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Rap1a高表达对SNL大鼠神经病理性疼痛及星形胶质细胞自噬的影响 被引量:8
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作者 孙树凯 马磊 +1 位作者 张海红 贾栋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第21期2335-2339,共5页
目的分析L5脊神经结扎(SNL)大鼠脊髓组织中Rap1a的表达及其对神经病理性疼痛的影响,探讨其作用机制。方法采用L5脊神经结扎法制备SNL大鼠模型,分为假手术(n=6)、SNL模型组(n=30)、生理盐水组(n=6)、Cont-shR组(n=6)、Rap1a-shR组(n=6)... 目的分析L5脊神经结扎(SNL)大鼠脊髓组织中Rap1a的表达及其对神经病理性疼痛的影响,探讨其作用机制。方法采用L5脊神经结扎法制备SNL大鼠模型,分为假手术(n=6)、SNL模型组(n=30)、生理盐水组(n=6)、Cont-shR组(n=6)、Rap1a-shR组(n=6)、雷帕霉素组(n=6),经由鞘内注射法处理后,采用Von-Frey纤维丝法检测大鼠机械痛阈值,采用RT-PCR和Western blot法检测大鼠脊髓组织和星形胶质细胞中Rap1a的表达、mTOR活性及自噬水平。结果 SNL大鼠脊髓组织中Rap1a的表达水平较生理盐水组显著上升,机械痛阈明显降低(P<0.05)。Rap1a shRNA腺病毒感染后,SNL大鼠机械痛阈明显升高(P<0.05),大鼠脊髓组织及分离培养的星形胶质细胞中细胞自噬标志分子LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值升高,p62表达水平下降,细胞自噬水平增加,且mTOR活化水平降低(P<0.05)。细胞自噬诱导剂雷帕霉素作用后,星形胶质细胞及SNL大鼠脊髓组织细胞自噬水平均明显增加,SNL大鼠的机械痛阈显著升高(P<0.05)。结论神经损伤引起的Rap1a高表达对神经病理性疼痛的发展有促进作用,这一过程可能与Rap1a对mTOR信号通路及星形胶质细胞自噬水平的调节有关。 展开更多
关键词 rap1a 神经病理性疼痛 星形胶质细胞自噬 MTOR SNL大鼠
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miR-488-3p靶向调控RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬的作用研究 被引量:4
2
作者 高源 揭育祯 +6 位作者 马天龙 汪乐新 杨慧霞 周瑜瑾 焦运 卢冠军 马胜超 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第9期1-9,共9页
目的探讨微小RNA(miR-488-3p)通过靶向调控RAS癌基因家族成员RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬中的作用。方法体外常规培养人正常肝细胞(HL-7702),并给予100μmol/L Hcy干预24 h,采用Western blot检测肝细胞自噬相关蛋白LC3、p62和RA... 目的探讨微小RNA(miR-488-3p)通过靶向调控RAS癌基因家族成员RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬中的作用。方法体外常规培养人正常肝细胞(HL-7702),并给予100μmol/L Hcy干预24 h,采用Western blot检测肝细胞自噬相关蛋白LC3、p62和RAP1A的表达水平,qRT-PCR检测肝细胞中miR-488-3p和RAP1A的表达;转染miR-488-3p inhibitor和mimics后,qRT-PCR和Western blot分别检测miR-488-3p的转染效率及其对LC3和p62蛋白表达的影响;TargetScan预测miR-488-3p与RAP1A基因相关性,Western blot检测miR-488-3p下游潜在靶蛋白(RAP1A)的表达改变;Pearson相关系数对肝细胞中miR-488-3p表达水平与自噬相关蛋白水平进行相关性分析。结果与Control组相比,Hcy组肝细胞自噬相关蛋白LC3、RAP1A和miR-488-3p的表达水平升高(P<0.01),而p62表达明显降低(P<0.01);同时,转染miR-488-3p inhibitor和mimics后,与NC-inhibitor组比较,miR-488-3p inhibitor组中LC3和RAP1A蛋白的表达水平显著降低(P<0.01),p62表达明显升高(P<0.01);而与NC-mimics组相比,miR-488-3p mimics组中LC3和RAP1A蛋白表达水平明显增加(P<0.01),p62表达降低(P<0.01);进一步机制研究表明RAP1A是miR-488-3p的下游靶基因并受其正向调控。Pearson相关性分析发现,miR-488-3p的表达水平与LC3(r=0.9329,P=0.0002)蛋白表达呈正相关,而与p62(r=-0.8086,P=0.0083)表达则呈负相关。结论miR-488-3p在Hcy介导的肝细胞中高表达,可通过靶向调控RAP1A的表达促进肝细胞自噬。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 miR-488-3p 肝细胞 rap1a 自噬
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RAP1A和EPAC1在卵巢子宫内膜异位症组织中的表达及意义 被引量:2
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作者 沈利聪 板得莹 张瑜 《中国现代医学杂志》 CAS 2020年第21期12-17,共6页
目的检测RAS相关蛋白1(RAP1)的异构体RAP1A和环磷酸腺苷交换蛋白1(EPAC1)在卵巢子宫内膜异位症的表达和分布,探讨两者在疾病发生、发展中的作用及意义。方法收集2019年6月—2020年1月在中南大学湘雅医院妇科行腹腔镜下卵巢子宫内膜异位... 目的检测RAS相关蛋白1(RAP1)的异构体RAP1A和环磷酸腺苷交换蛋白1(EPAC1)在卵巢子宫内膜异位症的表达和分布,探讨两者在疾病发生、发展中的作用及意义。方法收集2019年6月—2020年1月在中南大学湘雅医院妇科行腹腔镜下卵巢子宫内膜异位症手术患者的临床资料及组织,采用免疫组织化学法检测RAP1A和EPAC1在异位内膜、在位内膜、正常内膜的表达和分布情况,采用Western blotting法检测蛋白的表达,分析RAP1A和EPAC1表达的相关性。结果RAP1A表达于腺上皮细胞及间质细胞的细胞质,在在位内膜腺上皮细胞呈强阳性表达;EPAC1表达于腺上皮细胞的细胞质,在间质细胞的细胞质和细胞核都有表达,在腺上皮细胞的细胞质呈强阳性表达。2种蛋白在异位内膜、在位内膜及正常内膜的表达比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中异位内膜、在位内膜的表达均高于正常内膜(P<0.05),异位内膜与在位内膜的表达差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,RAP1A和EPAC1的表达水平在异位内膜(r=0.635,P<0.05)、在位内膜(r=0.697,P<0.05)和正常子宫内膜(r=0.436,P<0.05)均呈正相关。结论RAP1A和EPAC1在卵巢子宫内膜异位症中呈高表达,两者可能相互协同,促进异位病灶的发生、发展。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 rap1a EPAC1
