期刊文献+
共找到19篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
高致病性猪繁殖与呼吸综合征病RT-PCR快速鉴别诊断方法的建立与临床应用 被引量:18
1
作者 刘忠华 余兴龙 +7 位作者 李润成 黄泽彬 廖立珊 白霞 李晶 向卫军 汪镇南 丁建 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1268-1272,共5页
根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因的缺失信息,设计了3条特异性引物,以含高致病性PRRSVNsp2基因的质粒pMDNSP2及普通PRRSVVR2332株RNA为模板,建立了快速诊断高致病性PRRSVRT-PCR方法。通过对临床组织病料的总RNA进行... 根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因的缺失信息,设计了3条特异性引物,以含高致病性PRRSVNsp2基因的质粒pMDNSP2及普通PRRSVVR2332株RNA为模板,建立了快速诊断高致病性PRRSVRT-PCR方法。通过对临床组织病料的总RNA进行不同稀释倍数检测,结果表明该方法能从0.265pg的总RNA中检测到PRRSV的基因,说明敏感性高。用该方法对猪瘟病毒(CSFV)、Ⅱ型圆环病毒(PCV-2)、伪狂犬病病毒(PRV)、链球菌(Streptococcus)、副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis)和大肠杆菌(Escherichiacoli)同条件检测,结果都为阴性。进一步对36份疑似高致病性PRRSV临床组织病料细胞培养物、2株PRRSV商品活疫苗以及52个猪场所送检的184份临床样品进行了检测应用,结果36份疑似高致病性PRRSV临床组织病料的细胞培养物有5份样品为阳性且都为高致病性PRRSV,2株PRRSV商品活疫苗为普通PRRSV,52个猪场中有42个猪场(123份样品)呈阳性,其中只有1份为普通PRRSV。实验表明该方法能够准确地鉴别诊断高致病性PRRSV和普通PRRSV,且具有快速、敏感和特异的特点,具有临床实用性。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病 rt-pc 鉴别诊断
在线阅读 下载PDF
应用多重RT-PCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒 被引量:8
2
作者 王洪星 张雨良 +5 位作者 罗志文 杨文君 龚殿 孙玉娟 张树珍 刘志昕 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期128-131,共4页
建立了多重RT-PCR同时检测甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,ScYLV)和高粱花叶病毒病毒(Sorghummosaic virus,SrMV)的技术体系,该体系可有效地对甘蔗田间植株和试管苗进行检测。根据引物之间的互补性及引物的Tm值筛选多重PCR... 建立了多重RT-PCR同时检测甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,ScYLV)和高粱花叶病毒病毒(Sorghummosaic virus,SrMV)的技术体系,该体系可有效地对甘蔗田间植株和试管苗进行检测。根据引物之间的互补性及引物的Tm值筛选多重PCR引物。确定适宜的PCR缓冲液的浓度为1×,退火温度为53℃,延伸温度为72℃。 展开更多
关键词 多重rt-pcR 病毒检测 甘蔗
在线阅读 下载PDF
疣粒野生稻抗白叶枯病相关基因ME281半定量RT-PCR分析 被引量:3
3
作者 吕广磊 付坚 +5 位作者 和志娇 白现广 蔺忠龙 黄兴奇 杨和生 程在全 《西南农业学报》 CSCD 2008年第5期1289-1293,共5页
以从疣粒野生稻受白叶枯病菌诱导所建的差减文库中筛选出的一个具有CC-NBS-LRR抗病结构域的基因(克隆号为ME281),用半定量RT-PCR法,以肌动蛋白(β-actin)基因为内参,研究疣粒野生稻抗白叶枯病相关基因ME281基因mRNA的表达水平。通过对PC... 以从疣粒野生稻受白叶枯病菌诱导所建的差减文库中筛选出的一个具有CC-NBS-LRR抗病结构域的基因(克隆号为ME281),用半定量RT-PCR法,以肌动蛋白(β-actin)基因为内参,研究疣粒野生稻抗白叶枯病相关基因ME281基因mRNA的表达水平。通过对PCR体系中循环次数及Mg2+浓度的优化,最终建立了一个稳定、方便的半定量RT-PCR体系。通过ME281基因与β-actin基因PCR产物的灰度之比,确定ME281为诱导性表达,并进一步推测其为疣粒野生稻抗白叶枯病相关基因,甚至为抗病基因。 展开更多
关键词 半定量rt-pcR ME281基因 疣粒野生稻 诱导性表达
