精蛋白减少了VEGF与其受体的结合。结论一定质量浓度的鱼精蛋白对正常及缺氧状态下的RF/6AVEGF的表达有明确的抑制作用,同时还可以减少VEGF与VEGF受体的结合。鱼精蛋白有可能成为临床治疗缺血型新生血管性眼底病的新药。 展开更多
关键词 鱼精蛋白 血管内皮生长因子 RF/6A细胞系
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长链多不饱和脂肪酸对高糖环境下视网膜细胞生长的影响及其机理研究 被引量:1
11
作者 于海宁 蔡鹏飞 +1 位作者 沈生荣 单伟光 《浙江工业大学学报》 CAS 2014年第3期338-343,共6页
选择花生四烯酸(AA),二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)用于探索长链多不饱和脂肪酸(PUFAs)对高糖环境下视网膜细胞(RF/6A)生长的影响,并初步探索其作用机理.采用MTT法细胞存活率,发现高浓度葡萄糖可促进RF/6A细胞过度增殖;采用三... 选择花生四烯酸(AA),二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)用于探索长链多不饱和脂肪酸(PUFAs)对高糖环境下视网膜细胞(RF/6A)生长的影响,并初步探索其作用机理.采用MTT法细胞存活率,发现高浓度葡萄糖可促进RF/6A细胞过度增殖;采用三种PUFAs处理高糖环境下的RF/6A细胞,结果显示AA,EPA及DHA分别在180,160,200μmol/L浓度下能有效抑制由高糖引起的过度增殖;采用气相色谱分析细胞脂肪酸组成,发现高浓度葡萄糖可改变视网膜细胞对脂肪酸的吸收及细胞脂肪酸代谢;而三种PUFAs能被细胞吸收,并改变RF/6A细胞脂肪酸组成;采用Elisa试剂盒测定白介素-6(IL-6)及生长因子VEGF的表达,结果表明:AA处理可促进IL-6及VEGF的表达;EPA处理可抑制IL-6表达,促进VEGF表达;而DHA对IL-6表达有显著抑制作用,对VEGF表达无显著性影响. 展开更多
关键词 多不饱和脂肪酸 RF/6A 脂肪酸组成 VEGF IL-6
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重组人血管抑制因子Vasostatin对视网膜血管内皮细胞增殖的影响 被引量:1
12
作者 李光宇 范斌 +3 位作者 徐立 吴雅臻 何立洁 吴家祥 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期351-354,共4页
目的 探讨重组人血管抑制因子Vasostatin对体外培养的恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)增殖的影响。方法 以bFGF刺激增殖 ,体外培养恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)至 4代 ,分别加入不同质量浓度的重组人Vasostatin蛋白 ,并采用MT... 目的 探讨重组人血管抑制因子Vasostatin对体外培养的恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)增殖的影响。方法 以bFGF刺激增殖 ,体外培养恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)至 4代 ,分别加入不同质量浓度的重组人Vasostatin蛋白 ,并采用MTT法、3 H TdR法检测 2、4、6d时其对血管内皮细胞增殖抑制的作用 ,同时利用流式细胞仪对重组人Vasostatin蛋白是否诱导细胞凋亡进行了探讨。结果 MTT法、3 H TdR两种方法均显示重组人Vasostatin蛋白以质量浓度依赖的方式抑制bFGF刺激的恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)的增殖。流式细胞仪检测显示加入重组人Vasostatin蛋白后 ,G0 /G1期无明显的亚二倍体核形峰出现 ,其不是通过诱导细胞凋亡的方式来抑制细胞增殖的。结论 重组人Vasostatin蛋白在体外具有抑制bFGF诱导的血管内皮细胞增殖的作用 ,其有可能成为一种有效的血管新生抑制剂。 展开更多
关键词 血管抑制因子 恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A) 新生血管 钙网蛋白
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姜黄素对缺氧下视网膜血管内皮细胞增殖、迁移和成管的影响 被引量:2
13
作者 张静 姚国敏 李小珩 《临床眼科杂志》 2019年第5期463-467,共5页