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Expression and significance of Rap1A in testes ofazoospermic subjects 被引量:4
4
作者 BoYang HeWang +8 位作者 Xiao-KangGao Bao-QiChen Yuan-QiangZhang He-LiangLiu YongWang Wei-JunQin Rong-LiangQin Guo-XingShao ChenShao 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2004年第1期35-40,共6页
Aim: To evaluate the Rap1A mRNA expression and its significance in the testes of normal and azoospermic subjects. Methods: A cDNA microarray that contained Rap1A and some other genes such as RBM, EIF1 AY was used to i... Aim: To evaluate the Rap1A mRNA expression and its significance in the testes of normal and azoospermic subjects. Methods: A cDNA microarray that contained Rap1A and some other genes such as RBM, EIF1 AY was used to identify the differential gene expression profiles between the normal and azoospermic testes. cDNA probes were prepared by labeling mRNA from azoospermic and normal testicular tissues through reverse transcription with Cy5-dUTP and Cy3-dUTP, respectively. The mixed cDNA probes were then hybridized with cDNA microarray (each containing 4096 unique human cDNA sequences). The fluorescent signals were scanned and the values of Cy5-dUTP and Cy3-dUTP on each spot were analyzed and calculated. In situ hybridization was employed to detect the expression of RaplA in the testes of 10 fertile and 39 azoospermic subjects. Results: One hundred and twenty-eight differentially expressed genes were found to be possibly related to azoospermia, of which 56 were up-regulated and 72, down-regulated genes. The mRNA expression of RaplA in the spermatogenic cells of azoospermic was stronger than that in those of the fertile testes. Conclusion: Rap1A may play certain roles in the development of azoospermia. 展开更多
关键词 rap1a AZOOSPERMIA cDNA microarray
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Rap1A DNA甲基化在Hcy促进巨噬细胞增殖中的作用 被引量:1
5
作者 张玲 李思睿 +6 位作者 赵迅霞 田荣 袁茵 孙卓成 马生贤 郝银菊 杨晓玲 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第6期483-489,共7页
目的探讨Rap1A DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)促进小鼠单核巨噬细胞RAW264.7增殖中的作用。方法将处于对数生长期的RAW264.7细胞分为对照组(Hcy 0μmol/L)和不同浓度的Hcy(20,40,60,80,100μmol/L)干预组,24 h后用XTT检测细胞活力;Edu... 目的探讨Rap1A DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)促进小鼠单核巨噬细胞RAW264.7增殖中的作用。方法将处于对数生长期的RAW264.7细胞分为对照组(Hcy 0μmol/L)和不同浓度的Hcy(20,40,60,80,100μmol/L)干预组,24 h后用XTT检测细胞活力;Edu检测细胞增殖情况;qRT-PCR和Western blot检测Rap1A的mRNA和蛋白的表达;甲基化特异性PCR法(MSP)检测Rap1A启动子区甲基化改变;激光共聚焦显微镜观察Rap1A的变化;将Rap1A干扰腺病毒转染RAW264.7细胞并用Hcy刺激,检测Rap1A的mRNA和蛋白水平的变化及细胞的增殖情况。结果与对照组相比,不同浓度的Hcy干预细胞后,细胞活力增强,其中100μmol/L Hcy浓度最为明显(P<0.01),且细胞增殖水平明显增加(P<0.01);经Hcy刺激后,细胞Rap1A的mRNA和蛋白表达量显著增加(P<0.01),启动子区甲基化水平降低(P<0.01);干扰Rap1A的表达后能够部分逆转Hcy所致的细胞增殖(P<0.01)。结论 Rap1A启动子区低甲基化介导了Hcy导致的RAW264.7细胞增殖。 展开更多
关键词 RAW264.7细胞 同型半胱氨酸 Ras相关蛋白1A DNA甲基化
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微重力效应激活VEGFR2/RAP1B/ERK通路促进hCMEC/D3细胞血管生成 被引量:1
6
作者 李玉娟 吴爱佳 +3 位作者 汪家苹 闫然然 崔姚远 杨静 《北京理工大学学报》 北大核心 2025年第7期764-770,共7页
