基于HIFs/RhoB/ROCK通路探讨黄芪甲苷改善缺氧诱导心力衰竭大鼠心肌损伤的作用机制

1

作者 张佳 秦蕊 李刚 《中西医结合心脑血管病杂志》 2025年第6期863-868,共6页

目的:观察黄芪甲苷(AST)对缺氧诱导的心力衰竭大鼠血流动力学相关指标、心肌肌钙蛋白及细胞凋亡的改善作用,并探讨其通过调节缺氧诱导因子(HIFs)/RhoB蛋白(RhoB)/Rho相关激酶(ROCK)信号通路的改善机制。方法:采用大鼠尾静脉注射盐酸阿... 目的:观察黄芪甲苷(AST)对缺氧诱导的心力衰竭大鼠血流动力学相关指标、心肌肌钙蛋白及细胞凋亡的改善作用,并探讨其通过调节缺氧诱导因子(HIFs)/RhoB蛋白(RhoB)/Rho相关激酶(ROCK)信号通路的改善机制。方法:采用大鼠尾静脉注射盐酸阿霉素建立心力衰竭大鼠模型,AST治疗后,再包装HIF-1α-干扰腺病毒(HIF-1αsiRNA)和HIF-2α-干扰腺病毒(HIF-2αsiRNA)干预大鼠。将大鼠分为假手术组(Sham组)、心力衰竭组(HF组)、心力衰竭+AST组(HF+AST组)、心力衰竭+AST+阴性对照组(HF+AST+NC组)、心力衰竭+AST+siRNA HIF-1α组(HF+AST+siRNA HIF-1α组)及心力衰竭+AST+siRNA HIF-2α组(HF+AST+siRNA HIF-2α组)。测定大鼠心肌肌钙蛋白(I cTnI)、心率、收缩压、舒张压及平均血压(MBP)变化;通过流式细胞术检测活性氧变化。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测HIF-1α、HIF-2αmRNA表达水平;蛋白免疫印记法(Western Blot)检测HIF-1α、HIF-2α、RhoB、ROCK表达变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Caspase-3表达水平。结果:与HF组比较,HF+AST组大鼠心率、舒张压、MBP、cTnI、活性氧、Caspase-3水平下降,心肌细胞HIF-1α、HIF-2αmRNA与蛋白表达升高,RhoB和ROCK蛋白表达升高(P<0.05);与HF+AST+NC组比较,HF+AST+siRNA HIF-1α组及HF+AST+siRNA HIF-2α组大鼠心率、收缩压、MBP升高,cTnI、活性氧、Caspase-3水平升高,心肌细胞RhoB、ROCK蛋白表达下降(P<0.05)。结论:AST可减轻缺氧诱导的心力衰竭模型大鼠心肌细胞损伤,其机制可能与HIFs/RhoB/ROCK通路相关。 展开更多

关键词 心力衰竭 缺氧诱导的心肌细胞损伤 黄芪甲苷 缺氧诱导因子 rhob蛋白 Rho相关激酶 大鼠 实验研究

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RhoB和E-cadherin在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 被引量：6

2

作者 谭祎媚 张逊 +2 位作者 徐美林 王菁 徐医军 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第1期27-30,I0003,共5页

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中RhoB和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Super Pic TureTMPolymer二步法,检测116例NSCLC组织(NSCLC组)和同期116例正常余肺组织(正常组)中RhoB和E-cadherin的表达,并分析其表... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中RhoB和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Super Pic TureTMPolymer二步法,检测116例NSCLC组织(NSCLC组)和同期116例正常余肺组织(正常组)中RhoB和E-cadherin的表达,并分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果 NSCLC组RhoB、E-cadherin阳性表达率均低于正常组(57.76%vs 87.07%,54.31%vs 85.34%,均P<0.01)。NSCLC组织中RhoB的表达强度在不同肿瘤病理类型、肿瘤分化程度及淋巴结转移情况间的差异有统计学意义,E-cadherin的表达强度在不同TNM分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移情况间的差异有统计学意义。NSCLC组RhoB与E-cadherin的表达呈正相关(r=0.503,P<0.01)。RhoB高表达的患者3年生存率高于低表达者(83.93%vs 40.00%,Log-rankχ2=18.992,P<0.01);Ecadherin高表达的患者3年生存率高于低表达者(85.11%vs 44.93%,Log-rankχ2=16.680,P<0.01)。RhoB和E-cadherin共同低表达、淋巴结转移是影响NSCLC患者预后的危险因素。结论 RhoB与E-cadherin在NSCLC组织中的表达呈现较好的相关性,检测二者的表达对判断NSCLC患者的临床病理学特征及预后有一定提示作用。 展开更多