目的研究姜黄素对缺氧条件下培养的视网膜血管内皮细胞增殖、迁移和成管的影响。方法将恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A)随机分为对照组(常氧下培养)、缺氧组(低氧箱中培养)、缺氧+不同浓度姜黄素组(培养基中分别加入25、50、100μmol/... 目的研究姜黄素对缺氧条件下培养的视网膜血管内皮细胞增殖、迁移和成管的影响。方法将恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A)随机分为对照组(常氧下培养)、缺氧组(低氧箱中培养)、缺氧+不同浓度姜黄素组(培养基中分别加入25、50、100μmol/L姜黄素后置于低氧箱),培养24h后,分别采用MTT法检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,成管实验检测细胞管腔形成。结果与对照组相比,缺氧组RF/6A细胞增殖明显增强(P<0.05),各浓度姜黄素组增殖均比缺氧组明显降低(P<0.05),细胞增殖随姜黄素浓度的增加而降低。与对照组相比,缺氧组RF/6A细胞迁移距离明显增大(P<0.05),各浓度姜黄素组迁移距离均比缺氧组明显减小(P<0.05),细胞迁移距离随姜黄素浓度的增加而降低。与对照组相比,缺氧组RF/6A细胞成管数明显增多(P<0.05),各浓度姜黄素组成管数均比缺氧组明显减少(P<0.05),细胞成管数随姜黄素浓度的增加而减少。结论姜黄素可通过抑制缺氧下的RF/6A细胞增殖、迁移和管腔样结构形成,从而抑制缺血缺氧诱导的视网膜血管形成。 展开更多
关键词 姜黄素 缺氧 RF/6A 血管内皮细胞 视网膜 细胞培养
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脂联素对高糖环境下视网膜血管内皮细胞自噬的影响 被引量:1
14
作者 李蓉 姚国敏 +4 位作者 巨伟 雷凯 袁博博 张一凡 杜军辉 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第11期1576-1581,共6页
目的研究脂联素(adiponectin,APN)对高糖培养环境下恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(monkey choroid-retinal endothelial cell line,RF/6A)自噬水平的影响。方法将体外培养的RF/6A细胞随机分为对照组(正常培养基培养)、高糖组(含25 mmo... 目的研究脂联素(adiponectin,APN)对高糖培养环境下恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(monkey choroid-retinal endothelial cell line,RF/6A)自噬水平的影响。方法将体外培养的RF/6A细胞随机分为对照组(正常培养基培养)、高糖组(含25 mmol/L D-葡萄糖的培养基培养)和高糖+APN组(含25 mmol/L D-葡萄糖+15μg/ml APN的培养基培养)。分别采用电镜观察细胞内自噬体的形成,Western blot法检测细胞自噬标志蛋白LC3及Beclin-1的表达,激光共聚焦显微镜观察自噬荧光。结果三组细胞中均可见到自噬体的形成,高糖组明显多于对照组,高糖+APN组又少于高糖组;三组细胞均有LC3和Beclin-1的蛋白表达,高糖组两种蛋白的表达明显高于对照组(P <0. 05),高糖+APN组明显低于高糖组(P <0. 05);三组细胞中均可观察到自噬流,对照组可见较弱的绿色和红色荧光,高糖组黄色和红色荧光明显增多,高糖+APN组黄色和红色较高糖组荧光明显降低。结论高糖环境激活RF/6A细胞自噬,APN可以降低高糖环境下的细胞自噬水平,提示APN对病理刺激条件下的细胞自噬具有调控作用。 展开更多
关键词 脂联素 高糖 RF/6A细胞 自噬
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胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白-1抑制视网膜血管新生的机制研究
15
作者 孙涛 朱弼珺 +3 位作者 许迅 苏莉 顾青 许琳 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期133-136,142,共5页
目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白-1(IGFBP-rP1)抑制血管内皮细胞生长因子(VEGF)体外诱导视网膜新生血管形成的机制。方法猕猴视网膜/脉络膜血管内皮细胞株(RF/6A)扩增培养、血清饥饿培养24 h后,分为对照组及50、100、200 ng/m... 目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白-1(IGFBP-rP1)抑制血管内皮细胞生长因子(VEGF)体外诱导视网膜新生血管形成的机制。方法猕猴视网膜/脉络膜血管内皮细胞株(RF/6A)扩增培养、血清饥饿培养24 h后,分为对照组及50、100、200 ng/mL IGFBP-rP1干预组进行干预,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化;分为对照组,10 ng/mL VEGF干预组,50、100、200 ng/mL IGFBP-rP1+10 ng/mL VEGF干预组进行干预,免疫细胞化学染色检测细胞中B-Raf蛋白表达,分光光度法检测细胞中Caspase 3活性的变化。