哈蟆油蛋白对骨质疏松预防及ALP,Osteocalcin,Runx-2基因表达的调节作用 被引量：8

1

作者 李晓华 陈锡俊 +4 位作者 李娜 石晓征 韩冬 黄晓巍 曲晓波 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第20期138-143,共6页

目的:观察哈蟆油蛋白(ROP)的抗骨质疏松作用,并探讨其对骨生长相关基因的调节作用。方法:采用去势法建立大鼠骨质疏松模型,随机分为空白组,模型组,戊酸雌二醇组,ROP高、中、低剂量组(0.15,0.075,0.037 5 g·kg^(-1));利用X射线技术... 目的:观察哈蟆油蛋白(ROP)的抗骨质疏松作用,并探讨其对骨生长相关基因的调节作用。方法:采用去势法建立大鼠骨质疏松模型,随机分为空白组,模型组,戊酸雌二醇组,ROP高、中、低剂量组(0.15,0.075,0.037 5 g·kg^(-1));利用X射线技术测量股骨和腰椎骨密度(BMD);利用骨骼强度仪检测股骨的最大载荷量;应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测骨生长相关基因的表达。结果:与空白组比较,模型组股骨、腰椎骨密度明显降低(P<0.05,P<0.01),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),Osteocalcin,Runx-2基因表达均显著下调(P<0.01);与模型组比较,ROP高、中剂量组腰椎BMD均有显著增加(P<0.01),ROP高剂量组ALP,Osteocalcin,Runx-2基因表达显著上调(P<0.01)。结论:ROP能显著提高大鼠BMD和最大载荷量;ROP可能通过上调ALP,Osteocalcin,Runx-2基因的mRNA表达,促进成骨分化,调节骨代谢平衡,从而发挥防治骨质疏松的作用。 展开更多

关键词 哈蟆油蛋白 骨质疏松 碱性磷酸酶 OSTEOCALCIN runx-2

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PPARγ-2和Runx-2与激素性股骨头坏死的发生 被引量：6

2

作者 谭钢 罗磊 +1 位作者 康鹏德 裴福兴 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期1274-1277,共4页

关键词 激素 股骨头坏死 PPARγ-2 runx-2

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Runx-2转染骨髓间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石修复兔桡骨骨缺损效果观察 被引量：1

3

作者 李庆庆 廖福朋 +2 位作者 桂先革 黄江鸿 王大平 《现代实用医学》 2018年第2期165-168,共4页

目的观察Runx-2转染的骨髓间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石修补兔桡骨骨缺损的效果。方法将Runx-2骨髓间充质干细胞与纳米羟基磷灰石共培养设置为实验组(A组),设置e GFP-骨髓间充质干细胞组(B组),骨髓间充质干细胞组(C组)及空白组(D组)... 目的观察Runx-2转染的骨髓间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石修补兔桡骨骨缺损的效果。方法将Runx-2骨髓间充质干细胞与纳米羟基磷灰石共培养设置为实验组(A组),设置e GFP-骨髓间充质干细胞组(B组),骨髓间充质干细胞组(C组)及空白组(D组)。建立兔桡骨骨缺损模型,并分别填入填充材料(D组不填充)。术后4、8及12周分别行X线检查,术后12周获取实验兔桡骨标本并行病理切片检查。结果 Runx-2骨髓间充质干细胞高表达Runx-2基因;术后实验组兔桡骨标本在外观、X线片及病理切片下均显示更好的骨性愈合。结论Runx-2骨髓间充质干细胞纳米羟基磷灰石能够很好修复兔桡骨缺损,证实其具有良好的骨缺损修复能力,可以作为人体骨缺损修复的生物复合材料。 展开更多

关键词 组织工程 runx-2 骨髓间充质干细胞 骨缺损

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淫羊藿素逆转糖皮质激素所致骨质疏松及其与Runx-2靶点的相互作用研究 被引量：10

4

作者 夏海建 郭文杰 +7 位作者 裴晋阳 施嘉欣 杜天琪 肖世长 侯磊 王慧颖 孙旭杰 蒋俊 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期797-801,共5页

