期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
麻疹病毒N蛋白的原核表达、纯化及其兔抗血清的制备
1
作者 杨志辉 安欢欢 +3 位作者 吴杰 孟胜利 郭靖 申硕 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第9期1025-1029,1036,共6页
目的原核表达并纯化麻疹病毒(measles virus,MV)核蛋白(N),免疫家兔后制备兔抗MV N抗血清,并鉴定其特异性。方法以MV-S191疫苗株基因组为模板,PCR扩增N基因3个片段,构建重组表达质粒pGEX-MV-N1、pGEXMV-N2和pGEX-MV-N3,分别转化至E.coli... 目的原核表达并纯化麻疹病毒(measles virus,MV)核蛋白(N),免疫家兔后制备兔抗MV N抗血清,并鉴定其特异性。方法以MV-S191疫苗株基因组为模板,PCR扩增N基因3个片段,构建重组表达质粒pGEX-MV-N1、pGEXMV-N2和pGEX-MV-N3,分别转化至E.coli BL21(DE3)中诱导表达N-末端带有GST标签的融合蛋白GST-MV-N1、GST-MV-N2和GST-MV-N3,纯化后,分别与等体积弗氏完全佐剂(初次免疫)、弗氏不完全佐剂(加强免疫)混合,乳化均匀后各免疫1只雌性家兔,共免疫6次,采集全血,分离血清获得兔抗MV N抗血清,Western blot法及间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)鉴定其特异性。结果重组表达质粒pGEX-MV-N1、pGEX-MV-N2和pGEX-MV-N3经双酶切、PCR及测序鉴定证明构建正确;表达的GST-MV-N1和GST-MV-N3融合蛋白相对分子质量分别约42000和39000,主要以包涵体形式存在,纯度分别为96%和85%,而上清和沉淀中均未见GST-MV-N2融合蛋白的表达;兔抗MV N3抗血清能特异性识别MV-S191感染细胞后表达的N蛋白,且特异性高于兔抗MV-N1抗血清。结论成功制备了兔抗MV N抗血清,为重组MV疫苗的研发以及MV结构蛋白抗体的制备提供了技术支持。 展开更多
关键词 麻疹病毒 核蛋白 兔抗血清 原核表达 纯化
原文传递
传染性胰坏死病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量：6
2
作者 张琳琳 连科迅 +7 位作者 张英 蒋烨 姜艳萍 崔文 乔薪瑗 唐丽杰 李一经 刘敏 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2014年第4期57-62,72,共7页
以纯化的兔抗传染性胰坏死病病毒(IPNV)VP2重组蛋白多克隆抗体为包被抗体,抗IPNV VP2单克隆抗体为检测抗体建立了IPNV双抗体夹心ELISA方法。优化反应条件为:兔抗IPNV VP2重组蛋白多克隆抗体包被浓度为1.28μg/mL,抗IPNV VP2单克隆抗体... 以纯化的兔抗传染性胰坏死病病毒(IPNV)VP2重组蛋白多克隆抗体为包被抗体,抗IPNV VP2单克隆抗体为检测抗体建立了IPNV双抗体夹心ELISA方法。优化反应条件为:兔抗IPNV VP2重组蛋白多克隆抗体包被浓度为1.28μg/mL,抗IPNV VP2单克隆抗体的工作浓度为1.34μg/mL,酶标二抗稀释比例为1∶2 000,以P/N>2,且OD490 nm>0.101 494作为阳性判定标准。该方法的重复性变异系数均小于10%,与传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、病毒性出血败血症病毒(VHSV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、轮状病毒(HRV)无交叉反应。对41份虹鳟肝脏样品分别进行双抗体夹心ELISA和RT-PCR检测,结果双抗体夹心法与RT-PCR法检测符合率为97%,表明本实验建立的双抗体夹心ELISA检测方法检测IPNV具有较高的敏感性和特异性,可用于IPNV的病原学检测。 展开更多
关键词 传染性胰坏死病毒 双抗体夹心ELISA检测方法 单克隆抗体 兔抗血清
在线阅读 下载PDF
家兔精子膜蛋白rSP10在大肠杆菌中的高效表达及其抗血清的制备 被引量：1
3
作者 刘建喜 林爱星 +3 位作者 杨毅 侯健 胡宏宇 陈永福 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期314-317,共4页
为研究家兔精子膜蛋白rSP10在精子膜上的定位及其免疫原性 ,将不含编码信号肽序列的rsp10基因插入表达载体pET30a中 ,N端具有His6 肽的融合蛋白re rSP10得到高效表达 ,表达产物达细菌总蛋白的 6 7%。经DEAE柱层析纯化表达产物 ,re rSP1... 为研究家兔精子膜蛋白rSP10在精子膜上的定位及其免疫原性 ,将不含编码信号肽序列的rsp10基因插入表达载体pET30a中 ,N端具有His6 肽的融合蛋白re rSP10得到高效表达 ,表达产物达细菌总蛋白的 6 7%。经DEAE柱层析纯化表达产物 ,re rSP10 ,产量约为 5 0mg mL培养物。Western实验结果表明 ,精子膜蛋白多克隆抗体能识别re rsp10 ,说明大肠杆菌表达的re rSP10具有免疫原性。用纯化的re rSP10免疫雌性兔 ,得到re rSP10专一性多克隆抗血清。将re rSP10专一性多克隆抗血清加入获能精子中 ,发现SP10专一性多克隆抗血清严重影响获能精子的运动并且表现为剂量依赖性 。 展开更多
关键词 家兔 精子膜蛋白 rSP10 表达 抗血清 免疫避孕
在线阅读 下载PDF
北京鸭血清IgM及其抗血清的提纯和腔上囊中B淋巴细胞IgM表达的初步研究 被引量：1
4
作者 扈启宽 许旭 +2 位作者 王素云 王承春 潘其丽 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1990年第6期728-734,共7页
从未经超免的正常北京鸭血清中分离纯化鸭IgM,制备了兔抗鸭IgM抗血清,并进一步用鸭IgG进行了亲和纯化。本研究还试将此抗血清用于免疫荧光法对北京鸭胚胎后期腔上囊B淋巴细胞发育中IgM的表达进行了初步观察。
关键词 北京鸭 腔上囊 B细胞 IGM
暂未订购
鸡免疫球蛋白(GIgG)轻链的分离纯化及其抗血清的制备 被引量：3
5
作者 李庆章 刘忠贵 《兽医大学学报》 CSCD 1989年第1期37-41,共5页
经硫酸铵盐析、柱色谱分离得到纯化的鸡血清IgG。继用2-巯基乙醇还原、碘乙酰胶烷化拆开IgG的轻、重链,再经Sephadex G100凝胶过滤柱色谱分离得到IgG轻链。以IgG轻链免疫家兔制得兔抗鸡IgG轻链抗血清。
关键词 鸡 家兔 抗血清 免疫球蛋白 轻链
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部