期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
RPL30基因的克隆及其与神经管发育相关关系的研究 被引量：3
1
作者 于丽 管英俊 +1 位作者 高英茂 李少玲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期33-37,共5页
本文通过构建金黄地鼠神经管cDNA文库,筛选了RPL30基因,并探讨了其与神经管发育的关系。提取胚胎(E)8.5d的金黄地鼠神经管总RNA,用SMART技术构建神经管cDNA的噬菌体表达文库。利用分部分排除技术(SSS法),结合PCR法逐级筛选cDNA文库。将... 本文通过构建金黄地鼠神经管cDNA文库,筛选了RPL30基因,并探讨了其与神经管发育的关系。提取胚胎(E)8.5d的金黄地鼠神经管总RNA,用SMART技术构建神经管cDNA的噬菌体表达文库。利用分部分排除技术(SSS法),结合PCR法逐级筛选cDNA文库。将得到的RPL30阳性噬菌斑进行质粒转化、酶切鉴定及测序分析,进而回收、纯化RPL30cDNA片段并制备探针。用Northern杂交技术检测神经管发育过程中RPL30mRNA的表达状况。结果显示,构建的神经管cDNA文库容量为1.5×106pfu/ml,重组率达到99%,平均插入片段长度大于1kb。经过筛选得到含RPL30cDNA的阳性克隆。序列测定及同源性分析发现,该cDNA片段全长535bp,其中含有完整的开放阅读框。Northern杂交结果显示,在E8d^E12d各时间段,神经管中RPL30mRNA的表达均处于较高水平,且随着时间的增长,表达量递增,于E12d达到高峰。本文结果表明,我们用SSS技术结合PCR法从神经管cDNA文库中克隆到了RPL30基因的全长cDNA序列,该基因可能与神经管发育密切相关。 展开更多
关键词 CDNA文库 神经管 rpl30 SSS法筛选
暂未订购
RPL30基因哺乳动物表达载体的构建及其初步表达分析 被引量：1
2
作者 李丽 朱贵明 +1 位作者 汪坤福 张鹏霞 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1422-1424,共3页
目的克隆RPL30基因并构建其哺乳动物表达载体,然后将该基因导入人肝癌细胞系HepG2进行初步表达分析,并考察RPL30的超表达对硒蛋白P基因转录水平的影响。方法应用RT-PCR方法扩增出目的基因的全长编码区,并利用双酶切连接法将其连入哺乳... 目的克隆RPL30基因并构建其哺乳动物表达载体,然后将该基因导入人肝癌细胞系HepG2进行初步表达分析,并考察RPL30的超表达对硒蛋白P基因转录水平的影响。方法应用RT-PCR方法扩增出目的基因的全长编码区,并利用双酶切连接法将其连入哺乳动物表达载体pcDNA3.1(+)。采用脂质体转染法转染HepG2细胞后应用RT-PCR法检测RPL30基因的表达以及其超表达对硒蛋白P基因转录水平的影响。同时在转染细胞中添加无机硒后研究其对RPL30和硒蛋白P基因转录水平的调控。结果成功地构建了RPL30表达质粒pcDNA3.1-RPL30,转染HepG2细胞后实现基因的超表达,相对于GFP对照转染细胞增加了4～5倍。然而,RPL30基因的超表达并没有显著提高硒蛋白P的转录水平。硒对RPL30基因的表达基本上没有影响,但却显著提高硒蛋白P的表达水平。结论 RPL30哺乳动物表达载体的成功构建以及RPL30超表达后的初步分析为下一步深入研究硒蛋白的生物合成机制打下了基础。 展开更多
关键词 rpl30 克隆 表达载体 硒蛋白P
在线阅读 下载PDF
地高辛标记的金黄地鼠RPL30cDNA探针的制备和应用
3
作者 于丽 陈燕春 +3 位作者 赵春艳 管英俊 高海玲 岳炳德 《潍坊医学院学报》 2006年第6期428-430,I0004,共4页
目的制备地高辛标记的核糖体蛋白RPL30cDNA探针并用其研究RPL30在神经管发育过程中的表达状况。方法利用分部分排除技术(SSS法)从金黄地鼠神经管cDNA文库中逐级筛选得到RPL30cDNA的全长序列;随机引物法制备地高辛标记RPL30cDNA探针,点... 目的制备地高辛标记的核糖体蛋白RPL30cDNA探针并用其研究RPL30在神经管发育过程中的表达状况。方法利用分部分排除技术(SSS法)从金黄地鼠神经管cDNA文库中逐级筛选得到RPL30cDNA的全长序列;随机引物法制备地高辛标记RPL30cDNA探针,点杂交法检测探针的灵敏度;Northern杂交检测神经管发育过程中RPL30mRNA的表达状况。结果本研究从构建的神经管cDNA文库中得到RPL30cDNA片段,全长535bp;制备探针的浓度达到50mg/L;Northern杂交检测发现E8d^E12d神经管中RPL30mRNA的表达均处于较高水平。结论该研究结果为进一步探讨RPL30与神经管发育和神经管畸形发生之间的关系奠定基础。 展开更多
