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RNase9蛋白的抗菌活性及在炎性附睾组织中的表达
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作者 刘杰 孙成铭 +1 位作者 张成林 张守信 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第10期1193-1193,1195,共2页
目的探讨附睾特异表达RNase9蛋白活性及其在炎性附睾组织中的表达情况。方法主要通过体外实验研究其抗菌活性,通过Western blot和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分析正常附睾组织和炎性附睾组织中RNase9蛋白表达情况。结果 RNase9蛋白具... 目的探讨附睾特异表达RNase9蛋白活性及其在炎性附睾组织中的表达情况。方法主要通过体外实验研究其抗菌活性,通过Western blot和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分析正常附睾组织和炎性附睾组织中RNase9蛋白表达情况。结果 RNase9蛋白具有抗菌活性;在炎性附睾组织中RNase9蛋白表达水平升高。结论 RNase9蛋白可能参与附睾炎症过程。 展开更多
关键词 附睾炎 蛋白 rnase9 抗菌
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食肉目生殖酶RNase9的分子进化研究
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作者 郎大田 王俊辉 +1 位作者 刘松菊 朗启雄 《玉溪师范学院学报》 2018年第12期28-33,共6页
以食肉目2个超科7科14个代表物种为研究对象,分析获得14条RNase9序列,包含10条真基因和4条假基因.与典型核糖核酸酶基因超家族成员(RNase1-8)相比,催化活性氨基酸H-K-H和保守的功能区"CKXXNTF"在RNase9中发生了改变.基于RNase... 以食肉目2个超科7科14个代表物种为研究对象,分析获得14条RNase9序列,包含10条真基因和4条假基因.与典型核糖核酸酶基因超家族成员(RNase1-8)相比,催化活性氨基酸H-K-H和保守的功能区"CKXXNTF"在RNase9中发生了改变.基于RNase9构建的系统发育树以超科形式聚集,为食肉目的亲缘关系提供了一种可能性参考.另外,RNase9等电点较低,平均值为6.461,显著低于RNASE A典型成员,揭示食肉目RNase9除与生殖功能相关外,可能不再具有RNASE A所特有核糖核酸酶活性和抗菌活性. 展开更多
关键词 rnase9 食肉目 分子进化 系统发育 等电点
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附睾特异RNase9蛋白对精子的作用 被引量:1
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作者 刘杰 孙成铭 +1 位作者 张成林 张守信 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期14-18,共5页
目的研究附睾特异表达的RNase9蛋白在精子获能过程中的作用及对精子运动的影响。方法本实验主要采用免疫荧光技术、金霉素染色法以及计算机辅助精子分析法研宄RNase9蛋白或抗体对精子的作用。结果精子在获能过程中RNase9蛋白的定位不断... 目的研究附睾特异表达的RNase9蛋白在精子获能过程中的作用及对精子运动的影响。方法本实验主要采用免疫荧光技术、金霉素染色法以及计算机辅助精子分析法研宄RNase9蛋白或抗体对精子的作用。结果精子在获能过程中RNase9蛋白的定位不断发生改变,顶体反应发生后,精子头部的RNase9蛋白荧光信号明显减弱或消失。精子与RNase9蛋白共同孵育后,精子运动能力也明显降低。结论RNase9蛋白参与精子获能过程并在体外抑制精子的运动。 展开更多
关键词 精子 rnase9 获能 运动
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RNase9蛋白在男性生殖系统中的表达及功能
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作者 刘杰 张守信 +2 位作者 张成林 孙隽 孙成铭 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2015年第4期296-302,共7页
目的:研究核糖核酸酶9(RNase9)在男性生殖系统中的表达、定位及功能,为其异常所引起的不育症诊断和治疗提供理论基础。方法采用生物信息学分析人RNase9的结构,预测其功能;利用基因重组技术构建了原核表达载体制备重组RNase9蛋白... 目的:研究核糖核酸酶9(RNase9)在男性生殖系统中的表达、定位及功能,为其异常所引起的不育症诊断和治疗提供理论基础。方法采用生物信息学分析人RNase9的结构,预测其功能;利用基因重组技术构建了原核表达载体制备重组RNase9蛋白。通过RT-PCR检测RNase9蛋白在不同组织中的表达,比较老年人(76.3±8.1岁)、成年人(31.2±5.6岁)和胎儿(0.8±0.2岁)附睾组织RNase9蛋白表达量的差异。应用免疫荧光实验观察RNase9蛋白在睾丸、附睾、精子上的定位。应用酵母tRNA底物实验检测RNase9核糖核酸酶活性。分别向精子悬液中加入免疫前血清(A组)和鼠抗RNase9多抗血清(B组),应用抗体封闭精子运动实验检测RNase9蛋白对精子运动能力[平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)]的影响。8~12周龄金黄地鼠肌注孕激素和人绒毛膜促性腺激素,取卵子与两组精子孵育后(A组精子用免疫前血清,B组精子用RNase9抗血清封闭5 h;实验中所用卵子的数目分别是A组60个和B组62个),应用抗体封闭精子穿卵实验检测RNase9蛋白对精子穿卵能力的影响。