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RIPK1/RIPK3/MLKL通路介导的坏死性凋亡促进大鼠冠状动脉微栓塞所致心肌损伤
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作者 刘阳春 杨华锋 +2 位作者 黄源 苏强 黄万众 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第12期2307-2313,共7页
目的:探讨受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1,RIPK1)/RIPK3/混合谱系激酶结构域样区域蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)通路介导坏死性凋亡促进大鼠冠状动脉微栓塞(coronary microembol... 目的:探讨受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1,RIPK1)/RIPK3/混合谱系激酶结构域样区域蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)通路介导坏死性凋亡促进大鼠冠状动脉微栓塞(coronary microembolization,CME)所致心肌损伤的作用机制。方法:将24只大鼠按随机分为假手术(sham)组、CME组和坏死性凋亡抑制剂necrostatin-1(Nec-1)组,每组8只;超声心动图测定心功能;HE染色观察心肌病理改变;Heidenhain染色测定心肌微梗死面积;透射电镜观察大鼠心肌细胞超微结构变化;ELISA法检测血清白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)水平;Western blot检测心肌组织RIPK1/RIPK3/MLKL通路相关蛋白的表达。结果:与sham组相比,CME组大鼠心功能显著下降,血清cTnT水平显著升高(P<0.05)。CME组心肌排列疏松,部分细胞核出现核碎裂和核溶解;心肌细胞线粒体肿胀并空泡化,线粒体嵴断裂甚至消失;心肌微梗死面积显著增加(P<0.05)。此外,炎症因子IL-1β和TNF-α的表达显著增加,p-RIPK1/RIPK1、p-RIPK3/RIPK3和p-MLKL/MLKL蛋白比值均显著上调(P<0.05)。与CME组相比,Nec-1能够显著改善心功能,降低血清cTnT水平,减少心肌微梗死面积,并显著降低血清中炎症因子IL-1β和TNF-α的分泌(P<0.05)。经Nec-1干预后,p-RIPK1/RIPK1、p-RIPK3/RIPK3和p-MLKL/MLKL蛋白比值均显著下调(P<0.05)。结论:RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路可能通过介导心肌细胞的坏死性凋亡,参与CME大鼠的病理进程。抑制该信号通路能够显著改善大鼠的心功能,减少微梗死面积,并减轻心肌炎症反应。 展开更多
关键词 冠状动脉微栓塞 坏死性凋亡 心肌损伤 ripk1/ripk3/MLKL通路
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胡桃醌对急性髓系白血病细胞增殖抑制作用及RIPK1/RIPK3/MLKL表达的影响 被引量:1
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作者 吕纯懿 殷学伟 +5 位作者 李宗宏 韩晨 王琰 王振振 刘绿野 徐瑞荣 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第4期980-985,共6页
目的:研究胡桃醌对急性髓系白血病(AML)细胞增殖与凋亡的影响和机制。方法:从公共数据库收集胡桃醌及AML靶点,取交集靶点群进行功能富集分析,发掘胡桃醌作用于AML的潜在机制,进行湿实验验证。不同浓度的胡桃醌处理KG-1a、MV-411、THP-1... 目的:研究胡桃醌对急性髓系白血病(AML)细胞增殖与凋亡的影响和机制。方法:从公共数据库收集胡桃醌及AML靶点,取交集靶点群进行功能富集分析,发掘胡桃醌作用于AML的潜在机制,进行湿实验验证。不同浓度的胡桃醌处理KG-1a、MV-411、THP-1、MOLM-13细胞24 h,MTT检测细胞活力并确定IC50值,筛选最敏感的细胞株进行后续实验。流式细胞术检测不同浓度胡桃醌作用于细胞的凋亡情况。Western blot检测相关蛋白表达情况。结果:获得11个胡桃醌干预AML的潜在靶点,该靶点群显著富集的前十位通路为凋亡的内在途径、程序性细胞死亡、细胞色素c介导的凋亡反应、细胞凋亡、凋亡因子介导的反应、调节性坏死、免疫系统中的细胞因子信号传导、白细胞介素的信号传导、癌基因诱导的衰老及信号转导。胡桃醌处理24 h后的KG-1a、MV-411、THP-1、MOLM-13细胞存活率随着胡桃醌浓度增加而降低(r=-0.992,-0.886,-0.956,-0.910),其中MOLM-13细胞对胡桃醌最为敏感。流式细胞术结果显示,随胡桃醌作用浓度不断升高,MOLM-13细胞凋亡率呈显著上升趋势(r=0.99)。同一时间点,胡桃醌各浓度组与对照组比较,p-RIPK1/RIPK1、p-RIPK3/RIPK3、p-MLKL/MLKL比值降低。结论:胡桃醌抑制AML细胞KG-1a、MV-411、THP-1、MOLM-13细胞增殖,且诱导MOLM-13细胞凋亡,其机制可能与抑制RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路相关。 展开更多
关键词 胡桃醌 白血病 ripk1/ripk3/MLKL信号通路 凋亡 体外实验
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基于RIPK1/RIPK3/MLKL通路探讨补肾活血方对髓核细胞坏死性凋亡的影响 被引量:4
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作者 彭伟 朱立国 +10 位作者 尹逊路 杨克新 罗杰 冯敏山 于杰 李玲慧 展嘉文 韩涛 梁龙 罗明义 张典 《中国中医药信息杂志》 2025年第3期69-75,共7页