目的阐明淫羊藿素(icaritin,IT)对糖皮质激素所致骨质疏松的治疗作用,解析Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX-2)与IT的作用机制。方法采用泼尼松龙(prednisolone,PNSL)抑制斑马鱼骨形成,头骨染色后,评价IT对... 目的阐明淫羊藿素(icaritin,IT)对糖皮质激素所致骨质疏松的治疗作用,解析Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX-2)与IT的作用机制。方法采用泼尼松龙(prednisolone,PNSL)抑制斑马鱼骨形成,头骨染色后,评价IT对斑马鱼头骨染色面积、累计光密度和矿物元素含量;通过结合分子对接(molecular docking)技术分析RUNX-2与IT的分子间作用。结果PNSL显著抑制了斑马鱼矿化骨面积、累积光密度和Ca、P含量(P<0.01);经IT干预后,斑马鱼的上述指标均有显著性升高(P<0.01);计算机拟合数据显示,IT可与RUNX-2能稳定对接,其分子对接得分为-5.46986055,结合位点主要是3号位的-OH和2号位的苯环。结论IT能与RUNX-2受体结合,促进斑马鱼的骨形成。 展开更多

关键词 淫羊藿素 runx-2 分子对接 斑马鱼 糖皮质激素 骨质疏松

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runx-2基因与牙发育 被引量：3

5

作者 文军 陆群 朱庆林 《国际口腔医学杂志》 CAS 2008年第2期164-166,共3页

runx-2基因在牙的发育过程中发挥重要调控作用。下面就runx-2基因的结构特征及其在牙胚细胞的分化、牙体组织的形成和牙髓干细胞定向分化中所起作用作一综述。

关键词 runx-2 核心结合因子-α1 牙发育 牙髓干细胞

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强筋合剂对骨质疏松大鼠治疗及相关基因ALP、Osteocalcin、Runx-2表达的调节作用 被引量：1

6

作者 王青华 龚卫月 +3 位作者 沈云方 谢海霞 蒋雪嫣 胡钧 《浙江中医杂志》 2022年第11期784-787,共4页

目的:探讨强筋合剂对骨质疏松的治疗作用及碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)、骨钙素(Osteocalcin)和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx-2)表达的影响。方法:以去卵巢SD大鼠作为模型,随机分为假手术组... 目的:探讨强筋合剂对骨质疏松的治疗作用及碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)、骨钙素(Osteocalcin)和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx-2)表达的影响。方法:以去卵巢SD大鼠作为模型,随机分为假手术组、模型组、低剂量组和高剂量组,每组10只。假手术组和模型组给予生理盐水,低剂量组和高剂量组分别给予10mL/(kg·d)、20mL/(kg·d)强筋合剂,1日2次。给药3个月后,检测各组大鼠的骨组织形态,磷离子(Phosphorusion,P^(+)),钙离子(Calciumion,Ca^(2+)),镁离子(Magnesiumion,Mg^(2+))浓度、骨密度、骨结构、ALP、Osteocalcin、Runx-2表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清P^(+)含量显著上升,Ca^(2+)与Mg^(2+)含量显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组和高剂量组大鼠血清P^(+)含量明显降低,Ca^(2+)与Mg^(2+)含量明显增加,有统计学差异(P<0.05),且呈剂量依赖性。大鼠HE染色显示与假手术组比较,模型组大鼠骨小梁局灶性坏死,排列稀疏、不整齐,部分断裂,骨髓腔内造血细胞数量减少,形态改变;与模型组比较,低剂量组和高剂量组大鼠骨小梁数量减少不明显,排列较规则,连续性、完整性较好,骨形态学结构变化具有统计学差异(P<0.05)。与假手术组比较,模型组骨小梁密度(Tb.Th)、骨小梁相对体积(BV/TV)和骨密度(BMD)指标明显降低,有显著性差异(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组和高剂量组Tb.Th、BV/TV和BMD明显升高,有显著性差异(P<0.05),且呈剂量依赖性。RT-PCR检测显示与假手术组比较,模型组的ALP、Osteocalcin、Runx-2 mRNA相对表达量均显著下调(P<0.05);与模型组比较,低剂量组和高剂量组ALP、Osteocalcin、Runx-2 mRNA表达水平均显著上调(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:强筋合剂能通过上调ALP、Osteocalcin,Runx-2表达,达到治疗大鼠骨质疏松,改善骨结构,为临床治疗骨质疏松提供新思路。 展开更多