结果经过生物信息学分析,RNase9基因属于核糖核酸酶A超家族一新成员,N末端含23个氨基酸的信号肽序列,相对分子质量约为20000,等电点PI 5.92;含5个N-糖基化位点、2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点、1个NDUFC2位点和2个胰-核糖核酸酶功能域标签位点。RNase9蛋白在人附睾、睾丸、心脏,肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、胃多种组织广泛表达,在附睾组织中表达量较高;在成年人附睾组织中的表达量明显高于胎儿和老年人附睾组织(均P〈0.05)。RNase9蛋白特异结合在精子的赤道后颈部,原核表达获得高纯度具有生物活性的重组蛋白和相应的抗体。核糖核酸酶实验显示RNase9蛋白缺乏核糖核酸酶活性,为0.111±0.007。抗体封闭精子后不影响精子的运动及穿卵能力,两组VAP、VSL、VCL和受精率差异没有统计学意义(均P〉0.05)。结论 RNase9蛋白在附睾及精子上的表达及定位表明该蛋白可能在男性精子成熟及发育过程中起重要作用,但不影响成熟精子的运动及穿卵能力。 展开更多
关键词 rnase9 睾丸 附睾 精子 精子能动性 精子卵子相互作用
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Birth-and-death evolution of ribonuclease 9 genes in Cetartiodactyla 被引量:2
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作者 Datian Lang Xiaoping Wang +6 位作者 Chunbing Liu Weihang Geng David M.Irwin Shanyuan Chen Chunqing Li Li Yu Heng Xiao 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2023年第5期1170-1182,共13页
RNase9 plays a reproductive function and has been recognized as an important member of the ribonuclease(RNase)A superfamily,a gene family that is widely used as a model for molecular evolutionary studies.Here,we ident... RNase9 plays a reproductive function and has been recognized as an important member of the ribonuclease(RNase)A superfamily,a gene family that is widely used as a model for molecular evolutionary studies.Here,we identified 178 RNase9 genes from 95 Cetartiodactyla species that represent all four lineages and 21 families of this clade.Unexpectedly,RNase9experienced an evolutionary scenario of“birth and death”in Ruminantia,and expression analyses showed that duplicated RNase9A and RNase9B genes are expressed in reproductive tissues(epididymis,vas deferens or prostate).This expression pattern combined with the estimate that these genes duplicated during the middle Eocene,a time when Ruminantia become a successful lineage,suggests that the RNase9 gene duplication might have been advantageous for promoting sperm motility and male fertility as an adaptation to climate seasonality changes of this period.In contrast,all RNase9 genes were lost in the Cetacean lineage,which might be associated with their high levels of prostatic lesions and lower reproductive rates as adaptations to a fully aquatic environment and a balance to the demands of ocean resources.This study reveals a complex and intriguing evolutionary history and functional divergence for RNase9 in Cetartiodactyla,providing new insights into the evolution of the RNaseA superfamily and molecular mechanisms for organismal adaptations to the environment. 展开更多
关键词 rnase9 gene duplication gene loss CETARTIODACTYLA
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