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干扰lncRNARNF5-AS1对奶牛乳腺上皮细胞炎症反应的影响
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作者 虎喜敏 周冉 +3 位作者 王正兴 李宇航 罗仍卓么 王兴平 《生物技术通报》 北大核心 2025年第5期333-342,共10页
【目的】长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)能够通过直接调控下游分子或竞争性结合微小RNA(microRNA,miRNA)参与奶牛乳房炎症过程。lncRNA RNF5-AS1是新发现的lncRNA,旨在分析lncRNA RNF5-AS1在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammar... 【目的】长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)能够通过直接调控下游分子或竞争性结合微小RNA(microRNA,miRNA)参与奶牛乳房炎症过程。lncRNA RNF5-AS1是新发现的lncRNA,旨在分析lncRNA RNF5-AS1在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,bMECs)炎症反应中的作用。【方法】利用RT-PCR技术进行lncRNA RNF5-AS1的克隆,采用核质分离法探究其在bMECs中的亚细胞定位情况。采用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导bMECs建立炎症模型,并利用RTqPCR检测lncRNA RNF5-AS1在炎性bMECs中的表达水平;干扰lncRNA RNF5-AS1后,检测促炎细胞因子表达水平,并利用CCK-8法和EdU法分别评估细胞活力和增殖能力;通过流式细胞术分析细胞凋亡情况。进一步通过在线工具预测lncRNA RNF5-AS1的潜在靶基因。【结果】lncRNA RNF5-AS1长度为1125 bp,主要分布于细胞质中。在LPS诱导的bMECs炎症模型中,lncRNA RNF5-AS1表达水平显著上调;干扰lncRNA RNF5-AS1后,促炎因子IL-6和IL-8的表达水平显著下调,细胞活力和增殖能力显著增加,细胞凋亡水平极显著降低。KEGG结果表明,lncRNA RNF5-AS1可能通过靶向bta-miR-375、bta-miR-615、bta-miR-193a-5p、btamiR-1291和bta-miR-1468而调控细胞炎症反应。【结论】lncRNA RNF5-AS1在bMECs炎症反应中表达上调,干扰后会抑制促炎因子的表达和细胞凋亡,提升细胞活力和增殖能力,提示其参与奶牛乳房炎的调控。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 lncRNA rnf5-AS1 乳腺上皮细胞 炎症因子
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E3泛素连接酶RNF5调控口蹄疫病毒粒子组装抑制病毒复制的分子机制
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作者 《中国兽医科学》编辑部 郑海学 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第5期705-706,共2页
口蹄疫病毒(FMDV)编码四种结构蛋白,其中VP1蛋白是病毒表面的主要衣壳蛋白,在病毒入侵和抗原性方面发挥关键作用,决定病毒的致病力和组织嗜性。2025年1月17日,中国农业科学院兰州兽医研究所郑海学研究员带领的科研团队在PLoS Pathogens... 口蹄疫病毒(FMDV)编码四种结构蛋白,其中VP1蛋白是病毒表面的主要衣壳蛋白,在病毒入侵和抗原性方面发挥关键作用,决定病毒的致病力和组织嗜性。2025年1月17日,中国农业科学院兰州兽医研究所郑海学研究员带领的科研团队在PLoS Pathogens期刊上发表了题为“RING finger protein 5 is a key anti-FMDV host factor through inhibition of virion assembly”的研究论文,该研究揭示了环指蛋白5(RNF5)依赖其E3泛素酶活性介导FMDV VP1蛋白降解并限制病毒组装的功能机制,为广谱抗小RNA病毒药物的研发提供了理论依据,为抗病育种提供新思路。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 VP1 rnf5 病毒组装
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乳腺癌中环指蛋白5(RNF5)基因表达水平的研究