探究模拟微重力(simulated microgravity,SMG)效应对人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3的增殖、迁移以及血管生成能力影响.将对数生长期的hCMEC/D3细胞分为对照组(CON)和24h-SMG组,采用ELISA法检测细胞Ang-2和VEGFA因子表达;通过细胞划痕愈合... 探究模拟微重力(simulated microgravity,SMG)效应对人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3的增殖、迁移以及血管生成能力影响.将对数生长期的hCMEC/D3细胞分为对照组(CON)和24h-SMG组,采用ELISA法检测细胞Ang-2和VEGFA因子表达;通过细胞划痕愈合法和管样形成法观察SMG效应对细胞迁移能力影响,利用Western-Blot检测VEGFR2/RAP1B/ERK蛋白表达水平变化.24h-SMG效应显著提升血管生成相关因子Ang-2和VEGFA表达水平,划痕实验及管样形成实验显示SMG效应能够增强hCMEC/D3细胞迁移及血管形成能力,Western-Blot结果显示24h-SMG效应上调VEGFR2、Rap1B和Braf相对表达量,提高MEK1和ERK1/2的磷酸化水平.SMG效应可以通过激活VEGFR2/RAP1B/ERK通路来发挥促脑血管细胞生成的作用. 展开更多
关键词 模拟微重力 脑微管内皮细胞 血管生成 VEGFR2/RAP1B/ERK信号通路
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连翘脂素调节cAMP/EPAC1/RAP1信号通路对肺癌细胞恶性进展的影响
7
作者 祁卫华 黄广磊 +2 位作者 张媛媛 班宏英 毛诏旭 《天津医药》 2025年第4期343-348,共6页
目的探究连翘脂素调节环磷酸腺苷/环磷腺苷激活的交换蛋白1/Ras相关蛋白1(cAMP/EPAC1/RAP1)信号通路对肺癌细胞恶性进展的影响。方法体外培养肺癌细胞A549,并分为对照组,连翘脂素低、中、高剂量组(25、50、100 mg/L),连翘脂素高剂量+百... 目的探究连翘脂素调节环磷酸腺苷/环磷腺苷激活的交换蛋白1/Ras相关蛋白1(cAMP/EPAC1/RAP1)信号通路对肺癌细胞恶性进展的影响。方法体外培养肺癌细胞A549,并分为对照组,连翘脂素低、中、高剂量组(25、50、100 mg/L),连翘脂素高剂量+百日咳毒素(PTX)组(100 mg/L连翘脂素+5μmol/L PTX),连翘脂素高剂量+EPAC1拮抗剂(ESI-09)组(100 mg/L连翘脂素+1.5μmol/L ESI-09)。CCK-8实验检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell检测细胞侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验检测细胞上清液cAMP水平;Western blot分析cAMP/EPAC1/RAP1信号通路及凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果相较于对照组,连翘脂素低、中、高剂量组OD450值、划痕愈合率、细胞侵袭数目、cAMP水平、EPAC1、RAP1和Bcl-2表达下降,细胞凋亡率和Bax表达升高,且呈剂量依赖性(P<0.05);与连翘脂素高剂量组比较,连翘脂素高剂量+PTX组A549细胞中光密度(OD)450值、划痕愈合率、侵袭细胞数目、cAMP水平、EPAC1、RAP1和Bcl-2蛋白表达增加,细胞凋亡率和Bax表达下降(P<0.05);连翘脂素高剂量+ESI-09组各指标水平均与之相反。结论连翘脂素通过下调cAMP/EPAC1/RAP1信号通路阻碍A549细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺肿瘤 连翘脂素 细胞增殖 细胞凋亡 cAMP/EPAC1/RAP1信号通路
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RAP1GAP基因多态性与阳原驴产仔数的相关分析
8
作者 陈亮 苏咏梅 +9 位作者 朱文进 李可强 李哲 明佳 逯春香 王茂森 胡文波 路长青 刘海洋 张艳英 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第6期152-159,共8页
本试验旨在研究RAP1 GTP酶激活蛋白(Rap1 GTPase-activating Protein,RAP1GAP)基因多态性与阳原驴产仔数的相关性。以86头阳原驴母驴(其中10头为产双仔母驴)为研究对象,采用PCR-SSCP技术对RAP1GAP基因单核苷酸多态性(Single Nucleotide ... 本试验旨在研究RAP1 GTP酶激活蛋白(Rap1 GTPase-activating Protein,RAP1GAP)基因多态性与阳原驴产仔数的相关性。以86头阳原驴母驴(其中10头为产双仔母驴)为研究对象,采用PCR-SSCP技术对RAP1GAP基因单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位点进行分型,并对各SNP位点与阳原驴产仔数进行关联分析。结果表明:在RAP1GAP基因中发现8个单碱基突变,分别为g.44031G>C、g.44156G>C、g.48851 A>G、g.49456 A>C、g.52853T>C、g.52880T>C、g.59730T>C、g.64393T>G。其中g.44031 G>C在外显子上且为错义突变,导致蛋白质二级结构发生变化,其余7个位点均在内含子上。g.44031G>C、g.44156G>C位点CG和GG基因型个体的平均产仔数显著高于CC基因型;g.49456 A>C位点AC基因型个体的平均产仔数显著高于CC和AA基因型;g.52853 T>C、g.52880 T>C位点CT和TT基因型个体的平均产仔数显著高于CC基因型;g.59730 T>C位点CC基因型个体的平均产仔数显著高于CT和TT基因型;而g.48851 A>G、g.64393 T>G位点未发现与产仔数存在显著关联性。综上,RAP1GAP基因的g.44031G>C、g.44156 G>C、g.49456 A>C、g.52853 T>C、g.52880 T>C、g.59730 T>C 6个位点可作为阳原驴产仔数育种的分子标记。 展开更多
关键词 阳原驴 RAP1GAP 多态性 产仔数
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不同细胞Rap1对动脉粥样硬化的差异性调控作用 被引量:1
9
作者 宋珊杉 杨惠茹 +2 位作者 易小莉 余军 许传铭 《生理学报》 北大核心 2025年第3期483-492,共10页