关键词 rpl30 探针 神经管 CDNA文库
暂未订购
RPL30在肝细胞肝癌中的表达及对其进展的影响
4
作者 陆益俊 管其飞 孙倍成 《肝胆外科杂志》 2023年第6期465-470,共6页
目的 研究核糖体蛋白RPL30在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展中的作用.方法 利用GEPIA网站预测RPL30在HCC组织中的表达水平,通过qRT-PCR、蛋白免疫印迹及免疫组织化学染色实验验证其表达.构建稳定敲低和过表达RPL30的... 目的 研究核糖体蛋白RPL30在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展中的作用.方法 利用GEPIA网站预测RPL30在HCC组织中的表达水平,通过qRT-PCR、蛋白免疫印迹及免疫组织化学染色实验验证其表达.构建稳定敲低和过表达RPL30的MHC97H细胞系并利用该细胞系进行体外实验.通过CCK-8和平板克隆实验探究RPL30对HCC细胞增殖能力的影响;通过划痕和transwell实验研究其对细胞迁移和侵袭能力的改变;利用干细胞成球实验和流式细胞术检测HCC细胞肿瘤干性;最后通过蛋白免疫印迹实验确定RPL30的表达对ERK通路的影响.结果 GEPIA数据库的分析结果提示,RPL30在HCC组织高表达,通过qRT-PCR、westem blot及免疫组织化学染色实验对本中心收集的HCC样本检测后得到了一致的结果.CCK-8实验结果显示,RPL30的过表达的细胞增殖速度显著高于对照组.平板克隆实验结果显示,过表达RPL30的MHC97H细胞克隆形成数目明显增多.划痕实验结果表明,RPL30的过表达的HCC细胞迁移距离明显大于转染对照质粒的细胞.Transwell实验提示,过表达RPL30后细胞穿过小室的数目显著增加.与对照组相比,RPL30过表达的MHC97H细胞在干细胞成球实验中成球数目明显增加,CD133的阳性比例升高.此外,RPL30的过表达导致MEK1/2和ERK的磷酸化水平升高,ERK通路激活.结论 RPL30在HCC组织中高表达,其表达水平的升高会增强HCC细胞增殖、迁移、侵袭能力以及肿瘤干性,上调ERK通路的水平. 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 rpl30 ERK通路 肿瘤干性
暂未订购
大熊猫核糖体蛋白L30亚基基因(RPL30)的cDNA克隆及序列分析 被引量：1
5
作者 侯怡铃 侯万儒 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1154-1158,共5页
RPL30是核糖体大亚基60S的组成部分,由RPL30基因所编码,主要存在于真核生物中.根据已报道的部分哺乳动物核糖体蛋白L30亚基基因(RPL30)的相关信息设计引物,运用RT-PCR技术,以大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的肌肉组织为材料,成功地克... RPL30是核糖体大亚基60S的组成部分,由RPL30基因所编码,主要存在于真核生物中.根据已报道的部分哺乳动物核糖体蛋白L30亚基基因(RPL30)的相关信息设计引物,运用RT-PCR技术,以大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的肌肉组织为材料,成功地克隆了核糖体蛋白L30亚基RPL30基因,并对其进行了测序及初步分析.结果表明:大熊猫L30亚基基因的表达序列长为388bp,开放阅读框(ORF)为348 bp,编码115个氨基酸的蛋白质,并含有6个功能位点.进一步分析发现,该基因的表达序列及其编码的氨基酸序列与已报道的人、牛、褐家鼠、小家鼠有很高的相似性,其表达序列同源性分别为93.97%,96.26%,89.66%和89.94%,其编码的氨基酸序列同源性分别为99.13%,98.26%,99.13%,99.13%,且其蛋白质的高级结构相似性也很高. 展开更多
关键词 大熊猫 RT-PCR rpl30 克隆 序列分析
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部