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作者 王曦 李春义 +4 位作者 张红军 宗振久 胡永胜 于新路 郑新宇 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期2397-2399,共3页
目的探讨乳腺癌中RNF5基因mRNA和蛋白表达水平的变化。方法取51例乳腺癌标本,并以癌旁正常组织为对照,应用半定量RT-PCR方法检测乳腺癌中RNF5基因mRNA表达水平,应用Western印迹杂交方法检测相应标本中蛋白表达水平。结果在51例标本中,3... 目的探讨乳腺癌中RNF5基因mRNA和蛋白表达水平的变化。方法取51例乳腺癌标本,并以癌旁正常组织为对照,应用半定量RT-PCR方法检测乳腺癌中RNF5基因mRNA表达水平,应用Western印迹杂交方法检测相应标本中蛋白表达水平。结果在51例标本中,31例癌组织中RNF5mRNA表达水平高于癌旁正常组织,33例中RNF5蛋白表达水平增高,经统计分析两组差异显著(P<0.05)。结论RNF5基因在乳腺癌中存在高表达,这可能是乳腺癌发生发展的另一新的分子机制。 展开更多
关键词 乳腺癌 rnf5 表达
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乙型肝炎病毒HBx蛋白诱导肝细胞泛素连接酶RNF5抑制STING/IFN-β信号通路的研究 被引量:2
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作者 杨凯 潘颖 +3 位作者 宇芙蓉 张发苏 陈谨 李芳 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第9期1005-1009,1014,共6页
目的研究乙型肝炎病毒编码X蛋白(HBx)对HepG2细胞STING/IFN-β信号通路的影响及其可能存在的机制。方法将含HBV全基因组1.5倍复制子质粒pHBV-48和缺失HBV X基因的HBV复制子质粒pHBV-48-X_(0)分别转染至HepG2细胞,采用细胞免疫荧光染色... 目的研究乙型肝炎病毒编码X蛋白(HBx)对HepG2细胞STING/IFN-β信号通路的影响及其可能存在的机制。方法将含HBV全基因组1.5倍复制子质粒pHBV-48和缺失HBV X基因的HBV复制子质粒pHBV-48-X_(0)分别转染至HepG2细胞,采用细胞免疫荧光染色法观察细胞内HBx蛋白表达情况,同时采用实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞内干扰素基因刺激因子(STING)基因表达水平及蛋白含量。分别转染空载体pEGFP-N1和HBV编码X基因表达质粒pEGFP-HBx至HepG2细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞内STING及环指蛋白5(RNF5)基因和蛋白含量。采用基因干扰技术减少转染质粒的HepG2细胞RNF5表达,Western blot检测细胞STING、干扰素β(IFN-β)蛋白表达情况;以不同浓度蛋白酶抑制剂MG132处理转染pEGFP-HBx的HepG2细胞,Western blot检测细胞内STING、IFN-β蛋白表达情况。结果转染空载体、pHBV-48及pHBV-48-X_(0)的HepG2细胞STING基因相对含量差异无统计学意义(P>0.05);转染空载体的HepG2细胞STING蛋白(1.14±0.11)相对表达水平较转染pHBV-48的HepG2细胞(0.47±0.09)显著升高(P<0.01),但低于转染pHBV-48-X_(0)的HepG2细胞(2.15±0.18)(P<0.01)。转染空载体及pEGFP-HBx的HepG2细胞STING基因相对含量差异均无统计学意义(均P>0.05),但转染pEGFP-HBx的HepG2细胞STING蛋白(0.48±0.16)相对含量较转染空载体的细胞(0.87±0.22)显著降低(P<0.01);与转染空载体的HepG2细胞相比,转染pEGFP-HBx的HepG2细胞RNF5基因相对表达水平及蛋白相对含量均显著升高(均P<0.01)。减少HepG2细胞RNF5表达后,细胞内STING和IFN-β相对蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。随着蛋白酶抑制剂MG132浓度逐渐升高,表达HBx的HepG2细胞内STING和IFN-β蛋白相对含量逐渐上升。结论乙型肝炎病毒可能通过病毒编码蛋白HBx上调肝细胞泛素连接酶RNF5进而抑制STING/IFN-β信号通路。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 HBX rnf5 STING/IFN-β信号通路
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RNF5调控HRD1泛素化参与大鼠妊娠期糖尿病发展的机制研究