关键词 癌 非小细胞肺 钙黏着糖蛋白类 免疫组织化学 预后 Kaplan—Meiers评估 rhob E-钙黏蛋白

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热应激对大鼠肝组织及人前列腺癌PC-3细胞RhoB表达的影响 被引量：3

3

作者 刘亚萍 李忆东 +2 位作者 王晓慧 杨瑞 卢建 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期381-384,共4页

目的:观察烫伤后大鼠肝脏组织及热应激后前列腺癌PC-3细胞小G蛋白RhoB表达的变化,探讨热应激对体内外RhoB表达的影响。方法:制备雄性SD大鼠30％体表面积Ⅲ度背部烫伤模型,烫伤后2、4、8、16 h取相应大鼠肝脏组织(n= 6),应用RT-PCR和West... 目的:观察烫伤后大鼠肝脏组织及热应激后前列腺癌PC-3细胞小G蛋白RhoB表达的变化,探讨热应激对体内外RhoB表达的影响。方法:制备雄性SD大鼠30％体表面积Ⅲ度背部烫伤模型,烫伤后2、4、8、16 h取相应大鼠肝脏组织(n= 6),应用RT-PCR和Western印迹分析测定RhoB mRNA和蛋白水平,并以正常大鼠肝脏组织作对照(n=6)。制备人前列腺癌PC-3细胞热应激模型,热应激后0．5、1、2、4、8 h取细胞检测RhoB的表达,并以未处理细胞作对照。结果:烫伤后4 h,大鼠肝组织RhoB mRNA表达量最高,为正常对照的3．2倍(P<0．01),8 h开始下降;而RhoB蛋白表达量在烫伤后8 h最高(P<0．01)。PC-3细胞RhoB mRNA在热应激后2 h时开始上调;4 h时达到最大值,约为对照的2．8倍(P<0．01);热应激后8 h RhoB蛋白表达量最高(P<0．01)。结论:在体内、体外实验中热应激均能上调小G蛋白RhoB mRNA和蛋白的表达。 展开更多

关键词 热应激 烫伤 小G蛋白 rhob 肝 前列腺肿瘤

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RhoB抑制慢性粒细胞白血病细胞的生长 被引量：2

4

作者 姚红 朱晓苏 +2 位作者 徐康萍 周海侠 赵昀 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2012年第5期537-542,共6页

目的:研究RhoB对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞增殖能力的影响。方法:用PCR扩增RhoB编码区并构建几种RhoB脂类修饰突变体。以慢病毒为载体携带RhoB及其突变体在CML细胞中过表达后,检测细胞增殖能力,并分析细胞的... 目的:研究RhoB对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞增殖能力的影响。方法:用PCR扩增RhoB编码区并构建几种RhoB脂类修饰突变体。以慢病毒为载体携带RhoB及其突变体在CML细胞中过表达后,检测细胞增殖能力,并分析细胞的周期进程。结果:过表达RhoB能抑制MEG-01细胞及CML患者CD34+细胞的增殖;脂类修饰缺失的RhoBC193G不能抑制CML细胞的增殖;单独进行法尼基(F)修饰和单独进行牻牛儿基牻牛儿基(GG)修饰的RhoB均可抑制CML细胞的增殖;过表达RhoB及其单种脂类修饰变体将CML细胞阻滞于G2/M期。结论:RhoB需要F或GG类型的脂类修饰才能抑制CML细胞的生长并将CML细胞阻滞于G2/M期。 展开更多

关键词 慢性粒细胞白血病 rhob 增殖 脂类修饰

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RhoB在肾透明细胞癌中的表达及临床意义 被引量：2

5

作者 陈伟浩 徐衍盛 +6 位作者 王希友 欧阳昀 吴意光 张新宇 王毅 刘萃龙 张旭 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第16期2619-2622,共4页