目的观察补肾活血方对压力诱导的人髓核细胞坏死性凋亡及RIPK1/RIPK3/MLKL通路表达的影响,探讨其延缓椎间盘退变的可能机制。方法体外培养人髓核细胞,采用持续负载压力法建立髓核细胞退变模型,将造模后的髓核细胞分为模型组、补肾活血... 目的观察补肾活血方对压力诱导的人髓核细胞坏死性凋亡及RIPK1/RIPK3/MLKL通路表达的影响,探讨其延缓椎间盘退变的可能机制。方法体外培养人髓核细胞,采用持续负载压力法建立髓核细胞退变模型,将造模后的髓核细胞分为模型组、补肾活血方组和抑制剂组,分别予空白血清、补肾活血方含药血清和坏死性凋亡抑制剂(Nec-1)干预,另设正常组髓核细胞常规培养。AO/EB荧光双染法检测细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞坏死性凋亡率,Western blot检测p-受体相互作用蛋白激酶(RIPK)1、p-RIPK3、p-混合谱系激酶结构域样蛋白(MLKL)蛋白表达,RT-qPCR检测RIPK1、RIPK3、MLKL mRNA表达。结果与正常组比较,模型组髓核细胞AO/EB染色下红色荧光较多,呈圆形、固缩状,髓核细胞坏死性凋亡率升高(P<0.05),p-RIPK1、p-RIPK3、p-MLKL蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),RIPK1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),RIPK3、MLKL mRNA表达升高(P<0.01);与模型组比较,补肾活血方组及抑制剂组髓核细胞红色固缩状染色质较少,补肾活血方组坏死性凋亡率降低(P<0.05),抑制剂组坏死性凋亡率有降低趋势(P>0.05),补肾活血方组及抑制剂组p-RIPK1、p-RIPK3、p-MLKL蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),RIPK1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),RIPK3、MLKL mRNA表达降低(P<0.01)。结论补肾活血方可减轻压力诱导的髓核细胞损伤,从而延缓椎间盘退变程度,其机制可能与抑制RIPK1/RIPK3/MLKL通路介导的坏死性凋亡有关。 展开更多
关键词 补肾活血方 髓核细胞 坏死性凋亡 椎间盘退变 ripk1/ripk3/MLKL通路
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ZBP1/RIPK1/MLKL通路介导AD小鼠神经元坏死性凋亡的作用研究 被引量:2
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作者 朱小敏 陈炜 +4 位作者 符钰岚 卓桂锋 黄颖睿 张颖 吴林 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第6期1128-1133,共6页
目的:探讨Z-DNA结合蛋白1(Z-DNA binding protein 1,ZBP1)/受体相互作用蛋白激酶1(receptorinteracting protein kinase 1,RIPK1)/混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)通路介导阿尔茨海默病(Alzhe... 目的:探讨Z-DNA结合蛋白1(Z-DNA binding protein 1,ZBP1)/受体相互作用蛋白激酶1(receptorinteracting protein kinase 1,RIPK1)/混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)通路介导阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)小鼠神经元坏死性凋亡的机制。方法:将30只小鼠随机分为3组:正常对照(normal control,NC)组、APP/PS1模型(model,MOD)组和坏死性凋亡抑制剂necrostatin-1(Nec-1)组,每组10只。通过Morris水迷宫实验评估小鼠学习记忆能力;HE染色观察海马组织病理形态;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis facotr-α,TNF-α)和白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)的水平;Western blot检测海马组织淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、磷酸化Tau蛋白及ZBP1/RIPK1/MLKL通路相关蛋白的表达。免疫荧光染色法检测p-RIPK1阳性表达;RT-qPCR检测ZBP1 mRNA水平。结果:与NC组相比,MOD组小鼠逃避潜伏期显著延长(P<0.05),穿越平台次数减少(P<0.05),海马神经元排列紊乱伴核固缩;血清中TNF-α水平升高,IL-10水平下降(P<0.05);海马组织APP、p-Tau、ZBP1蛋白表达及p-RIPK1/RIPK1、p-RIPK3/RIPK3、p-MLKL/MLKL比值均显著上调(P<0.05);海马组织中p-RIPK1阳性表达量和ZBP1 mRNA水平均显著增加(P<0.05)。与MOD组相比,Nec-1可显著改善AD小鼠认知功能(P<0.05),减轻海马组织病理损伤,降低血清中TNF-α并升高IL-10水平(P<0.05);且经Nec-1干预后,海马组织APP、p-Tau、ZBP1蛋白表达及p-RIPK1/RIPK1、p-RIPK3/RIPK3、p-MLKL/MLKL比值均显著下调(P<0.05),p-RIPK1阳性表达和ZBP1 mRNA水平显著降低(P<0.05)。结论:ZBP1/RIPK1/MLKL通路可能通过介导神经元坏死性凋亡参与AD小鼠病理进程,抑制该通路可显著减轻AD小鼠认知功能障碍及神经炎症反应。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 坏死性凋亡 ZBP1/ripk1/MLKL通路
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基于RIPK1/RIPK3/MLKL途径探讨温肺降浊方对VaD大鼠坏死性凋亡的影响
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作者 张鼎 陈炜 +5 位作者 秦红玲 张玲 向军军 王开龙 姚春 胡跃强 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第1期1-8,共8页
目的探讨温肺降浊方是否抑制RIPK1/RIPK3/MLKL途径减少坏死性凋亡,从而对血管性痴呆(VD)模型大鼠发挥脑保护作用。方法健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抑制剂组、温肺降浊方低剂量、中剂量和高剂量组,除假手术组,其余各组制备... 目的探讨温肺降浊方是否抑制RIPK1/RIPK3/MLKL途径减少坏死性凋亡,从而对血管性痴呆(VD)模型大鼠发挥脑保护作用。方法健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抑制剂组、温肺降浊方低剂量、中剂量和高剂量组,除假手术组,其余各组制备VaD模型,造模成功后各组以相应药物灌胃,治疗3周后进行各项检测。观察各组大鼠行为学、海马CA1区形态学损伤和Nissl小体变化情况,ELISA检测血清中IL-1β、IL-6和TNF-α浓度;Western blot和qRT-PCR检测RIPK1/RIPK3/MLKL通路蛋白及mRNA的表达情况。结果与假手术组比较,模型组和各干预组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数缩短(P<0.05),海马神经元形态稀松,部分细胞形态破裂,出现水肿,细胞核缩小,Nissl小体严重缺失,结构空洞;血清中IL-1β、IL-6和TNF-α表达升高(P<0.05);大鼠海马组织中RIPK1/RIPK3/MLKL通路蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较,抑制剂组和温肺降浊方高剂量组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数增加(P<0.05),海马神经元数量增多,细胞排列紧密,形态逐渐规整,结构较为完整;血清中IL-1β、IL-6和TNF-α表达下降(P<0.05);海马组织中RIPK1/RIPK3/MLKL通路蛋白及mRNA表达下降(P<0.05)。结论温肺降浊方可以抑制RIPK1/RIPK3/MLKL途径以减少坏死性凋亡,从而改善大脑认知情况,发挥脑保护效应。 展开更多