在线阅读 下载PDF
应用内含子法构建PC基因mRNA竞争RT-PCR内参照 被引量:4
4
作者 徐闯 夏成 +2 位作者 刘国文 王哲 姜玉富 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1056-1059,共4页
运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少1个81bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过1对引物,进行1次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照。为应用逆转录-聚合酶链... 运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少1个81bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过1对引物,进行1次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照。为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础。 展开更多
关键词 内含子法 PC基因 MRNA 竞争模板 rt-pcR 内参照 丙酮酸羟化酶
在线阅读 下载PDF
番茄环斑病毒的普通RT-PCR和巢式PCR检测方法 被引量:4
5
作者 杨翠云 于翠 +1 位作者 沈禹飞 代光辉 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2005年第4期396-400,共5页
根据番茄环斑病毒(ToRSV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计了2对引物(引物对I和II),利用RT-PCR分别扩增出预期大小的800bp和580bp的条带,其中引物对II扩增效率较高、特异性较好。以引物对I和II进行2轮PCR扩增,建立了巢式PCR检测方法,其... 根据番茄环斑病毒(ToRSV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计了2对引物(引物对I和II),利用RT-PCR分别扩增出预期大小的800bp和580bp的条带,其中引物对II扩增效率较高、特异性较好。以引物对I和II进行2轮PCR扩增,建立了巢式PCR检测方法,其灵敏度比普通RT-PCR提高100~200倍。序列测定和分析表明所测定的序列为ToRSVCP基因的部分序列,在系统关系树上与ToRSV的其他分离物形成一簇,亲缘关系很近。 展开更多
关键词 番茄环斑病毒 RT—PCR 巢式PCR 检测方法
在线阅读 下载PDF
pSG5-Cbfa1转染兔皮肤成纤维细胞及其瞬时表达 被引量:1
6
作者 肖德常 杨庆铭 +1 位作者 邓廉夫 张伟 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期502-505,共4页
目的 探讨外源性小鼠Cbfa1基因在兔皮肤成纤维细胞中获得瞬时表达的可行性。方法 在阳离子脂质体介导下 ,将含外源性小鼠Cbfa1基因的 pSG5 Cbfa1真核表达质粒导入原代培养的第 2代兔皮肤成纤维细胞内。采用RT PCR及Western Blot法检... 目的 探讨外源性小鼠Cbfa1基因在兔皮肤成纤维细胞中获得瞬时表达的可行性。方法 在阳离子脂质体介导下 ,将含外源性小鼠Cbfa1基因的 pSG5 Cbfa1真核表达质粒导入原代培养的第 2代兔皮肤成纤维细胞内。采用RT PCR及Western Blot法检测Cbfa1基因在兔皮肤成纤维细胞内的瞬时表达。同时采用RT PCR法检测细胞内骨钙素及碱性磷酸酶基因的表达情况。结果 转染pSG5 Cbfa1真核表达质粒的兔皮肤成纤维细胞内有大量小鼠Cbfa1mRNA转录及蛋白瞬时表达 ,同时诱导骨钙素mRNA及碱性磷酸酶mRNA大量表达。结论 在阳离子脂质体介导下 ,小鼠Cbfa1基因能够导入兔皮肤成纤维细胞内并获得瞬时表达 。 展开更多
关键词 pSG5-Cbfal转染 皮肤成纤维细胞 瞬时表达 WESTERN-BLOT法 rt-pc
暂未订购
薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用 被引量:13
7
作者 崔涛 高晶 +5 位作者 曾勇 李薇 伊秀林 司端运 刘昌孝 李大鹏 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第21期4460-4464,共5页