关键词 强筋合剂 骨质疏松 血清碱性磷酸酶 骨钙素 runx-2 大鼠

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EZH2通过调控RUNX1影响骨髓增生异常综合征免疫逃逸与免疫细胞活性

7

作者 郑转珍 侯天赐 +2 位作者 王艳博 王文静 冯梦婧 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第6期796-803,共8页

目的 探讨zeste基因同源物增强子2(EZH2)通过调控RUNX家族转录因子1(RUNX1)对骨髓增生异常综合征(MDS)免疫逃逸和免疫细胞活性的影响。方法 收集2024年8月~2025年2月山西医科大学第二医院15例MDS新鲜骨髓标本作为实验(MDS)组,同时纳入1... 目的 探讨zeste基因同源物增强子2(EZH2)通过调控RUNX家族转录因子1(RUNX1)对骨髓增生异常综合征(MDS)免疫逃逸和免疫细胞活性的影响。方法 收集2024年8月~2025年2月山西医科大学第二医院15例MDS新鲜骨髓标本作为实验(MDS)组,同时纳入10例健康人新鲜骨髓标本作为对照(Con)组。定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测两组骨髓标本中EZH2和RUNX1的表达水平。采用随机数字表法将120只JUN小鼠分为模型(Model)组60只、EZH2基因敲低(KDEZH2)组60只,同时以60只复杂遗传性CC小鼠作为对照(Con)组。蛋白免疫印迹(Western blot)检测各组小鼠骨髓标本中EZH2和RUNX1的表达水平;CCK-8法检测各组小鼠骨髓标本中MDS原始细胞增殖活性;免疫细胞占淋巴细胞百分比方法比较各组小鼠T细胞亚群、B细胞和NK细胞的差异;流式细胞术比较各组T细胞亚群、MDS原始髓细胞和调节性T细胞(Treg)中程序性死亡受体1(PD-1)及其配体(PD-L1)的表达情况;细胞微球芯片技术(CBA)检测外周血清1型辅助性T细胞(Th1细胞)/2型辅助性T细胞(Th2细胞)/17型辅助性T细胞(Th17细胞)/转化生长因子-β(TGF-β)细胞因子水平。结果 qRT-PCR检测结果显示,与Con组人骨髓标本比较,MDS组人骨髓标本EZH2表达水平升高,RUNX1表达水平降低(均P<0.05)。Western blot检测结果显示,与Con组小鼠骨髓标本比较,Model组小鼠骨髓标本EZH2表达水平升高,RUNX1表达水平降低(均P<0.05);与Model组小鼠骨髓标本比较,KDEZH2组骨髓标本EZH2表达水平降低,RUNX1表达水平升高(均P<0.05)。CCK-8法检测结果显示,与Con组小鼠比较,Model组小鼠骨髓中MDS原始细胞增殖活性增强(P<0.05),与Model组小鼠比较,KDEZH2组小鼠骨髓中MDS原始细胞增殖活性减弱(P<0.05);免疫细胞占淋巴细胞百分比方法检测结果显示,与Con组小鼠比较,Model组小鼠T细胞亚群、B细胞和NK细胞计数明显减少(均P<0.05),与Model组小鼠比较,KDEZH2组小鼠T细胞亚群、B细胞和NK细胞计数明显升高(均P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,与Con组小鼠比较,Model组小鼠T细胞亚群、MDS原始细胞和Treg细胞PD-1/PD-L1的表达升高(均P<0.05),与Model组小鼠比较,KDEZH2组小鼠细胞亚群、MDS原始细胞和Treg细胞PD-1/PD-L1的表达降低(均P<0.05)。外周血清细胞因子检测结果显示,与Con组小鼠比较,Model组小鼠Th1、Th17细胞因子水平显著降低而Th2和TGF-β分泌显著升高(均P<0.05),与Model组小鼠比较,EZH2 KD组Th1、Th17细胞因子水平显著升高而Th2和TGF-β分泌显著降低(均P<0.05)。结论EZH2可能通过抑制RUNX1表达调控肿瘤细胞处于免疫抑制的微环境,促进肿瘤细胞免疫逃逸,有利于MDS的进展。 展开更多

关键词 zeste同源物增强子2 RUNX家族转录因子1 骨髓增生异常综合征 免疫逃逸 免疫细胞活性

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低氧条件下M2型巨噬细胞上清液促进骨髓间充质干细胞成骨分化

