为分析E3泛素连接酶环指蛋白125(ring finger protein 125,RNF125)在肝癌中的表达及临床预后意义,并探究RNF125对肝癌侵袭和转移的影响及其作用机制,通过ENCORI数据库和临床组织样本分析RNF125在肝癌和癌旁组织中的表达量,使用ENCORI数...为分析E3泛素连接酶环指蛋白125(ring finger protein 125,RNF125)在肝癌中的表达及临床预后意义,并探究RNF125对肝癌侵袭和转移的影响及其作用机制,通过ENCORI数据库和临床组织样本分析RNF125在肝癌和癌旁组织中的表达量,使用ENCORI数据库分析RNF125与肝癌预后的关系。构建敲低和过表达RNF125的肝癌细胞系,通过Transwell试验和细胞划痕试验检验RNF125表达水平对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响。通过动物试验验证调控RNF125对体内肿瘤生长情况及对肿瘤免疫微环境的影响,质谱分析寻找RNF125的靶蛋白,qPCR、蛋白质免疫印迹技术、泛素化试验验证RNF125与MYH9之间的关系,通过蛋白质免疫印迹和细胞免疫荧光技术确定调控RNF125与MYH9对EMT标志蛋白的影响。结果表明:RNF125在肝癌组织中表达较低,RNF125的高表达提示良好的预后。RNF125的表达水平与肝癌细胞迁移和侵袭能力呈负相关。过表达RNF125使肿瘤生长延迟并增加免疫细胞的浸润水平。RNF125特异性结合MYH9并促进其泛素化降解。RNF125与上皮细胞标志物的表达水平呈正相关,与间充质细胞标志物呈负相关。过表达MYH9可逆转RNF125对EMT标志蛋白的影响。综上,RNF125在肝癌中表达下调,RNF125的高表达与肝癌患者的良好预后相关,RNF125通过泛素化MYH9来抑制肝癌的EMT过程,从而抑制肝癌的迁移和侵袭。展开更多
文摘为分析E3泛素连接酶环指蛋白125(ring finger protein 125,RNF125)在肝癌中的表达及临床预后意义,并探究RNF125对肝癌侵袭和转移的影响及其作用机制,通过ENCORI数据库和临床组织样本分析RNF125在肝癌和癌旁组织中的表达量,使用ENCORI数据库分析RNF125与肝癌预后的关系。构建敲低和过表达RNF125的肝癌细胞系,通过Transwell试验和细胞划痕试验检验RNF125表达水平对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响。通过动物试验验证调控RNF125对体内肿瘤生长情况及对肿瘤免疫微环境的影响,质谱分析寻找RNF125的靶蛋白,qPCR、蛋白质免疫印迹技术、泛素化试验验证RNF125与MYH9之间的关系,通过蛋白质免疫印迹和细胞免疫荧光技术确定调控RNF125与MYH9对EMT标志蛋白的影响。结果表明:RNF125在肝癌组织中表达较低,RNF125的高表达提示良好的预后。RNF125的表达水平与肝癌细胞迁移和侵袭能力呈负相关。过表达RNF125使肿瘤生长延迟并增加免疫细胞的浸润水平。RNF125特异性结合MYH9并促进其泛素化降解。RNF125与上皮细胞标志物的表达水平呈正相关,与间充质细胞标志物呈负相关。过表达MYH9可逆转RNF125对EMT标志蛋白的影响。综上,RNF125在肝癌中表达下调,RNF125的高表达与肝癌患者的良好预后相关,RNF125通过泛素化MYH9来抑制肝癌的EMT过程,从而抑制肝癌的迁移和侵袭。