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边坡柔性防护网中RECCO圆环力学性能研究
被引量：
8
1
作者
罗祥
石少卿
汪敏
《路基工程》
2010年第6期45-47,共3页
RECCO圆环是构成边坡柔性防护网中的环形网的主要构件,为弄清其力学性能,文中对RECCO圆环在两端受拉荷载作用下进行了试验研究和数值模拟分析。在数值计算中采用等效面积法和力的平均分配法对圆环进行了简化处理。计算结果表明,采用力...
RECCO圆环是构成边坡柔性防护网中的环形网的主要构件,为弄清其力学性能,文中对RECCO圆环在两端受拉荷载作用下进行了试验研究和数值模拟分析。在数值计算中采用等效面积法和力的平均分配法对圆环进行了简化处理。计算结果表明,采用力的平均分配法对圆环进行简化计算与试验结果较吻合。并通过理论分析,得出了计算RECCO圆环等效截面半径的方法。
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关键词
柔性防护网
recco
圆环
力学性能
等效截面半径
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职称材料
pGEX-4T-1-cMC4R原核表达载体的构建与表达
被引量：
2
2
作者
巴彩凤
聂茹
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第23期9921-9924,共4页
[目的]构建犬MC4R基因编码区的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。[方法]以Beagle犬基因组DNA为模板,经PCR技术扩增目的片段,利用LP Recco PCR克隆技术将目的片段直接重组到原核表达载体pGEX-4T-1上,转化到E.coliDH5α,筛选...
[目的]构建犬MC4R基因编码区的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。[方法]以Beagle犬基因组DNA为模板,经PCR技术扩增目的片段,利用LP Recco PCR克隆技术将目的片段直接重组到原核表达载体pGEX-4T-1上,转化到E.coliDH5α,筛选阳性克隆,BamHI、XhoI酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性。将测序正确的重组表达质粒pGEX-4T-1-cMC4R转化到E.co-liBL21内,经IPTG诱导后,利用SDS-PAGE检测犬MC4R蛋白的表达。[结果]成功构建重组表达质粒pGEX-4T-1-cMC4R,经DNA测序证实插入序列与设计基本一致,只有777位碱基T变成了C,这是由于犬MC4R编码区存在的多态性引起,对表达的犬MC4R蛋白序列无影响。大肠杆菌诱导后表达出犬MC4R融合性蛋白。[结论]成功构建犬MC4R原核表达载体,此重组体能在E.coliBL21内表达犬MC4R融合蛋白,为进一步获取犬MC4R的单克隆抗体奠定物质基础,也为研究犬MC4R蛋白的结构和生理功能提供帮助。
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关键词
犬MCAR
LP
recco
PCR克隆技术
重组表达质粒pGEX-4T-1-cMCAR
诱导表达
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职称材料
靶向克隆法构建pET15b-VP3原核表达载体
被引量：
3
3
作者
邓守恒
柯贤柱
+4 位作者
石小燕
蔡召忠
杨敬宁
黄永章
陈萍
《成都医学院学报》
CAS
2012年第3期393-395,共3页
目的探索利用PCR产物靶向克隆法构建能够表达凋亡素的pET15b-VP3原核表达载体。方法以PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒为模板,PCR扩增VP3基因的366bp片段,应用靶向克隆酶,将VP3基因插入到线性pET15b,得到重组表达载体pET15b-VP3,经过筛选,挑选出...
目的探索利用PCR产物靶向克隆法构建能够表达凋亡素的pET15b-VP3原核表达载体。方法以PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒为模板,PCR扩增VP3基因的366bp片段,应用靶向克隆酶,将VP3基因插入到线性pET15b,得到重组表达载体pET15b-VP3,经过筛选,挑选出阳性克隆进行XhoⅠ和BamHⅠ双酶切,图谱分析和重组质粒核苷酸序列分析以鉴定所构建的原核表达载体。结果 PCR产物经过电泳鉴定可见366bp特征性的VP3片段,重组质粒经双酶切电泳获得了一个大小为366bp的VP3片段,重组质粒测序证实VP3cDNA编码区成功地插入了pET15b,且其序列与GeneBank中VP3cDNA序列完全一致。结论靶向克隆法可快速,高效地构建pET15b-VP3原核表达载体,为进一步研究VP3药用价值奠定了基础。
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关键词
pET15b-VP3
靶向克隆
原核表达
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职称材料
靶向克隆法构建NY-ESO-1基因的原核表达载体
被引量：
1
4
作者
俞远东
徐少勇
+2 位作者
王斌
王家宁
黄永章
《武汉大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2009年第2期209-211,215,I0002,共5页
目的:利用PCR产物靶向克隆法构建人癌-睾丸抗原NY-ESO-1的原核表达载体。方法:从人新鲜的食管癌组织中提取总RNA,通过RT-PCR技术扩增NY-ES0-1基因3′端的340bp片段,采用靶向克隆法将目的基因插入到原核表达载体pET-15b中,得到重组表达质...