8

作者 吕梦姣 白生宾 +5 位作者 田晓寒 廖礼彬 阿不都热西提·库提彼丁 王梦慈 柴冰茹 杨毅 《西部医学》 2025年第8期1115-1119,共5页

目的探究低氧条件下M2型巨噬细胞上清液对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法培养鼠源性巨噬细胞系RAW264.7与鼠骨髓间充质干细胞系CP-M131,培养至第3代,应用IL-4诱导巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞,常氧37℃5%CO_(2)和低氧37℃5%N2条... 目的探究低氧条件下M2型巨噬细胞上清液对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法培养鼠源性巨噬细胞系RAW264.7与鼠骨髓间充质干细胞系CP-M131,培养至第3代,应用IL-4诱导巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞,常氧37℃5%CO_(2)和低氧37℃5%N2条件下分别培养巨噬细胞,24 h后提取M2型巨噬细胞细胞上清液。骨髓间充质干细胞(CP-M131)分别与常氧M2型巨噬细胞上清和低氧M2型巨噬细胞上清按2∶1比例共孵育,记为常氧组和低氧组,共培养72 h;实时荧光定量(qRT-PCR)检测骨髓间充质干细胞中成骨指标ALP、BMP-2的mRNA表达情况;蛋白免疫印迹(Western blot)检测骨髓间充质干细胞中成骨指标ALP、BMP-2、RUNX的蛋白表达情况;茜素红染色和碱性磷酸酶染色检测骨髓间充质干细胞中钙结节表达情况。结果IL-4可以诱导巨噬细胞向M2型巨噬细胞分化(P<0.05);qRT-PCR检测显示,与常氧组相比,低氧组成骨指标ALP、BMP-2的mRNA有上调趋势(P<0.05)。Western blot检测结果显示,与常氧组相比,低氧组成骨指标ALP、BMP-2、RUNX的蛋白表达水平有上调趋势(P<0.05);茜素红染色和碱性磷酸酶染色结果显示,低氧组可以促进骨髓间充质干细胞成骨分化(P<0.05)。结论低氧条件下M2型巨噬细胞上清液能够促进骨髓间充质干细胞成骨分化。 展开更多

关键词 低氧 M2型巨噬细胞 骨髓间充质干细胞 ALP BMP-2 RUNX

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不同浓度rhBMP-2对MC3T3-E1细胞增殖、ALP活性及成骨分化的影响 被引量：9

9

作者 赵彦涛 李忠海 +3 位作者 胡先同 韩丽伟 白玉龙 李矛 《中国骨与关节损伤杂志》 2016年第3期281-284,共4页

目的研究不同浓度rh BMP-2对MC3T3-E1细胞增殖、ALP活性及成骨分化的影响规律。方法 MC3T3-E1细胞接种到培养板24 h后,试验组分别加入1.25、2.5、5、10μg/ml的rh BMP-2进行药物干预,对照组加入全培。试验组应用CCK-8法检测细胞增殖活性... 目的研究不同浓度rh BMP-2对MC3T3-E1细胞增殖、ALP活性及成骨分化的影响规律。方法 MC3T3-E1细胞接种到培养板24 h后,试验组分别加入1.25、2.5、5、10μg/ml的rh BMP-2进行药物干预,对照组加入全培。试验组应用CCK-8法检测细胞增殖活性,PNPP法检测细胞ALP活性,RT-PCR法检测成骨标志蛋白m RNA的表达情况。结果rh BMP-2浓度为2.5μg/ml时开始促进细胞的增殖(P<0.05),rh BMP-2浓度为5μg/ml时促进作用达到峰值(P<0.05)。rh BMP-2浓度为2.5μg/ml时ALP活性显著提高(P<0.05);rh BMP-2浓度为5μg/ml和10μg/ml时,ALP活性较浓度为2.5μg/ml时继续升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。ALP、COL1-α以及转录因子RUNX-2的m RNA含量均在加入浓度5μg/ml rh BMP-2后明显升高(P<0.05),继续加大rh BMP-2浓度,m RNA含量没有明显增加。结论在研究范围内,rh BMP-2对MC3T3-E1的影响呈浓度依赖性。 展开更多