关键词 温肺降浊方 坏死性凋亡 ripk1/ripk3/MLKL信号通路 血管性痴呆 神经元凋亡 作用机制
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二黄新伤止痛软膏对急性软组织损伤中RIPK1/RIPK3/MLKL介导的坏死性凋亡的影响
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作者 肖鹏 王浩东 +1 位作者 秦天芝 代承忠 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第9期1639-1643,共5页
目的探讨二黄新伤止痛软膏对急性软组织损伤中RIPK1/RIPK3/MLKL介导的坏死性凋亡的影响。方法选取24只6~8周龄SPF级雄性SD大鼠,随机分为四组,每组6只,正常组(胶布将纱布覆盖大鼠左后肢大腿中段外侧软组织)、模型组(纱布覆盖大鼠患处并... 目的探讨二黄新伤止痛软膏对急性软组织损伤中RIPK1/RIPK3/MLKL介导的坏死性凋亡的影响。方法选取24只6~8周龄SPF级雄性SD大鼠,随机分为四组,每组6只,正常组(胶布将纱布覆盖大鼠左后肢大腿中段外侧软组织)、模型组(纱布覆盖大鼠患处并使用胶布缠绕加强固定)、治疗组(二黄新伤止痛软膏覆盖患处并使用胶布缠绕加强固定)及Nec-1(Necroptosis-1)处理组,24 h换药1次,连续7 d,末次给药24 h后,收集外周血后,取损伤组织部分。治疗结束后,收集外周血和损伤组织,通过ELISA检测血清中IL-6、IL-1β、TNF-α水平,透射电镜观察细胞坏死性凋亡,Western blot检测caspase-8、MLKL、RIPK1、RIPK3蛋白表达。结果与正常组相比,IL-6、IL-1β、TNF-α含量及MLKL、RIPK1、RIPK3相关蛋白表达升高(P<0.01),caspase-8表达降低(P<0.01);与模型组相比,二黄新伤止痛软膏治疗组和Nec-1处理组大鼠IL-6、IL-1β、TNF-α含量、线粒体损伤及MLKL、RIPK1、RIPK3相关蛋白表达降低(P<0.01),caspase-8表达升高(P<0.01)。结论二黄新伤止痛软膏通过抑制RIPK1/RIPK3/MLKL通路的激活,减轻坏死性凋亡,降低炎症因子的分泌,对急性软组织损伤的治疗具有积极作用。 展开更多
关键词 二黄新伤止痛软膏 急性软组织损伤 坏死性凋亡 ripk1/ripk3/MLKL 炎症反应
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索法酮通过RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路改善非甾体抗炎药诱导的大鼠小肠黏膜损伤
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作者 谭杰 曹玉萍 +1 位作者 王俊先 陈思 《医药导报》 北大核心 2025年第6期854-861,共8页
目的探讨索法酮对非甾体抗炎药(NSAIDs)诱导小肠黏膜损伤模型大鼠的保护作用及可能机制。方法第1组实验将大鼠随机分为5组(n=5):正常对照组、双氯芬酸组(双氯芬酸7.5 mg·kg^(-1))、索法酮大剂量组(索法酮10 mg·kg^(-1)+双氯芬... 目的探讨索法酮对非甾体抗炎药(NSAIDs)诱导小肠黏膜损伤模型大鼠的保护作用及可能机制。方法第1组实验将大鼠随机分为5组(n=5):正常对照组、双氯芬酸组(双氯芬酸7.5 mg·kg^(-1))、索法酮大剂量组(索法酮10 mg·kg^(-1)+双氯芬酸7.5 mg·kg^(-1))、索法酮中剂量组(索法酮5 mg·kg^(-1)+双氯芬酸7.5 mg·kg^(-1))、索法酮小剂量组(索法酮2 mg·kg^(-1)+双氯芬酸7.5 mg·kg^(-1)),每日灌胃1次,连续7 d,测血清D-乳酸水平,苏木精-伊红(HE)染色观察小肠组织学损伤并行病理评分。第2组实验将大鼠随机分为3组(n=7):正常对照组、双氯芬酸组(双氯芬酸7.5 mg·kg^(-1))、索法酮组(索法酮2 mg·kg^(-1)+双氯芬酸7.5 mg·kg^(-1)),监测大鼠体质量、24 h饮食、24 h饮水量,试剂盒检测细胞因子白细胞介素(IL)-6、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),检测炎症标志物C反应蛋白(CRP)、D-乳酸、小肠组织活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、线粒体膜电位水平,电镜观察上皮细胞超微结构,蛋白免疫印迹法检测细胞间连接蛋白[咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白-1(Claudin-1)、α-连环蛋白(α-Catenin)]、程序性坏死通路相关蛋白受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)、RIPK3和混合谱系激酶结构域样假激酶(MLKL)、磷酸化MLKL(p-MLKL)表达水平。结果第1组实验中,双氯芬酸组小肠组织学损伤明显,D-乳酸水平及病理评分较正常对照组升高(P<0.01),索法酮干预后,小肠组织学损伤减轻,D-乳酸及病理评分明显降低(P<0.05或P<0.01),不同剂量索法酮组病理评分差异无统计学意义(P>0.05)。第2组实验中,与正常对照组比较,双氯芬酸组大鼠体质量减小、24 h平均饮食和饮水量减少,IL-6、IFN-γ、TNF-α、CRP、D-乳酸、小肠组织ROS强度、LDH活性、RIPK1、RIPK3、p-MLKL/MLKL蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),线粒体膜电位及Occludin、Claudin-1、α-Catenin蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01),索法酮干预后,以上指标均可逆转(P<0.05或P<0.01),但RIPK1蛋白表达降低差异无统计学意义(P>0.05)。结论索法酮通过抑制RIPK1/RIPK3/MLKL依赖的程序性坏死途径,减轻NSAIDs诱导的大鼠小肠黏膜损伤。 展开更多
关键词 索法酮 非甾体抗炎药 小肠损伤 ripk1/ripk3/MLKL信号通路