目的探讨薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法建立人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤模型,以2、6 m L/kg剂量的薏苡仁油连续ig给药26 d,绘制肿瘤生长曲线,实验结束后摘除肿瘤组织,称质量,计算抑瘤率,并采用紫外-可见分光光度法测... 目的探讨薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法建立人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤模型,以2、6 m L/kg剂量的薏苡仁油连续ig给药26 d,绘制肿瘤生长曲线,实验结束后摘除肿瘤组织,称质量,计算抑瘤率,并采用紫外-可见分光光度法测定肿瘤组织中脂肪酸合成酶(FAS)活性。体外培养人前列腺癌PC-3细胞,应用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR法测定各组FAS m RNA的相对表达量。结果薏苡仁油6 m L/kg组抑瘤率为43.9%,肿瘤组织中FAS活性与模型组比较下降44.7%(P<0.05)。薏苡仁油20μL/m L水平上的FAS m RNA表达明显下降(P<0.05)。结论薏苡仁油对人前列腺癌PC-3细胞的荷瘤裸鼠模型有明显的抑瘤作用,该作用可能与下调FAS m RNA的表达和降低FAS的活性有关。 展开更多
关键词 薏苡仁油 人前列腺癌 PC-3细胞 脂肪酸合成酶 rt-pcR
原文传递
Tropic1808在PC12细胞中的表达 被引量:2
8
作者 刘梅 张琦 +1 位作者 刘炎 丁斐 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期372-375,共4页
目的构建稳定表达tropic1808基因的PC12细胞株,并通过观察稳定株中高分子量神经丝蛋白(NF-H)的表达以初步观察该基因的作用。方法构建重组真核表达载体pcDNA-HA-tropic1808,转染PC12细胞,经G418筛选、Westernblot鉴定。采用RT-PCR,实时P... 目的构建稳定表达tropic1808基因的PC12细胞株,并通过观察稳定株中高分子量神经丝蛋白(NF-H)的表达以初步观察该基因的作用。方法构建重组真核表达载体pcDNA-HA-tropic1808,转染PC12细胞,经G418筛选、Westernblot鉴定。采用RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法观察tropic1808稳定株中NF-H的表达。结果Westernblot检测表明,tropic1808基因稳定表达,RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法均观察到NF-H在tropic1808稳定株中的表达高于空载体对照。结论Tropic1808基因可以在PC12稳定表达且NF-H在tropic1808稳定株中表达上升。 展开更多
关键词 Tropicl808 PCI2 真核表达 NF-H WESTERN BLOT rt-pcR 实时PCR
原文传递
MEKKl与胰腺癌恶性程度的相关性研究
9
作者 苏富琴 陈晓光 《中国药理通讯》 2007年第3期10-11,共2页
目的:研究人不同类型胰腺癌培养细胞系以及其他肿瘤细胞系中MEKKl的表达水平与其增殖、运动功能以及侵袭转移能力之间的关系,为寻找和建立MEKKl高表达细胞筛选模型和临床诊断奠定基础。方法:利用RT-PCR方法和Western-blot方法检测人... 目的:研究人不同类型胰腺癌培养细胞系以及其他肿瘤细胞系中MEKKl的表达水平与其增殖、运动功能以及侵袭转移能力之间的关系,为寻找和建立MEKKl高表达细胞筛选模型和临床诊断奠定基础。方法:利用RT-PCR方法和Western-blot方法检测人胰腺癌培养细胞系和其他肿瘤细胞系中MEKKl的mRNA和蛋白质表达水平。通过细胞划痕试验、改良MTT的细胞黏附实验、软琼脂集落生成实验以及细胞运动实验,观察MEKKl表达水平与细胞存活、增殖能力及侵袭转移能力的关系。结果:胰腺癌培养细胞系Bx-PC-3、SWl990、Copan-2中MEKKl的mRNA水平和蛋白质水平均高表达。MEKKl高表达细胞系的克隆形成、增殖、运动功能以及侵袭转移能力均增强。结论:胰腺癌细胞中MEKKl的表达水平与其恶性程度呈高度正相关。 展开更多
关键词 胰腺癌 高度正相关 MEKK1激酶 rt-pc方法 Western-blot方法
暂未订购
济宁地区无偿献血者人细小病毒B19感染的相关研究 被引量:7
10
作者 王志效 周贝贝 +1 位作者 张娜 黄海燕 《公共卫生与预防医学》 2015年第3期4-7,共4页