关键词 RHBMP-2 MC3T3-E1细胞 碱性磷酸酶 COL1-a runx-2 CCK-8

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miR-133a对骨形态发生蛋白2诱导的鼠前成骨细胞分化的影响及其作用机制 被引量：3

10

作者 丁永利 陈星 +2 位作者 赵明明 蔡一强 姜勇 《中医正骨》 2014年第7期3-7,共5页

目的:探究miR-133a对骨形态发生蛋白2诱导的鼠前成骨细胞分化的影响及其作用机制。方法:检测骨形态发生蛋白2诱导的鼠前成骨细胞分化过程中miR-133a水平、碱性磷酸酶活性、Runx-2蛋白水平及Osterix蛋白水平,检测转染miR-133a后鼠前成骨... 目的:探究miR-133a对骨形态发生蛋白2诱导的鼠前成骨细胞分化的影响及其作用机制。方法:检测骨形态发生蛋白2诱导的鼠前成骨细胞分化过程中miR-133a水平、碱性磷酸酶活性、Runx-2蛋白水平及Osterix蛋白水平,检测转染miR-133a后鼠前成骨细胞分化过程中碱性磷酸酶活性、Runx-2 mRNA水平、Runx-2蛋白水平、Osterix mRNA水平和Osterix蛋白水平。miR-133a测定采用qRT-PCR法,Runx-2和Osterix蛋白水平测定采用Western-blot法,Runx-2和Osterix mRNA水平测定采用RTPCR法,碱性磷酸酶活性检测采用碱性磷酸酶检测试剂盒。采用HEK293细胞进行miR-133a靶基因验证实验,细胞中荧光值的检测采用荧光素酶报告基因检测系统。结果:miR-133a在骨形态发生蛋白2诱导的MC3T3-E1细胞分化过程中表达显著下调,碱性磷酸酶的活性则显著增高。转染miR-133a后,细胞中碱性磷酸酶活性受到明显抑制,Runx-2蛋白水平显著下调、Runx-2mRNA水平未发生明显变化,Osterix的mRNA和蛋白水平均明显下调。荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-133a可靶向作用于Runx-2 mRNA的3’-UTR区。结论:miR-133a通过抑制Runx-2的蛋白表达进而抑制骨形态发生蛋白2诱导的鼠前成骨细胞分化过程。 展开更多

关键词 微RNAS 成骨细胞 骨形态发生蛋白质2 miR-133a runx-2 OSTERIX 碱性磷酸酶 动物实验

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Runx 2在第三期牙本质形成过程中的分布及其意义 被引量：5

11

作者 文军 陆群 倪龙兴 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2008年第5期251-254,共4页

目的:研究Runx 2在牙髓炎症修复中的作用,探讨活髓保存的新途径。方法:建立大鼠第三期牙本质形成动物模型,用免疫组织化学染色方法研究Runx 2的表达变化及其意义。结果:Runx 2于牙髓损伤早期阶段表达于穿髓点下方细胞群;修复性牙本质形... 目的:研究Runx 2在牙髓炎症修复中的作用,探讨活髓保存的新途径。方法:建立大鼠第三期牙本质形成动物模型,用免疫组织化学染色方法研究Runx 2的表达变化及其意义。结果:Runx 2于牙髓损伤早期阶段表达于穿髓点下方细胞群;修复性牙本质形成初期于牙髓根尖部强表达,修复性牙本质形成中期表达减弱,而修复性牙本质形成末期表达为阴性。结论:Runx 2在牙髓损伤修复过程中的表达具有明显的时空特异性。 展开更多

关键词 Rumx2 牙髓炎 牙髓干细胞 第三期牙本质 反应性牙本质 修复性牙本质

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Runx 2在牙釉质形成中的作用研究 被引量：1

12

作者 何永云 梁广智 +2 位作者 刘晓影 孙岩 高玉光 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2011年第2期62-66,共5页