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利用CRISPR/Cas9技术构建RIPK1基因敲除的Neuro-2a细胞系及其功能研究
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作者 刘佳琪 李梦瑶 +6 位作者 郝晨琳 曾权 许梦潇 丁雪燕 靳晓慧 胡慧 张红垒 《病毒学报》 北大核心 2025年第4期1121-1130,共10页
通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建受体相互作用蛋白激酶1(Receptor-interacting protein kinase 1,RIPK1)基因缺失的小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a),并探究敲除RIPK1基因后对乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)复制及对JE... 通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建受体相互作用蛋白激酶1(Receptor-interacting protein kinase 1,RIPK1)基因缺失的小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a),并探究敲除RIPK1基因后对乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)复制及对JEV诱导的细胞死亡的影响。根据NCBI数据库中小鼠的RIPK1基因序列(Gene ID:19766)设计三条sgRNA,构建LentiCRISPR v2-RIPK1重组敲除质粒,并将其转染至HEK-293T细胞中获得慢病毒液;使用嘌呤霉素对慢病毒液感染的Neuro-2a细胞进行筛选,再通过有限稀释法获取RIPK1敲除的Neuro-2a单克隆细胞,对其进行基因组测序和Western blot试验鉴定。测序结果显示RIPK1基因发生了26 bp碱基缺失并且Western blot试验未检测到RIPK1蛋白的表达。利用CCK-8评估RIPK1基因敲除后细胞活力的变化,结果显示RIPK1敲除后不影响Neuro-2a的细胞活力。使用Western blot和Annexin V-mCherry/SYTOX Green染色试验检测RIPK1基因敲除对JEV复制及JEV诱发的细胞死亡的影响,与野生型细胞相比,RIPK1敲除后并未对JEV复制产生影响,但减少了JEV诱发的细胞死亡。本试验利用CRISPR/Cas9技术成功构建了RIPK1基因缺失的Neuro-2a细胞,为进一步探究RIPK1在JEV引发的细胞死亡中的分子机制提供细胞模型。 展开更多
关键词 ripk1基因 CRISPR/Cas9基因编辑技术 Neuro-2a细胞 乙型脑炎病毒
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A Commentary on RIPK2:The Hidden Driver of MHC-I Related Immune Suppression in Cancer
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作者 Qian Yang Alina Leonie Ruff Lydia Meder 《BIOCELL》 2025年第2期161-165,共5页
1 MHC-I Loss in the Immune Evasion of Cancer Cells Pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC)is a lethal cancer with a poor prognosis due to its aggressive nature and late detection.Recently,new discoveries in PDAC demons... 1 MHC-I Loss in the Immune Evasion of Cancer Cells Pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC)is a lethal cancer with a poor prognosis due to its aggressive nature and late detection.Recently,new discoveries in PDAC demonstrated receptor-interacting protein kinase 2(RIPK2)triggering immune evasion.Mechanistically,RIPK2 drives the desmoplastic tumor microenvironment(TME)and restricts the activation and density of tumor-infiltrating effector T cells by impairing the expression of major histocompatibility complex class I(MHC-I)[1].This process might be relevant in different solid cancer entities as illustrated by analyzing publicly available databases. 展开更多
关键词 MHC-I ripk2 immune evasion
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葶苈子激活RIPK3并诱导细胞凋亡抑制结直肠癌肺转移的作用研究
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作者 张婷婷 魏义 《浙江中医杂志》 2025年第11期941-944,共4页
目的:结合动物实验和生物信息学分析探究播娘蒿(Descurainia sophia,DS)种子葶苈子水煎总提取物对早期转移性结直肠癌(mCRC)的作用及作用机制。方法:通过尾静脉注射结直肠癌细胞构建小鼠肺转移模型并分组给药。评估肺部转移和病理变化... 目的:结合动物实验和生物信息学分析探究播娘蒿(Descurainia sophia,DS)种子葶苈子水煎总提取物对早期转移性结直肠癌(mCRC)的作用及作用机制。方法:通过尾静脉注射结直肠癌细胞构建小鼠肺转移模型并分组给药。评估肺部转移和病理变化、检测肿瘤细胞凋亡与增殖、评估mCRC中RIPK3表达及其与葶苈子主要成分的分子对接、检测肿瘤组织中RIPK3及其他凋亡相关蛋白的表达水平。结果:DS组肺结节和肺部转移瘤数量显著减少;DS组肿瘤组织阳性细胞凋亡率显著上升;DS组肿瘤组织PCNA的表达量显著下降;RIPK3在mCRC中低表达,且可能与葶苈子主成分结合;DS给药后小鼠瘤组织中RIPK3、PDIA1、Bax、Cleaved Caspase 3蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低。结论:葶苈子通过激活RIPK3并促进m CRC肿瘤组织中细胞凋亡,从而在一定程度上改善结直肠癌并减缓其肺转移现象。 展开更多