结果流式细胞仪检测显示,50、100、200 ng/mL IGFBP-rP1干预组RF/6A细胞凋亡率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。免疫细胞化学染色检测与Caspase 3活性检测显示,与对照组比较,10 ng/mL VEGF干预组RF/6A细胞细胞质平均吸光度显著升高、D405值显著降低(均P<0.05);与10 ng/mL VEGF干预组比较,50、100、200 ng/mL IGFBP-rP1+10 ng/mL VEGF干预组RF/6A细胞细胞质平均吸光度显著降低、D405值显著升高(均P<0.05),且各组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 IGFBP-rP1通过干预B-Raf蛋白表达,上调细胞Caspase 3活性,对抗VEGF的促视网膜血管新生效应,发挥抑血管新生因子的负向调节作用。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白-1 血管内皮细胞生长因子 RF/6A细胞 B-RAF CASPASE3
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加减大黄虫丸干预RF/6A细胞参与血管生成的实验研究
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作者 罗旭昇 吴星伟 顾青 《世界中西医结合杂志》 2011年第9期754-759,共6页
目的探讨加减大黄虫丸干预猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)参与血管生成的作用。方法 MTS比色法观察加减大黄虫丸对RF/6A细胞增殖的影响;Transwell小室检测其对RF/6A细胞移行的影响;Matrigel实验检测其对RF/6A细胞管腔形成的影响;Wester... 目的探讨加减大黄虫丸干预猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)参与血管生成的作用。方法 MTS比色法观察加减大黄虫丸对RF/6A细胞增殖的影响;Transwell小室检测其对RF/6A细胞移行的影响;Matrigel实验检测其对RF/6A细胞管腔形成的影响;Western Blot和实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),分别检测其对RF/6A细胞表达VEGF、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白和mRNA的影响。结果 0.2 g.mL-1浓度的加减大黄虫丸对VEGF诱导的RF/6A细胞增殖具有抑制作用;其浓度为01、2.52、5和50 mg.mL-1时RF/6A细胞移行数分别为73.333±4.51、61.333±4.042、8.667±6.66和17.667±4.16;其浓度为01、2.52、5和50 mg.mL-1时RF/6A细胞内皮管腔形成数分别为20.333±0.581、3.333±1.53、11.000±1.00和1.333±0.58;其100和200 mg.mL-1浓度能够抑制RF/6A细胞VEGF、MMP-2蛋白和mRNA表达,400 mg.mL-1浓度能够抑制RF/6A细胞MMP-2蛋白和VEGF mRNA表达。结论加减大黄虫丸通过抑制RF/6A细胞增殖、移行及管腔形成的途径抑制其参与新生血管生成,其机理可能与抑制RF/6A细胞VEGF、MMP-2的表达有关。 展开更多
关键词 加减大黄虫丸 猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A) 增殖 移行 脉络膜新生血管(CNV) 血管内皮生长因子(VEGF) 基质金属蛋白酶2(MMP-2)
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康柏西普与雷珠单抗对RF/6A细胞增殖和迁移影响的比较 被引量:5
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作者 刘华妮 李明新 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第1期87-93,共7页
