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miR-27a-3p靶向调节突触膜胞吐2调控宫颈癌细胞增殖凋亡的机制研究 被引量：1
1
作者 邱娜 潘长清 +2 位作者 郑茜文 赵菊惠 王丹 《中国性科学》 2022年第1期89-93,共5页
目的观察微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)、调节突触膜胞吐2(RIMS2)对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响,并探究其作用机制。方法选取2014年1月至2016年6月绵阳市中心医院收治的145例行手术切除的宫颈癌患者的癌组织及癌旁组织作为研究对象。运用... 目的观察微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)、调节突触膜胞吐2(RIMS2)对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响,并探究其作用机制。方法选取2014年1月至2016年6月绵阳市中心医院收治的145例行手术切除的宫颈癌患者的癌组织及癌旁组织作为研究对象。运用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测宫颈癌组织、癌旁组织、Ect1/E6E7、HeLa细胞中miR-27a-3p、RIMS2的mRNA表达;Kaplan-Meier法绘制宫颈癌患者的生存曲线;脂质体法将anti-miR-con、anti-miR-27a-3p、pcDNA、pcDNA-RIMS2、anti-miR-27a-3p+si-con和anti-miR-27a-3p+si-RIMS2转染至HeLa细胞。细胞计数试剂盒(CCK-8)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素-碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染法、蛋白免疫印迹(WB)实验检测细胞的增殖率、细胞凋亡率和RIMS2、激活的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(c-Caspase)-3、c-Caspase-9的蛋白表达。双荧光素酶报告实验检测细胞的荧光活性。结果与癌旁组织或Ect1/E6E7细胞相比,癌组织、HeLa细胞中miR-27a-3p的表达显著升高,RIMS2的表达均显著降低,miR-27a-3p低表达患者的生存率显著升高(P<0.05)。抑制miR-27a-3p的HeLa细胞增殖率显著降低,凋亡率显著升高,c-Caspase-3、c-Caspase-9蛋白表达显著升高。miR-27a-3p靶向RIMS2,过表达RIMS2具有与抑制miR-27a-3p相似的功能。敲减RIMS2部分逆转了抑制miR-27a-3p对HeLa细胞的增殖抑制和凋亡促进作用。结论 miR-27a-3p促进HeLa细胞增殖,抑制凋亡,其机制与靶向RIMS2有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 微小RNA-27a-3p rims2 靶向
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用Rim2超级家族分子指纹鉴别杂交水稻及预测杂种优势 被引量：8
2
作者 张礼霞 王林友 +3 位作者 张利华 何祖华 金庆生 王建军 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期77-83,共7页
选用5对Rim2引物对21份籼稻和20份粳稻材料进行了DNA指纹扩增,共扩增出38条谱带,其中多态性谱带26条,多态性水平为69.64%;粳稻平均多态性水平为56.67%,明显高于籼稻。根据Nei’s遗传距离计算获得的聚类树状图表明,参试21份籼稻材料聚为6... 选用5对Rim2引物对21份籼稻和20份粳稻材料进行了DNA指纹扩增,共扩增出38条谱带,其中多态性谱带26条,多态性水平为69.64%;粳稻平均多态性水平为56.67%,明显高于籼稻。根据Nei’s遗传距离计算获得的聚类树状图表明,参试21份籼稻材料聚为6组,20份粳稻材料聚为7组。亲缘关系分析表明,Rim2分子指纹可以区分多数的籼稻或粳稻材料,且显示出材料的遗传特征。考察部分籼稻和粳稻杂交组合的产量对照优势与双亲间遗传距离的关系,发现杂交粳稻的遗传距离与杂交优势表现出相关性,而杂交籼稻无此相关性。 展开更多
