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外泌体传递lncRNA RPL23AP82促进胰腺导管腺癌吉西他滨耐药
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作者 孙运鹏 吴欢欢 +3 位作者 庄磊 陈浩然 徐博 黄侠鸣 《武汉大学学报(医学版)》 2025年第7期850-856,905,共8页
目的:探究外泌体传递lncRNA RPL23AP82促进胰腺导管腺癌(PDAC)吉西他滨(GEM)耐药。方法:(1)构建lncRNA RPL23AP82过表达载体并转染至SW1990细胞中后用GEM进行干扰、分组,对比细胞增殖活性、细胞凋亡。(2)SW1990细胞系转染shRNA‑RPL23AP8... 目的:探究外泌体传递lncRNA RPL23AP82促进胰腺导管腺癌(PDAC)吉西他滨(GEM)耐药。方法:(1)构建lncRNA RPL23AP82过表达载体并转染至SW1990细胞中后用GEM进行干扰、分组,对比细胞增殖活性、细胞凋亡。(2)SW1990细胞系转染shRNA‑RPL23AP82并分组,对比miR‑129、PFTK1 mRNA与PFTK1蛋白表达;SW1990细胞系转染miR‑129 mimics或miR‑129 inhibitor,对比PFTK1 mRNA、PFTK1蛋白表达。(3)SW1990细胞系诱导构建GEM耐受型PDAC细胞(SW1990‑GR)并提取外泌体与亲本细胞孵育,分别根据加入GEM、转染sh‑NC或sh‑RPL23AP82、转染sh‑NC或外泌体抑制剂GW4869,对比lncRNA RPL23AP82表达、GEM敏感性变化、细胞凋亡、细胞增殖活性。结果:(1)对比LV‑NC组,LV‑RPL23AP82组RPL23AP82相对表达量、细胞增殖活性更高且细胞凋亡更低,LV‑NC+GEM组细胞增殖活性更低,LV‑RPL23AP82+GEM组细胞增殖活性低于LV‑RPL23AP82组(均P<0.05)。(2)sh‑RPL23AP82组中RPL23AP82相对表达量低于sh‑NC组,对比sh‑NC组,sh‑RPL23AP82组miR‑129表达升高且PFTK1 mRNA、PFTK1蛋白均下降(均P<0.05);对比NC mimics组,miR‑129 mimics组miR‑129表达升高且miR‑129 inhibitor组miR‑129表达降低,miR‑129 mimics组PFTK1 mRNA和PFTK1蛋白水平降低,而miR‑129 inhibitor组PFTK1 mRNA和PFTK1蛋白水平升高(均P<0.05)。(3)SW1990‑GR组lncRNA RPL23AP82表达、SW1990‑GR组细胞增殖活性升高,对比SW1990‑GR组,SW1990‑GR+GEM组细胞增殖活性下调且细胞凋亡升高,耐药细胞SW1990‑GR与GEM共干扰后细胞凋亡下降(均P<0.05);敲低RPL23AP82后细胞增殖活性下调;GW4869抑制外泌体分泌后GW4869降低,抑制细胞增殖活性;抑制剂GW4869处理细胞增殖活性下降,细胞凋亡上升(均P<0.05)。结论:外泌体上调lncRNA RPL23AP82可降低miR‑129表达并通过刺激PFTK1表达促进吉西他滨耐药。 展开更多
关键词 胰腺导管癌 细胞周期蛋白依赖性激酶14 长链非编码RNA rpl23ap82 微小非编码RNA‑129 细胞增殖 细胞凋亡 吉西他滨 耐药
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