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作者 魏小敏 王丽丽 +2 位作者 刘海霞 杨玉侠 宋志慧 《标记免疫分析与临床》 CAS 2023年第2期327-331,共5页
目的探究E3泛素蛋白连接酶(E3 ubiquitin protein ligase,RNF5)调控泛素连接酶复合物(ubiquitin ligase complex1,HRD1)及其泛素化修饰过程参与妊娠期糖尿病发展的分子机制。方法对SPF级怀孕SD大鼠进行STZ注射构建妊娠期糖尿病模型,将... 目的探究E3泛素蛋白连接酶(E3 ubiquitin protein ligase,RNF5)调控泛素连接酶复合物(ubiquitin ligase complex1,HRD1)及其泛素化修饰过程参与妊娠期糖尿病发展的分子机制。方法对SPF级怀孕SD大鼠进行STZ注射构建妊娠期糖尿病模型,将大鼠随机分为对照组(n=15)、模型组(n=15)、NC组(n=15)和si-RNF5组(n=15),其中NC组转染NC质粒,si-RNF5组转染si-RNF5质粒,对照组和模型组给与等量生理盐水。HE染色检测各组大鼠肾脏组织病理变化;大生化检测血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿蛋白,血糖仪检测空腹血糖,通过qPCR和Western blot检测肾脏组织RNF5和HRD1的mRNA和蛋白表达水平及泛素化修饰水平。结果HE染色结果表明敲除RNF5后能显著降低妊娠期糖尿病大鼠肾脏损伤;降低外周血Scr、BUN、尿蛋白和空腹血糖水平,并且显著抑制HRD1的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01),同时降低HRD1的泛素化修饰过程。结论敲除RNF5可以降低妊娠期糖尿病大鼠肾脏损伤,其机制可能与抑制RNF5信号通路泛素化有关。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 大鼠 肾脏损伤 rnf5信号通路 泛素化
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抗病毒天然免疫通路中IRF-3调控新机制 被引量:2
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作者 刘殿波 钱远宇 +1 位作者 张七斤 陈忠斌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1090-1095,共6页
干扰素调节因子-3(interferonregulatoryfactor-3,IRF-3)是IRF家族中重要转录因子之一,在调控干扰素(interferon,IFN)基因表达和抗病毒天然免疫反应中具有重要作用.最新发现的MITA(mediator of IRF-3 activation,又称STING/ERIS)蛋白是... 干扰素调节因子-3(interferonregulatoryfactor-3,IRF-3)是IRF家族中重要转录因子之一,在调控干扰素(interferon,IFN)基因表达和抗病毒天然免疫反应中具有重要作用.最新发现的MITA(mediator of IRF-3 activation,又称STING/ERIS)蛋白是宿主抗病毒天然免疫反应中的一种重要调节分子.病毒侵染时,MITA与IRF-3相互作用,特异性激活IRF-3,并募集TANK结合激酶1(TANKbindingkinase 1,TBK1)与IFN通路中的线粒体抗病毒信号蛋白MAVS(mitochondrial anti-viralsignaling protein)形成复合物,且MITA可被TBK1磷酸化,诱导Ⅰ型IFN及IFN刺激基因(interferonstimulate genes,ISG)的表达,诱发抗病毒天然免疫反应.同时还发现,泛素连接酶RNF5(ringfingerprotein 5)可对MITA发生泛素化修饰从而抑制其对IRF-3活化,实现对宿主抗病毒天然免疫反应负调节作用.本室研究发现,严重性急性呼吸系统综合症冠状病毒(severe acute respiratory syndromecoronavirus,SARS-CoV)和人类新型冠状病毒(human coronavirus NL63,HCoV-NL63)的木瓜样蛋白酶(papain-like protease,PLP)利用其特有的去泛素化酶(deubiquitinase,DUB)活性,通过宿主细胞泛素-蛋白酶体信号系统对IRF-3的泛素化等翻译后修饰进行调节,从而成为该种病毒逃逸机体抗病毒防御系统主要手段之一. 展开更多
关键词 抗病毒天然免疫 干扰素 干扰素调节因子-3 MITA rnf5
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