关键词 葶苈子 结直肠癌肺转移 细胞凋亡 ripk3
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抑制TNFR/RIPK信号通路对大鼠急性脊髓损伤后神经功能的影响 被引量:5
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作者 王双 林斌 +3 位作者 陈志达 史吉胜 曾宇哲 吴松松 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期353-360,共8页
目的 :探讨应用坏死性凋亡抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)抑制TNFR/RIPK介导的坏死性凋亡信号通路对大鼠急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的作用。方法:72只雄性SPF级SD大鼠,体重0.25~0.30kg,随机分为4组:假手术组(Sham组,A组)、假手... 目的 :探讨应用坏死性凋亡抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)抑制TNFR/RIPK介导的坏死性凋亡信号通路对大鼠急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的作用。方法:72只雄性SPF级SD大鼠,体重0.25~0.30kg,随机分为4组:假手术组(Sham组,A组)、假手术+Necrostatin-1组(Sham+Nec-1组,B组)、SCI+二甲基亚砜(DMSO)(DMSO组,C组)、SCI+Nec-1组(Nec-1组,D组)。C、D组采用钳夹法制作大鼠急性SCI模型。所有大鼠硬膜下置管,A组不给药,B组和D组造模后30min经导管注射1μl Nec-1(25μg/μl),C组注射等量DMSO,1次/d,至取材时间点。各组分别于造模后12h、24h和3d三个时间点每组取6只大鼠,先行Basso/Beattie/Bresnahan(BBB)评分,再处死动物取脊髓组织。12h时间点动物处死前1h腹腔注射碘化丙啶(propidine iodide,PI)1mg/kg,取材检测脊髓组织PI红染细胞数;24h时取材采用苏木素-伊红(HE)染色观察脊髓损伤情况、尼氏(Nissl)染色观察神经元存活数目、Western Blot(WB)检测Bcl-2、坏死性凋亡蛋白RIPK1及RIPK3的表达水平;3d时取材行Tunel染色观察细胞凋亡情况。结果:造模后A组和B组各时间点的BBB评分均正常,C、D组各时间点均显著性低于A、B组,D组各时间点的BBB评分均显著高于同时间点C组(P<0.05)。造模后12h,D组PI红染细胞较C组明显减少,神经元崩解减轻(P<0.05)。造模后24h,A组和B组脊髓组织HE和Nissl染色正常,D组脊髓组织损伤程度和存活神经元数量均优于C组,差异有统计学意义(P<0.05);A组和B组Bcl-2、RIPK1及RIPK3均低水平表达,C组RIPK1及RIPK3表达显著性升高,D组Bcl-2表达较C组上调,RIPK1及RIPK3表达显著性下降,C、D两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。造模后3d,A组和B组可见少量凋亡小体,C组和D组明显增多,但D组凋亡小体数量较C组明显减少(P<0.05)。结论:抑制TNFR/RIPK信号通路可以减轻大鼠急性SCI后的病理变化,改善行为学评分,促进脊髓神经功能恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 ripk1 ripk3 BCL-2 坏死性凋亡 功能恢复
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RIPK1/RIPK3介导的程序性坏死在离心运动骨骼肌损伤及修复中的作用 被引量:2
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作者 柯志飞 曹春霞 +5 位作者 尚画雨 雷槟恺 王祯 董云峰 王瑞元 李俊平 《中国体育科技》 CSSCI 北大核心 2024年第4期54-63,共10页
目的:观察一次离心运动后不同恢复时程大鼠骨骼肌程序性坏死的趋势变化,分析RIPK1/RIPK3途径在运动性骨骼肌损伤及修复中的可能作用。方法:70只雄性8周龄Sprague-Dawley(SD)大鼠据体重随机分为安静对照组(C,n=10)和运动组(E,n=60),其中... 目的:观察一次离心运动后不同恢复时程大鼠骨骼肌程序性坏死的趋势变化,分析RIPK1/RIPK3途径在运动性骨骼肌损伤及修复中的可能作用。方法:70只雄性8周龄Sprague-Dawley(SD)大鼠据体重随机分为安静对照组(C,n=10)和运动组(E,n=60),其中E组又根据不同时程分为运动后即刻、运动后12 h、24 h、48 h、72 h、120 h共6组,每组10只。E组大鼠持续性下坡跑(-16°,16 m/min,90 min)。各组分别于相应时程点对比目鱼肌进行取材。透射电镜观察比目鱼肌超微结构变化,蛋白质印迹检测比目鱼肌程序性坏死蛋白RIPK1、p-RIPK1S166、RIPK3、p-RIPK3S232、MLKL、p-MLKLS358、HMGB1、IL-1α等表达。结果:1)一次离心运动后恢复期比目鱼肌超微结构发生改变,在恢复期12—48 h肌纤维排列紊乱,线粒体肿胀明显,肌膜下大量线粒体聚集;2)一次离心运动后恢复期比目鱼肌细胞膜形态改变,运动后48 h肌纤维细胞膜不完整、起皱受损明显,72 h与120 h逐渐恢复;3)MLKL表达在恢复期48 h达到峰值,在恢复期24 h(P<0.05)和48 h(P<0.01)明显升高;p-MLKLS358表达在恢复期48 h达到峰值,在恢复期48 h(P<0.01)和72 h(P<0.01)显著升高;p-MLKLS358/MLKL比值在恢复期72 h达到峰值,在恢复期12 h(P<0.05)和24 h(P<0.05)明显降低,72 h(P<0.05)显著升高;HMGB1表达在恢复期48 h达到峰值,在恢复期24 h(P<0.05)和48 h(P<0.01)显著升高;IL-1α表达在恢复期12 h达到峰值,在12 h(P<0.01)、24 h(P<0.05)和48 h(P<0.01)明显升高;4)RIPK1表达在恢复期48 h达到峰值,在恢复期运动后即刻(P<0.01)、12 h(P<0.01)、24 h(P<0.01)、48 h(P<0.01)、72 h(P<0.01)、120 h(P<0.01)均显著升高;RIPK3表达在恢复期48 h达到峰值,在恢复期48 h(P<0.01)、72 h(P<0.01)、120 h(P<0.01)明显升高;p-RIPK1S166蛋白表达呈现先升高后降低的趋势,在恢复期72 h(P<0.01)显著升高;p-RIPK3S232表达在恢复期72 h达到峰值,运动后即刻(P<0.05)和12 h(P<0.05)明显降低,72 h(P<0.05)显著升高。结论:1)一次离心运动后恢复期比目鱼肌发生程序性坏死现象,在运动后48 h相对明显;2)一次离心运动后恢复期比目鱼肌程序性坏死现象可能由RIPK1/RIPK3途径介导。 展开更多