目的:探讨RhoB在肾透明细胞癌中的表达及临床意义。方法:采用实时定量PCR、Westernblot和免疫组化方法检测RhoB在肾透明细胞癌组织中的表达情况。选取60例肾透明细胞癌组织标本,详细收集病人临床病理资料,通过免疫组化方法检测RhoB在肾... 目的:探讨RhoB在肾透明细胞癌中的表达及临床意义。方法:采用实时定量PCR、Westernblot和免疫组化方法检测RhoB在肾透明细胞癌组织中的表达情况。选取60例肾透明细胞癌组织标本,详细收集病人临床病理资料,通过免疫组化方法检测RhoB在肾透明细胞癌组织中的蛋白表达水平,并分析RhoB的蛋白水平与临床病理资料的关系。结果:与对应瘤旁肾组织相比,RhoB的mRNA及蛋白表达水平在肾透明细胞癌组织标本中明显降低;RhoB的蛋白表达水平在不同年龄、性别组间差异无统计学意义(P>0.05),而在肿瘤直径大小、T分期、临床分期和组织分级间差异有显著统计学差异(P<0.05)。结论:RhoB的表达降低可能在肾透明细胞癌的肿瘤发生中发挥作用,且其表达下降可能与肾透明细胞癌的恶性进展有关。 展开更多

关键词 rhob 肾透明细胞癌 恶性进展

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miRNA223和RhoB在大肠癌中的表达及其与临床特征的相关性研究 被引量：1

6

作者 杨鹏春 姜仕柱 +4 位作者 张凯 王琴 晏彩华 李琪毅 戴迟兵 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第15期2345-2349,共5页

目的检测大肠癌组织中miR-223和RhoB的表达,并分析其与大肠癌的发生发展、临床病理特征之间的关系。方法收集大肠癌患者手术标本的癌组织及配对的癌旁组织、腺瘤性息肉及正常大肠黏膜。应用免疫组织化学检测组织中的RhoB蛋白的表达,采用... 目的检测大肠癌组织中miR-223和RhoB的表达,并分析其与大肠癌的发生发展、临床病理特征之间的关系。方法收集大肠癌患者手术标本的癌组织及配对的癌旁组织、腺瘤性息肉及正常大肠黏膜。应用免疫组织化学检测组织中的RhoB蛋白的表达,采用qRT-PCR及Western blot检测miR-223及RhoB在正常黏膜、腺瘤性息肉、大肠癌及大肠癌癌旁组织中的mRNA及蛋白表达水平,观察miR-223与RhoB的相关性,并结合患者的临床病理参数进行分析。结果 miR-223与RhoB蛋白在大肠癌组织中呈负相关(P<0.05);通过检测大肠癌组织中的miR-223和RhoB蛋白表达水平,发现其与侵袭及远处转移显著相关;Kaplan-Meier分析表明miR-223高表达者的总生存期相对较差。此外,通过Western blot和免疫组织化学检测发现,大肠癌组织中RhoB的表达明显下降。结论 miR-223可能在大肠癌的发生发展中发挥一定作用,并可能成为新的大肠癌诊断标志物。 展开更多

关键词 miR-223 大肠癌 MIRNA rhob

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RhoB分子靶蛋白MHY9的鉴定 被引量：2

7

作者 唐蓓 唐彦 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期341-345,共5页

鉴定能与活性RhoB分子结合的靶蛋白。制备GST融合的活性RhoB蛋白(GST-RhoB),与LPS刺激的DC2.4细胞裂解物混合后实施pull-down实验,沉降复合物通过SDS-PAGE分析、金染色后,对与GST-RhoB结合的蛋白条带进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质... 鉴定能与活性RhoB分子结合的靶蛋白。制备GST融合的活性RhoB蛋白(GST-RhoB),与LPS刺激的DC2.4细胞裂解物混合后实施pull-down实验,沉降复合物通过SDS-PAGE分析、金染色后,对与GST-RhoB结合的蛋白条带进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析。然后制备小鼠的树突状细胞,LPS刺激12 h后,进行荧光标记的抗体染色。激光共聚焦显微镜下观察RhoB与MYH9的细胞内定位。通过MALDI-TOF质谱分析,鉴定到一个新的可以与RhoB的活性形式结合的马达分子MYH9。激光共聚焦显微镜的结果表明,RhoB在LPS刺激前后均与MYH9在树突状细胞内共定位。该研究首次发现MYH9可与活性RhoB结合,可能是RhoB下游的一个靶蛋白。 展开更多

关键词 rhob 靶蛋白 鉴定 MYH9

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RhoB/ROCK蛋白分子在重度子痫前期的表达

8

作者 杨博萍 韩健 +4 位作者 韩新美 俞丽丽 颜耀华 周元国 李力 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第8期1410-1413,共4页