目的比较康柏西普与雷珠单抗对恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(RF/6A cells)增殖和迁移的影响。方法将RF/6A细胞分为正常组、VEGF组、康柏西普组、雷珠单抗组、康柏西普+VEGF组和雷珠单抗+VEGF组。CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室... 目的比较康柏西普与雷珠单抗对恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(RF/6A cells)增殖和迁移的影响。方法将RF/6A细胞分为正常组、VEGF组、康柏西普组、雷珠单抗组、康柏西普+VEGF组和雷珠单抗+VEGF组。CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室检测细胞迁移;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡;Western blot检测蛋白AKT、p-AKT、P38MAPK及p-P38MAPK表达;实时定量PCR检测AKT mRNA和P38MAPK mRNA表达。结果 1)与正常组比,同时间不同浓度药物组细胞增殖率呈浓度依赖性降低。确定药物浓度225μg/m L和培养24 h继续实验。2)与正常组比,VEGF组细胞增殖率高,迁移数目多,单药组增殖率低,迁移数目少;与VEGF组比,VEGF+药组增殖率低,迁移数目少。3)与正常组比,VEGF组细胞凋亡率低,单药组凋亡率高;与VEGF组比,VEGF+药组凋亡率高。4)与正常组比,VEGF组磷酸化蛋白和mRNA表达高,单药组表达低;与VEGF组比,VEGF+药组表达低。结论两药通过AKT和P38MAPK信号通路抑制RF/6A细胞增殖、迁移及相关蛋白的表达。 展开更多
关键词 RF/6A 康柏西普 雷珠单抗 增殖 迁移
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姜黄素对高浓度葡萄糖培养的RF/6A的保护作用 被引量:2
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作者 张强 刘学政 《中国实用医药》 2012年第11期243-244,共2页
目的探讨高浓度葡萄糖对体外培养的恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)的损伤及姜黄素对此的保护作用。方法 RF/6A为3组培养(n=6):对照组(DMEM完全培养基+10%胎牛血清),高浓度葡萄糖组(DMEM完全培养基+10%胎牛血清+30mmol/L葡萄糖),姜... 目的探讨高浓度葡萄糖对体外培养的恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)的损伤及姜黄素对此的保护作用。方法 RF/6A为3组培养(n=6):对照组(DMEM完全培养基+10%胎牛血清),高浓度葡萄糖组(DMEM完全培养基+10%胎牛血清+30mmol/L葡萄糖),姜黄素-葡萄糖组(DMEM培养基+10%胎牛血清+30mmol/L葡萄糖+30μmol/L姜黄素)。以噻唑蓝(MTT)法检测分组培养1、3、5d后各组细胞活力的变化,检测培养5d后各组细胞丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果高浓度葡萄糖组RF/6A活力逐渐降低,呈现明显的时间依赖性,与对照组相比高浓度葡萄糖组RF/6A活性降低明显(P<0.01)。姜黄素-葡萄糖组RF/6A活力无明显变化,与对照组无统计学差异(P>0.05)。氧化应激水平检测显示,与对照组相比,分组培养5d后,高浓度葡萄糖组MDA含量增加(P<0.01),SOD活力降低(P<0.01)。姜黄素-葡萄糖组MDA含量及SOD活力均无明显变化(P>0.05)。结论姜黄素可抑制RF/6A氧化应激水平,防止高浓度葡萄糖对细胞造成损伤。 展开更多
关键词 RF/6A 葡萄糖 姜黄素 氧化应激 细胞活力
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二甲双胍对高糖诱导的RF/6A细胞增殖、迁移和血管形成的影响及其可能机制 被引量:2
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作者 孟婷宇 范晶 +2 位作者 郑柳 杨彬彬 丁芝祥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第5期346-351,共6页
目的研究二甲双胍(MET)对高糖诱导的恒河猴脉络膜⁃视网膜内皮细胞RF/6A增殖、迁移和血管形成的影响,并初步探讨其作用机制。方法RF/6A细胞随机分为5组:NC组、HG组、HG+15 mmol·L^(-1) MET组、HG+30 mmol·L^(-1) MET组、HG+45 ... 目的研究二甲双胍(MET)对高糖诱导的恒河猴脉络膜⁃视网膜内皮细胞RF/6A增殖、迁移和血管形成的影响,并初步探讨其作用机制。方法RF/6A细胞随机分为5组:NC组、HG组、HG+15 mmol·L^(-1) MET组、HG+30 mmol·L^(-1) MET组、HG+45 mmol·L^(-1) MET组,CCK⁃8法检测细胞增殖情况。将RF/6A细胞随机分为4组:NC组和NC+15 mmol·L^(-1) MET组、NC+30 mmol·L^(-1) MET组、NC+45 mmol·L^(-1) MET组,CCK⁃8法检测MET的细胞毒性。将RF/6A细胞随机分为3组:NC组、HG组和HG+15 mmol·L^(-1) MET组,细胞划痕法和Transwell法检测细胞迁移,Matrigengel法检测细胞血管形成,RT⁃PCR、Western blot检测Hippo信号通路的核心成分YAP、TEAD1的mRNA及蛋白表达。