目的:利用PCR产物靶向克隆法构建人癌-睾丸抗原NY-ESO-1的原核表达载体。方法:从人新鲜的食管癌组织中提取总RNA,通过RT-PCR技术扩增NY-ES0-1基因3′端的340bp片段,采用靶向克隆法将目的基因插入到原核表达载体pET-15b中,得到重组表达质粒pET-15b-NY-ESO-1,经过筛选,挑选出阳性克隆进行XhoⅠ和BamHⅠ双酶切图谱分析、PCR检测和扩增产物核苷酸序列分析等,鉴定所构建的原核表达载体。结果:扩增得到NY-ESO-1基因片段,经测序证实与GenBank公布的序列一致,重组的质粒经过PCR,酶切鉴定获得了一个大小为340bp的特征性片段,证明重组质粒中已成功的插入了目的基因NY-ESO-1。结论:靶向克隆法可快速、高效地构建人NY-ESO-1基因的原核表达载体,为制备pET-15b-NY-ESO-1融合蛋白奠定了基础。
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关键词
NY—ESO-1
靶向克隆
原核表达
原文传递
题名
边坡柔性防护网中RECCO圆环力学性能研究
被引量：
8
1
作者
罗祥
石少卿
汪敏
机构
解放军后勤工程学院军事建筑工程系
出处
《路基工程》
2010年第6期45-47,共3页
基金
总后基建营房部科技资助项目
文摘
RECCO圆环是构成边坡柔性防护网中的环形网的主要构件,为弄清其力学性能,文中对RECCO圆环在两端受拉荷载作用下进行了试验研究和数值模拟分析。在数值计算中采用等效面积法和力的平均分配法对圆环进行了简化处理。计算结果表明,采用力的平均分配法对圆环进行简化计算与试验结果较吻合。并通过理论分析,得出了计算RECCO圆环等效截面半径的方法。
关键词
柔性防护网
recco
圆环
力学性能
等效截面半径
Keywords
flexible protecting fence
recco
ring
mechanic properties
equivalent sectional radius
分类号
U416.14 [交通运输工程—道路与铁道工程]
在线阅读
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职称材料
题名
pGEX-4T-1-cMC4R原核表达载体的构建与表达
被引量：
2
2
作者
巴彩凤
聂茹
机构
辽宁医学院实验动物中心
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第23期9921-9924,共4页
基金
辽宁省教育厅基金(202172052)
文摘
[目的]构建犬MC4R基因编码区的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。[方法]以Beagle犬基因组DNA为模板,经PCR技术扩增目的片段,利用LP Recco PCR克隆技术将目的片段直接重组到原核表达载体pGEX-4T-1上,转化到E.coliDH5α,筛选阳性克隆,BamHI、XhoI酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性。将测序正确的重组表达质粒pGEX-4T-1-cMC4R转化到E.co-liBL21内,经IPTG诱导后,利用SDS-PAGE检测犬MC4R蛋白的表达。[结果]成功构建重组表达质粒pGEX-4T-1-cMC4R,经DNA测序证实插入序列与设计基本一致,只有777位碱基T变成了C,这是由于犬MC4R编码区存在的多态性引起,对表达的犬MC4R蛋白序列无影响。大肠杆菌诱导后表达出犬MC4R融合性蛋白。[结论]成功构建犬MC4R原核表达载体,此重组体能在E.coliBL21内表达犬MC4R融合蛋白,为进一步获取犬MC4R的单克隆抗体奠定物质基础,也为研究犬MC4R蛋白的结构和生理功能提供帮助。
关键词
犬MCAR
LP
recco
PCR克隆技术
重组表达质粒pGEX-4T-1-cMCAR
诱导表达
Keywords
Canis MC4R
LP
recco
PCR cloning technique
Recombinant pGEX-4T-1 -cMC4R
Induction and expression
分类号
S829.2 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
靶向克隆法构建pET15b-VP3原核表达载体
被引量：
3
3
作者
邓守恒
柯贤柱
石小燕
蔡召忠
杨敬宁
黄永章
陈萍
机构
湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心
湖北医药学院附属人民医院医务处
武汉市中心医院实验中心
湖北医药学院免疫教研室
湖北医药学院附属人民医院临床医学研究所
出处
《成都医学院学报》
CAS
2012年第3期393-395,共3页
基金
湖北省卫生厅基金(NO:QJX2008-42)
湖北医药学院创新基金(NO:2008CXZ02
+1 种基金
2010XSA02)
十堰市科技局基金(NO:2010st24)
文摘
目的探索利用PCR产物靶向克隆法构建能够表达凋亡素的pET15b-VP3原核表达载体。方法以PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒为模板,PCR扩增VP3基因的366bp片段,应用靶向克隆酶,将VP3基因插入到线性pET15b,得到重组表达载体pET15b-VP3,经过筛选,挑选出阳性克隆进行XhoⅠ和BamHⅠ双酶切,图谱分析和重组质粒核苷酸序列分析以鉴定所构建的原核表达载体。结果 PCR产物经过电泳鉴定可见366bp特征性的VP3片段,重组质粒经双酶切电泳获得了一个大小为366bp的VP3片段,重组质粒测序证实VP3cDNA编码区成功地插入了pET15b,且其序列与GeneBank中VP3cDNA序列完全一致。结论靶向克隆法可快速,高效地构建pET15b-VP3原核表达载体,为进一步研究VP3药用价值奠定了基础。
关键词
pET15b-VP3
靶向克隆
原核表达
Keywords
pET15 b-VP3 Gene
LP
recco
PCR cloning
Prokaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
靶向克隆法构建NY-ESO-1基因的原核表达载体
被引量：
1
4
作者
俞远东
徐少勇
王斌
王家宁
黄永章
机构
郧阳医学院附属人民医院肿瘤科消化内科
郧阳医学院附属人民医院肿瘤科临床医学研究所
出处
《武汉大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2009年第2期209-211,215,I0002,共5页
基金
湖北省科技厅资助项目(编号:2004AA304B08)
文摘
目的:利用PCR产物靶向克隆法构建人癌-睾丸抗原NY-ESO-1的原核表达载体。方法:从人新鲜的食管癌组织中提取总RNA,通过RT-PCR技术扩增NY-ES0-1基因3′端的340bp片段,采用靶向克隆法将目的基因插入到原核表达载体pET-15b中,得到重组表达质粒pET-15b-NY-ESO-1,经过筛选,挑选出阳性克隆进行XhoⅠ和BamHⅠ双酶切图谱分析、PCR检测和扩增产物核苷酸序列分析等,鉴定所构建的原核表达载体。结果:扩增得到NY-ESO-1基因片段,经测序证实与GenBank公布的序列一致,重组的质粒经过PCR,酶切鉴定获得了一个大小为340bp的特征性片段,证明重组质粒中已成功的插入了目的基因NY-ESO-1。结论:靶向克隆法可快速、高效地构建人NY-ESO-1基因的原核表达载体,为制备pET-15b-NY-ESO-1融合蛋白奠定了基础。
关键词
NY—ESO-1
靶向克隆
原核表达
Keywords
NY-ESO-1 Gene
LP
recco
PCR Cloning
Prokaryotic Expression
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
边坡柔性防护网中RECCO圆环力学性能研究
罗祥
石少卿
汪敏
《路基工程》
2010
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
pGEX-4T-1-cMC4R原核表达载体的构建与表达
巴彩凤
聂茹
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
靶向克隆法构建pET15b-VP3原核表达载体
邓守恒
柯贤柱
石小燕
蔡召忠
杨敬宁
黄永章
陈萍
《成都医学院学报》
CAS
2012
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
靶向克隆法构建NY-ESO-1基因的原核表达载体
俞远东
徐少勇
王斌
王家宁
黄永章
《武汉大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2009
1
原文传递
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