目的为了解济宁地区献血人群中人细小病毒B19(human parvovirus B19,简称HPV B19)感染情况,探讨血浆合并对其检出率的影响情况,降低临床输血风险提供一定依据。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR(RTPCR)法对采集的960份... 目的为了解济宁地区献血人群中人细小病毒B19(human parvovirus B19,简称HPV B19)感染情况,探讨血浆合并对其检出率的影响情况,降低临床输血风险提供一定依据。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR(RTPCR)法对采集的960份献血员血液样本进行单人份及随机8人份血浆合并样本进行HPV B19-Ig G、Ig M抗体及DNA检测。结果单人份血浆与随机8人份血浆合并样本HPV B19 Ig G抗体、Ig M抗体阳性率分别为36.15%、5.94%、35.83%、12.50%,抗体阳性标本中单人份及血浆合并样本DNA阳性率分别为0.83%、5.00%。其中Ig M抗体阳性组B19 DNA检出率明显高于Ig G阳性组。结论献血人群中存在较高的HPV B19感染率,血浆合并后Ig M抗体及DNA检出率较高,未提示其传播风险降低,应对儿童、老年人、孕妇等免疫功能低下者选择性输注B19-Ig G抗体滴度较高的血液制品。 展开更多
关键词 无偿献血者 人细小病毒B19 血浆合并 实时荧光定量PCR(rt-pcR)
原文传递
神经特异性转录因子DAT1基因的表达 被引量:3
11
作者 惠玲 蔡文琴 +1 位作者 吕同德 王玲 《生命科学研究》 CAS CSCD 2005年第1期38-42,共5页
采用生物信息学分析、细胞培养和RT-PCR等方法,以初步解DAT1基因在小鼠主要组织及神经系统相关肿瘤细胞中的表达.生物信息学的基因表达谱分析发现与DAT1同源的EST有100多条,大多数EST分布于胎脑、成年脑、脑肿瘤、肺及肺部的良性肿瘤等... 采用生物信息学分析、细胞培养和RT-PCR等方法,以初步解DAT1基因在小鼠主要组织及神经系统相关肿瘤细胞中的表达.生物信息学的基因表达谱分析发现与DAT1同源的EST有100多条,大多数EST分布于胎脑、成年脑、脑肿瘤、肺及肺部的良性肿瘤等组织.SAGE分析发现DAT1在脑及神经系统肿瘤组织中表达非常广泛;RT-PCR方法检测发现DAT1只在脑组织中特异表达,而其它组织如心脏、肺、肝脏、骨骼肌、肾脏、睾丸、卵巢等未见表达;DAT1在培养的正常星形胶质细胞C8中不表达,在胶质瘤、神经母细胞瘤等细胞株中有不同水平的表达.由于DAT1是一种LIM蛋白,而LIM蛋白在细胞的分化、发育调控和肿瘤形成中有重要作用,DAT1在脑及神经系统相关肿瘤中的较高表达提示,DAT1在神经系统中有重要功能,并可能与神经系统肿瘤的发生相关. 展开更多
关键词 DAT1 LIM基因表达 肿瘤 RT—PCR
在线阅读 下载PDF
新余市甲型H1N1流感病毒H275Y突变监测 被引量:4
12
作者 刘瑞弘 文奇 +3 位作者 付倩 毛尚根 龚甜 徐刚 《实验与检验医学》 CAS 2018年第4期472-474,491,共4页
目的分析2013年-2014年新余市甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)第275位氨基酸变异情况,掌握甲型H1N1流感病毒耐药特性。方法收集新余市流感监测哨点医院的流感样病例的咽拭子标本,采用狗肾传代细胞(MDCK)对标本进行病毒分离,随机选择15... 目的分析2013年-2014年新余市甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)第275位氨基酸变异情况,掌握甲型H1N1流感病毒耐药特性。方法收集新余市流感监测哨点医院的流感样病例的咽拭子标本,采用狗肾传代细胞(MDCK)对标本进行病毒分离,随机选择15株甲型H1N1流感病毒进行核酸提取,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒NA基因部分片段,应用限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)方法进行酶切分析。结果新余市15株甲型H1N1流感病毒中,仅有A/江西渝水/SWL1220/2014(H1)发生了H275Y突变,它具有Oseltamivir耐药性。结论新余市绝大多数甲型H1N1流感毒株对Oseltamivir敏感,但仍有必要持续监测和防范Oseltamivir耐药毒株的出现。 展开更多
关键词 甲型H1N1流感病毒 神经氨酸酶 H275Y突变 逆转录聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析方法
暂未订购
GnRH-A及其配伍对鲤鱼ZP3基因表达的影响 被引量:5
13
作者 宋艳 夏庆杰 +4 位作者 扬松沛 胡大芳 马世荣 张发强 闫乃红 《西南农业学报》 CSCD 2006年第1期149-151,共3页
运用逆转录实时荧光定量酶链反应(RT-FQ-PCR)技术,研究GnRH-A及其配伍对鱼卵成熟、受精相关基因ZP3的调控。结果显示:3种不同药物配伍分别使鲤鱼ZP3基因表达在给药处理后4、6和12 h达到峰值。提示:不同配伍药物对鱼卵成熟、受精产生影响... 运用逆转录实时荧光定量酶链反应(RT-FQ-PCR)技术,研究GnRH-A及其配伍对鱼卵成熟、受精相关基因ZP3的调控。结果显示:3种不同药物配伍分别使鲤鱼ZP3基因表达在给药处理后4、6和12 h达到峰值。提示:不同配伍药物对鱼卵成熟、受精产生影响。ZP3基因可作为促繁殖药筛选的重要指标。 展开更多