关键词 水稻 Rim2分子指纹 聚类树状图 杂种优势
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水稻Rim2/Hipa超级家族的基因组变异和基于Rim2/Hipa展示的水稻资源的系统进化和指纹分析(英文) 被引量：2
3
作者 田平芳 王建军 +3 位作者 吴刚 李群 卢宝荣 何祖华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期169-177,共9页
水稻Rim2/Hipa是最近鉴定的一个受逆境诱导的转座因子超级家族.研究表明,Rim2的核心序列在不同来源的水稻材料中存在显著的差异,暗示Rim2家族的长期进化历程.基于Rim2因子间的差异性以及该因子的静止状态,开发出一种利用Rim2因子展示的... 水稻Rim2/Hipa是最近鉴定的一个受逆境诱导的转座因子超级家族.研究表明,Rim2的核心序列在不同来源的水稻材料中存在显著的差异,暗示Rim2家族的长期进化历程.基于Rim2因子间的差异性以及该因子的静止状态,开发出一种利用Rim2因子展示的新的分子指纹技术,可以灵敏地区分不同水稻资源以及它们的遗传关系.仅用5对引物就可以清楚地将53个栽培稻和普通野生稻材料鉴定出来,并可将它们分为不同的系统进化组.研究表明不仅在水稻资源而且在野生稻种质间均存在明显的多样性.野生稻可以被单独分组,或者分散在粳稻中间.这种新的指纹技术还可以将水稻的杂交子代和它们的亲本区分出来,并可用于种子纯度的鉴定,在水稻基因组进化研究、水稻育种和种子生产中有很好的应用前景. 展开更多
关键词 水稻 Rim2/Hipa 基因组差异 系统树 指纹
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病原菌诱导转录的水稻Rim2家族转座酶编码亚组的结构与分布 被引量：3
4
作者 田平芳 王国栋 +4 位作者 吴刚 李群 罗利军 李德葆 何祖华 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2003年第3期257-264,共8页
以基因组克隆Rim2 5 6 9为代表 ,分析了该家族中转座酶编码亚组的分子结构 ,同时对Rim2因子在染色体和不同水稻品种之间的差别分布情况进行了研究。序列分析表明 ,Rim2 5 6 9具有完整的 16 bp的末端颠倒重复序列 (TIRs)、若干正向和... 以基因组克隆Rim2 5 6 9为代表 ,分析了该家族中转座酶编码亚组的分子结构 ,同时对Rim2因子在染色体和不同水稻品种之间的差别分布情况进行了研究。序列分析表明 ,Rim2 5 6 9具有完整的 16 bp的末端颠倒重复序列 (TIRs)、若干正向和反向的 16 bp的亚末端重复 (STRs)以及插入位点 3 bp的同向重复。它的TIRs上具有保守序列CACTG ,有别于以往报告的CACTA转座子。该因子含有一个编码区 ,与已报告的Rim2cDNA的ORF基本一致 ,其预测编码蛋白与CAC TA转座子编码的转座酶TNP2和TNPD有低度的同源性。该亚组的其它因子的分子结构均与Rim2 5 6 9的相似 ,但这些因子预测ORF长度上存在着差异 ,反映了结构上的多样性。对检索到的Rim2因子的定位作图表明 ,它们在已测序拼接完成的第 1、4和 10号染色体上呈不均匀分布 ,以着丝点附近的分布频率为最高。PCR反应显示 ,Rim2编码因子在品种之间存在着编码序列多态性。 展开更多
关键词 水稻 Rim2因子 转座酶编码亚组 分子结构 分布
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受逆境诱导的水稻Rim2/Hipa假基因转录本选择性加尾和剪接(英文) 被引量：3
5
作者 石夏荣 李群 何祖华 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期607-614,共8页