关键词 一次离心运动 比目鱼肌 程序性坏死 ripk1 ripk3
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黄芩素对缺氧/复氧诱导的心肌损伤保护作用以及RIPK1/RIPK3信号通路的影响 被引量:5
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作者 高新富 边瑞民 +2 位作者 王滨 谢世阳 宋征 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期654-661,共8页
目的探究黄芩素对缺氧/复氧诱导的心肌损伤保护作用以及活化受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)/RIPK3信号通路的影响。方法体外培养H9c2细胞,分为空白组、模型组和实验组(黄芩素20μmol·L^(-1))。实验组和模型组先用黄芩素或无血清培... 目的探究黄芩素对缺氧/复氧诱导的心肌损伤保护作用以及活化受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)/RIPK3信号通路的影响。方法体外培养H9c2细胞,分为空白组、模型组和实验组(黄芩素20μmol·L^(-1))。实验组和模型组先用黄芩素或无血清培养基预处理12 h,然后100μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理4 h造成氧化应激损伤。PI法和TUNEL法检测细胞坏死和凋亡情况。对于体内实验,将C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组、阳性组(Nec-13 mg·kg^(-1))和3个实验组(黄芩素7.5、15和30 mg·kg^(-1))。除假手术组外,采用小鼠左冠状动脉侧支阻断法建立缺血/再灌注模型,术后次日给药,连续7 d。检测心肌梗死面积、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。Western blot法检测RIPK1、RIPK3蛋白表达水平;免疫沉淀法检测H2O2作用于心肌细胞后RIPK1与RIPK3的相互作用。结果MTT法确定黄芩素对H9c2细胞的无毒剂量为20μmol·L^(-1)后,进行后续实验。与模型组相比,实验组H9c2细胞PI阳性细胞指数[(19.26±3.35)%vs(12.82±4.30)%]和TUNEL阳性细胞指数[(25.75±5.70)%vs(13.80±5.47)%]则显著降低(P<0.05),同时细胞培养上清中LDH、MDA水平降低,SOD、GSH-Px水平则升高(P<0.05);RIPK1和RIPK3蛋白表达量也显著下调(P<0.05)。与模型组相比,黄芩素30 mg·kg^(-1)组大鼠心肌组织梗死面积明显降低[(28.65±7.54)%vs(11.85±4.20)%](P<0.05);同时CK、CK-MB、LDH、SOD含量下降,SOD、GSH-Px水平则升高(P<0.05);RIPK1和RIPK3蛋白表达量下调(P<0.05),且RIPK1/RIPK3凋亡小体逐渐解聚。结论黄芩素可保护缺氧/复氧诱导的心肌损伤,其机制可能与抑制RIPK1和RIPK3蛋白表达并干扰RIPK1/RIPK3坏死小体稳定性进而抑制心肌细胞程序性坏死有关。 展开更多
关键词 黄芩素 缺氧/复氧 ripk1/ripk3通路 程序性坏死 心肌损伤
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乌珠穆沁绵羊RIPK2基因多态性与生长性状的关联 被引量:6
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作者 马晓萌 轩俊丽 +8 位作者 王慧华 袁泽湖 吴明明 朱才业 刘瑞凿 魏彩虹 赵福平 杜立新 张莉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1391-1407,共17页
【目的】基于前期绵羊肉用性状GWAS研究结果,旨在探讨RIPK2基因对乌珠穆沁绵羊生长性状的影响,找到该基因中与绵羊生长性状相关的分子标记,同时对GWAS结果进行验证。【方法】在343只乌珠穆沁绵羊试验群体中,选取其中30个个体的血液DNA样... 【目的】基于前期绵羊肉用性状GWAS研究结果,旨在探讨RIPK2基因对乌珠穆沁绵羊生长性状的影响,找到该基因中与绵羊生长性状相关的分子标记,同时对GWAS结果进行验证。【方法】在343只乌珠穆沁绵羊试验群体中,选取其中30个个体的血液DNA样本,以相同浓度组成池DNA,设计引物对RIPK2基因外显子及其上下游1 000bp的调控区进行PCR扩增,PCR产物检测为目的条带后测序。使用DNAMAN和Chromas2软件对测序峰图进行分析,采用飞行质谱方法对检测到的SNP位点及前期GWAS得到的SNP位点进行基因型分型。使用Haploview软件对多态位点构建单倍型及连锁不平衡分析。使用SPSS(22.0)软件进行RIPK2基因SNP位点与生长性状间的关联分析。【结果】共发现了4个多态位点,A5536G的同义突变rs01位于第四外显子内,在该位点检测到三种基因型,AA基因型频率为0.42,AG基因型频率为0.45,GG基因型频率为0.13,优势等位基因为A,其频率为0.65;在第七外显子上检测到T8952C错义突变rs02,在该突变位点检测到3种基因型,其中TT基因型频率为0.82,TC基因型频率为0.16,CC基因型频率为0.02,T为优势等位基因,基因频率为0.9;在第十外显子检测到T2836C的突变rs05,在该位点检测到两种基因型TT和CC,没有检测到杂合子基因型,TT基因型频率为0.25,CC基因型频率为0.75;上游调控区发现一个G5181C的突变rs30,有3种基因型,其中GC基因型频率为0.50,CC基因型频率为0.18,GG基因型频率为0.32,G为优势等位基因,其频率为0.58;GWAS得到的SNP位点是T4456C,在本研究中被命名为rs34,在该位点有3种基因型,其中TT基因型频率为0.49,TC基因型频率为0.37,CC基因型频率为0.14,优势等位基因T的频率为0.68。χ^2适合性检验发现,除rs34位点外,其余位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P〉0.05)。rs02位点处于低度多态(PIC〈0.25), 展开更多
关键词 ripk2基因 生长性状 多态性 关联分析 乌珠穆沁绵羊
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RIPK4通过调控NF-КB参与TNFα信号通路从而促进卵巢癌细胞增殖和迁移 被引量:6
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作者 熊焰 梁承蓉 邵安娜 《中国计划生育和妇产科》 2020年第8期62-66,70,共6页