结果CCK⁃8法检测结果显示,与NC组比较,HG组RF/6A细胞的增殖活性升高(P<0.001);与HG组比较,HG+15 mmol·L^(-1) MET组、HG+30 mmol·L^(-1) MET组和HG+45 mmol·L^(-1) MET组RF/6A细胞的增殖活性均降低(均为P<0.001)。与NC组比较,NC+15 mmol·L^(-1) MET组RF/6A细胞增殖活性无变化(P=0.2273),因此选择15 mmol·L^(-1) MET进行后续实验。细胞划痕法和Transwell法检测结果显示,与NC组比较,HG组RF/6A细胞的迁移率升高、迁移个数增加(均为P<0.01);与HG组比较,HG+15 mmol·L^(-1) MET组RF/6A细胞的迁移率降低、迁移个数减少(均为P<0.01)。Matrigengel法检测结果显示,与NC组比较,HG组RF/6A细胞的血管相对总长度增加(P<0.05);与HG组比较,HG+15 mmol·L^(-1) MET组RF/6A细胞的血管相对总长度减少(P<0.01)。RT⁃PCR检测结果显示,与NC组比较,HG组RF/6A细胞的YAP和TEAD1 mRNA相对表达量均增加(均为P<0.05);与HG组比较,HG+15 mmol·L^(-1) MET组RF/6A细胞的YAP和TEAD1 mRNA相对表达量均减少(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,与NC组比较,HG组RF/6A细胞的YAP和TEAD1蛋白相对表达量均增加(均为P<0.05);与HG组比较,HG+15 mmol·L^(-1) MET组RF/6A细胞的YAP和TEAD1蛋白相对表达量均减少(均为P<0.05)。结论MET可抑制高糖诱导的RF/6A细胞增殖、迁移和血管形成,下调YAP、TEAD1的mRNA及蛋白表达,推测其作用机制与Hippo信号通路有关。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 二甲双胍 RF/6A细胞 高糖 细胞增殖 细胞迁移 血管形成 Hippo信号通路
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姜黄素对高浓度葡萄糖诱导的RF/6A细胞血管生成的抑制作用 被引量:1
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作者 李建波 张静 +1 位作者 罗永锋 李小珩 《中国中医眼科杂志》 2020年第6期396-401,共6页
目的观察姜黄素对高浓度葡萄糖培养的恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)增殖活力、迁移和管腔形成的作用。方法将RF/6A细胞分为3组进行培养:对照组(DMEM培养基)、高糖组(DMEM培养基中加入25 mmol/L D-葡萄糖)、高糖+姜黄素组(DMEM培... 目的观察姜黄素对高浓度葡萄糖培养的恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)增殖活力、迁移和管腔形成的作用。方法将RF/6A细胞分为3组进行培养:对照组(DMEM培养基)、高糖组(DMEM培养基中加入25 mmol/L D-葡萄糖)、高糖+姜黄素组(DMEM培养基中加入25 mmol/L D-葡萄糖+30μmol/L姜黄素),分组培养3 d后,分别采用CCK-8法检测细胞增殖活力,Transwell法检测细胞迁移,Matrigel法检测细胞管腔形成。结果(1)细胞增殖活力:与对照组(99.55±0.57)%相比,高糖组RF/6A细胞增殖活力(72.53±2.20)%明显降低(t=29.07,P=0.000),高糖+姜黄素组RF/6A细胞增殖活力(92.75±2.37)%比高糖组明显升高(t=15.30,P=0.000)。(2)细胞迁移:与对照组(122.00±5.48)个相比,高糖组RF/6A细胞迁移数(142.00±10.18)个明显增加(t=4.24,P=0.002),高糖+姜黄素组RF/6A细胞迁移数(76.50±7.56)个比高糖组明显减少(t=12.66,P=0.000)。(3)管腔形成数:与对照组相比(9.33±2.50)个,高糖组RF/6A细胞管腔形成数(14.83±3.06)个明显增加(t=3.41,P=0.007),高糖+姜黄素组RF/6A细胞管腔形成数(6.33±1.37)个比高糖组明显减少(t=6.21,P=0.000)。(4)血管分支长度:与对照组相比(3169.67±270.81)μm,高糖组RF/6A细胞血管分支长度(3606.67±325.15)μm明显增加(t=2.53,P=0.030),高糖+姜黄素组RF/6A细胞血管分支长度(2556.50±301.72)μm比高糖组明显减少(t=5.80,P=0.000)。结论姜黄素可维持高浓度葡萄糖培养条件下的RF/6A细胞增殖活力,抑制细胞迁移和管腔形成,提示姜黄素对高糖诱导的RF/6A细胞损伤具有保护作用,并抑制病理性的血管生成。 展开更多
关键词 姜黄素 葡萄糖 RF/6A 细胞增殖 血管生成
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