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腺相关病毒主要调控蛋白Rep78的表达及其与HBV-X基因启动子的体外结合
被引量：
2
1
作者
刘天会
丛敏
+4 位作者
王萍
唐淑珍
王宝恩
贾继东
尤红
《首都医科大学学报》
CAS
2006年第4期423-426,共4页
目的对腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)Rep78蛋白对乙肝病毒X启动子(HBV-X promoter)的可能作用进行初步研究。方法利用pMAL-Rep78(含有Rep78全长基因的表达质粒)在大肠杆菌中表达并纯化得到带有AAVRep78蛋白的MBP-rep78融合蛋...
目的对腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)Rep78蛋白对乙肝病毒X启动子(HBV-X promoter)的可能作用进行初步研究。方法利用pMAL-Rep78(含有Rep78全长基因的表达质粒)在大肠杆菌中表达并纯化得到带有AAVRep78蛋白的MBP-rep78融合蛋白;通过SDS-电泳及免疫印迹(Western blot)鉴定蛋白表达。合成地高辛标记的X启动子3段探针;以非放射性凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测Rep78与HBV-X启动子的结合。结果得到纯化的MBP-rep78融合蛋白;EMSA结果显示Rep78蛋白在体外能够与HBV-X启动子DNA结合,并有剂量依赖关系。结论AAVRep78可以与HBV-X启动子结合。
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关键词
腺相关病毒
乙肝病毒
rep78
凝胶电脉阻滞实验
暂未订购
腺相关病毒Rep78蛋白抑制乙型肝炎病毒复制的体外研究
被引量：
3
2
作者
刘天会
丛敏
+5 位作者
王萍
唐淑珍
刘晓明
王宝恩
贾继东
尤红
《肝脏》
2006年第6期396-398,共3页
目的研究腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)Rep78蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制的抑制作用及机制。方法将土拨鼠肝炎病毒(WHV)全基因组DNA从质粒中酶切回收,线状DNA重新连接呈环状。用脂质体Fugene6体外转染至HepG2细胞,同时共同转...
目的研究腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)Rep78蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制的抑制作用及机制。方法将土拨鼠肝炎病毒(WHV)全基因组DNA从质粒中酶切回收,线状DNA重新连接呈环状。用脂质体Fugene6体外转染至HepG2细胞,同时共同转染含有Rep78的质粒AAVdl52-91。5d后收获细胞DNA,Southernblot检测WHVDNA复制。以含有HBV全长的质粒为模板,PCR法分别扩增出HBV-S、C和X基因全长。以凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测Rep78与HBV-S、C和X的结合。结果Southernblot结果表明,AAV-Rep78可以明显抑制WHV病毒在HepG2细胞中的复制,并呈剂量依赖关系。EMSA结果显示,Rep78蛋白在体外能够与HBV-S、C和X的DNA结合,其中与HBV-C的结合最强而且有剂量依赖关系。此外,这种Rep78蛋白与HBV-CDNA结合可以被特异性的Rep78抗体阻滞,形成超结合带。结论AAV-Rep78可以抑制HBVDNA的复制,其机制可能在于Rep78蛋白结合并抑制了HBV-C基因。
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关键词
腺相关病毒
rep78
乙型肝炎病毒
暂未订购
腺相关病毒Rep78/68蛋白
3
作者
刘天会
尤红
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2008年第9期998-1000,共3页
腺相关病毒(AAV)编码的非结构蛋白Rep78/68具有抑制病毒和肿瘤转化的作用,并且对宿主细胞的增殖及代谢产生广泛地影响。本文将对此蛋白的最新研究进展进行综述。
关键词
rep78
/68蛋白
腺相关病毒
肿瘤转化
暂未订购
腺相关病毒Rep78/68蛋白功能的研究进展
被引量：
1
4
作者
占申标
吕颖慧
李招发
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期24-29,共6页
Rep78/68是腺相关病毒(AAV)基因组编码的具有多种调控功能的非结构蛋白。主要参与了AAV DNA定点整合到人类19号染色体,抑制病毒的生物活性,如腺病毒、类猿病毒SV40等,调节AAV DNA的复制和转录等。重点阐述了定点整合的作用机制,Rep78/AA...
