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RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因表达产物对小鼠皮肤培养细胞的作用 被引量:2
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作者 张军 王小珂 +3 位作者 牟少春 梁晓琴 陈建华 唐胜建 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期297-300,309,共5页
目的构建RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因短剪接本真核表达载体,研究其对体外小鼠皮肤培养细胞的作用。方法PCR扩增鼠胚皮肤mRNA逆转录产物,分别获得RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因短剪接本septin2s。构建其真核表达载体pcDNA3.1(-)/RP... 目的构建RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因短剪接本真核表达载体,研究其对体外小鼠皮肤培养细胞的作用。方法PCR扩增鼠胚皮肤mRNA逆转录产物,分别获得RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因短剪接本septin2s。构建其真核表达载体pcDNA3.1(-)/RPs29,pcDNA3.1(-)/RPs15,pcDNA3.1(-)/EndoA及pcDNA3.1(-)/septin2s,转染体外培养的小鼠表皮细胞及成纤维细胞。观察基因的表达情况及其对小鼠皮肤培养细胞生物学特性的影响。结果RT-PCR法检测RPs29,RPs15,EndoA及septin2s在转染的表皮细胞及成纤维细胞中均获得表达,pcDNA3.1(-)/RPs29和pcDNA3.1(-)/RPs15转染组成纤维细胞生长密度下降,其中pcDNA3.1(-)/RPs29转染组成纤维细胞发生凋亡,pcDNA3.1(-)/EndoA和pcDNA3.1(-)/septin2s转染组表皮细胞明显增殖。结论RPs29,RPs15,EndoA及Sep-tin2基因短剪接本能够影响小鼠表皮细胞及成纤维细胞的增殖。 展开更多
关键词 rps29 RPs15 EndoA septin2 转基因 表皮细胞 成纤维细胞
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Genetic and Protein Sequence Analysis of rpS29 from Ailuropoda melanoleuca (giant panda)
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作者 邓杰 《重庆与世界(学术版)》 2012年第8期6-8,15,共4页
To explore the structural characteristic of ribosomal protein S29 (rpS29) gene of Ailuropoda melanoleuca (giant panda), primers were designed based on the known nucleotide sequence of rpS29 genes to clone the cDNA and... To explore the structural characteristic of ribosomal protein S29 (rpS29) gene of Ailuropoda melanoleuca (giant panda), primers were designed based on the known nucleotide sequence of rpS29 genes to clone the cDNA and genomic sequences of this gene from giant panda by RT-PCR and PCR strategy respectively, and then the cloned cDNA and genomic sequences were sequenced and analyzed preliminarily. The results indicated that the cDNA fragment of the rpS29 from the giant panda is 205bp in size in length, containing an open reading frame (ORF) of 171bp, encoding 56 amino acids. The length of the genomic sequence is 1 598 bp, with three exons and two introns. The coding sequence shows a high degree of homology to those of Homo sapiens, Bos taurus, Rattus norvegicus and Mus musculus with 75%, 94.74%, 89.47% and 88.89% respectively, While all the homologies for amino acid sequences are high up to 100%. Primary structure analysis revealed that the molecular weight of the putative rpS29 protein is 6.68 KD, with a theoretical pI of 10.63. Based on topology prediction, there are three distinct types of functional sites in the rpS29 protein of giant panda. 展开更多
关键词 GIANT PANDA rps29 RT-PCR CLONED SEQUENCE analysis
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绵羊肺炎支原体对人肺泡Ⅱ型上皮细胞活性及炎症反应的影响 被引量:1
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作者 高力扬 张颖 +5 位作者 陈方正 李小杰 马金成 马小明 赵琰龙 李敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1051-1057,共7页
为探究绵羊肺炎支原体(MO)是否对人体造成潜在影响,本研究以人肺泡Ⅱ型上皮细胞为细胞模型,将MO Y98株荧光染色后感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞,于激光共聚焦显微镜下可见MO存在于细胞中;分别利用CCK-8及CellTiter-LumiTM试剂盒检测细胞的增... 为探究绵羊肺炎支原体(MO)是否对人体造成潜在影响,本研究以人肺泡Ⅱ型上皮细胞为细胞模型,将MO Y98株荧光染色后感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞,于激光共聚焦显微镜下可见MO存在于细胞中;分别利用CCK-8及CellTiter-LumiTM试剂盒检测细胞的增殖及活力,结果显示MO对人肺泡Ⅱ型上皮细胞的增殖及活性均无显著影响;扫描电镜检测细胞形态,结果显示肺泡上皮细胞伪足明显增多;基因芯片分析筛选出3个mRNA及5个lncRNA,荧光定量PCR验证后确定SCNN1G、LOX、ST6GALNAC1及lncRNA RP11-29G8.3-001在MO感染后的转录水平发生显著变化;荧光定量PCR检测肺泡上皮细胞中IL-1β、TNF-α、IFN、IRF7等炎症因子,结果显示这些因子基因的转录水平无明显变化;采用将lncRNA RP11-29G8.3-001过表达的方法对其功能进行研究,结果显示少量lncRNA RP11-29G8.3-001表达增高不会调控细胞免疫相关基因的表达。本研究结果表明MO并不降低人肺泡Ⅱ型上皮细胞的增殖及活性,且MO对人肺泡Ⅱ型上皮细胞炎症因子的表达无显著影响,提示MO对人肺泡Ⅱ型上皮细胞影响较小。本研究为防范MO对人呼吸系统存在的潜在影响提供了实验依据。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 人肺泡Ⅱ型上皮细胞 lncRNA RP11-29G8.3-001
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