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RT-RAPD技术分析高温诱导双孢蘑菇相关基因片段 被引量:7
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作者 陈兰芬 宋思扬 +4 位作者 郑忠辉 苏文金 陈美元 廖健华 王泽生 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期103-107,共5页
应用RT RAPD技术 ,以 6bp随机引物反转录双孢蘑菇 (Agaricusbisporus) 0 2菌株常温培养和高温诱导菌丝体的总RNA ,10bp随机引物PCR扩增 ,得到几个高温诱导差异片段 ,对OPU13引物的差异片段 0 2U13克隆并测序 ,发现该片段可能编码tRNAVal... 应用RT RAPD技术 ,以 6bp随机引物反转录双孢蘑菇 (Agaricusbisporus) 0 2菌株常温培养和高温诱导菌丝体的总RNA ,10bp随机引物PCR扩增 ,得到几个高温诱导差异片段 ,对OPU13引物的差异片段 0 2U13克隆并测序 ,发现该片段可能编码tRNAVal(密码子GUC)基因 .推测GUC可能是稀有密码子 ,在某些耐温基因中出现频率较高 .识别该稀有密码子的tRNAVal在常温条件下不表达或表达量很少 ,而在高温诱导下引发一定的调控机制促使它们大量的合成 。 展开更多
关键词 双孢蘑菇 rt-rapd 耐温相关基因 tRNA^Val 食用菌 高温诱导 稀有密码子 调控机制
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剑麻核酸的高效提取及应用(英文) 被引量:4
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作者 王尉 周文钊 《热带作物学报》 CSCD 2008年第6期725-729,共5页
针对剑麻组织中多糖、多酚和次生物质含量高的特点,对其总RNA和基因组DNA提取进行研究。比较了改良SDS法、改良CTAB法提取总RNA和SDS法、CTAB法提取基因组DNA的效果,结果表明:改良CTAB法提取总RNA效果较佳,所得RNA OD_(260)/OD_(280)高... 针对剑麻组织中多糖、多酚和次生物质含量高的特点,对其总RNA和基因组DNA提取进行研究。比较了改良SDS法、改良CTAB法提取总RNA和SDS法、CTAB法提取基因组DNA的效果,结果表明:改良CTAB法提取总RNA效果较佳,所得RNA OD_(260)/OD_(280)高于1.8,OD_(260)/OD_(23)O大于2.0,而CTAB法提取基因组DNA纯度和完整性较好。基于RNA和DNA水平,分别对剑麻的苯丙氨酸解氨酶基因(PAL)RT-PCR和RAPD反应体系进行优化,均得到理想条带。此方法提取剑麻的核酸可运用于后续分子生物学研究,为其它材料核酸的分离提供参考依据。 展开更多
关键词 剑麻 核酸提取 RT—PCR RAPD
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DNA分子标记技术在环境污染物检测中的应用 被引量:3
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作者 解莉婧 刘宛 +2 位作者 李淑芹 李培军 陈静 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第6期842-846,共5页
DNA分子标记是DNA分子碱基序列变异的直接反映,利用分子标记物对污染物造成的生物体DNA损伤的检测和定量分析研究是可行的方法。文章主要综述了DNA加合物技术、随机扩增DNA多态性技术(RAPD)、扩增片段长度多态性技术(AFLP)、单细胞凝胶... DNA分子标记是DNA分子碱基序列变异的直接反映,利用分子标记物对污染物造成的生物体DNA损伤的检测和定量分析研究是可行的方法。文章主要综述了DNA加合物技术、随机扩增DNA多态性技术(RAPD)、扩增片段长度多态性技术(AFLP)、单细胞凝胶电泳技术(SCGE)及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的原理及其在环境污染物检测中的应用。该方法具有快速、简便、特异性强的特点,在环境污染物早期诊断和评价方面具有重要意义,已广泛应用于遗传毒理学研究。 展开更多
关键词 分子标记物 DNA加合物 RAPD技术 AFLP技术 单细胞凝胶电泳 RT-PCR
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基于PCR技术的松材线虫分子检测技术研究进展 被引量:1
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作者 姬党成 金奕亨 熊忠平 《湖北林业科技》 2024年第3期67-73,共7页
松材线虫是世界性检疫对象,并对我国林业造成了严重的危害。由于线虫个体较小且鉴定特征单一,利用传统的形态学鉴定较为困难,因此客观的分子生物学鉴定方法显得尤为重要。本研究总结了近些年主要的松材线虫PCR检测技术及其与拟松材线虫... 松材线虫是世界性检疫对象,并对我国林业造成了严重的危害。由于线虫个体较小且鉴定特征单一,利用传统的形态学鉴定较为困难,因此客观的分子生物学鉴定方法显得尤为重要。本研究总结了近些年主要的松材线虫PCR检测技术及其与拟松材线虫的区别,阐述了常规PCR技术、PCR-PFLPs检测技术、RAPD和SCAR分子标记技术以及荧光PCR技术等各类检测技术的特异性序列、片段大小和应用场景,并探讨了各检测技术的优缺点,为后期研究提供参考。 展开更多
关键词 松材线虫 PCR PFLP RAPD SCAR RT-PCR
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Gene Expression Profiling during Wilting in Chickpea Caused by <i>Fusarium oxysporum</i>F. sp. <i>Ciceri</i>
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作者 Gayatri S. Gurjar Ashok P. Giri Vidya S. Gupta 《American Journal of Plant Sciences》 2012年第2期190-201,共12页
Fusarium oxysporum f. sp. ciceri (Foc), one of the most important fungal pathogen of chickpea, is a constant threat to this crop plant. In the present study gene expression analysis of chickpea roots during Foc infect... Fusarium oxysporum f. sp. ciceri (Foc), one of the most important fungal pathogen of chickpea, is a constant threat to this crop plant. In the present study gene expression analysis of chickpea roots during Foc infection was performed using various approaches. cDNAs derived from total mRNA during infection process of susceptible (JG62)and resistant (Digvijay) cultivars, were amplified using random oligonucleotides. Sequence characterization of differentially expressed transcripts revealed their homology with many plant genes essential for various metabolic functions including defense. Further, expression patterns of specific candidate gene transcripts were analyzed in the Foc inoculated and uninoculated resistant and susceptible chickpea cultivars, on day 6 of infection. Semiquantitative RT-PCR analysis of defense related genes was performed using gene specific oligonucleotides in resistant and susceptible chickpea cultivars. The expression of fungal pathogenesis related genes and their race specific response was determined throughout the course of chickpea-Foc interaction. Temporal expression and race specific response of plant defense related and fungal virulence genes were studied in the resistant and susceptible cultivars of chickpea inoculated with three races of Foc highlighting the host-pathogen interactions. Few genes, involved in chickpea defense against Fusarium wilt which were not reported previously were unveiled in this study. 展开更多
关键词 CICER Arietinum Fusarium OXYSPORUM Cdna-RAPD SEMI-QUANTITATIVE RT-PCR
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