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细菌中RpoS蛋白的表达调控及其功能的研究进展 被引量:5
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作者 王淑娴 魏鉴腾 +1 位作者 李天保 杨秀生 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期24-31,共8页
RpoS蛋白是RNA聚合酶的一种σ因子,能够调控一组特异性基因的表达,因此在细菌中发挥着至关重要的作用。在细菌中,RpoS蛋白的表达受到严格的控制,主要表现在3个水平的调控:转录水平,翻译水平和翻译后水平。环境应力作用通过信号传导进入... RpoS蛋白是RNA聚合酶的一种σ因子,能够调控一组特异性基因的表达,因此在细菌中发挥着至关重要的作用。在细菌中,RpoS蛋白的表达受到严格的控制,主要表现在3个水平的调控:转录水平,翻译水平和翻译后水平。环境应力作用通过信号传导进入细菌细胞内,引起一系列微环境的改变,进而引起调控子的变化。通过调控子与RpoS蛋白直接和间接的相互作用,达到控制其水平的目的。另外,由于RpoS蛋白在细菌中有特殊作用,因此RpoS蛋白水平的变化会引起众多基因表达水平的改变,从而引起细菌对不同环境应力应答的变化以及细菌的某些特性的改变,为今后细菌病害的防治提供了新的策略。综述了近年来对RpoS蛋白的表达调控以及在几种常见菌种中功能的研究进展,由于RpoS蛋白的功能的复杂性,仍有大量的未知功能有待进一步鉴定。 展开更多
关键词 rpoS或σS rpoS基因 表达调控 环境应力 rpoS功能
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Advances in the Regulation of RpoS Protein Expression and Its Function in Bacteria 被引量:2
2
作者 王淑娴 李天保 +4 位作者 叶海斌 魏鉴腾 王勇强 刁菁 杨秀生 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第6期1215-1221,1225,共8页
RpoS protein is a σ factor of RNA polymerase that can control the expression of a group-specific gene, thus playing a vital role in bacteria. In bacteria, RpoS expression is under strict control and is mainly regulat... RpoS protein is a σ factor of RNA polymerase that can control the expression of a group-specific gene, thus playing a vital role in bacteria. In bacteria, RpoS expression is under strict control and is mainly regulated at three levels: transcription level, translation level and post-translational level. Environmental stress enters bacterial cells through signal transduction and leads to a series of variations in microenvironment, thereby causing changes of regulator and controlling its levels based on the direct and indirect interaction between regulator and RpoS protein. In addition, RpoS protein has played special roles in bacteria, therefore the changes of RpoS protein levels will lead to variations in expression levels of a large number of genes, thereby causing variations of bacterial response to different environmental stress and changes of certain characteristics of bacteria, which provides a new strategy for the control of bacterial diseases in the future. This paper reviewed the recent progress on the regulation of RpoS protein expression and its function in several common bacteria. Due to the functional complexity of RpoS protein, there are still a lot of unknown functions to be further identified. 展开更多