关键词 促繁殖药物 逆转录实时荧光定量酶链反应 鲤鱼ZP3基因表达
在线阅读 下载PDF
早期宫颈癌外周血MAGE_(A3)和hSTC_1 mRNA的检测及意义 被引量:3
14
作者 赵新玲 卢爱妮 廖予妹 《中国现代医生》 2009年第12期13-15,共3页
目的研究早期宫颈癌患者外周血中MAGE。和hSTC1mRNA的表达及临床意义。方法采用RT-PCR法检测60例ⅠA~ⅡA期宫颈癌患者及15例同期入院的排除其他恶性肿瘤的子宫肌瘤患者外周血中MAGEA3和hSTC,mRNA的表达,并分析其与临床病理因素之间... 目的研究早期宫颈癌患者外周血中MAGE。和hSTC1mRNA的表达及临床意义。方法采用RT-PCR法检测60例ⅠA~ⅡA期宫颈癌患者及15例同期入院的排除其他恶性肿瘤的子宫肌瘤患者外周血中MAGEA3和hSTC,mRNA的表达,并分析其与临床病理因素之间的关系。结果60例早期宫颈癌患者外周血中MAGEA3和hSTC1mRNA的阳性表达率分别为46.67%(28/60)和40%(24/60),子宫肿瘤均为0%。MAGEA3和hSTC1mRNA的单独阳性表达率和双阳性表达率除与淋巴结转移和脉管瘤栓显著相关外(P〈O.05),与宫颈癌的预后因素如年龄、分期、分化、组织类型、肿瘤大小均无关(P〉0.05),但随着肿瘤分期及肌层浸润深度的增加有逐步上升的趋势。结论MAGEA3和hSTC1可作为检测早期宫颈癌外周血微转移的生物学指标,但对预后的意义有待于进一步研究。 展开更多
关键词 宫颈癌 MAGEA3 MRNA hSTC1mRNA 外周血 RT—PCR
暂未订购
路易斯安那鸢尾LiPCS1基因克隆和表达分析
15
作者 田松青 朱旭东 +3 位作者 赵沿海 原海燕 顾春笋 黄苏珍 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1956-1963,共8页
通过对路易斯安那鸢尾转录组进行分析,获得路易斯安那鸢尾络合素合酶基因(LiPCS1)的中间片段,利用RACE技术分别克隆到其全长,并对该基因进行生物信息学分析。结果表明,该基因全长1 683bp,预测编码501aa,含有半胱氨酸(Cys)、组氨酸(His)... 通过对路易斯安那鸢尾转录组进行分析,获得路易斯安那鸢尾络合素合酶基因(LiPCS1)的中间片段,利用RACE技术分别克隆到其全长,并对该基因进行生物信息学分析。结果表明,该基因全长1 683bp,预测编码501aa,含有半胱氨酸(Cys)、组氨酸(His)和天冬氨酸(Asp)3个必需氨基酸活性位点和重金属离子传感器基序(C368 C369 RMTC373 VRC376),与猴面花等植物同源PCS的相似位点达91.6%。表达分析结果表明,LiPCS1基因在内花瓣表达量最高,与其他组织差异显著,雄蕊、叶和茎的表达量基本在同一水平,外花瓣、根和雌蕊表达较低,雌蕊最低;随着铅处理时间增加,LiPCS1基因表达量在根系和叶片中表现先升高后下降的趋势,在铅处理3h达到最大并且差异显著。 展开更多
关键词 路易斯安那鸢尾 PB胁迫 PCS 基因克隆 生物信息学分析 实时荧光定量PCR
在线阅读 下载PDF
Constructing Competitive Reverse Transcription Polymerize Chain Reaction Inter-Reference of PC mRNA by Intron Approach
16
作者 XUChuang XIACheng LIUGuo-wen WANGZhe JIANGYu-fu ZHANGNai-shen~ FUShi-xin 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2004年第7期548-552,共5页
Inter-reference of competitive reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)was constructed by intron method to detect the change of PC mRNA level in the pathway ofcarbohydrate metabolism. The experiment ba... Inter-reference of competitive reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)was constructed by intron method to detect the change of PC mRNA level in the pathway ofcarbohydrate metabolism. The experiment based on the principle that 81bp intron sequencewas deleted in PC mRNA compared with PC DNA sequence. The 466bp competitive DNA templaterecombinant plasmid of PC mRNA was successfully built by a pair of primer and was clonedonce, PC DNA and PC mRNA could be inter-referred each other. The intron approach used inthe experiment has broken through the traditional method of constructing competitivetemplate. 展开更多