目的:探讨RhoB/ROCK蛋白分子在重度子痫前期(severe preeclampsia,sPE)患者胎盘组织中表达水平以及意义。方法:取sPE产妇和正常产妇胎盘组织各20例,通过Western blot和免疫组化检测胎盘组织中Rho亚家族蛋白(RhoB、RhoC)及其Rho激酶即ROC... 目的:探讨RhoB/ROCK蛋白分子在重度子痫前期(severe preeclampsia,sPE)患者胎盘组织中表达水平以及意义。方法:取sPE产妇和正常产妇胎盘组织各20例,通过Western blot和免疫组化检测胎盘组织中Rho亚家族蛋白(RhoB、RhoC)及其Rho激酶即ROCK(ROCKI、ROCKII)蛋白的表达水平,应用Spearman等级相关分析法检验RhoB、RhoC与ROCKI、ROCKII蛋白表达水平的相关性。结果:RhoB、ROCKI、ROCKII蛋白在sPE表达水平增加(P<0.05);sPE患者胎盘组织中RhoB与ROCKI、ROCKII蛋白表达水平均呈正相关(r=0.793,r=0.901,P<0.05)。结论:RhoB及其与下游分子ROCKI、ROCKII构成的信号通路,在sPE的发病中可能发挥着重要的作用。 展开更多

关键词 rhob ROCK 重度子痫前期

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胎盘组织中RhoB／Rock蛋白分子的表达 被引量：1

9

作者 盖立文 《国际医药卫生导报》 2016年第17期2601-2605,共5页

目的研究Rho亚家族蛋白B（RhoB）／相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1（Rock1）、相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2（Rock2）在子痫前期（preeclampsia，PE）患者的胎盘组织中的表达及意义。方法收集30例子痫前期患者的胎盘组织及20例正常晚期妊娠患... 目的研究Rho亚家族蛋白B（RhoB）／相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1（Rock1）、相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2（Rock2）在子痫前期（preeclampsia，PE）患者的胎盘组织中的表达及意义。方法收集30例子痫前期患者的胎盘组织及20例正常晚期妊娠患者的胎盘组织，采用免疫组织化学法检测两组胎盘组织中的RhoB／Rock1、Rock2蛋白分子的表达定位及差异。结果RhoB、Rock1、Rock2蛋白分子在子痫前期组中的表达显著高于在正常晚期妊娠组中的表达（P〈0．05）。结论RhoB、Rock1、Rock2蛋白分子，可能通过引起滋养细胞的凋亡、抑制滋养细胞的增殖、迁徙，降低了滋养细胞的功能等，参与子痫前期发病。 展开更多

关键词 rhob蛋白 Rock蛋白 子痫前期 细胞凋亡

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糖皮质激素对小G蛋白RhoB的调节作用及其可能机制

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作者 陈玉霞 曹冬梅 +1 位作者 李宗斌 卢建 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1543-1543,共1页

关键词 糖皮质激素 小G蛋白 rhob 调节作用 糖皮质激素受体 糖皮质激素制剂

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环状RNA SAMD8调控miR-223-3p/RHOB表达抑制胰腺导管腺癌进程的分子机制

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作者 郑坚江 郑秉礼 刘跃全 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第5期31-39,共9页

目的探讨环状RNA SAMD8(circ-SAMD8)在胰腺导管腺癌(PDAC)进展中的潜在机制。方法基于Microarray数据(GSE79634)分析PDAC组织中circRNAs的表达谱。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证circ-SAMD8(hsa_circ_0006148)在PDAC组织和... 目的探讨环状RNA SAMD8(circ-SAMD8)在胰腺导管腺癌(PDAC)进展中的潜在机制。方法基于Microarray数据(GSE79634)分析PDAC组织中circRNAs的表达谱。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证circ-SAMD8(hsa_circ_0006148)在PDAC组织和细胞(CFPAC-1和PANC-1)中的表达。采用生物信息学分析预测circ-SAMD8的靶微小RNA(miRNA)及其下游mRNA,并采用双荧光素酶报告基因实验进行鉴定。采用MTT法和集落形成法检测PDAC细胞的增殖能力。采用免疫印迹法(Western blot)检测抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax的表达水平。采用流式细胞术检测凋亡细胞百分比。结果circ-SAMD8在PDAC组织和细胞中的表达水平低于癌旁组织和正常细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达circ-SAMD8能有效促进PDAC细胞凋亡,抑制PDAC细胞增殖。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-223-3p是circ-SAMD8的一个潜在相互作用分子,miR-223-3p的下游mRNA靶点是RHOB。miR-223-3p在PDAC组织和细胞中异常过表达,并伴有RHOB低表达。在转染miR-223-3p模拟物或sh-circ-SAMD8的PDAC细胞中,RHOB表达显著降低,增殖能力增强,凋亡率降低。结论circ-SAMD8通过海绵化miR-223-3p,调控下游RHOB的表达,有效抑制PDAC的发生发展。 展开更多

