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RNF125泛素化MYH9抑制肝癌侵袭、转移机制研究
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作者 王顺意 唐浩 +1 位作者 缪阳杨 柏斗胜 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第3期53-64,共12页
为分析E3泛素连接酶环指蛋白125(ring finger protein 125,RNF125)在肝癌中的表达及临床预后意义,并探究RNF125对肝癌侵袭和转移的影响及其作用机制,通过ENCORI数据库和临床组织样本分析RNF125在肝癌和癌旁组织中的表达量,使用ENCORI数... 为分析E3泛素连接酶环指蛋白125(ring finger protein 125,RNF125)在肝癌中的表达及临床预后意义,并探究RNF125对肝癌侵袭和转移的影响及其作用机制,通过ENCORI数据库和临床组织样本分析RNF125在肝癌和癌旁组织中的表达量,使用ENCORI数据库分析RNF125与肝癌预后的关系。构建敲低和过表达RNF125的肝癌细胞系,通过Transwell试验和细胞划痕试验检验RNF125表达水平对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响。通过动物试验验证调控RNF125对体内肿瘤生长情况及对肿瘤免疫微环境的影响,质谱分析寻找RNF125的靶蛋白,qPCR、蛋白质免疫印迹技术、泛素化试验验证RNF125与MYH9之间的关系,通过蛋白质免疫印迹和细胞免疫荧光技术确定调控RNF125与MYH9对EMT标志蛋白的影响。结果表明:RNF125在肝癌组织中表达较低,RNF125的高表达提示良好的预后。RNF125的表达水平与肝癌细胞迁移和侵袭能力呈负相关。过表达RNF125使肿瘤生长延迟并增加免疫细胞的浸润水平。RNF125特异性结合MYH9并促进其泛素化降解。RNF125与上皮细胞标志物的表达水平呈正相关,与间充质细胞标志物呈负相关。过表达MYH9可逆转RNF125对EMT标志蛋白的影响。综上,RNF125在肝癌中表达下调,RNF125的高表达与肝癌患者的良好预后相关,RNF125通过泛素化MYH9来抑制肝癌的EMT过程,从而抑制肝癌的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 肝癌 rnf125 MYH9 泛素化 EMT 迁移 侵袭
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RNF125介导的RIG-I泛素化降解减少促进肾脏炎症和纤维化进展
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作者 李露新 姬婷婷 +3 位作者 陆丽 李肖瑛 陆利民 白寿军 《生理学报》 北大核心 2025年第3期385-394,共10页
持续的炎症反应是肾脏纤维化发生和进展的关键因素。模式识别受体维甲酸诱导基因I(retinoic acid-inducible geneI,RIG-I)激活引起的炎症因子生成参与肾脏纤维化进展,本研究旨在探讨调控RIG-I的上游机制。选用8周龄雄性C57BL/6小鼠,用... 持续的炎症反应是肾脏纤维化发生和进展的关键因素。模式识别受体维甲酸诱导基因I(retinoic acid-inducible geneI,RIG-I)激活引起的炎症因子生成参与肾脏纤维化进展,本研究旨在探讨调控RIG-I的上游机制。选用8周龄雄性C57BL/6小鼠,用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)建立肾纤维化模型,14天后收集组织样本进行分析。离体实验在转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)刺激的小鼠肾小管上皮细胞中进行。结果显示,与对照组相比,UUO小鼠肾脏出现明显的纤维化改变,RIG-I、磷酸化NF-κB p65和炎症因子水平升高,同时E3泛素连接酶RNF125的蛋白水平明显下调,并且主要定位在肾小管上皮细胞;在离体培养的肾小管上皮细胞中给予TGF-β刺激同样引起RIG-I、磷酸化NF-κB p65和炎症因子水平升高,并伴有RNF125水平下降;RIG-I能够发生泛素化修饰,免疫共沉淀结果验证了RNF125与RIG-I存在直接相互作用,且过表达RNF125能够促进RIG-I的泛素化,加速RIG-I通过泛素蛋白酶体途径降解。在肾组织和离体肾小管上皮细胞中过表达RNF125可以有效缓解炎症反应和肾脏纤维化。综上所述,本研究结果证实,在病理情况下RNF125水平下降,导致RIG-I的泛素化降解减少,下游NF-κB信号通路激活,炎症因子产生增加,最终促进肾脏纤维化的进展。 展开更多
关键词 肾纤维化 炎症 泛素化 rnf125 RIG-I
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RNF125通过泛素化修饰caspase-1 p33活性亚基促进炎症应答
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作者 林浩天 范廷辉 +2 位作者 耿晋 杨小盼 王斌 《安徽大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第5期101-108,共8页
为探讨RNF125在调控caspase-1中的功能及作用机制,利用免疫共沉淀、GST pull-down和免疫荧光等技术证明RNF125和caspase-1 p33亚基之间的相互作用;分析RNF125对p33亚基泛素化修饰的方式;通过siRNA技术降低THP-1细胞中RNF125的表达,检测R... 为探讨RNF125在调控caspase-1中的功能及作用机制,利用免疫共沉淀、GST pull-down和免疫荧光等技术证明RNF125和caspase-1 p33亚基之间的相互作用;分析RNF125对p33亚基泛素化修饰的方式;通过siRNA技术降低THP-1细胞中RNF125的表达,检测RNF125敲低前后细胞受LPS+ATP刺激时IL-1β的分泌情况;以腹腔注射叶酸的方式构建RNF125^(+/+)和RNF125^(-/-)小鼠的肾炎模型,分析血清中尿素水平,称量小鼠体重和肾脏重量并计算肾重比.结果显示,RNF125可与caspase-1 p33亚基直接相互作用,且RNF125抑制了caspase-1 p33亚基的K48聚泛素化修饰;与对照组相比,敲低RNF125表达的THP-1细胞在受到LPS+ATP刺激时,分泌的IL-1β显著减少;肾炎模型的结果显示,RNF125敲除型小鼠的肾脏肿胀不明显,尿素水平和肾重比均显著低于野生型小鼠.该研究首次发现了E3泛素连接酶RNF125与caspase-1活性亚基p33之间的相互作用,并证明它可通过影响caspase-1 p33亚基的泛素化修饰促进炎症反应的信号传导. 展开更多
关键词 rnf125 caspase-1 p33 泛素化 炎症反应 信号传导
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