关键词 rpoS or σ S rpoS gene Expression regulation Environmental stress rpoS function
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调控因子RpoS在副溶血性弧菌抗环境胁迫中的作用
3
作者 马芊芊 吴剑夫 +6 位作者 谢春阳 李心茹 徐思涵 张雅轩 邱霜 檀昕 谷春梅 《食品工业科技》 北大核心 2025年第23期202-211,共10页
副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种食源性条件致病菌,在水产品中广泛存在。副溶血性弧菌的爆发会引发严重的食品安全问题,出现食物中毒的现象。为了进一步探究调控因子RpoS是否在副溶血性弧菌的耐环境胁迫中发挥关键作用,本... 副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种食源性条件致病菌,在水产品中广泛存在。副溶血性弧菌的爆发会引发严重的食品安全问题,出现食物中毒的现象。为了进一步探究调控因子RpoS是否在副溶血性弧菌的耐环境胁迫中发挥关键作用,本实验通过同源重组技术构建了rpoS基因缺失菌株ATCC33846/ΔrpoS及rpoS基因回补菌株ΔrpoS/pBAD33T-rpoS。结果表明,在不同温度、NaCl浓度、寡营养和pH条件下,ATCC33846/ΔrpoS生长受到明显抑制,泳动性和生物膜形成能力降低。扫描电镜观察ATCC33846/ΔrpoS细胞膜表面形态发生变化,出现明显的褶皱。傅里叶红外光谱(FTIR)分析发现,ATCC33846/ΔrpoS中氢键减弱,细胞膜脂质受到不良影响,胞外分泌物组分中多糖类物质减少。在诺氟沙星、多粘菌素B、恩诺沙星、氯霉素、利福平条件下,ATCC33846/ΔrpoS的耐药性随药物浓度的增加显著降低。这些结果表明,RpoS是副溶血性弧菌抵御外界环境胁迫的关键调控因子。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 rpoS 抗环境胁迫 生物膜 抗生素
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RpoN和RpoS参与细菌鞭毛合成与趋化调控的研究进展 被引量:4
4
作者 刘晓东 吴港 +3 位作者 杨智敏 燕永亮 林敏 张云华 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第12期11-16,共6页
在自然界中,细菌需要靠趋化运动来趋利避害以获得有利的生存环境。鞭毛作为细菌的运动器官,是趋化的前提与基础,鞭毛的合成组装是一个高度有序、耗能的等级调控过程,每一等级的基因表达都需要多个调控因子参与。RpoN对鞭毛合成基因的表... 在自然界中,细菌需要靠趋化运动来趋利避害以获得有利的生存环境。鞭毛作为细菌的运动器官,是趋化的前提与基础,鞭毛的合成组装是一个高度有序、耗能的等级调控过程,每一等级的基因表达都需要多个调控因子参与。RpoN对鞭毛合成基因的表达为正调控,鞭毛调节子FleQ作为RpoN的激活增强子,与RpoN协同调控了鞭毛基因的转录与表达,相反,RpoS负调控包括鞭毛调控σ因子FliA在内的鞭毛合成基因的转录与表达,且rpoS基因的缺失导致鞭毛合成相关基因的转录水平显著上调。RpoS能够负调控诸多鞭毛基因的表达可能是通过调控鞭毛主调节子FleQ或鞭毛调控σ因子FliA来实现的;亦可能是由于RpoS和其他的σ因子竞争有限的核心聚合酶造成的。本文综述了细菌的鞭毛合成与趋化中不同σ因子之间存在复杂的交叉调控。 展开更多
关键词 rpoN rpoS 鞭毛 趋化 调控
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荧光假单胞菌M18的rpoS基因克隆及其功能分析 被引量:9
5
作者 徐汪节 朱栋华 +1 位作者 张雪洪 许煜泉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期309-314,共6页
从荧光假单胞菌 (Pseudomonasfluorescentsp .)M1 8基因组中克隆了RNA聚合酶的稳定期σs 因子编码基因rpoS ,推测其氨基酸序列与铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌的同源性分别为 99 1 %、87 35 %和87 8%。利用体外定点插入突... 从荧光假单胞菌 (Pseudomonasfluorescentsp .)M1 8基因组中克隆了RNA聚合酶的稳定期σs 因子编码基因rpoS ,推测其氨基酸序列与铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌的同源性分别为 99 1 %、87 35 %和87 8%。利用体外定点插入突变和同源重组技术 ,构建了M1 8的rpoS突变株M1 8R- 。对突变株M1 8R- 合成抗生素吩嗪 1 羧酸 (PCA)和藤黄绿菌素 (Plt)的动力学分析结果表明 ,在KB或PPM培养基中 ,突变株合成PCA的能力比野生型分别提高了 2 5或 5 78倍 ,但Plt的积累量不受影响。与野生型相比 ,突变株对碳源饥饿的耐性下降。同时 ,在碳源饥饿条件下对过氧化氢、乙醇和和氯化钠等环境胁迫的交叉保护性减小 。 展开更多
