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全反式维甲酸诱导Rig-g基因表达的调控机制研究 被引量:5
1
作者 潘晓蓉 楼叶江 +3 位作者 张长林 许桂平 贾培敏 童建华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期31-35,共5页
为了揭示全反式维甲酸(ATRA)诱导急性早幼粒白血病(APL)细胞株NB4细胞分化过程中rig-g基因表达的分子机制,进一步阐明ATRA在APL细胞分化中的信号转导网络,采用荧光素酶报告基因试验、蛋白质免疫共沉淀试验以及染色质免疫共沉淀试验等对... 为了揭示全反式维甲酸(ATRA)诱导急性早幼粒白血病(APL)细胞株NB4细胞分化过程中rig-g基因表达的分子机制,进一步阐明ATRA在APL细胞分化中的信号转导网络,采用荧光素酶报告基因试验、蛋白质免疫共沉淀试验以及染色质免疫共沉淀试验等对直接启动rig-g基因表达的转录因子及其作用机制进行研究。结果显示:在NB4细胞中,STAT2、IRF-9和IRF-1均能够被ATRA诱导表达,但表达时相有所不同。STAT2和IRF-9可以发生相互作用,形成复合物,并与rig-g基因启动子上的序列结合,激活rig-g基因的表达。IRF-1单独也能激活含rig-g基因启动子的报告基因,但是C/EBPα能强烈抑制IRF-1的这种转录激活作用。结论:在维甲酸诱导APL细胞分化过程中,ATRA首先诱导IRF-1的表达;随着C/EBPα的逐渐下调,IRF1-继而又进一步使细胞内的IRF-9和STAT2的蛋白水平上升。IRF-9和STAT2相互作用形成的复合物是直接诱导rig-g基因表达最基本的转录因子。本研究对于深入理解ATRA诱导APL细胞分化的信号转导网络具有一定的意义。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 rig-g基因 IRF-1 IRF-9 STAT2
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酵母双杂交研究与RIG-G相互作用的蛋白 被引量:2
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作者 朱海青 王海红 +3 位作者 陈赛娟 陈竺 王振义 童建华 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第5期385-389,400,共6页
目的应用酵母双杂交技术研究能够与维甲酸诱导的G基因 (RIG -G)发生作用的蛋白 ,以了解其功能。 方法应用酵母双杂交技术 ,以RIG -G为诱饵 ,筛选人类骨髓cDNA文库 ,寻找能与之相互作用的蛋白。利用生物信息学 ,一对一酵母回复性杂交 ,... 目的应用酵母双杂交技术研究能够与维甲酸诱导的G基因 (RIG -G)发生作用的蛋白 ,以了解其功能。 方法应用酵母双杂交技术 ,以RIG -G为诱饵 ,筛选人类骨髓cDNA文库 ,寻找能与之相互作用的蛋白。利用生物信息学 ,一对一酵母回复性杂交 ,β -GAL实验等提供的信息 ,筛除假阳性克隆 ,确定阳性克隆。  结果经过酵母双杂交共获得 10 9个克隆 ,经过验证 ,有 2 4个阳性克隆 ,它们分别是细胞的信号传导蛋白、细胞骨架蛋白、激酶等。 结论为了研究诸如RIG -G新基因的功能 ,酵母双杂交技术是可靠的分子生物学技术。 展开更多
关键词 酵母双杂交 rig-g 基因功能 全反式维甲酸 急性白血病 治疗 诱导分化治疗
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RIG-G基因在酵母双杂交后的蛋白互作验证
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作者 程姗 曾庆韬 童建华 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第1期73-76,共4页
RIG G基因是利用全反式维甲酸(ATRA)诱导,采用差异显示PCR方法从APL细胞系NB4中克隆到的一个新基因.采用酵母双杂交的方法筛到了与RIG G发生相互作用的JAB1.由于在酵母这种低等真核细胞中缺少诸如高等真核细胞中各种保证蛋白正常生物学... RIG G基因是利用全反式维甲酸(ATRA)诱导,采用差异显示PCR方法从APL细胞系NB4中克隆到的一个新基因.采用酵母双杂交的方法筛到了与RIG G发生相互作用的JAB1.由于在酵母这种低等真核细胞中缺少诸如高等真核细胞中各种保证蛋白正常生物学功能发挥所必需的翻译后修饰,这种方法筛到的阳性克隆并不一定代表了真实的作用,所以在COS7细胞中采用了CO IP(co immunoprecipitation)实验,间接法、直接法均证实了这种相互作用. 展开更多
关键词 rig-g基因 差异显示 PCR 酶母双杂交 CO-IP 高等真核水平 COS7