目的:研究小鼠成釉细胞中Runx 2对釉成熟蛋白(Amelotin,AMTN)、成釉蛋白(Ameloblas-tin,AMBN)、牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast-asssociated protein,ODAM)基因表达的调控作用,为研究Runx 2在牙釉质形成中的作用奠定基础。... 目的:研究小鼠成釉细胞中Runx 2对釉成熟蛋白(Amelotin,AMTN)、成釉蛋白(Ameloblas-tin,AMBN)、牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast-asssociated protein,ODAM)基因表达的调控作用,为研究Runx 2在牙釉质形成中的作用奠定基础。方法:通过RT-PCR法从小鼠成釉细胞中克隆得到Runx 2全长基因,测序正确后将其亚克隆至pcDNA3.1-hisA载体中;构建针对小鼠Runx 2的siRNA表达框架,将反应质粒pcdna-3.1-HisA-Runx 2及针对Runx 2的特异性小分子干扰RNA(siRNA)分别转染小鼠成釉细胞,用RT-PCR方法检测Runx 2,AMTN,AMBN以及ODAM的mRNA水平。结果:转染的小分子干扰RNA(siRNA)对Runx 2mRNA的表达有显著性抑制作用,Runx 2基因沉默可显著抑制AMTN和AMBN的mRNA表达水平;Runx 2基因过表达可显著上调AMTN和AMBN的mRNA表达水平。Runx 2基因的表达变化对ODAM的mRNA表达水平则无显著性调控作用。结论:Runx 2通过调控AMTN和AMBN的表达水平,在牙釉质形成过程中发挥作用。 展开更多

关键词 核心结合因子 釉成熟蛋白 成釉蛋白 牙成釉细胞相关蛋白 RT-PCR

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异补骨脂素对体外培养骨髓间充质干细胞增殖与成骨性分化的研究 被引量：31

13

作者 明磊国 葛宝丰 +2 位作者 陈克明 马慧萍 翟远坤 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期2124-2128,共5页

目的:研究异补骨脂素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法:取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓贴壁培养法培养单核层细胞,培养于含10%FBS的DMEM-F12培养液中,3 d后首次换... 目的:研究异补骨脂素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法:取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓贴壁培养法培养单核层细胞,培养于含10%FBS的DMEM-F12培养液中,3 d后首次换液,9 d后成骨性诱导培养并用药物干预。异补骨脂素在培养基中终浓度分别为1×10-4,1×10-5,1×10-6,1×10-7 mol.L-1。增殖分析采用MTT法,于成骨性诱导培养第4,8,12,16天测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量,第15天进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取总RNA,Real-time RT-PCR法检测bFGF,IGF-1,Osterix与Runx-2等成骨性相关的基因表达情况。结果:异补骨脂素剂量依赖性抑制BMSCs增殖,但能促进其成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进骨钙素分泌、钙盐沉积量、增加钙化结节数量、提高bFGF,IGF-1,Osterix,Runx-2 mRNA表达水平。结论:终浓度为1×10-5 mol.L-1异补骨脂素能显著促进BMSCs的成骨性分化,证明异补骨脂素是中药补骨脂中抗骨质疏松的有效成分。 展开更多

关键词 骨髓基质干细胞 分化 增殖 异补骨脂素 bFGF IGF-1 OSTERIX runx-2

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蛇床子素对体外培养骨髓基质干细胞增殖与成骨性分化的影响 被引量：23

14

作者 明磊国 葛宝丰 +2 位作者 陈克明 马慧萍 翟远坤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1098-1103,共6页

目的研究蛇床子素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养单核层细胞,培养于含10%FBS的DMEM-F12培养液中,3d后首次换液,9d后传... 目的研究蛇床子素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养单核层细胞,培养于含10%FBS的DMEM-F12培养液中,3d后首次换液,9d后传代培养。培养基中蛇床子素终浓度分别为1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7mol·L-1。增殖分析采用MTT法,于成骨性诱导培养d4、8、12、16测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量,d15进行钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RTReal-Time PCR法检测bFGF、IGF-1、Osterix与Runx-2的基因表达情况。结果蛇床子素剂量依赖性抑制BMSCs增殖,但能明显促进其向成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进骨钙素分泌、钙盐沉积量、增加钙化结节数量、提高bFGF、IGF-1、Osterix和Runx-2的mRNA表达水平。结论终浓度为1×10-5mol·L-1蛇床子素能明显促进BMSCs的成骨性分化,证明蛇床子素是中药蛇床子抗骨质疏松的有效成分。 展开更多

关键词 骨髓基质干细胞 分化 增殖 蛇床子素 bFGF IGF-1 OSTERIX runx-2

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淫羊藿苷与染料木黄酮对体外培养成骨细胞增殖及矿化成熟影响的对比研究 被引量：18