关键词 荧光假单胞菌M18 rpoS突变株 吩嗪-1-羧酸 藤黄绿菌素 环境胁迫
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肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株的构建及其生长特性观察 被引量:2
6
作者 曾红亮 曾庆梅 +2 位作者 乔向欣 杨晋 刘坤 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第8期690-694,共5页
目的利用λ-red同源重组系统构建食源性肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,SE)CICC21482rpoS基因缺陷株SE/⊿rpoS,观察其在胁迫环境中的生长特性,以探讨rpoS基因的生物学作用。方法通过PCR扩增两侧为肠炎沙门氏菌rpoS基因同源臂,中... 目的利用λ-red同源重组系统构建食源性肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,SE)CICC21482rpoS基因缺陷株SE/⊿rpoS,观察其在胁迫环境中的生长特性,以探讨rpoS基因的生物学作用。方法通过PCR扩增两侧为肠炎沙门氏菌rpoS基因同源臂,中间为卡那霉素抗性基因(kmr)的打靶片段,再电击转入含质粒pkD46的肠炎沙门氏菌中,替换rpoS基因,筛选阳性转化子SE/⊿rpoS并用PCR法验证。结果成功构建了肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株。在常规LB培养基中37℃培养的缺陷株和野生株生长曲线差异无统计学意义(P>0.05);SE/⊿rpoS菌株在45℃、2%NaCl和pH4.0应激条件下的生存能力较野生株弱(P<0.05)。结论成功构建SE/⊿rpoS基因缺陷株。该基因在肠炎沙门氏菌克服高温、高渗、酸应激时被诱导表达从而发挥作用。此结果为进一步研究rpoS基因在应激过程中的作用机制提供了基础资料。 展开更多
关键词 肠炎沙门氏菌 λ-red重组系统 rpoS基因 基因敲除 生长特性
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绵羊痘病毒RPO30基因的克隆及序列分析 被引量:4
7
作者 赵志荀 吴国华 +4 位作者 颜新敏 李健 朱海霞 孙晓林 张强 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第7期304-308,共5页
选择羊痘病毒RNA聚合酶RPO30进行分析,为进行RNAi羊痘病毒研究,进行目的基因的初步筛选。PCR扩增RPO30基因,连入pMD18-T simple载体并转化DH5a大肠杆菌。经蓝白斑筛选挑选白斑制备质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定。结果成功克隆了RPO30基... 选择羊痘病毒RNA聚合酶RPO30进行分析,为进行RNAi羊痘病毒研究,进行目的基因的初步筛选。PCR扩增RPO30基因,连入pMD18-T simple载体并转化DH5a大肠杆菌。经蓝白斑筛选挑选白斑制备质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定。结果成功克隆了RPO30基因,克隆的SSPV RPO30基因ORF为585bp,编码193个氨基酸,阅读框内有一个HindIII酶切位点,测序结果与Gen Bank数据库中不同痘病毒毒株之间同源性存在着明显区别。进一步经过生物学软件分析表明RPO30蛋白质氨基酸4—12、18—26、50—61、68—92,176—190位之间区域形成活性中心的可能性较大,选择这些区域进行作用可能会造成该基因产物酶的失活,从而高效抑制病毒的复制。 展开更多
关键词 绵羊痘病毒 rpo30基因 序列分析 生物信息学
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不依赖RpoS的鸡白痢沙门菌生物被膜形成相关基因鉴定 被引量:1
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作者 冯政 苏洋洋 +3 位作者 全柯吉 秦涛 陈素娟 彭大新 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期613-620,共8页