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利用稳定转染细胞模型研究RIG-G基因的生物学功能 被引量:3
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作者 肖澍 贾培敏 +4 位作者 宋满根 李冬 潘晓蓉 陈竺 童建华 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期795-798,共4页
目的通过建立稳定表达 RIG-G 蛋白的细胞模型研究 RIG-G 基因的生物学功能。方法利用 Tet-off 表达系统在 U937细胞中转入外源的 RIG-G 基因并诱导其表达;比较 RIG-G 基因表达前后细胞生长、形态、细胞周期的分布和表面分化抗原以及相... 目的通过建立稳定表达 RIG-G 蛋白的细胞模型研究 RIG-G 基因的生物学功能。方法利用 Tet-off 表达系统在 U937细胞中转入外源的 RIG-G 基因并诱导其表达;比较 RIG-G 基因表达前后细胞生长、形态、细胞周期的分布和表面分化抗原以及相关细胞周期调控蛋白水平的变化。结果RIG-G 蛋白可通过上调细胞周期抑制因子 P21和 P27的蛋白水平,将细胞阻滞在 G_0/G_1期。与转染空质粒对照细胞相比,G_0/G_1期细胞的比例由(43.9±5.6)%增加到(63.9±2.3)%(P<0.01),细胞的生长被抑制,抑制率达到(68.7±0.2)%。此外,RIG-G 蛋白还能使细胞表面分化抗原 CD11C 的表达升高至(61.3±1.1)%,细胞出现胞体变小、核浆比缩小、核凹陷、染色质变粗糙等部分分化的形态特征。而对照细胞的 CD11C 表达则为(18.0±0.4)%(P<0.01)。结论 RIG-G 蛋白具有重要的抑制细胞增殖和促进细胞分化的能力。 展开更多
关键词 基因 RIG—G Tet-off表达系统 细胞增殖 细胞分化
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Establishment and evaluation based of a RIG-G gene detection system by TaqMan-MGB probe real-time PCR
5
作者 庞丽 《China Medical Abstracts(Internal Medicine)》 2017年第1期54-,共1页
Objective To establish a Taq Man-MGB fluorescent probe characterized real-time polymerase chain reaction(q PCR)method for detecting retinoic acid induced genes G(RIG-G)in human acute promyelocytic leukemia(M3).Analyze... Objective To establish a Taq Man-MGB fluorescent probe characterized real-time polymerase chain reaction(q PCR)method for detecting retinoic acid induced genes G(RIG-G)in human acute promyelocytic leukemia(M3).Analyze RIG-G expression levels in peripheral blood of both normal persons and M3 patients and 展开更多
关键词 RIG MGB REAL Establishment and evaluation based of a rig-g gene detection system by TaqMan-MGB probe real-time PCR time gene
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海洋修井机火气系统 被引量:5
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作者 谷伟 叶剑 李勇 《自动化技术与应用》 2014年第3期89-90,95,共3页
在海上石油及天然气开采过程中,海洋平台作为油气采集、临时存储及简单处理的重要场所,其危险性极大。火气系统对危险区电气设施进行实时监控及报警,对于第一时间扑灭火灾防止灾难发生有着重要的意义。本文从技术要求、系统架构、元器... 在海上石油及天然气开采过程中,海洋平台作为油气采集、临时存储及简单处理的重要场所,其危险性极大。火气系统对危险区电气设施进行实时监控及报警,对于第一时间扑灭火灾防止灾难发生有着重要的意义。本文从技术要求、系统架构、元器件选型、信号传输网络等几个方面对海洋修井机火气系统的设计进行了探讨。 展开更多
关键词 火气系统 海洋修井机 火气盘 PLC ESD
