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稳定转染COL1 A1-EGFP基因的ROS17/2.8细胞株的建立 被引量:2
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作者 戴钟铨 丁柏 +2 位作者 李莹辉 张玉国 刘芃芃 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期107-110,共4页
目的构建稳定表达由COL1A1启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的ROS1 7/2 .8细胞株。方法用PCR方法从大鼠基因组DNA中扩增出长为 3.6Kb的COL1A1 (Ⅰ型胶原α1链基因 )启动子 ,并克隆到T载体 ;然后将COL1A1启动子分段酶切 ,获得不同... 目的构建稳定表达由COL1A1启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的ROS1 7/2 .8细胞株。方法用PCR方法从大鼠基因组DNA中扩增出长为 3.6Kb的COL1A1 (Ⅰ型胶原α1链基因 )启动子 ,并克隆到T载体 ;然后将COL1A1启动子分段酶切 ,获得不同长度的启动子片段 ;与报告基因EGFP相连接 ,构建成真核表达载体 ;随后转染ROS1 7/2 .8细胞系 ,再用G41 8筛选。结果得到了稳定转染COL1A1 EGFP基因的ROS1 7/2 .8细胞株。结论 这些细胞株的建立为研究微重力对COL1A1启动子活性及成骨相关基因表达的影响奠定基础。 展开更多
关键词 失重模拟 启动子 成骨细胞 COL Ⅰα1 ros17/2.8 细胞株 基因表达
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模拟失重对大鼠骨肉瘤成骨样细胞分化相关物质表达的作用 被引量:1
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作者 王冰 张舒 吴兴裕 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第12期1136-1138,共3页
目的 :观察回转器模拟失重对大鼠骨肉瘤成骨样细胞 (ROS17/ 2 .8)分化相关物质表达的作用 .方法 :对培养的ROS17/ 2 .8细胞采用回转器模拟失重 72h ,同时设 1G对照组 .提取细胞总RNA ,进行反转录PCR ,检测I型胶原 (1链(collagenIα1)和... 目的 :观察回转器模拟失重对大鼠骨肉瘤成骨样细胞 (ROS17/ 2 .8)分化相关物质表达的作用 .方法 :对培养的ROS17/ 2 .8细胞采用回转器模拟失重 72h ,同时设 1G对照组 .提取细胞总RNA ,进行反转录PCR ,检测I型胶原 (1链(collagenIα1)和碱性磷酸酶 (ALP)mRNA的表达情况 .同时采用ELISA法测定细胞内I型胶原蛋白的表达量 .结果 :模拟失重 72h后 ,ROS17/ 2 .8细胞内collagenIα1和ALP的基因表达量以及I型胶原蛋白的表达量显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) .结论 :回转器模拟失重 72h可使大鼠骨肉瘤成骨样细胞 (ROS17/ 2 .8) 展开更多
关键词 失重模拟 rosl7/2.8细胞 胶原 碱性磷酸酶
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