为鉴定鸡白痢沙门菌生物被膜形成不依赖Rpo S的调控基因,以鸡白痢沙门菌S6702及其rpoS基因缺失株S6702ΔrpoS为母本,对S6702生物被膜状态和S6702ΔrpoS生物被膜状态(S7BF vs S7SBF)及S6702ΔrpoS浮游状态和S6702ΔrpoS生物被膜状态(S7SF... 为鉴定鸡白痢沙门菌生物被膜形成不依赖Rpo S的调控基因,以鸡白痢沙门菌S6702及其rpoS基因缺失株S6702ΔrpoS为母本,对S6702生物被膜状态和S6702ΔrpoS生物被膜状态(S7BF vs S7SBF)及S6702ΔrpoS浮游状态和S6702ΔrpoS生物被膜状态(S7SFY vs S7SBF)进行转录组测序分析,筛选差异表达基因,构建基因缺失株并验证其生物被膜形成能力。结果显示,S7BF vs S7SBF组共鉴定出83个差异表达基因,S7SFY vs S7SBF组共鉴定出1984个差异表达基因,筛选出15个可能与生物被膜形成相关的基因。以STM2361和STM1703为靶标构建基因缺失株,结晶紫染色定量结果显示,STM2361不影响鸡白痢沙门菌生物被膜的形成,而STM1703缺失能增强鸡白痢沙门菌的生物被膜形成能力。本研究鉴定出不依赖RpoS的鸡白痢沙门菌生物被膜形成调控基因,丰富了鸡白痢沙门菌生物被膜调控的信息。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门菌 生物被膜 rpoS 转录组分析
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细菌对胁迫应答因子RpoS的调控 被引量:4
9
作者 吴晨紫 杨志伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期50-55,63,共7页
RpoS是细菌一般胁迫反应的主要调控因子,可以诱导RpoS表达的胁迫条件包括碳源和氮源饥饿、渗透压升高、低pH、温度升高等。在细菌体内,大量环境和细胞内信号参与RpoS的调控。这些调控可以发生在转录和翻译水平、降解过程以及活性调节等... RpoS是细菌一般胁迫反应的主要调控因子,可以诱导RpoS表达的胁迫条件包括碳源和氮源饥饿、渗透压升高、低pH、温度升高等。在细菌体内,大量环境和细胞内信号参与RpoS的调控。这些调控可以发生在转录和翻译水平、降解过程以及活性调节等方面,形成一个复杂的调控网络。RpoS调控机制的阐明对于了解胁迫条件下细菌响应机制具有重要意义。 展开更多
关键词 一般胁迫反应 Σ因子 rpoS RssB 双组分系统
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山羊痘病毒RPO30基因绿色荧光蛋白质粒的构建及融合表达 被引量:1
10
作者 赵志荀 吴国华 +4 位作者 颜新敏 崔力凡 李健 朱海霞 张强 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期48-52,共5页
为了研究针对山羊痘病毒RPO30的siRNAs的干扰效果,构建了RPO30基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。通过对RPO30基因进行PCR扩增,克隆入表达载体pEGFP-N1,并进行双酶切及测序鉴定;将阳性重组质粒转... 为了研究针对山羊痘病毒RPO30的siRNAs的干扰效果,构建了RPO30基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。通过对RPO30基因进行PCR扩增,克隆入表达载体pEGFP-N1,并进行双酶切及测序鉴定;将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和RPO30基因的转录水平。结果显示,获得的目的基因片段大小与预期结果相符,该基因与Gen-Bank数据库中RPO30基因序列的同源性为97%。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,转染后第48小时,阳性细胞率达到80.1%;经RT-PCR检测,细胞内有RPO30基因的转录。证实,已成功构建了RPO30基因与EGFP基因的融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 rpo30基因 增强型绿色荧光蛋白 融合表达
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基于RPO/E的虚拟装配、运动仿真与装配动画 被引量:1
11
作者 李奉香 黄政 +1 位作者 万志华 周川 《计算机与数字工程》 2011年第1期134-137,共4页
通过零件三维模型的生成和对零件虚拟装配和运动仿真的分析,可大大减少设计周期;通过装配动画的设计和制作,可提高装配工艺编制效率,并指导工人装配,从而提高产品制造质量。以齿轮泵为例介绍了RPO/E软件中的虚拟装配、运动仿真和装配动... 通过零件三维模型的生成和对零件虚拟装配和运动仿真的分析,可大大减少设计周期;通过装配动画的设计和制作,可提高装配工艺编制效率,并指导工人装配,从而提高产品制造质量。以齿轮泵为例介绍了RPO/E软件中的虚拟装配、运动仿真和装配动画的操作思路和具体方法。 展开更多
关键词 rpo/E 虚拟装配 运动仿真 装配动画
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Cloning and Sequence Analysis of Sheeppox Virus RPO30 Gene
12
作者 赵志荀 吴国华 +3 位作者 颜新敏 李健 朱海霞 张强 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第11期1721-1723,1728,共4页