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维甲酸诱导基因G蛋白调控p21基因表达的机制
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作者 邹清平 许桂平 +5 位作者 庄立琨 张长林 晏伟伟 张颖婷 楼叶江 童建华 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期657-661,共5页
目的 研究维甲酸诱导基因G(RIG-G)蛋白调控p21基因表达的相关机制.方法 采用Western blot法检测白血病细胞株NB4中过表达RIG-G蛋白对p21蛋白表达的影响,以及U937细胞中过表达RIG-G蛋白对c-Jun和JNK蛋白磷酸化水平的影响.将c-Jun表达... 目的 研究维甲酸诱导基因G(RIG-G)蛋白调控p21基因表达的相关机制.方法 采用Western blot法检测白血病细胞株NB4中过表达RIG-G蛋白对p21蛋白表达的影响,以及U937细胞中过表达RIG-G蛋白对c-Jun和JNK蛋白磷酸化水平的影响.将c-Jun表达质粒与含p21基因启动子的报告基因质粒共同转染至293T细胞,采用荧光素酶报告基因实验研究c-Jun蛋白对p21基因的表达调控作用.结果 Western blot法检测结果显示,在NB4细胞中过表达RIG-G蛋白能明显上调p21蛋白的表达水平;而且在全反式维甲酸(ATRA)诱导NB4细胞分化的过程中,随着内源性RIG-G蛋白被明显地诱导表达,p21蛋白的表达水平也明显升高.在过表达RIG-G蛋白的U937细胞中,JNK和c-Jun蛋白的磷酸化水平均明显下降,而JNK和c-Jun总蛋白的表达水平则无明显变化.当U937细胞中加入JNK抑制剂SP600125后,尽管JNK蛋白的磷酸化被完全抑制,但与对照细胞U937T-pTRE比较,过表达RIG-G蛋白的U937T-RIG-G细胞中,c-Jun蛋白的磷酸化水平依然明显下降.表明RIG-G蛋白不仅能通过JNK信号通路抑制c-Jun蛋白的磷酸化,也可以以不依赖JNK信号途径的方式下调c-Jun蛋白的磷酸化水平.荧光素酶报告基因检测结果则显示,当293T细胞中分别转染0.1、0.5、1.0和2.0 μg c-Jun表达质粒时,荧光素酶报告基因的活性分别为转染空载体组的(83.0±1.7)%、(73.7±0.7)%、(68.9±0.9)%和(64.1±0.9)%,提示c-Jun蛋白能抑制p21基因的转录表达活性.结论 在U937细胞中,过表达RIG-G蛋白能通过多条不同的信号途径共同下调c-Jun蛋白的磷酸化水平,最终使p21基因的表达水平升高,发挥阻断细胞周期进程,抑制细胞生长的功能. 展开更多
关键词 rig-g蛋白 P21基因 JNK蛋白 C-JUN蛋白 磷酸化
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干扰素α调控维甲酸诱导基因G表达分子机制的新发现 被引量:1
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作者 楼叶江 潘晓蓉 +4 位作者 贾培敏 李冬 张长林 许桂平 童建华 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期88-92,共5页
目的探讨干扰素α(IFN-α)调控维甲酸诱导基因G(RIG-G)表达调控的分子机制。方法采用Westernblot方法检测急性早幼粒白血病细胞系NB4经IFN-α处理后信号传导和转录活化因子1(STAT1)、p-STATI和RIG—G蛋白的表达变化。采用细胞转... 目的探讨干扰素α(IFN-α)调控维甲酸诱导基因G(RIG-G)表达调控的分子机制。方法采用Westernblot方法检测急性早幼粒白血病细胞系NB4经IFN-α处理后信号传导和转录活化因子1(STAT1)、p-STATI和RIG—G蛋白的表达变化。采用细胞转染、报告基因实验、免疫共沉淀实验和染色质免疫沉淀实验等技术,研究STAT1缺失的U3A细胞中,STAT1、STAT2和IFN调节因子9(IRF-9)在IFN-α调控RIG—G基因表达中的作用及其机制。结果在U3A细胞中,只有当STAT2和IRF-9共同转染时,RIG—G启动子荧光素酶报告基因的表达活性才明显升高,约为空载对照组的8倍。在无IFN-α作用时,野生型或突变型STAT2与IRF-9共同转染U3A细胞可产生相似的效应;但IFN-α能进一步增强野生型STAT2与IRF-9的转录激活作用,约为未加IFN-α时的6倍,而对突变型STAT2无效。STAT2能与IRF-9相互作用,并能与RIG-G基因的启动子结合。结论STAT2和IRF-9能以不依赖于STATl的形式发生相互作用,所形成的复合物是介导IFN-α调控RIG—G基因表达的关键性转录因子,这是一种有别于经典JAK—STAT途径的新的干扰素信号转导方式。 展开更多
关键词 干扰素Α 信号转导 维甲酸诱导基因G
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