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大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)RPS24基因cDNA克隆及序列分析 被引量:3
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作者 杜玉杰 侯怡铃 +2 位作者 郝彦哲 张田 侯万儒 《西华师范大学学报(自然科学版)》 2009年第2期109-114,共6页
本研究运用RT-PCR技术,首次从大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的肌肉组织总RNA中成功克隆了RPS24(Ribosomal Protein S24)基因的表达序列,并对其进行了测序及初步分析.结果表明:大熊猫RPS24基因的表达序列全长为431bp,开放阅读框(ORF)为... 本研究运用RT-PCR技术,首次从大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的肌肉组织总RNA中成功克隆了RPS24(Ribosomal Protein S24)基因的表达序列,并对其进行了测序及初步分析.结果表明:大熊猫RPS24基因的表达序列全长为431bp,开放阅读框(ORF)为399bp,编码132个氨基酸的蛋白质,该蛋白的分子量为15.3251kD,pI为10.92,含有7种类型共14个功能位点:即1个N-糖基化位点、2个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、6个蛋白激酶C磷酸化位点、1个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、3个N-酰基化位点、1个酰胺化位点及1个RPS24e sig-nature.进一步分析发现,大熊猫RPS24基因与已报道的人、牛、苏门答腊猩猩、褐家鼠和小家鼠5个哺乳动物物种的表达序列及其编码的氨基酸序列具有很高的相似性:编码序列同源性分别为94.1%、92.4%、94.7%、89.9%和90.4%;与人RPS24蛋白的氨基酸序列同源性为98.48%,其余均为99.24%. 展开更多
关键词 大熊猫 RT—PCR rps24 克隆 序列分析
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核糖体蛋白S24基因在胃癌及其癌前病变中差异表达的研究 被引量:2
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作者 郑洁 周风华 +1 位作者 张维铭 刘文天 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2006年第4期306-309,共4页
背景与目的:将胃癌组织、正常胃黏膜及胃癌前病变的基因表达进行比较,找出与人胃癌密切相关的基因片段,为进一步探讨胃癌的发生机制、胃癌的早期诊断和治疗方案提供重要的理论根据。材料与方法:应用荧光mRNA差异显示技术(FluorescentmRN... 背景与目的:将胃癌组织、正常胃黏膜及胃癌前病变的基因表达进行比较,找出与人胃癌密切相关的基因片段,为进一步探讨胃癌的发生机制、胃癌的早期诊断和治疗方案提供重要的理论根据。材料与方法:应用荧光mRNA差异显示技术(FluorescentmRNAdifferentialdisplay,FDD)分析3例胃癌、3例正常胃粘膜、3例胃癌前病变组织,分析基因差异表达情况。分离差异表达基因片段,进行PCR扩增。将cDNA片段测序,测序结果提交Genbank,经BLAST软件检索与同源性分析。选取其中差异表达的核糖体蛋白S24(RibosomalproteinS24,RPS24)基因,应用Northern杂交进行验证,并进一步对RPS24基因进行基因表达系列分析和组织表达谱分析。结果:mRNA差异显示发现RPS24基因在胃癌组织中的表达明显高于癌前病变和正常胃黏膜组织,并且Northern印迹验证阳性。基因表达系列分析和组织表达谱分析发现RPS24基因在多种肿瘤组织中表达增高以及分布广泛。结论:与非癌组织相比,RPS24基因在胃癌中表达明显增高,RPS24的高表达可能与胃癌的发生、恶性进展有关。 展开更多
关键词 胃癌 MRNA差异显示 rps24基因 NORTHERN杂交
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孕早期增塑剂DEHP暴露降低长链非编码RNA RP24-315D19.10表达影响子宫内膜蜕膜反应 被引量:2
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作者 袁柳 谭丽萍 +4 位作者 孙智芳 陈雪梅 李方方 何俊琳 高茹菲 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-12,共12页