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作者 明磊国 陈克明 +2 位作者 葛宝丰 马慧萍 周建 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第16期2240-2245,共6页

目的:对比研究淫羊藿苷(icariin,I)与染料木黄酮(genistein,G)对体外培养大鼠成骨细胞(rat calvarial osteo-blasts,ROB)增殖与分化成熟的影响及其药理活性的强弱。方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养于含10%FBS的ME... 目的:对比研究淫羊藿苷(icariin,I)与染料木黄酮(genistein,G)对体外培养大鼠成骨细胞(rat calvarial osteo-blasts,ROB)增殖与分化成熟的影响及其药理活性的强弱。方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,3 d后首次换液,铺满90%皿底后传代培养;I与G的作用终浓度为1×10-5 mol.L-1,增殖分析采用96孔板,MTT法分析;分化成熟分析采用24孔板,于成骨性诱导培养第3,6,9,12天分别测碱性磷酸酶(alkaline phospha-tase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素,第12天进行ALP组织化学染色、茜素红染色和钙化结节计数;于成骨性诱导培养0,6,12,24,48,72 h提取总RNA,Real-time RT-PCR法检测Runx-2,bFGF,IGF-Ⅰ,Osterix(OSX)等成骨性相关因子的表达情况。结果:终浓度为1×10-5 mol.L-1的I与G均不促进ROB的增殖,均能显著提高细胞ALP活性、增加钙含量、促进骨钙素分泌,并增加钙化结节数量;同时上调Runx-2,bFGF,IGF-Ⅰ和Osterix等成骨性相关因子的表达量;在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性明显强于G的活性。结论:1×10-5 mol.L-1的I与G均能促进ROB矿化成熟,均有抗骨质疏松的作用,但在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性显著强于G。 展开更多

关键词 成骨细胞 淫羊藿苷 染料木黄酮 骨钙素 碱性磷酸酶 runx-2 bFGF IGF-Ⅰ OSTERIX

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蛇床子素对体外培养成骨细胞成骨相关因子表达的影响 被引量：23

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作者 明磊国 王鸣刚 +3 位作者 陈克明 周建 韩桂秋 朱瑞清 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期53-56,共4页

目的:研究蛇床子素(Osthol)对体外培养大鼠成骨细胞(Rat calvarial osteoblasts,ROB)成骨相关因子表达的影响。方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,传代之后进行成骨性诱导培养并加药干预,蛇... 目的:研究蛇床子素(Osthol)对体外培养大鼠成骨细胞(Rat calvarial osteoblasts,ROB)成骨相关因子表达的影响。方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,传代之后进行成骨性诱导培养并加药干预,蛇床子素浓度为1×10-5mol/L,于成骨性诱导培养0、6、12、24、48和72小时提取总RNA,RT-Real Time PCR法检测Runx-2、bFGF、IGF-Ⅰ和Osterix(OSX)等成骨性相关因子的表达情况;第3、6、9、12天分别测钙盐沉积量和骨钙素分泌量。结果:1×10-5mol/L的蛇床子素能够显著提高ROB的Runx-2、bFGF、IGF-Ⅰ、Osterix基因的表达量,并促进骨钙素的分泌和钙盐沉积,从而增强细胞成骨性活动。结论:蛇床子素能促进ROB的矿化成熟并增强细胞成骨性活动,是促进骨修复愈合及抗骨质疏松的重要原因之一。 展开更多

关键词 蛇床子素 骨质疏松 骨钙素 胰岛素生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 runx-2 OSTERIX

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西地那非促进体外培养大鼠骨髓间充质干细胞的成骨性分化 被引量：4

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作者 翟远坤 陈克明 +2 位作者 李志锋 明磊国 马慧萍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1489-1494,共6页

