目的探究温肾益髓汤(Wen Shen Yi Sui Decoction,WSYSD)含药血清对RANKL诱导的破骨细胞(osteoclast,OC)分化的影响及作用机制。方法采用不同质量分数的WSYSD含药血清干预骨髓单核细胞,通过CCK-8法筛选无细胞毒性的含药血清进行后续实验...目的探究温肾益髓汤(Wen Shen Yi Sui Decoction,WSYSD)含药血清对RANKL诱导的破骨细胞(osteoclast,OC)分化的影响及作用机制。方法采用不同质量分数的WSYSD含药血清干预骨髓单核细胞,通过CCK-8法筛选无细胞毒性的含药血清进行后续实验。设置对照组、RANKL诱导组、RANKL+不同质量分数的WSYSD含药血清组。各组进行相应干预后,运用TRAP染色和甲苯胺蓝染色观察OC及骨陷窝形成;RT-qPCR和Western blot检测TRAP、c-FOS和CTR mRNA及蛋白表达;Western blot检测MAPK通路中ERK、JNK和p38蛋白磷酸化水平。结果与对照组相比,质量分数为5%、10%和15%的WSYSD含药血清未降低细胞存活率(P>0.05)。与RANKL诱导组相比,WSYSD含药血清组(5%、10%和15%)抑制了OC分化和骨陷窝形成,并降低TRAP、c-FOS和CTR mRNA表达,作用效果呈质量分数依赖性,以15%最佳(P均<0.01)。与RANKL诱导组相比,WSYSD含药血清组(15%)抑制TRAP、c-FOS和CTR蛋白表达,作用效果呈时间依赖性,以第5天最明显(P<0.01)。此外,与RANKL诱导组相比,WSYSD含药血清组(15%)抑制MAPK通路中ERK、JNK和p38蛋白磷酸化,作用效果也呈时间依赖性,以第60分钟最明显(P<0.01)。结论WSYSD含药血清可抑制RANKL诱导的OC分化,作用机制可能与抑制MAPK通路的激活有关。展开更多
骨质疏松症由于其严重的致病后果同时较高的发病率已经成为我国老年人的头号健康潜在威胁,而OPG/RANK/RANKL信号通路主要通过影响破骨细胞分化成熟,从而在骨质疏松症的发病机制中占据了重要地位,是许多抗骨质疏松药品开发的重要研究靶...骨质疏松症由于其严重的致病后果同时较高的发病率已经成为我国老年人的头号健康潜在威胁,而OPG/RANK/RANKL信号通路主要通过影响破骨细胞分化成熟,从而在骨质疏松症的发病机制中占据了重要地位,是许多抗骨质疏松药品开发的重要研究靶点之一。为了探究OPG/RANK/RANKL信号通路在骨质疏松症中的作用机制及中医药干预现状和进展,通过CNKI、WANFANG DATE、中华医学期刊全文数据库、Web of Science、Pub Med数据库,以骨质疏松症、OPG/RANK/RANKL、中药和中药方剂为关键词检索近10年相关文献报道,结果显示许多中药及其有效成分和中药方剂都可通过调控OPG/RANK/RANKL信号通路抑制破骨细胞,改善骨质疏松症,增加骨强度,提示中药及其有效成分和中药方剂能有效防治骨质疏松症,同时在药物研发方面具有极大的潜力和应用前景。展开更多
文摘目的探究温肾益髓汤(Wen Shen Yi Sui Decoction,WSYSD)含药血清对RANKL诱导的破骨细胞(osteoclast,OC)分化的影响及作用机制。方法采用不同质量分数的WSYSD含药血清干预骨髓单核细胞,通过CCK-8法筛选无细胞毒性的含药血清进行后续实验。设置对照组、RANKL诱导组、RANKL+不同质量分数的WSYSD含药血清组。各组进行相应干预后,运用TRAP染色和甲苯胺蓝染色观察OC及骨陷窝形成;RT-qPCR和Western blot检测TRAP、c-FOS和CTR mRNA及蛋白表达;Western blot检测MAPK通路中ERK、JNK和p38蛋白磷酸化水平。结果与对照组相比,质量分数为5%、10%和15%的WSYSD含药血清未降低细胞存活率(P>0.05)。与RANKL诱导组相比,WSYSD含药血清组(5%、10%和15%)抑制了OC分化和骨陷窝形成,并降低TRAP、c-FOS和CTR mRNA表达,作用效果呈质量分数依赖性,以15%最佳(P均<0.01)。与RANKL诱导组相比,WSYSD含药血清组(15%)抑制TRAP、c-FOS和CTR蛋白表达,作用效果呈时间依赖性,以第5天最明显(P<0.01)。此外,与RANKL诱导组相比,WSYSD含药血清组(15%)抑制MAPK通路中ERK、JNK和p38蛋白磷酸化,作用效果也呈时间依赖性,以第60分钟最明显(P<0.01)。结论WSYSD含药血清可抑制RANKL诱导的OC分化,作用机制可能与抑制MAPK通路的激活有关。
文摘骨质疏松症由于其严重的致病后果同时较高的发病率已经成为我国老年人的头号健康潜在威胁,而OPG/RANK/RANKL信号通路主要通过影响破骨细胞分化成熟,从而在骨质疏松症的发病机制中占据了重要地位,是许多抗骨质疏松药品开发的重要研究靶点之一。为了探究OPG/RANK/RANKL信号通路在骨质疏松症中的作用机制及中医药干预现状和进展,通过CNKI、WANFANG DATE、中华医学期刊全文数据库、Web of Science、Pub Med数据库,以骨质疏松症、OPG/RANK/RANKL、中药和中药方剂为关键词检索近10年相关文献报道,结果显示许多中药及其有效成分和中药方剂都可通过调控OPG/RANK/RANKL信号通路抑制破骨细胞,改善骨质疏松症,增加骨强度,提示中药及其有效成分和中药方剂能有效防治骨质疏松症,同时在药物研发方面具有极大的潜力和应用前景。