我们以往的研究证明水稻受病原菌诱导的Rim2/Hipa 因子是水稻基因组所特有的 DNA 转座子超级家族。本实验通过对病原菌诱导的 cDNA文库的筛选和对 EST 数据库的搜索,发现在众多的 Rim2 拷贝中,只有 Rim2-42 因子被表达,其为一个TNP2类... 我们以往的研究证明水稻受病原菌诱导的Rim2/Hipa 因子是水稻基因组所特有的 DNA 转座子超级家族。本实验通过对病原菌诱导的 cDNA文库的筛选和对 EST 数据库的搜索,发现在众多的 Rim2 拷贝中,只有 Rim2-42 因子被表达,其为一个TNP2类转座酶的假基因,其编码区为终止子所打断。序列分析结果表明Rim2转录本被选择性剪接和加尾,而且在两个水稻亚种中的剪接方式有差异,共形成 7 种不同转录本结构,包括一个未知功能的Rim2-XET嵌合转录本,该嵌合转录本为转录通读(read-through)所形成,而 XET 基因是可以被逆境所诱导的。这些结果说明Rim2因子家族可能已失去转座的活性。结果也初步表明Rim2-42 因子插入到了一个 XET 基因启动子的下游,该启动子带动了 Rim2 因子的诱导表达。 展开更多
关键词 水稻 Rim2/Hipa 假基因 转录本 加工
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nm23-M2cDNA的克隆、表达及抗体制备 被引量：1
6
作者 李茂萍 何俊琳 +3 位作者 王应雄 翁亚光 刘学庆 陈雪梅 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期67-71,120,共6页
目的:通过基因工程技术表达和纯化重组nm23-M2蛋白,进而制备高效价、高特异性的抗血清。方法:构建在大肠杆菌中高效表达pQE30/nm23-M2表达质粒,Ni+-NTA亲和层析纯化;用纯化蛋白免疫兔,制备抗血清并纯化,琼脂双向扩散法测效价,免疫组织... 目的:通过基因工程技术表达和纯化重组nm23-M2蛋白,进而制备高效价、高特异性的抗血清。方法:构建在大肠杆菌中高效表达pQE30/nm23-M2表达质粒,Ni+-NTA亲和层析纯化;用纯化蛋白免疫兔,制备抗血清并纯化,琼脂双向扩散法测效价,免疫组织化学法比较它与抗NM23-H2抗体的特异性。结果:nm23-M2cDNA序列完全正确,表达的17kD可溶性融合蛋白占菌体总蛋白45%,纯化后纯度97%以上,抗血清效价为1∶64-128,提纯后纯度在90%以上,特异性高于抗NM23-H2抗体。结论:成功构建了pQE30/nm23-M2质粒,获得高纯度重组nm23-M2蛋白(rNM23-M2),并制备了高效价、高度特异性的抗血清,为进一步研究nm23-M2基因功能和蛋白作用奠定了基础。 展开更多
关键词 rim23-M2 克隆 表达 抗体
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一个新的水稻TE的克隆及其与CACTA转座子结构的比较(英文)
7
作者 田平芳 王国栋 +2 位作者 李群 李德葆 何祖华 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期133-140,共8页
对水稻受稻瘟病菌诱导的新因子 Rim2的基因组结构进行了研究 .以 Rim2 c DNA片段作探针 ,筛选水稻 BAC文库并对其亚克隆 ,获得了一个基因组 DNA克隆 Rim2 - 5 6 9.序列分析表明 ,Rim2 - 5 6 9序列具备 Class 2转座子的基本结构特征 .它... 对水稻受稻瘟病菌诱导的新因子 Rim2的基因组结构进行了研究 .以 Rim2 c DNA片段作探针 ,筛选水稻 BAC文库并对其亚克隆 ,获得了一个基因组 DNA克隆 Rim2 - 5 6 9.序列分析表明 ,Rim2 - 5 6 9序列具备 Class 2转座子的基本结构特征 .它两端具有完整的末端颠倒重复 (TIRs) ,若干正向和反向的亚末端重复 (STRs) ,以及插入位点 3bp的同向重复 .它 TIRs上的保守序列 CACTG有别于以往报道的 CACTA转座子 .该因子包含一个开读框 ,其预测蛋白与 CACTA转座子编码的 TNP2、TNPD等转座酶有低程度的同源性 .该因子没有能够编码类似 TNP1/ TNPA的 DNA结合蛋白的开读框 .Southern杂交显示 ,Rim2因子在多个不同起源的水稻品种上广泛存在 ,连同检索结果 ,证明该家族具有很多拷贝 .上述特点表明 ,该因子属于一个与 CACTA转座子有一定差异的新的转座子大家族 . 展开更多
关键词 水稻 TE 克隆 CACTA转座子 基因组 稻瘟病菌 Rim2因子 分子结构
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