心血管疾病是导致死亡的主要原因,该类疾病发病率高,对人类健康构成重大威胁。动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病,同时也是大多数心血管疾病的主要病理基础。动脉粥样硬化的发病率持续上升,但其发病机制尚未完全阐明。小GTP酶Rap1(Ras-a... 心血管疾病是导致死亡的主要原因,该类疾病发病率高,对人类健康构成重大威胁。动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病,同时也是大多数心血管疾病的主要病理基础。动脉粥样硬化的发病率持续上升,但其发病机制尚未完全阐明。小GTP酶Rap1(Ras-association proximate 1)作为小G蛋白超家族成员,是细胞中重要的分子开关,参与调控细胞的分化、增殖和黏附等生理功能。Rap1通过在Rap1-GTP和Rap1-GDP之间循环来实现分子开关的效用。Rap1以细胞差异性的方式参与调控动脉粥样硬化的发生、发展过程。本文总结了不同细胞Rap1在动脉粥样硬化发生、发展中的作用及机制,旨在为动脉粥样硬化的治疗提供新标靶和新思路。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 Rap1 内皮细胞 巨噬细胞 平滑肌细胞
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The tumor suppressor RASSF1A is a novel effector of small G protein Rap1A 被引量:3
10
作者 Sunil K.Verma Trivadi S.Ganesan +1 位作者 Uday Kishore Peter J.Parker 《Protein & Cell》 SCIE CSCD 2011年第3期237-249,共13页
Rap1A is a small G protein implicated in a spectrum of biological processes such as cell proliferation,adhesion,differentiation,and embryogenesis.The downstream effectors through which Rap1A mediates its diverse effec... Rap1A is a small G protein implicated in a spectrum of biological processes such as cell proliferation,adhesion,differentiation,and embryogenesis.The downstream effectors through which Rap1A mediates its diverse effects are largely unknown.Here we show that Rap1A,but not the related small G proteins Rap2 or Ras,binds the tumor suppressor Ras association domain family 1A(RASSF1A)in a manner that is regulated by phosphorylation of RASSF1A.Interaction with Rap1A is shown to influence the effect of RASSF1A on microtubule behavior. 展开更多
关键词 RASSF1A rap1a MICROTUBULE VIMENTIN protein-protein interaction
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人脐带间充质干细胞对ARDS小鼠肺损伤作用及机制
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作者 王蓓莹 卢孔渺 +2 位作者 秦伟伟 孙立新 韩伟 《青岛大学学报(医学版)》 2025年第2期159-164,共6页
目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠肺损伤的治疗作用及机制。方法采用随机数字表法将24只C57BL/6小鼠分为对照组(C组)、ARDS模型组(LPS组)和HUC-MSCs+LPS组(MSC组),每组8只。计算肺组织湿/干质量(W/D... 目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠肺损伤的治疗作用及机制。方法采用随机数字表法将24只C57BL/6小鼠分为对照组(C组)、ARDS模型组(LPS组)和HUC-MSCs+LPS组(MSC组),每组8只。计算肺组织湿/干质量(W/D)比值,采用BCA法检测肺泡灌洗液(BALF)蛋白水平,瑞士-吉姆萨染色后观察BALF细胞分类和计数,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变并进行肺组织损伤评分,酶联免疫吸附试验(ELISA)法和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测BALF和肺组织中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,肺组织转录组测序探讨其潜在机制。结果与C组比较,LPS组肺泡壁增厚,肺泡腔炎症细胞浸润增多,肺损伤评分和W/D比值增高,BALF蛋白和IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高,肺组织IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达升高(F=26.52~192.90,P<0.05);与LPS组比较,MSC组肺泡壁增厚和炎症细胞渗出改善,肺损伤评分和W/D比值降低,BALF蛋白和IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,肺组织IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达降低(P<0.05)。转录组测序以及qRT-PCR结果显示,MSCs可能通过降低趋化因子信号通路中的Ras相关蛋白1(Rap1a)、C-X-C基序趋化因子5(Cxcl5)和趋化因子配体20(Ccl20)因子来改善肺损伤。结论HUC-MSCs可能通过降低肺组织中Rap1a、Cxcl5和Ccl20表达水平改善小鼠ARDS,进而减轻肺损伤。 展开更多
关键词 间质干细胞 呼吸窘迫综合征 肺损伤 rap1 GTP结合蛋白质类 趋化因子CXCL5 趋化因子CCL20 小鼠
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IL1RAP在恶性肿瘤中作用的研究进展
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作者 张雪鸥 徐建红 郁丽娜 《世界肿瘤研究》 2025年第2期53-60,共8页