[Objective] The study aimed to clone RPO30 gene from Sheeppox virus (SPPV) and predict the structure and function of the sequence. [Method] RPO30 gene of SPPV was cloned with PCR, linked into pMD18-T simple vector a... [Objective] The study aimed to clone RPO30 gene from Sheeppox virus (SPPV) and predict the structure and function of the sequence. [Method] RPO30 gene of SPPV was cloned with PCR, linked into pMD18-T simple vector and then transformed into E. coli DH5a. In blue-white screen, the white colonies were selected to prepare plasmids. The positive plasmids were selected by double digestion and PCR, and then sequenced. Finally, the structure and function of the sequence obtained were predicted by bioinformatics methods. [Results] The RPO30 gene was successfully obtained; its ORF was 585 bp, encoding 193 amino acids and containing a recognition site for Hind III. Moreover, the SPPV RPO30 gene shared different homologies with the RPO30 gene sequences of other pox virus strains from GenBank database. Further analysis by biological software showed that in RPO30 protein, amino acids 4-12, 18-26, 50- 61, 68- 92 and 176-190 had a high possibility to form the active center, and acting to these regions was likely to inactivate the enzyme encoded by the sequence, thus to inhibit viral replication efficiently. [Conclusion] This study will lay foundation for further study on the structure and function of RPO30. 展开更多
关键词 Sheeppox virus rpo30 gene Sequence analysis BIOINFORMATICS
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RPO运营现状及发展策略探析 被引量:2
13
作者 李晚芳 《中国商论》 2017年第29期159-162,共4页
RPO(招聘流程外包)是一种新兴的人力资源服务模式,是人才招聘顺应市场需求走向专业化和系统化的分水岭。本文以智联招聘的RPO实践为基础,分析RPO的运营现状和存在的问题,对拓展RPO的发展策略进行相关探讨,力图为RPO在我国的发展提供有... RPO(招聘流程外包)是一种新兴的人力资源服务模式,是人才招聘顺应市场需求走向专业化和系统化的分水岭。本文以智联招聘的RPO实践为基础,分析RPO的运营现状和存在的问题,对拓展RPO的发展策略进行相关探讨,力图为RPO在我国的发展提供有意义的借鉴。 展开更多
关键词 rpo rpo服务商 客户企业 发展策略
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CPS、RPS、RPO对四氧嘧啶高血糖动物的降血糖作用研究
14
作者 任文龙 姚玉龙 +2 位作者 王娟 陈秀华 李炳生 《中国药理通讯》 2004年第3期52-52,共1页
关键词 CPS RPS rpo 四氧嘧啶 高血糖 降糖作用
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CPS、RPS、RPO对小鼠急性四氯化碳肝损伤的保护作用研究
15
作者 姚玉龙 任文龙 +2 位作者 王娟 陈秀华 李炳生 《中国药理通讯》 2004年第3期52-53,共2页
关键词 CPS RPS rpo 小鼠 四氯化碳 肝损伤 保护作用 病理检查
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rpoS对鳗弧菌MHK3株Hcp表达和杀菌能力的影响 被引量:5
16
作者 王小鹿 李杰 +3 位作者 李贵阳 唐磊 杨慧超 莫照兰 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2021年第6期125-134,共10页