目的研究西地那非对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(Rat bone marrow stromal stem cells,rBMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,贴壁筛选法培养rBMSCs,每3天换液1次,9d后传代培养。采用终浓度分别为1×10-4、... 目的研究西地那非对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(Rat bone marrow stromal stem cells,rBMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,贴壁筛选法培养rBMSCs,每3天换液1次,9d后传代培养。采用终浓度分别为1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7mol·L-1的西地那非进行药物干预,MTT法检测细胞增殖率,同时检测成骨性诱导培养后9d的碱性磷酸酶(ALP)活性,筛选出最佳浓度。以最佳药物浓度干预rBMSCs的成骨性分化,比较西地那非组和不加药的对照组之间的钙化结节数量及阳性克隆数(colonies stained positive for alkaline phosphatase,CFU-FALP);提取Total RNA,Real-Time PCR检测Runx-2与Osterix mRNA的表达情况;Western blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量。结果西地那非剂量依赖性抑制细胞的增殖,但可强烈促进成骨性分化,最佳药物浓度为1×10-5mol·L-1。该浓度下的西地那非可明显增加钙化结节和CFU-FALP数量,促进与成骨相关的转录因子Runx-2与Osterix mRNA的表达,同时也可增强Ⅰ型胶原蛋白的分泌。结论浓度为1×10-5mol·L-1的西地那非可明显促进rBMSCs的成骨性分化,提示西地那非在具备其他药理作用的同时,也有较强的抗骨质疏松活性,具备开发为抗骨质疏松药物的潜力。 展开更多

关键词 西地那非 骨髓间充质干细胞 增殖 成骨性分化 碱性磷酸酶 runx-2 OSTERIX Ⅰ型胶原

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8-异戊烯基柑橘素促进体外骨髓基质干细胞成骨性分化的研究 被引量：3

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作者 明磊国 陈克明 +2 位作者 葛宝丰 马慧萍 翟远坤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期107-113,共7页

目的研究8-异戊烯基柑橘素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养于含体积分数为10%FBS的DMEM-F12培养液中。以碱性磷酸酶(alkali... 目的研究8-异戊烯基柑橘素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养于含体积分数为10%FBS的DMEM-F12培养液中。以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为指标,96孔板梯度筛选作用最佳浓度。增殖分析采用MTT法。以1×10-6 mol.L-1的最佳浓度作用并成骨性诱导(1×10-7mmol.L-1地塞米松、10 mmol.L-1β-甘油磷酸钠和50 mg.L-1抗坏血酸)培养的d 4、8、12、16测ALP活性、钙盐沉积量,d 16进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RT Real-Time PCR法检测bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的基因表达情况。结果 8-异戊烯基柑橘素不能促进BMSCs增殖,但8-异戊烯基柑橘素在1×10-6 mol.L-1时能促进其向成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进钙盐沉积、增加钙化结节数量、提高bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的mRNA表达水平。结论 8-异戊烯基柑橘素可诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,作为促进骨修复和抗骨质疏松的有效成分具有较大的药用价值。 展开更多

关键词 骨髓基质干细胞 分化 8-异戊烯基柑橘素 碱性磷酸酶 碱性成纤维细胞生长因子 胰岛素样生长因子 骨形态发生蛋白 Ⅰ型胶原 OSTERIX runx-2

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黄芪总黄酮对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究 被引量：3

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作者 孔祥鹤 牛银波 +4 位作者 武祥龙 翟远坤 潘亚磊 李晨睿 梅其炳 《化学与生物工程》 CAS 2012年第6期26-30,45,共6页

在大鼠颅骨原代成骨细胞中加入不同浓度的黄芪总黄酮(ATF),用MTT法检测细胞增殖,用碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原及骨钙素水平检测细胞分化,用茜素红染色法检测细胞矿化,用ELISA法和Western blot方法检测成骨细胞中骨形成蛋白(BMP-2)... 在大鼠颅骨原代成骨细胞中加入不同浓度的黄芪总黄酮(ATF),用MTT法检测细胞增殖,用碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原及骨钙素水平检测细胞分化,用茜素红染色法检测细胞矿化,用ELISA法和Western blot方法检测成骨细胞中骨形成蛋白(BMP-2)及核心结合因子(Runx-2)的表达。结果表明,ATF能剂量依赖性地促进大鼠原代成骨细胞的增殖、分化及矿化,同时上调成骨细胞中BMP-2和Runx-2蛋白的表达。提示ATF可能通过上调成骨细胞中BMP-2和Runx-2的表达来促进成骨细胞的成骨活性。 展开更多

关键词 黄芪总黄酮 大鼠原代成骨细胞 增殖 分化 矿化 BMP-2 runx-2

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