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STIM1通过上调c-Myc/RPL35介导的核糖体通路促进唾液腺腺样囊性癌细胞增殖
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作者 程晓婷 房春燕 +7 位作者 刘唐君 岳红叶 王晓 珂李厚君 姜文妍 刘伽伽 王学健 孙志朋 《河北医药》 2025年第3期357-362,共6页
目的探究基质相互作用分子1(STIM1)上调促进唾液腺腺样囊性癌细胞(SACC)增殖及其机制。方法取SACC-83细胞,利用慢病毒转染建立稳定过表达STIM1细胞(STIM1-OE)和空载体对照细胞(STIM1-vector)。取SACC-LM细胞,小干扰RNA沉默STIM1,使其降... 目的探究基质相互作用分子1(STIM1)上调促进唾液腺腺样囊性癌细胞(SACC)增殖及其机制。方法取SACC-83细胞,利用慢病毒转染建立稳定过表达STIM1细胞(STIM1-OE)和空载体对照细胞(STIM1-vector)。取SACC-LM细胞,小干扰RNA沉默STIM1,使其降低(si-STIM1)。MTT、平面克隆形成实验和软琼脂集落形成实验检测STIM1-OE和si-STIM1对细胞增殖能力的影响。转录组测序获得STIM1-OE和STIM1-vecor组差异基因,并通过R语言分析可能参与的信号通路。Western blot检测c-Myc、RPSA、MRPL11、FAU、RPL35的蛋白表达水平。结果上调STIM1后,SACC细胞活力升高、集落数目及软琼脂集落形成数量增多(P<0.05);而敲低STIM1后,细胞活力降低、集落数目及软琼脂集落形成数量减少(P<0.05)。根据差异基因,进行GSEA和KEGG通路富集分析,发现STIM1上调后MYC介导核糖体通路被异常激活。进一步验证表明,c-Myc、RPL35蛋白表达量均升高,RPSA、MRPL11、FAU没有明显改变(P>0.05)。结论STIM1上调促进SACC细胞增殖,其机制可能与激活c-Myc/RPL35介导的核糖体信号通路相关。 展开更多
关键词 基质相互作用分子1 唾液腺腺样囊性癌 C-MYC rpl35 核糖体通路
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RPL35A基因在不同月龄寒泊羊肌肉组织中的表达及其生物信息学分析
2
作者 贺名扬 刘爱菊 +4 位作者 张鑫 周荣艳 田树军 白莹 陈晓勇 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期85-90,共6页
本实验旨在探究核糖体蛋白基因(RPL35A)在不同月龄寒泊羊肌肉组织中的mRNA表达及其生物学功能。选取1月龄、7月龄和13月龄寒泊公羊各3只,采集背最长肌,利用转录组测序(RNA-seq)与荧光定量PCR(qRT-PCR)技术相结合,分析比较RPL35A基因的... 本实验旨在探究核糖体蛋白基因(RPL35A)在不同月龄寒泊羊肌肉组织中的mRNA表达及其生物学功能。选取1月龄、7月龄和13月龄寒泊公羊各3只,采集背最长肌,利用转录组测序(RNA-seq)与荧光定量PCR(qRT-PCR)技术相结合,分析比较RPL35A基因的表达丰度。应用生物信息学方法分析RPL35A基因的核苷酸和氨基酸序列的分子结构特征、蛋白质特性及网络互作。结果表明:1月龄寒泊羊背最长肌RPL35A基因mRNA高于7月龄,后者低于13月龄,RNA-seq与qRT-PCR结果趋势一致。绵羊RPL35A基因核苷酸及氨基酸序列与山羊、牛、家马和猪的相似性较高;RPL35A编码蛋白为碱性蛋白(PI=11.07)、亲水蛋白(亲水值为-0.579),稳定性较好,属于非跨膜蛋白,在线粒体(69.6%)、细胞核(17.4%)、细胞质(8.7%)、过氧化物酶体(4.3%)内发挥作用。蛋白互作网络分析表明RPL35A蛋白在核糖体合成过程中发挥着重要作用。综上,RPL35A基因可能参与寒泊羊肌肉生长发育过程。 展开更多
关键词 rpl35A基因 寒泊羊 生物信息学 MRNA QRT-PCR
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大熊猫RPL35A基因的克隆及超表达研究 被引量：1
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作者 杜玉杰 侯万儒 《西华师范大学学报（自然科学版）》 2018年第4期377-382,共6页
探究大熊猫核糖体蛋白基因RPL35A及其编码蛋白的特点,以进一步研究其编码蛋白的功能,为深入开展大熊猫分子生物学研究及大熊猫基因保护等积累科学资料;本研究以大熊猫骨骼肌为材料,采用RT-PCR和降落-PCR方法克隆RPL35A基因的cDNA基因组... 探究大熊猫核糖体蛋白基因RPL35A及其编码蛋白的特点,以进一步研究其编码蛋白的功能,为深入开展大熊猫分子生物学研究及大熊猫基因保护等积累科学资料;本研究以大熊猫骨骼肌为材料,采用RT-PCR和降落-PCR方法克隆RPL35A基因的cDNA基因组序列,IPTG法诱导基因在BL21细胞系中的表达;大熊猫RPL35A基因的cDNA序列为337 bp,编码110个氨基酸;该基因的基因组序列长1 275 bp,包含2个外显子和1个内含子;RPL35A基因在BL21细胞系中的表达产物与组氨酸标签蛋白融合形成18 k Da的融合蛋白;该基因的cDNA序列、基因组序列中的外显子片段及其编码的蛋白序列与已报道的人、牛、小家鼠、褐家鼠等物种的对应序列同源性很高,蛋白质理化性质和功能位点基本相同,这说明该基因及其编码蛋白在进化过程中非常保守,可用于分子进化方面的研究,在物种进化关系研究中具有一定的参考意义和研究价值;同时,该基因可在原核生物中表达出具有活性的产物,可进一步开展纯化和蛋白质功能的研究。 展开更多
关键词 大熊猫 RT-PCR 降落-PCR rpl35A 克隆 表达
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