-
题名Rel-A siRNA对大鼠树突状细胞的影响
- 1
-
-
作者
汪泳
宇汝胜
周晓俊
秦磊
钱海鑫
-
机构
苏州大学第一附属医院普通外科
-
出处
《中国普通外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期44-48,共5页
-
基金
江苏省自然科学基金资助项目(BK2007057)
江苏省普通高校研究生科研创新计划项目
-
文摘
目的探讨siRNA沉默Rel-A基因表达对大鼠树突状细胞(DC)生物学效应的影响。方法采用细胞因子诱导培养法体外扩增大鼠骨髓DC,经免疫磁珠纯化获得高纯度DC后,针对Rel-A基因,采用半定量RT-PCR及Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测Rel-A的表达情况,筛选一对高效RNA干扰(RNAi)行慢病毒载体包装并转染DC(RNA干扰组),以未转染RNAi的DC作为对照组。分别给予1mg/L的脂多糖(LPS)刺激,透射电镜观察RNAi对LPS促DC成熟的影响,并利用流式细胞术(FCM)检测DC表面CD80,CD86及MHCⅡ分子的变化;混合淋巴细胞反应(MLR)法检测T细胞增殖能力;ELISA法检测DC分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)和白介素12(IL-12)的浓度。结果与空白对照组相比,序列2组降低最明显,抑制率达90%,差异有统计学意义;透射电镜下可见RNAi Rel-A DC内多吞噬泡样结构;RNA干扰组CD80,CD86,MHCⅡ分子的表达、T细胞增殖能力及TNF-α,IFN-γ,IL-12的浓度与对照组相比均显著下降。结论RNA干扰技术能显著下调大鼠Rel-A基因的表达,Rel-A基因沉默DC的生物学效应表现为未成熟DC的特点。这种RNAi Rel-A DC可望作为一种新型的致耐受DC,而应用于免疫耐受的诱导研究。
-
关键词
rel-a
RNA干扰
树突状细胞
基因表达
-
Keywords
rel-a
RNA Interference
Dendritic Cells
Gene Expression
-
分类号
R34-33
[医药卫生—基础医学]
-
