为研究山羊核糖体蛋白L27A(ribosome protein L27A,RPL27A)基因结构及其相关的生物学功能,试验采集简州大耳羊的14种组织样品(心脏、肝脏、脾脏、背最长肌、皮下脂肪等),利用RT-PCR扩增并克隆获得山羊RPL27A基因序列,通过在线工具进行...为研究山羊核糖体蛋白L27A(ribosome protein L27A,RPL27A)基因结构及其相关的生物学功能,试验采集简州大耳羊的14种组织样品(心脏、肝脏、脾脏、背最长肌、皮下脂肪等),利用RT-PCR扩增并克隆获得山羊RPL27A基因序列,通过在线工具进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR技术检测RPL27A基因在各个组织及不同分化阶段的皮下前体脂肪细胞中的表达水平。结果显示,山羊RPL27A基因CDS区长447 bp,可编码148个氨基酸。生物信息学分析表明,RPL27A基因在不同的物种间具有较高的保守性,RPL27A蛋白是不稳定的亲水碱性蛋白,其与脂代谢及脂肪沉积相关的RPS18、RPL26、RPL34、RPL32、RPL37A等核糖体蛋白存在相互作用,RPL27A蛋白没有跨膜结构域,且无信号肽,亚细胞定位表明其主要存在于细胞质中。实时荧光定量PCR结果显示,RPL27A基因在山羊心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、背最长肌、皮下脂肪等14种组织中均有广泛表达,且在瘤胃中表达水平最高,在臂三头肌和股二头肌中也存在较高的表达水平,均显著高于其他组织(P<0.05);RPL27A基因在成脂诱导60 h的山羊皮下脂肪细胞中的表达水平显著高于分化前(P<0.05)。本研究成功克隆了山羊RPL27A基因CDS序列,并揭示了RPL27A基因在山羊14种组织中的表达特性,研究结果可为阐明RPL27A基因对山羊脂肪细胞分化的调控机制提供材料。展开更多
文摘为研究山羊核糖体蛋白L27A(ribosome protein L27A,RPL27A)基因结构及其相关的生物学功能,试验采集简州大耳羊的14种组织样品(心脏、肝脏、脾脏、背最长肌、皮下脂肪等),利用RT-PCR扩增并克隆获得山羊RPL27A基因序列,通过在线工具进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR技术检测RPL27A基因在各个组织及不同分化阶段的皮下前体脂肪细胞中的表达水平。结果显示,山羊RPL27A基因CDS区长447 bp,可编码148个氨基酸。生物信息学分析表明,RPL27A基因在不同的物种间具有较高的保守性,RPL27A蛋白是不稳定的亲水碱性蛋白,其与脂代谢及脂肪沉积相关的RPS18、RPL26、RPL34、RPL32、RPL37A等核糖体蛋白存在相互作用,RPL27A蛋白没有跨膜结构域,且无信号肽,亚细胞定位表明其主要存在于细胞质中。实时荧光定量PCR结果显示,RPL27A基因在山羊心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、背最长肌、皮下脂肪等14种组织中均有广泛表达,且在瘤胃中表达水平最高,在臂三头肌和股二头肌中也存在较高的表达水平,均显著高于其他组织(P<0.05);RPL27A基因在成脂诱导60 h的山羊皮下脂肪细胞中的表达水平显著高于分化前(P<0.05)。本研究成功克隆了山羊RPL27A基因CDS序列,并揭示了RPL27A基因在山羊14种组织中的表达特性,研究结果可为阐明RPL27A基因对山羊脂肪细胞分化的调控机制提供材料。