溶血素共调节蛋白(Hcp)的合成和分泌是六型分泌系统(T6SS)行使功能的重要特征。RNA聚合酶的σ亚基RpoS参与调节细菌的生长和应激反应。为了探究RpoS对鳗弧菌(Vibrio anguillarum)T6SS的调控作用,本研究构建了 MHK3ΔrpoS突变株,检测了... 溶血素共调节蛋白(Hcp)的合成和分泌是六型分泌系统(T6SS)行使功能的重要特征。RNA聚合酶的σ亚基RpoS参与调节细菌的生长和应激反应。为了探究RpoS对鳗弧菌(Vibrio anguillarum)T6SS的调控作用,本研究构建了 MHK3ΔrpoS突变株,检测了部分表型特征的变化;利用lacZ半乳糖苷酶报告基因检测了突变株hcpl和hcp2在转录水平的变化;进行Western blot并定量分析突变株Hcp在翻译水平的变化;并通过细菌拮抗实验检测了突变株杀菌能力的变化。结果显示,MHK3ΔrpoS突变株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性与MHK3野生株相比无显著差异(P>0.05),而平台早期的菌膜形成能力有显著上升(P<0.05);在各生长时期,MHK3ΔrpoS的hcpl和hcp2在转录水平的表达量均较MHK3有显著上升(P<0.01),最高时分别为MHK3的1.79倍和1.94倍;在翻译水平上,MHK3ΔrpoS在胞内和胞外Hcp的分泌均有显著升高(P<0.05),最高时分别为MHK3的1.59倍和1.31倍;同时,MHK3ΔrpoS对大肠杆菌(Escherichia coli) E5的杀菌能力约为MHK3的1%。研究表明,rpoS对鳗弧菌MHK3株的生长情况、泳动性、明胶酶活性及酪蛋白酶活性均无显著调控作用,但对平台早期的菌膜形成能力具有一定的负调控作用,在转录和翻译水平上也负调控Hcp的表达。而在杀菌能力上,rpoS发挥一定的正调控作用。说明菌株的杀菌能力强弱并非直接与Hcp的表达和分泌量正相关。本研究为进一步阐明T6SS的调控机制及其介导的杀菌作用机制提供了新思路,并丰富了其理论基础。 展开更多
关键词 鳗弧菌 rpoS HCP T6SS 杀菌
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鼠伤寒沙门菌rpoS基因缺失菌株的构建及RpoS因子在环境胁迫下的作用 被引量:2
17
作者 梁运改 桂萌 +3 位作者 王顺 刘密 张清 周康 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第6期141-147,共7页
鼠伤寒沙门菌在应对环境胁迫时,通过自身的调节机制适应环境,其中Rpo S因子在其中起着重要的作用。为研究Rpo S因子在环境胁迫下对鼠伤寒沙门菌的影响,本研究用Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌Salmonella typhimurium 1344的rpo S缺失... 鼠伤寒沙门菌在应对环境胁迫时,通过自身的调节机制适应环境,其中Rpo S因子在其中起着重要的作用。为研究Rpo S因子在环境胁迫下对鼠伤寒沙门菌的影响,本研究用Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌Salmonella typhimurium 1344的rpo S缺失菌株SL1344/Drpo S,并在不同条件下比较亲本菌株SL1344和基因缺失菌株SL1344/Drpo S的生长情况,这些条件分别为:3.5%NaCl、42℃、pH 4.0。此外本实验还重点研究了沙门菌在不同盐质量分数中预处理不同时间后置于含3.5%NaCl的培养基中培养的生长情况,以说明rpo S对于沙门菌在逆境中适应性的影响。结果表明在3.5%NaCl条件下,二者生长均受到较大的抑制作用,且SL1344/Drpo S受到的抑制作用更大,SL1344的最大生长速率为SL1344/Drpo S的2.49倍;在42℃条件下,SL1344的最大生长速率仅为SL1344/Drpo S的1.33倍,而在pH 4.0条件下,SL1344的最大生长速率为SL1344/Drpo S的2.77倍;此外,二者在不同盐质量分数中处理不同时间后的生长情况也存在差异。rpo S基因缺失菌株SL1344/Drpo S的构建为进一步研究Rpo S因子在鼠伤寒沙门菌应对环境胁迫的作用机制,以及为预防和控制由沙门菌导致的食源性疾患提供了理论支持。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 基因敲除 rpoS 渗透压 温度 pH值
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GC夹对三种食源性致病菌的rpoB-PCR-DGGE图谱的影响 被引量:2
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作者 廖超 张昭寰 +4 位作者 姚鑫 谢晶 张炜佳 潘迎捷 赵勇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期212-219,共8页