目的筛选卵巢癌中具有临床意义的潜在药物靶点,研究其在卵巢癌发生发展中的生物学功能和分子机制。方法通过临床数据库GEPIA筛选目的靶基因,分别敲低和过表达目的基因,利用细胞增殖实验和划痕迁移实验验证目的基因在卵巢癌发生发展中的... 目的筛选卵巢癌中具有临床意义的潜在药物靶点,研究其在卵巢癌发生发展中的生物学功能和分子机制。方法通过临床数据库GEPIA筛选目的靶基因,分别敲低和过表达目的基因,利用细胞增殖实验和划痕迁移实验验证目的基因在卵巢癌发生发展中的作用;探索目的基因在卵巢癌中发挥功能的潜在分子机制,并通过蛋白免疫印迹实验进行验证。结果共有18个基因在卵巢癌中高表达,且具有显著临床预后相关性;与正常组织相比,受体相互作用蛋白激酶4(receptor-interacting protein kinase 4,RIPK 4)在卵巢癌中显著高表达,且高表达的患者预后不良;敲低RIPK 4显著抑制卵巢癌细胞的生长增殖和迁移,过表达RIPK 4显著促进卵巢癌细胞的生长增殖和迁移;敲低RIPK 4显著减少核因子КB(nuclear factor-Кgene binding,NF-КB)的入核并抑制其下游靶基因的表达;过表达RIPK 4显著增加NF-КB的入核并促进其下游靶基因的表达,由此初步证明了RIPK 4可能参与NF-КB介导的α肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNFα)信号通路。结论RIPK 4高表达增加NF-КB的入核并显著促进其下游靶基因的高表达,从而参与NF-КB介导的TNFα信号通路从而促进卵巢癌细胞生长增殖和迁移。 展开更多
关键词 卵巢癌 ripk 4 NF-КB 靶基因 分子机制
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mir-325-3p激活RIPK3/TFEB信号通路减轻脑出血大鼠神经元损伤 被引量:3
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作者 马晓维 周喜燕 +3 位作者 李彬 臧运华 王群 于淼 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第4期422-427,共6页
目的探讨mir-325-3p通过调控RIPK3/TFEB通路对脑出血大鼠神经元损伤的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组、agomir NC组、agomir-325-3p组、GSK872(RIPK3抑制剂)组、agomir-325-3p+GSK872组,每组18只。评估大鼠运动功能、... 目的探讨mir-325-3p通过调控RIPK3/TFEB通路对脑出血大鼠神经元损伤的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组、agomir NC组、agomir-325-3p组、GSK872(RIPK3抑制剂)组、agomir-325-3p+GSK872组,每组18只。评估大鼠运动功能、肢体协调能力、改良神经功能缺损评分(mNSS),测定大鼠脑含水量、血肿周围脑组织病理变化、神经细胞凋亡、神经元自噬、LC3与NeuN共定位、海马组织RIPK3/TFEB信号通路、自噬相关蛋白表达。结果与假手术组相比,脑出血组CA1区神经元肿胀,排列疏松,可见大量溶酶体和自噬小体,前肢放置成功率、左侧转身百分比、TFEB下降(P<0.05),mNSS评分、脑含水量、神经细胞凋亡率、RIPK3、Beclin-1和LC3-II/LC3-Ⅰ、LC3/NeuN强阳性个数升高(P<0.05);agomir-325-3p、GSK872可减轻大鼠海马神经元损伤,增强自噬,且两者有协同作用。结论mir-325-3p过表达可通过调控RIPK3/TFEB促进自噬,减轻脑出血大鼠神经元损伤。 展开更多
关键词 mir-325-3p ripk3/TFEB 脑出血 神经元损伤
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RIPK1抑制糖皮质激素体外诱导的间充质干细胞凋亡 被引量:2
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作者 杭栋华 李夏 +5 位作者 曹雷 朱宗昊 王建东 徐乔龙 王秋根 李凡 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期307-312,共6页
目的研究受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1,RIPK1)抑制糖皮质激素(glucocorticoid,GC)体外诱导的间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的凋亡效果及其调控机制。方法将SD大鼠来源的MSC,分为3组:GC+MSC... 目的研究受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1,RIPK1)抑制糖皮质激素(glucocorticoid,GC)体外诱导的间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的凋亡效果及其调控机制。方法将SD大鼠来源的MSC,分为3组:GC+MSC组,GC+RIPK1-MSC组和生理盐水+MSC组(对照组)。通过形态学观察、MTT分析、AO/EB染色、Hoechest 333342染色、Live/Dead染色、TUNEL凋亡检测及Western blot分析等方法确定抑制效果,并分析其中涉及的关键蛋白和信号通路。结果 GC诱导24h后,MSC发生凋亡,并证实RIPK1可对抗这种凋亡。RIPK1上调伴随TRAF2/cIAP1/cFLIPL水平升高,其为对抗凋亡的关键蛋白通路。结论 RIPK1可抑制GC诱导的MSC凋亡,为早期阻遏股骨头坏死(osteonecrosis of femoral head,ONFH)提供了新思路。 展开更多
关键词 ripk1 细胞凋亡 间充质干细胞 细胞信号通路 股骨头坏死
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β-catenin、RIPK4、CDK8在套细胞淋巴瘤中的表达及临床意义 被引量:12
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作者 李津 钟美佐 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2015年第3期233-237,共5页