Rep78/68是腺相关病毒(AAV)基因组编码的具有多种调控功能的非结构蛋白。主要参与了AAV DNA定点整合到人类19号染色体,抑制病毒的生物活性,如腺病毒、类猿病毒SV40等,调节AAV DNA的复制和转录等。重点阐述了定点整合的作用机制,Rep78/AAV ITR/ICP8复合物的形成机制以及Rep68蛋白的寡聚化特性,Rep78蛋白对p53核输出的限制,AAV Rep78蛋白与人乳头瘤病毒(HPV)E1蛋白相互作用从而促使Rep78和ITR DNA的结合,Rep78对乙型肝炎病毒(HBV)的抑制。这些作用的详细机制仍需完善和充实,对Rep78/68蛋白的相关作用机制的深入研究有助于rAAV基因药物的研发。
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关键词
AAV
rep78
Rep68
P53
机制
在线阅读
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职称材料
题名
腺相关病毒主要调控蛋白Rep78的表达及其与HBV-X基因启动子的体外结合
被引量：
2
1
作者
刘天会
丛敏
王萍
唐淑珍
王宝恩
贾继东
尤红
机构
首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
出处
《首都医科大学学报》
CAS
2006年第4期423-426,共4页
基金
国家自然科学基金(30500425)
霍英东青年教师基金(1010390)资助项目
文摘
目的对腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)Rep78蛋白对乙肝病毒X启动子(HBV-X promoter)的可能作用进行初步研究。方法利用pMAL-Rep78(含有Rep78全长基因的表达质粒)在大肠杆菌中表达并纯化得到带有AAVRep78蛋白的MBP-rep78融合蛋白;通过SDS-电泳及免疫印迹(Western blot)鉴定蛋白表达。合成地高辛标记的X启动子3段探针;以非放射性凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测Rep78与HBV-X启动子的结合。结果得到纯化的MBP-rep78融合蛋白;EMSA结果显示Rep78蛋白在体外能够与HBV-X启动子DNA结合,并有剂量依赖关系。结论AAVRep78可以与HBV-X启动子结合。
关键词
腺相关病毒
乙肝病毒
rep78
凝胶电脉阻滞实验
Keywords
adeno-associated virus
hepatitis B virus
rep78
electrophoretic mobility shift assay
分类号
R512.6 [医药卫生—内科学]
暂未订购
题名
腺相关病毒Rep78蛋白抑制乙型肝炎病毒复制的体外研究
被引量：
3
2
作者
刘天会
丛敏
王萍
唐淑珍
刘晓明
王宝恩
贾继东
尤红
机构
北京首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
出处
《肝脏》
2006年第6期396-398,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30500425)
霍英东教育青年教师基金(1010390)
文摘
目的研究腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)Rep78蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制的抑制作用及机制。方法将土拨鼠肝炎病毒(WHV)全基因组DNA从质粒中酶切回收,线状DNA重新连接呈环状。用脂质体Fugene6体外转染至HepG2细胞,同时共同转染含有Rep78的质粒AAVdl52-91。5d后收获细胞DNA,Southernblot检测WHVDNA复制。以含有HBV全长的质粒为模板,PCR法分别扩增出HBV-S、C和X基因全长。以凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测Rep78与HBV-S、C和X的结合。结果Southernblot结果表明,AAV-Rep78可以明显抑制WHV病毒在HepG2细胞中的复制,并呈剂量依赖关系。EMSA结果显示,Rep78蛋白在体外能够与HBV-S、C和X的DNA结合,其中与HBV-C的结合最强而且有剂量依赖关系。此外,这种Rep78蛋白与HBV-CDNA结合可以被特异性的Rep78抗体阻滞,形成超结合带。结论AAV-Rep78可以抑制HBVDNA的复制,其机制可能在于Rep78蛋白结合并抑制了HBV-C基因。
关键词
腺相关病毒
rep78
乙型肝炎病毒
Keywords
Adeno-associated virus
rep78
Hepatitis B virus
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
暂未订购
题名
腺相关病毒Rep78/68蛋白
3
作者
刘天会
尤红
机构
首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心
出处
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2008年第9期998-1000,共3页
基金
国家自然科学基金(30500425)
霍英东教育基金(101039)
文摘
腺相关病毒(AAV)编码的非结构蛋白Rep78/68具有抑制病毒和肿瘤转化的作用,并且对宿主细胞的增殖及代谢产生广泛地影响。本文将对此蛋白的最新研究进展进行综述。
关键词
rep78
/68蛋白
腺相关病毒
肿瘤转化
Keywords
rep78
/68 protein
adeno-associated virus
tumor transformation
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
暂未订购
题名
腺相关病毒Rep78/68蛋白功能的研究进展
被引量：
1
4
作者
占申标
吕颖慧
李招发
机构
华侨大学分子药物研究院
分子药物教育部工程研究中心
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期24-29,共6页
基金
国家自然科学青年科学基金项目(81201183)
中央高校基本科研业务费资助项目(JB-ZR1142)
文摘
Rep78/68是腺相关病毒(AAV)基因组编码的具有多种调控功能的非结构蛋白。主要参与了AAV DNA定点整合到人类19号染色体,抑制病毒的生物活性,如腺病毒、类猿病毒SV40等,调节AAV DNA的复制和转录等。重点阐述了定点整合的作用机制,Rep78/AAV ITR/ICP8复合物的形成机制以及Rep68蛋白的寡聚化特性,Rep78蛋白对p53核输出的限制,AAV Rep78蛋白与人乳头瘤病毒(HPV)E1蛋白相互作用从而促使Rep78和ITR DNA的结合,Rep78对乙型肝炎病毒(HBV)的抑制。这些作用的详细机制仍需完善和充实,对Rep78/68蛋白的相关作用机制的深入研究有助于rAAV基因药物的研发。
关键词
AAV
rep78
Rep68
P53
机制
Keywords
AAV
rep78
Rep68 p53 Mechanism
分类号
Q939.4 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腺相关病毒主要调控蛋白Rep78的表达及其与HBV-X基因启动子的体外结合
刘天会
丛敏
王萍
唐淑珍
王宝恩
贾继东
尤红
《首都医科大学学报》
CAS
2006
2
暂未订购
2
腺相关病毒Rep78蛋白抑制乙型肝炎病毒复制的体外研究
刘天会
丛敏
王萍
唐淑珍
刘晓明
王宝恩
贾继东
尤红
《肝脏》
2006
3
暂未订购
3
腺相关病毒Rep78/68蛋白
刘天会
尤红
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2008
0
暂未订购
4
腺相关病毒Rep78/68蛋白功能的研究进展
占申标
吕颖慧
李招发
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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