同源重组是维持基因组稳定和生物多样性的核心机制.RecA作为最早被发现的同源重组酶,在同源重组链交换过程中起着关键作用.关于同源重组机制的研究已持续数十年,近年来使用单分子技术使得该领域研究取得了不少重大突破.其中单分子FRET(f...同源重组是维持基因组稳定和生物多样性的核心机制.RecA作为最早被发现的同源重组酶,在同源重组链交换过程中起着关键作用.关于同源重组机制的研究已持续数十年,近年来使用单分子技术使得该领域研究取得了不少重大突破.其中单分子FRET(fluorescence resonance energy transfer)技术的应用最为广泛,然而FRET实验所必需的荧光标记可能会对RecA介导的链交换过程产生影响,且往往会被研究人员所忽视.本文通过对不同标记位置和标记方式进行梳理,将荧光标记对同源重组链交换的影响总结为链特异性和构象敏感性,并给出了影响最小的标记方案.该结果加深了对荧光标记影响的理解,研究人员可以快速优化荧光标记位置和方式,降低其对链交换过程带来的负面影响,也对其他荧光标记实验有一定的启发意义.展开更多
对来自西藏地区的20份传统发酵牦牛乳中乳酸菌进行分离、纯化,并采用生理生化反应、16S r RNA和rec A基因序列分析法对分离株进行多样性分析。结果表明:从20份样品中分离得到的28株分离株属于干酪乳杆菌群;进一步基于持家基因rec A对干...对来自西藏地区的20份传统发酵牦牛乳中乳酸菌进行分离、纯化,并采用生理生化反应、16S r RNA和rec A基因序列分析法对分离株进行多样性分析。结果表明:从20份样品中分离得到的28株分离株属于干酪乳杆菌群;进一步基于持家基因rec A对干酪乳杆菌群进行系统发育学分析,结果表明该菌群属于副干酪乳杆菌。因此,西藏地区传统发酵牦牛乳中干酪乳杆菌群具有较高的遗传多样性,持家基因rec A对干酪乳杆菌群种水平的鉴定和分类提供了一定的理论基础。展开更多
文摘同源重组是维持基因组稳定和生物多样性的核心机制.RecA作为最早被发现的同源重组酶,在同源重组链交换过程中起着关键作用.关于同源重组机制的研究已持续数十年,近年来使用单分子技术使得该领域研究取得了不少重大突破.其中单分子FRET(fluorescence resonance energy transfer)技术的应用最为广泛,然而FRET实验所必需的荧光标记可能会对RecA介导的链交换过程产生影响,且往往会被研究人员所忽视.本文通过对不同标记位置和标记方式进行梳理,将荧光标记对同源重组链交换的影响总结为链特异性和构象敏感性,并给出了影响最小的标记方案.该结果加深了对荧光标记影响的理解,研究人员可以快速优化荧光标记位置和方式,降低其对链交换过程带来的负面影响,也对其他荧光标记实验有一定的启发意义.