目的探讨β-catenin、RIPK4及CDK8在套细胞淋巴瘤(MCL)组织中的表达及其与临床病理特征、预后之间的关系。方法采用免疫组化SABC法检测30例MCL组织和16例淋巴结炎性病变组织中β-catenin、RIPK4及CDK8的表达情况,并对MCL患者进行生存随... 目的探讨β-catenin、RIPK4及CDK8在套细胞淋巴瘤(MCL)组织中的表达及其与临床病理特征、预后之间的关系。方法采用免疫组化SABC法检测30例MCL组织和16例淋巴结炎性病变组织中β-catenin、RIPK4及CDK8的表达情况,并对MCL患者进行生存随访。分析β-catenin、RIPK4及CDK8表达的相关性及其与MCL临床病理特征、预后之间的关系。结果 MCL组织中β-catenin、RIPK4及CDK8的阳性表达率分别为55.3%、63.3%和60.0%,均高于淋巴结炎性病变组织(P<0.05);MCL组织中β-catenin、RIPK4及CDK8的表达任两者均呈正相关(r=0.600,r=0.675,r=0.367,P<0.05);β-catenin、RIPK4及CDK8的表达与性别、年龄、MIPI评分、β2微球蛋白、B症状、Ann Arbor分期均无关(P>0.05)。30例MCL患者的中位总生存期(OS)为21个月,多因素分析结果显示MIPI评分高危组、CDK8阳性表达是影响OS的独立不良预后因素。结论β-catenin、RIPK4及CDK8在MCL中高表达;β-catenin、RIPK4及CDK8的表达呈正相关;CDK8阳性表达提示预后不佳。 展开更多
关键词 套细胞淋巴瘤 Β-CATENIN ripk4 CDK8 免疫组化染色
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藻蓝色素调控RIPK1对多种非小细胞肺癌细胞活性的影响 被引量:3
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作者 郝帅 李凡念 +4 位作者 刘媛璞 李爽 杨起 李前程 王成涛 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第2期18-27,共10页
藻蓝蛋白又称藻蓝色素蛋白(PC),是一种具有抗肿瘤活性的天然食品着色剂,对包括肺癌在内的多种肿瘤具有显著的抑制作用,然而其在非小细胞肺癌(NSCLC)中的调控机理尚不完全明确。本研究以H1299、H460和LTEP-a-23种典型的非小细胞肺癌细胞... 藻蓝蛋白又称藻蓝色素蛋白(PC),是一种具有抗肿瘤活性的天然食品着色剂,对包括肺癌在内的多种肿瘤具有显著的抑制作用,然而其在非小细胞肺癌(NSCLC)中的调控机理尚不完全明确。本研究以H1299、H460和LTEP-a-23种典型的非小细胞肺癌细胞为模型,探究藻蓝蛋白在抑制非小细胞肺癌增殖和诱导细胞凋亡过程中的关键调控机制。细胞表型试验结果证实:藻蓝蛋白能够显著抑制3种细胞的体外增殖能力,并通过调控Bax和Bcl-2诱导细胞凋亡。利用转录组技术对H1299细胞进行测序,受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)经藻蓝蛋白处理后出现极显著下调。对3种细胞转染siRNA特异性沉默RIPK1的表达后,细胞的体外增殖能力也明显降低,同时诱导细胞凋亡,与藻蓝蛋白处理后的表型结果一致。研究结果表明:藻蓝蛋白通过下调RIPK1的表达而抑制H1299、H460和LTEP-a-2非小细胞肺癌的体外增殖并诱导细胞凋亡,这为天然功能性食用色素的开发和利用以及非小细胞肺癌的安全性治疗奠定了理论基础。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 藻蓝蛋白 受体相互作用蛋白激酶1(ripk1) 细胞增殖 细胞凋亡
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灯盏乙素调控RIPK4基因抑制肺癌细胞增殖和迁移的分子机制 被引量:1
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作者 万清廉 郑慧禹 +1 位作者 常国涛 梅家转 《热带医学杂志》 CAS 2020年第1期28-33,145,共7页
目的探讨灯盏乙素调控受体相互作用蛋白激酶4(RIPK4)表达对肺癌细胞增殖和迁移的影响和机制。方法正常培养的A549细胞为正常组;用终浓度为25、50、100μmol/L的灯盏乙素处理A549细胞(25、50、100μmol/L灯盏乙素组),MTT法测细胞增殖活力... 目的探讨灯盏乙素调控受体相互作用蛋白激酶4(RIPK4)表达对肺癌细胞增殖和迁移的影响和机制。方法正常培养的A549细胞为正常组;用终浓度为25、50、100μmol/L的灯盏乙素处理A549细胞(25、50、100μmol/L灯盏乙素组),MTT法测细胞增殖活力,Transwell法检测细胞迁移能力,qRT-PCR和Western blot检测RIPK4 mRNA和RIPK4蛋白的表达;建立沉默RIPK4的A549细胞株(转染si-NC组和转染si-RIPK4组),MTT实验检测细胞增殖活力,Transwell实验检测细胞的迁移能力,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达水平;建立过表达RIPK4的A549细胞株,给予灯盏乙素处理后(pcDNA+100μmol/L灯盏乙素组和pcDNA-RIPK4+100μmol/L灯盏乙素组),MTT和Transwell实验分别检测细胞增殖和迁移能力。结果MTT结果显示,随着灯盏乙素浓度的增加,肺癌细胞的增殖活力被显著抑制,并呈浓度依赖性(P<0.05);Western blot结果显示,灯盏乙素呈浓度依赖性地抑制CyclinD1蛋白以及RIPK4 mRNA、蛋白表达,促进p21蛋白表达(P<0.05),选取灯盏乙素100μmol/L进行后续研究。与正常组(0.79±0.15)、(0.80±0.16)、(155.20±14.38)比较,100μmol/L灯盏乙素组肺癌细胞MMP-2(0.42±0.10)和MMP-9(0.46±0.13)蛋白表达以及迁移细胞数目(80.25±10.03)显著减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-NC组[(7.01±1.08)%、(7.10±2.0)%、(7.16±1.03)%、(147.52±12.17)、(0.81±0.10)、(0.86±0.18)]比较,si-RIPK4组肺癌细胞在24、48、72 h时细胞增殖抑制率(15.03±2.21)%、(33.21±2.10)%、(50.21±5.37)%显著升高,迁移细胞数目(52.68±9.57)显著减少,CyclinD1蛋白(0.28±0.03)和MMP-2蛋白(0.30±0.05)的表达显著减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA+100μmol/L灯盏乙素组[(15.03±2.21)%、(53.21±5.21)%、(70.21±7.45)%、(57.62±9.28)、(0.25±0.06)、(0.30±0.08)]比较,pcDNA-RIPK4+100μmol/L灯盏乙素组肺癌细胞在24、48、72 h时细胞抑制率(6.10±1.03)%、(7.82±0.59)%、(8.36±1.06)%显著降低,细胞迁移数目(125.71±12.58)显著增多,CyclinD1蛋白(0.52±0.10)和MMP-2蛋白(0.58±0.13)表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论灯盏乙素通过抑制RIPK4表达进而抑制肺癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 灯盏乙素 ripk4 肺癌 细胞增殖 迁移
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