关键词 PC Competitive template INTRON Quantitative rt-pcR CLONE
在线阅读 下载PDF
半巢式RT-Realtime PCR检测南芥菜花叶病毒 被引量:3
17
作者 粟智平 杨益娥 +3 位作者 邓丛良 李金庆 王颖 段效辉 《现代农业科技》 2015年第18期145-147,共3页
根据南芥菜花叶病毒(Ar MV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条Taq MAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测Ar MV的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR和Taq MAN探针检测技术。第二步半巢式-RT-Realtime ... 根据南芥菜花叶病毒(Ar MV)外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条Taq MAN荧光探针,建立了半巢式RT-Realtime PCR检测Ar MV的新方法。该方法有机地结合了巢式PCR和Taq MAN探针检测技术。第二步半巢式-RT-Realtime PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、Realtime PCR等方法高。结果表明:该方法检测灵敏度可达0.06 fg/μL植物总RNA。 展开更多
关键词 南芥菜花叶病毒(ArMV) 半巢式RT—ReMtimePCR 检测
在线阅读 下载PDF
强直性脊柱炎和类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中Toll样受体4基因的表达及临床意义 被引量:3
18
作者 杨再兴 梁艳 +3 位作者 郝婉莹 林志跃 赵文静 仲人前 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期938-941,共4页
目的探讨Toll样受体4(TLR4)mRNA在强直性脊柱炎(AS)、类风湿关节炎(RA)患者以及健康个体外周血单个核细胞(PBMC)中的表达差异及其临床意义。方法应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测2006年3月至10月第二军医大学附属长征医... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)mRNA在强直性脊柱炎(AS)、类风湿关节炎(RA)患者以及健康个体外周血单个核细胞(PBMC)中的表达差异及其临床意义。方法应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测2006年3月至10月第二军医大学附属长征医院60例AS患者、20例RA患者及30例健康对照PBMC中TLR4 mRNA的表达水平;应用ESR自动化分析仪和特定蛋白电泳仪分别测定红细胞沉降率(ESR)和血浆C-反应蛋白(CRP)。结果AS和RA患者PBMCTLR4 mRNA的表达水平明显高于对照组,但两疾病组之间差异并无显著性意义;人类白细胞抗原(HLA-B27)阳性和阴性AS患者均显著高于健康对照组,且HLA-B27阳性AS患者显著高于RA组,但两组AS患者以及HLA-B27阴性AS与RA患者之间,TLR4 mRNA差异无显著性意义;在HLA-B27阳性AS患者中,TLR4 mRNA的表达与ESR及CRP呈显著相关性,但在HLA-B27阴性AS患者中则无这种相关性。在RA患者中,TLR4 mRNA与CRP呈显著相关性。结论AS和RA患者PBMCTLR4 mRNA的表达均上调,AS患者上调与HLA-B27阳性与否无关,但HLA-B27阳性AS患者比RA上调更明显,且HLA-B27抗原影响AS患者TLR4 mRNA与ESR及CRP的相关性。TLR4的异常表达可能在AS和RA的发生和发展中起作用。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 强直性脊柱炎 类风湿关节炎 实时rt-pcR HLA-B27
暂未订购
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部