白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)是白介素1 (IL-1)家族的共受体,通过与白介素1受体(IL-1R)结合形成多聚复合物并激活下游信号通路发挥生物学效应。IL1RAP介导的信号通路在各类恶性肿瘤中表现出促增殖和促侵袭、迁移的特性,包括血液系统肿... 白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)是白介素1 (IL-1)家族的共受体,通过与白介素1受体(IL-1R)结合形成多聚复合物并激活下游信号通路发挥生物学效应。IL1RAP介导的信号通路在各类恶性肿瘤中表现出促增殖和促侵袭、迁移的特性,包括血液系统肿瘤、消化道肿瘤、乳腺癌、宫颈癌等。本综述旨在阐明IL1RAP介导的信号通路的生物学效应,以及IL1RAP在各类恶性肿瘤中作用机制的研究进展。Interleukin 1 receptor accessory protein (IL1RAP) is a co-receptor of the interleukin 1 (IL-1) family, which exerts biological effects by binding to the interleukin 1 receptor (IL-1R) to form a multimeric complex and activating the downstream signaling pathway. The signaling pathway mediated by IL1RAP shows pro-proliferative, pro-invasive, and migratory properties in various types of malignant tumors, including hematological tumors, gastrointestinal tract tumors, breast cancers, cervical cancer, etc. The aim of this review is to elucidate the biological effects of IL1RAP-mediated signaling pathway and the progress of the research on the mechanism of IL1RAP in various malignant tumors. 展开更多
关键词 IL1RAP 恶性肿瘤 信号通路 IL-1
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FOXC1通过Rap1信号通路介导结肠癌细胞增殖与凋亡的机制研究
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作者 付小霞 李蕊 +2 位作者 段瑞敏 郝力瑶 靳英 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第13期649-655,共7页
目的:探讨FOXC1在结肠癌中的表达特征、临床意义及其调控细胞增殖与凋亡的分子机制。方法:采用GEPIA数据库分析FOXC1在结肠癌中的表达及预后相关性;qRT-PCR和Western blot检测FOXC1在结肠癌细胞(HCT116、SW620)和正常结肠上皮细胞(NCM4... 目的:探讨FOXC1在结肠癌中的表达特征、临床意义及其调控细胞增殖与凋亡的分子机制。方法:采用GEPIA数据库分析FOXC1在结肠癌中的表达及预后相关性;qRT-PCR和Western blot检测FOXC1在结肠癌细胞(HCT116、SW620)和正常结肠上皮细胞(NCM460)中的差异表达,并构建FOXC1敲低(sh-FOXC1)稳转细胞系。应用Western blot、流式细胞术、CCK-8及平板克隆实验,分析FOXC1敲低对细胞增殖、周期及凋亡的影响;通过Rap1过表达回复实验验证其下游信号通路机制。结果:FOXC1在结肠癌组织中的mRNA表达显著高于正常组织(P<0.001),FOXC1过表达与肿瘤分期的相关性接近显著(P=0.053),且高表达患者总体生存期缩短(Log-rank P=0.013)。敲低FOXC1后,Cyclin D1、Bcl-2表达降低,Bax表达升高(P<0.01),G0/G1期比例增加,S期减少(P<0.001),细胞增殖活性及集落形成数目减少(P<0.001)。机制研究表明,FOXC1敲低后,Rap1表达降低,Rap1GAP表达升高(P<0.05)。敲低FOXC1又恢复Rap1表达后可逆转Cyclin D1、Bcl-2的表达下调及Bax表达升高(P<0.05),S期比例增加(P<0.05),细胞增殖活性和集落形成能力增强。结论:FOXC1通过促进Rap1表达并下调Rap1GAP,促进结肠癌进展,靶向干预FOXC1-Rap1信号轴可能成为潜在治疗策略。 展开更多
关键词 结肠癌 FOXC1 Rap1 增殖 凋亡
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COL8A1通过Rap1MAPK信号通路调控EMT过程介导结直肠癌顺铂药物敏感性的机制研究
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作者 许芳根 宋莹 +2 位作者 姜美兰 熊丽玲 姜斯聪 《中国实用医药》 2026年第1期177-180,共4页
目的选择结直肠癌中具备明显临床价值的隐匿靶元素,研究Ⅷ型胶原A1(COL8A1)透过Rap1MAPK信号通路调整上皮-间质细胞转化(EMT)流程介导结直肠癌顺铂药品敏感性的机制。方法透过GEPIA参数库搜索对结直肠癌有明显效果的治疗方法,使用免疫... 目的选择结直肠癌中具备明显临床价值的隐匿靶元素,研究Ⅷ型胶原A1(COL8A1)透过Rap1MAPK信号通路调整上皮-间质细胞转化(EMT)流程介导结直肠癌顺铂药品敏感性的机制。方法透过GEPIA参数库搜索对结直肠癌有明显效果的治疗方法,使用免疫组化染色模式与定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测试目标基因在结直肠癌细胞中的表达;透过小干扰RNA(siRNA)介导敲低目标基因,使用细胞增殖试验与克隆成型试验佐证其在结直肠癌形成演化中的功能;透过生物信息学参数库检索与目标基因融合的microRNA,深入探究潜藏功能体制。分析结直肠癌中高表达的靶元素;比较结直肠癌病变不同位置COL8A1表达。结果共选择46例结直肠癌中高表达并且具备明显临床预后关联度的细胞,最后选取COL8A1当成探究目标基因。结直肠上皮内瘤变位置COL8A1超过常规部位(P<0.05),与病理T分期明显关联。敲定COL8A1表达情况下,结直肠癌增殖速度与克隆成型速度明显下降(P<0.05)。过表达miR-876能够抑制SUZ12表达,让细胞增殖速度变得可控(P<0.05);而过表达miR-876与COL8A1能够明显调整SUZ12表达(P<0.05),复原细胞增殖速度到常规水准。结论COL8A1在结直肠癌内高表达,参与结直肠癌的整个流程,能够被当成结直肠癌初期诊疗的分子标识物;COL8A1带动结直肠癌增殖,能够透过竞争类融合miR-876弱化miR-876同SUZA12融合反应,从而解化SUZ12,带动结直肠癌的演化。通过对Rap1MAPK信号通路调控来明确其机制是否具有重大临床价值。 展开更多
关键词 Ⅷ型胶原A1 Rap1MAPK信号通路 调控上皮-间质细胞转化 结直肠癌 机制演变研究
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环腺苷酸激活交换蛋白1/RAS相关蛋白1信号通路在脑缺血-再灌注损伤发病机制中的研究进展 被引量:2
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作者 吕雪 孙毅红 +1 位作者 华志鹏 贾建新 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期552-558,共7页