目的:探索孕早期增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)暴露对小鼠子宫内膜蜕膜反应的影响及长链非编码RNA RP24-315D19.10的作用。方法:构建DEHP(1000 mg·kg^(-1)·d^(-1))暴露的早孕小鼠模型,取妊娠第6天子宫,通过苏木精-伊... 目的:探索孕早期增塑剂邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)暴露对小鼠子宫内膜蜕膜反应的影响及长链非编码RNA RP24-315D19.10的作用。方法:构建DEHP(1000 mg·kg^(-1)·d^(-1))暴露的早孕小鼠模型,取妊娠第6天子宫,通过苏木精-伊红染色和免疫荧光检测其对小鼠子宫内膜蜕膜区病理变化及相关分子表达。构建DEHP暴露(0.1、0.5、2.5、12.5、62.5μmol/L)的原代小鼠子宫内膜基质细胞体外蜕膜诱导模型,通过光学显微镜和鬼笔环肽染色观察细胞形态变化,免疫荧光、实时逆转录PCR、蛋白质印迹法检测蜕膜反应标志蛋白的表达情况。实时逆转录PCR分别检测RP24-315D19.10在蜕膜组织和蜕膜细胞中的表达。利用在线工具lnc Locator和RNA荧光原位杂交检测RP24-315D19.10的细胞定位,并运用在线工具Anno Lnc2预测与RP24-315D19.10相结合的微RNA(mi RNA)。结果:DEHP暴露组的胚胎着床点数、子宫湿重、子宫面积显著低于空白对照组,蜕膜反应标志蛋白基质金属蛋白酶、同源异型框A10的表达也明显少于空白对照组(均P<0.05)。随着DEHP浓度增加,蜕膜细胞中dtprp的表达逐渐降低。2.5μmol/L DEHP暴露组中基质细胞向蜕膜细胞的形态转化受到明显抑制,蜕膜反应标志蛋白同源异型框A10、骨形成蛋白2及增殖细胞核抗原表达水平显著低于空白对照组(均P<0.05)。DEHP暴露的蜕膜组织和蜕膜细胞中RP24-315D19.10的表达显著减少(均P<0.05)。RP24-315D19.10主要定位于细胞质,与45个mi RNA有潜在结合位点,其中mi R-138-5p、mi R-155-5p、mi R-183-5p及mi R-223-3p与子宫内膜蜕膜反应有关。结论:孕早期DEHP暴露导致小鼠蜕膜反应损伤可能与RP24-315D19.10表达下调有关。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 蜕膜反应 长链非编码RNA RP24-315D19.10 微RNA 小鼠
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人核糖体小亚基蛋白24剪接变异体mRNA在胃癌中的表达 被引量:1
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作者 李健 徐惠绵 +1 位作者 孙秀菊 孙开来 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1076-1078,共3页
目的探讨人核糖体小亚基蛋白(RPS)24剪接变异体mRNA在胃癌中的表达及其意义。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)结合剪接位点特异性引物技术,检测60例胃癌和7例胃溃疡标本中RPS24剪接变异体mRNA表达情况,并分析其与临床病理因素的... 目的探讨人核糖体小亚基蛋白(RPS)24剪接变异体mRNA在胃癌中的表达及其意义。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)结合剪接位点特异性引物技术,检测60例胃癌和7例胃溃疡标本中RPS24剪接变异体mRNA表达情况,并分析其与临床病理因素的关系。结果 所有的胃癌和胃溃疡标本中均出现RPS24a mRNA表达;而RPS24c mRNA在胃癌组织表达率为96.7%,癌旁正常黏膜为11.7%;并且低、未分化型胃癌、淋巴结转移≥5个、TNMⅢ、Ⅳ期病例的RPS24c mRNA表达比率分别显著高于分化型胃癌、淋巴结转移<5个、TNM Ⅰ、Ⅱ期胃癌病例(P<0.05)。胃癌组织中RPS24 mRNA的总体表达水平显著高于癌旁正常黏膜(P<0.01),而且TNMⅢ、Ⅳ期胃癌中RPS24 mRNA表达水平显著高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌(P<0.05);胃溃疡中RPS24mRNA的表达水平与正常胃黏膜差异无显著性(P>0.05)。结论RPS24剪接变异体的异常表达与胃癌的发展、转移有关,可作为胃癌生物学行为评估和判断预后的指标。 展开更多
关键词 胃癌 RPS mRNA表达 正常 变异体 胃溃疡 TNM 剪接位点 核糖体 表达水平
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