旨在探讨不同的GC夹以及GC夹连接引物的不同位置对3种食源性致病菌的DGGE图谱结果的影响,合成6对RNA聚合酶β亚基编码基因rpo B引物(rpo B 1-6),含3种不同GC夹(GC-1,GC-2,GC-3),且每种GC夹分别连接于正反引物5'端。应用rpo B-PCR-D... 旨在探讨不同的GC夹以及GC夹连接引物的不同位置对3种食源性致病菌的DGGE图谱结果的影响,合成6对RNA聚合酶β亚基编码基因rpo B引物(rpo B 1-6),含3种不同GC夹(GC-1,GC-2,GC-3),且每种GC夹分别连接于正反引物5'端。应用rpo B-PCR-DGGE对副溶血性弧菌(5株),单增李斯特菌(5株)和沙门氏菌(3株)进行分析,并与V3-PCR-DGGE和ERIC-PCR的图谱及聚类分析结果进行比较。结果显示,GC-3夹连接于反引物上的rpo B-PCR-DGGE分辨效果最好,分辨力指数达0.9,与ERIC-PCR相同,高于V3-PCR-DGGE。GC夹序列和连接引物位置均对rpo B-PCR-DGGE图谱结果产生影响。选择或设计无连续鸟嘌呤(G)排列的GC夹序列且将其连接于反引物5'端,均能有效提高rpo B-PCR-DGGE对食源性致病菌检测与分型的效果。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 单增李斯特菌 沙门氏菌 GC夹 rpo B-PCR-DGGE
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大肠杆菌RNA分子伴侣Hfq与DsrA和rpoS作用机制的研究进展 被引量:1
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作者 王丽君 王维维 +2 位作者 龚庆国 吴季辉 施蕴渝 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第7期627-633,共7页
RNA分子伴侣Hfq是细菌重要的转录后调节因子,它能够帮助非编码small RNA(sRNA)与目标mRNA配对.mRNArpoS编码的稳态sigma因子σS是大肠杆菌中应激响应的核心调控因子.在低温下,Hfq蛋白对于sRNA DsrA介导的mRNArpoS的翻译激活是必需的.然... RNA分子伴侣Hfq是细菌重要的转录后调节因子,它能够帮助非编码small RNA(sRNA)与目标mRNA配对.mRNArpoS编码的稳态sigma因子σS是大肠杆菌中应激响应的核心调控因子.在低温下,Hfq蛋白对于sRNA DsrA介导的mRNArpoS的翻译激活是必需的.然而,Hfq使用何种机制来促进sRNA和mRNA配对一直有两种并不互斥的模型存在:Hfq远侧和近侧两个表面同时结合sRNA和mRNA,使得两条RNA相互靠近,便于形成碱基配对;Hfq可能结合一条或者两条RNA,改变它们的二级结构或者三级结构,从而促进sRNA-mRNA配对的实现.最近的研究报道,成功在体外捕捉到了sRNA-Hfq-mRNA三元复合物,测定了AU6A-Hfq-A7三元复合物的晶体结构,并且在大肠杆菌体内证实了三元复合物的形成对于Hfq帮助sRNA DsrA激活mRNA rpoS的翻译是重要的.本文以sRNA DsrA和mRNA rpoS为例综述了蛋白质Hfq与RNA的结合特性,同时也讨论了sRNA-Hfq-mRNA三元复合物的存在对于研究sRNA介导的调控机制的一些启示. 展开更多
关键词 HFQ RNA分子伴侣 SRNA DSRA MRNA rpoS Hfq-RNA复合物晶体结构 翻译激活
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鳗弧菌rpoS基因克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 马莉 陈吉祥 +2 位作者 刘瑞 魏鉴腾 姜荧安 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期133-137,共5页
鳗弧菌是海水鱼类弧菌病的重要病原,弧菌病的发生及流行与该菌在环境中的生存密切相关。RpoS因子是细菌RNA聚合酶的主要组成部分,能够调控细胞对不良环境的抵抗和适应能力。本文从鳗弧菌W-1基因组DNA扩增1 002 bp的特异性片段,序列分析... 鳗弧菌是海水鱼类弧菌病的重要病原,弧菌病的发生及流行与该菌在环境中的生存密切相关。RpoS因子是细菌RNA聚合酶的主要组成部分,能够调控细胞对不良环境的抵抗和适应能力。本文从鳗弧菌W-1基因组DNA扩增1 002 bp的特异性片段,序列分析表明含有完整的rpoS基因阅读框,编码333个氨基酸残基的蛋白质。与其他鳗弧菌菌株的rpoS基因序列相似性为100%,与霍乱弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌、创伤弧菌、溶藻胶弧菌rpoS基因的序列相似性分别为78%,77%,77%,76%,75%,与大肠杆菌的序列相似性为71%。将该基因克隆于表达质粒pET-24d(+),在大肠杆菌中表达,用镍亲和层析柱纯化表达蛋白,SDS-PAGE分析表明纯化的蛋白为单一条带,蛋白分子量约42 kDa,与理论分析值相近。研究结果为探索鳗弧菌对自然环境的适应及疾病发生机制提供了依据。 展开更多
关键词 鳗弧菌 rpoS基因 克隆 表达 纯化
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