脑缺血-再灌注损伤(CIRI)是缺血性卒中患者恢复患侧脑组织血流时引发的严重并发症。CIRI患者常伴有神经功能减退、认知障碍、情绪障碍等,对日常生活产生严重影响。目前CIRI易被早期诊断,但相关特异性治疗方法相对较少。作者对环腺苷酸... 脑缺血-再灌注损伤(CIRI)是缺血性卒中患者恢复患侧脑组织血流时引发的严重并发症。CIRI患者常伴有神经功能减退、认知障碍、情绪障碍等,对日常生活产生严重影响。目前CIRI易被早期诊断,但相关特异性治疗方法相对较少。作者对环腺苷酸激活交换蛋白1/RAS相关蛋白1(Epac1/Rap1)信号通路与CIRI的相关性研究进行综述,以期为CIRI患者的临床治疗提供新思路。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 Epac1/Rap1信号通路 发病机制 综述
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虎杖苷调节cAMP/EPAC1/RAP1信号通路对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响 被引量:1
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作者 刘佳 纪贤芬 严金金 《中国妇幼保健》 CAS 2024年第15期2917-2921,共5页
目的 探讨虎杖苷调节环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷结合蛋白1(EPAC1)/Ras相关蛋白1(RAP1)信号通路对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 研究时间为2022年8月-2023年8月。以子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,分为空白组、虎杖苷-... 目的 探讨虎杖苷调节环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷结合蛋白1(EPAC1)/Ras相关蛋白1(RAP1)信号通路对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 研究时间为2022年8月-2023年8月。以子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,分为空白组、虎杖苷-L组(25μmol/L虎杖苷)、虎杖苷-M组(50μmol/L虎杖苷)、虎杖苷-H组(100μmol/L虎杖苷)、Forskolin组(cAMP激活剂,100μmol/L Forskolin)以及虎杖苷-H+Forskolin组(100μmol/L虎杖苷+100μmol/L Forskolin)。分别以克隆形成实验、Transwell实验、划痕实验、TUNEL法、CCK-8法、Western Blot检测细胞克隆数、侵袭、迁移、凋亡、增殖及EPAC1、RAP1、凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。采用ELISA法检测细胞培养基中cAMP水平。结果 与空白组相比,Forskolin组细胞克隆数[(195.66±19.62)个]、侵袭数[(281.52±28.22)个]、迁移率[(82.61±8.31)%]、增殖率[(125.64±12.59)%]、cAMP水平[(1 385.54±138.56)pmol/ml]、EPAC1(1.56±0.16)、RAP1(2.11±0.22)、MMP-9(1.88±0.19)表达显著增加,凋亡率[(5.47±0.56)%]、Cleaved Caspase-3(0.26±0.03)表达均降低(均P<0.05),虎杖苷-L组、虎杖苷-M组、虎杖苷-H组细胞克隆数[(105.34±10.57)个、(65.34±6.58)个、(42.27±4.25)个]、侵袭数[(185.72±18.66)个、(145.47±14.58)个、(112.59±11.29)个]、迁移率[(40.21±4.06)%、(31.12±3.12)%、(21.34±2.15)%]、增殖率[(68.37±6.86)%、(48.67±4.88)%、(35.24±3.55)%]、cAMP水平、EPAC1、RAP1、MMP-9表达显著降低,凋亡率[(19.85±1.99)%、(27.34±2.77)%、(36.44±3.66)%]、Cleaved Caspase-3表达均增加(均P<0.05)。与Forskolin组相比,虎杖苷-H+Forskolin组细胞克隆数、侵袭数、迁移率、增殖率、cAMP水平、EPAC1、RAP1、MMP-9表达均显著降低,凋亡率、Cleaved Caspase-3表达均显著增加(均P<0.05)。与虎杖苷-H组相比,虎杖苷-H+Forskolin组细胞克隆数、侵袭数、迁移率、cAMP水平、EPAC1、RAP1、MMP-9表达均显著增加,凋亡率、增殖率、Cleaved Caspase-3表达均显著降低(均P<0.05)。结论 虎杖苷可抑制子宫内膜癌细胞恶性生物学行为发展,可能与抑制cAMP/EPAC1/RAP1信号通路有关。 展开更多
关键词 虎杖苷 cAMP/EPAC1/RAP1信号通路 子宫内膜癌 恶性生物学行为
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基于RAP1信号通路探讨右归丸延缓膝骨关节炎的软骨退变 被引量:3
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作者 范元赫 杨永菊 +2 位作者 马贤德 张宇 关雪峰 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第4期137-142,I0035,I0036,共8页
目的通过右归丸治疗膝骨关节炎(KOA)模型大鼠,观察大鼠关节软骨形态及检测右归丸对RAP1信号通路表达和大鼠血清中的炎性因子表达,探讨右归丸对RAP1信号通路的表达及防治KOA的作用机制,为治疗提供理论基础。方法72只SPF级SD大鼠(雌雄各半... 目的通过右归丸治疗膝骨关节炎(KOA)模型大鼠,观察大鼠关节软骨形态及检测右归丸对RAP1信号通路表达和大鼠血清中的炎性因子表达,探讨右归丸对RAP1信号通路的表达及防治KOA的作用机制,为治疗提供理论基础。方法72只SPF级SD大鼠(雌雄各半)随机数字表法分为假手术组12只和造模组60只。造模组采用改良Hulth法建立膝关节OA模型,假手术组接受假手术。将造模成功的大鼠分为模型组(n=11)、右归丸低剂量组(n=12)、右归丸中剂量组(n=12)、右归丸高剂量组(n=12)及塞来昔布组(n=12)。给药阶段模型组、假手术组给予0.9%氯化钠溶液;右归丸低剂量组为等效浓度的1/2为0.5 g/d、右归丸中剂量组等效浓度为1 g/d、右归丸高剂量组为等效浓度2倍为2 g/d,塞来昔布组配置成悬浮(等效浓度为0.0072 g/d)。驱赶7周后检测并比较各组大鼠软骨病理,血清TNF-α、IL-1β和IL-18含量,以及大鼠软骨组织中RAP1、RAF、MEK1/2、ERK1/2、CREB、MMP3、MMP13、ADAMTS、C-fos、C-myc和C-Jun的表达水平。结果各组大鼠软骨病理检测结果显示:假手术组大鼠软骨组织未见异常,模型组大鼠关节软骨部分区域出现明显缺损,右归丸低剂量组大鼠关节软骨表面磨损较模型组有所减轻,而中、高剂量组及塞来昔布组大鼠软骨表面可见侵蚀现象明显改善。