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题名一种标记cDNA芯片探针的新方法
被引量：6
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作者
范保星
张开泰
王升启
吴德昌
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机构
军事医学科学院放射医学研究所
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出处
《生物技术通讯》
CAS
2001年第4期254-256,共3页
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基金
国家重点基础研究发展规划 ( 973项目 )资助 (G19980 5 12 0 8)
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文摘
探讨mRNA长片段反转录PCR技术 (RT LDPCR)在cDNA芯片微量探针标记和信号放大中的应用。首先提取BEP2D细胞的总RNA ,然后用两种不同的方法进行标记 ,一种为RT LDPCR ,用荧光素Cy3 dCTP进行标记 ;另一种为传统的RNA反转录 ,用荧光素Cy5 dCTP进行标记。将两种方法标记好的探针等量混合后与含有 44 0个点 (4 4个基因 )的cDNA芯片同时杂交 ,发现二者具有很高的一致性 (0 .5 <Cy3 Cy5 >2 .0 )。由于RNA反转录法为cDNA芯片探针标记的传统方法 ,从而验证了RT LDPCR用于cDNA芯片探针标记的可行性。RT LDPCR具有对样品总RNA的需要量少和可对样品中信号进行放大的优点 ,特别适合于对材料来源受到限制的RNA进行标记。
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关键词
rt-ldpcr
CDNA芯片
探针标记
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Keywords
RT LDPCR, cDNA microarray, probe labelling
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
Q75
[生物学—分子生物学]
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