右归丸对KOA大鼠血清中的IL-1β、TNF-α、IL-18含量与模型组相比,右归丸高、中、低剂量组和塞来昔布组在大鼠血清中表达显著降低,差异具有统计学意义。与软骨组织中RAP1-RAF-MEKl/2-ERKl/2-CREB信号通路活化水平检测结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织中RAP1、RAF、MEK1/2、ERK1/2、CREB、MMP3、MMP13、ADAMTS、C-fos、C-myc和C-Jun的表达水平均显著升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结果提示,在KOA发生时,RAP1-RAF-MEKl/2-ERKl/2-CREB信号转导通路激活,介导软骨组织中炎症反应及细胞凋亡的发生,这与以往研究结果一致。右归丸干预后,软骨组织中RAP1、RAF、MEK1/2、ERK1/2、CREB、MMP3、MMP13、ADAMTS、C-fos、C-myc和C-Jun蛋白表达水平均显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论右归丸能够抑制KOA大鼠软骨组织中RAP1-RAF-MEKl/2-ERKl/2-CREB信号通路的活化,降低炎性因子表达,从而延缓软骨退变。 展开更多
关键词 右归丸 骨关节炎 RAP1信号通路
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Rap1 GTP酶激活蛋白对结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移作用的影响 被引量:2
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作者 靳英 付小霞 +2 位作者 段瑞敏 郝力瑶 李峰 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期144-149,157,共7页
目的探讨Rap1 GAP在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的相关性。方法采用免疫组化EnVision两步法检测125例结肠癌组织中Rap1 GAP蛋白表达水平,应用Western blot法检测结肠癌细胞系(LOVO、HCT116、SW480)和正常结肠上皮细胞HCoE... 目的探讨Rap1 GAP在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的相关性。方法采用免疫组化EnVision两步法检测125例结肠癌组织中Rap1 GAP蛋白表达水平,应用Western blot法检测结肠癌细胞系(LOVO、HCT116、SW480)和正常结肠上皮细胞HCoEPiC中Rap1 GAP蛋白表达。通过慢病毒转染LOVO、HCT116和SW480细胞,分别下调、上调Rap1 GAP的表达,根据不同处理分为空载组(sh-NON、LV-NON)、sh-Rap1 GAP组(低表达Rap1 GAP)和LV-Rap1 GAP组(过表达Rap1 GAP),Western blot法验证细胞转染效率;采用MTT实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果125例结肠癌标本中,Rap1 GAP缺失表达者83例(66.4%),高于癌旁对照组织(7.2%)(P<0.001)。Rap1 GAP缺失表达率与肿瘤分化程度(χ^(2)=6.152,P=0.011)、是否伴黏液腺癌(χ^(2)=4.908,P=0.028)有关,与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、临床分期、淋巴结转移均无关(P>0.05)。Western blot结果显示,与HCoEPiC(0.189±0.081)细胞相比,LOVO(0.238±0.008)细胞中Rap1 GAP蛋白表达增高,HCT116(0.064±0.002)和SW480(0.152±0.026)细胞中Rap1 GAP蛋白表达降低(F=159.6,P<0.05)。LOVO细胞转染Rap1 GAP低表达慢病毒后,sh-Rap1 GAP-1组(0.733±0.071)、sh-Rap1 GAP-2组(0.559±0.136)和sh-Rap1 GAP-3组(0.606±0.037)Rap1 GAP蛋白表达水平明显低于LOVO组(1.880±0.129)(F=49.57,P<0.05)。与sh-NON组(1.260±0.109)相比,sh-Rap1 GAP-2组(1.569±0.059)和sh-Rap1 GAP-3组(1.548±0.087)细胞72 h增殖能力明显提高(F=28.36,P<0.05),其侵袭和迁移能力明显增高(P<0.05)。HCT116细胞转染Rap1 GAP过表达慢病毒后,与LV-NON组(0.485±0.097)相比,LV-Rap1 GAP组(1.395±0.137)Rap1 GAP蛋白表达明显较高(P<0.05)。MTT实验结果显示,与LV-NON组(0.652±0.047)相比,LV-Rap1 GAP组(1.212±0.038)细胞增殖能力降低,其侵袭和迁移能力明显降低(P<0.05)。SW480细胞的转染结果及增殖、侵袭和迁移能力与HCT116细胞一致。结论Rap1 GAP缺失表达率与结肠癌分化程度、是否伴黏液腺癌有关,上调Rap1 GAP表达能抑制结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,可为探究结肠癌的发生、发展机制提供理论依据。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 Rap1 GAP 增殖 侵袭 迁移
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HPV E6通过Rap1信号通路影响宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移的研究 被引量:1
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作者 秦祥川 李金秋 +2 位作者 黄晓婧 忽吐比丁·库尔班 阿仙姑·哈斯木 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第9期9-16,共8页
目的探讨人乳头瘤病毒E6蛋白(human papillomavirus E6 protein,HPV E6)对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响及潜在分子机制。方法基于Illumina Hiseq 4000转录组测序技术检测12例不同程度的宫颈病变组织之间的基因表达特征,筛选与... 目的探讨人乳头瘤病毒E6蛋白(human papillomavirus E6 protein,HPV E6)对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响及潜在分子机制。方法基于Illumina Hiseq 4000转录组测序技术检测12例不同程度的宫颈病变组织之间的基因表达特征,筛选与HPV相关的差异基因;利用GO、KEGG Pathway方法对差异基因进行生物学功能富集分析;Western blotting检测正常宫颈上皮细胞HCerEpic、宫颈癌细胞Hela中Rap、Rap1GAP蛋白表达水平;通过平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验检测其增殖、侵袭及迁移能力;通过sh-E6慢病毒转染下调细胞内HPV E6表达,分为对照组(Hela细胞)、空载组(sh-NON)和sh-E6组(低表达HPV E6);下调HPV E6表达,采用平板克隆和CCK-8实验分别检测每组细胞增殖能力和细胞活力;Transwell和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力;Western blotting检测各组细胞中E6、Rap1、Rap1GAP、CyclinD1、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达水平。在sh-E6组基础上过表达Rap1,Western blot检测细胞中Rap1通路及相关蛋白的表达水平;平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。结果测序结果显示,与正常宫颈HPV阴性比较,HPV阳性的正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中差异上调表达的基因分别有340、864和1036个;3个数据集寻找共有差异基因共24个。GO|KEGG富集分析24个差异表达基因主要富集在Rap1相关信号通路。与HCerEpic细胞相比,Hela细胞内Rap1表达升高,Rap1GAP表达降低(P<0.01);其细胞的增殖、侵袭和迁移能力增强(P<0.01);下调HPV E6表达后,与Hela组比较,sh-E6组细胞的增殖、细胞集落形成、侵袭和迁移能力降低(P<0.001);Western blotting表明,与Hela组比较,sh-E6组细胞内Rap1、CyclinD1、N-cadherin蛋白表达降低,Rap1GAP和E-cadherin蛋白表达升高(P<0.001)。与sh-E6组相比,过表达Rap1组(sh-E6/OE Rap1)细胞内Rap1/Rap1GAP、CyclinD1、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达被恢复(P<0.001),细胞增殖、侵袭迁移能力被恢复(P<0.01)。结论在宫颈癌发展过程中,HPV E6通过激活Rap1信号通路促进宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 HPV E6 宫颈癌 Rap1通路 增殖 侵袭 迁移
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益气活血方调控cAMP/Epac1/Rap1信号改善冠心病气虚血瘀证大鼠的验证 被引量:10
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作者 吴华英 邓凯 +3 位作者 李静 毛一之 李亮 彭清华 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第18期107-116,共10页
目的:基于环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Epac1)/Ras-同源蛋白1(Rap1)信号通路探讨益气活血方对冠心病气虚血瘀证大鼠的心肌保护机制。方法:88只SPF级雄性SD大鼠,按随机数字表分为假手术组(n=12)和实验组(n=76)... 目的:基于环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Epac1)/Ras-同源蛋白1(Rap1)信号通路探讨益气活血方对冠心病气虚血瘀证大鼠的心肌保护机制。方法:88只SPF级雄性SD大鼠,按随机数字表分为假手术组(n=12)和实验组(n=76),实验组大鼠采用限制饮食及力竭性游泳复合冠状动脉左前降支(LAD)结扎术构建冠心病气虚血瘀证模型,采集大鼠心电图,将造模成功后的实验组大鼠随机分为模型组、益气活血方低、中、高剂量组(4.28、8.55、17.1 g·kg^(-1))、西药组(单硝酸异山梨酯片,3.6 mg·kg^(-1)),连续给药4周;假手术组及模型组灌胃等体积双蒸水。末次给药后24 h取材,行心脏超声检测左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD),左室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF),腹主动脉采血行血液流变学测定,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆cAMP水平;留取心肌组织进行苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察心肌病理损伤情况,透射电镜观察心肌组织超微结构改变;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测心肌Epac1、Rap1GTP酶激活蛋白(Rap1GAP)及Rap1 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌Epac1、Rap1GAP及Rap1蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠的LVEDD、LVESD显著增加(P<0.01),EF及FS比率显著下降(P<0.01),表现出心功能减退的“心气虚”症状;全血黏度及血浆黏度显著升高(P<0.01),cAMP含量显著升高(P<0.01),心肌组织胶原纤维显著增生(P<0.01),心肌超微结构受损严重,表现出“血瘀”的病理改变;Real-time PCR结果显示模型组大鼠Epac1及Rap1 mRNA显著降低(P<0.01),Rap1GAP mRNA显著增加(P<0.01);Western blot显示Epac1蛋白表达显著降低(P<0.01),Rap1GAP蛋白表达明显增加(P<0.05);与模型组比较,益气活血方能改善冠心病气虚血瘀证大鼠心功能、降低血液黏度、降低血浆cAMP含量、减少胶原纤维增生,改善心肌超微结构损伤,以高剂量组作用效果最佳。益气活血方高剂量组能显著增加Epac1 mRNA及蛋白表达(P<0.01),显著增加Rap1 mRNA表达(P<0.01),明显降低Rap1GAP mRNA及Rap1GAP/Rap1蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:益气活血方可改善冠心病气虚血瘀证大鼠心功能、降低血液黏度与血浆cAMP含量、改善心肌损伤、减少胶原纤维增生,其心肌保护机制可能与调节cAMP/Epac1/Rap1信号通路有关。 展开更多
关键词 益气活血方 补阳还五汤 冠心病 气虚血瘀证 环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Epac1)/Ras-同源蛋白1(Rap1)信号通路
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