关键词 胰腺导管腺癌 环状RNA SAMD8 微小RNA-223-3p rhob基因 靶点 细胞增殖

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人RhoB基因真核表达载体的构建和表达分析

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作者 王梅林 牛精铃 +3 位作者 金若其 徐莹莹 蔡晶晶 陈群力 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期174-179,共6页

旨在构建带Flag标签的人RhoB基因真核表达载体并检测其表达。提取人胚肾细胞HEK-293T总RNA并反转录获得cDNA;设计引物并利用PCR技术扩增RhoB基因的ORF序列;将所扩增序列插入到带Flag标签的pCMV5真核表达载体,插入位点位于限制性内切酶Sa... 旨在构建带Flag标签的人RhoB基因真核表达载体并检测其表达。提取人胚肾细胞HEK-293T总RNA并反转录获得cDNA;设计引物并利用PCR技术扩增RhoB基因的ORF序列;将所扩增序列插入到带Flag标签的pCMV5真核表达载体,插入位点位于限制性内切酶SalⅠ和XbaⅠ之间,得到真核表达载体Flag-RhoB。酶切并测序验证该质粒的准确性。将成功构建的Flag-RhoB质粒转染乳腺癌MCF7细胞、宫颈癌HeLa细胞以及结直肠癌HCT116细胞,Western Blotting检测RhoB蛋白的表达情况;转染Mv.1.Lu细胞,免疫荧光技术检测该蛋白在细胞中的定位情况。成功扩增出RhoB基因的ORF序列;连入pCMV5中获得真核表达质粒Flag-RhoB;酶切鉴定得到590 bp大小的片段,测序结果显示连入的是RhoB基因的cDNA序列与GenBank相符。Western Blotting结果显示,该质粒可在MCF7细胞、HeLa细胞及HCT116细胞中正确表达。免疫荧光实验显示过表达的RhoB蛋白主要定位于细胞膜上,细胞质中也有分布。成功构建了带Flag标签的人RhoB基因的真核表达载体,该质粒可在细胞中顺利表达。 展开更多

关键词 rhob 真核表达 免疫荧光

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RhoB对胰腺癌细胞SW1990中NF-κB转录活性调控研究

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作者 苏茂生 何蕾 赵庆华 《军医进修学院学报》 CAS 2010年第11期1132-1133,1139,共3页

目的观察RhoB对人胰腺癌SW1990细胞中NF-κB转录活性的影响。方法将空载体质粒(pcDNA3)、野生型RhoB过表达质粒(RhoB-wt)、RNA干扰对照质粒(RNAi-control)、RhoBRNA干扰质粒(RhoB-RNAi)、RhoB激活质粒(RhoB-V14)或RhoB失活质粒(RhoB-N19... 目的观察RhoB对人胰腺癌SW1990细胞中NF-κB转录活性的影响。方法将空载体质粒(pcDNA3)、野生型RhoB过表达质粒(RhoB-wt)、RNA干扰对照质粒(RNAi-control)、RhoBRNA干扰质粒(RhoB-RNAi)、RhoB激活质粒(RhoB-V14)或RhoB失活质粒(RhoB-N19)和NF-κB报告基因质粒(NF-κB-luc)以及内参照质粒(pRLSV40-luc)共转染入SW1990细胞中,24h后用双萤光素酶检测基因的转录活性,WesternBlot检测RhoB蛋白。结果 SW1990细胞中,转染0.8μg的RhoB过表达和激活均能抑制NF-κB报告基因的活性,分别是对照的54%和21%;RhoBㄧRNA干扰后NF-κB的转录活性上调为对照的1.5倍。结论在胰腺癌SW1990细胞中RhoB能抑制NF-κB的转录活性。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 rhob NF—κB

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MYH9与树突状细胞中TRIF-GEFH1-RhoB信号途径的相关性研究

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作者 唐蓓 李影 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第3期313-318,共6页

为探讨Rho B(ras homolog family member B)靶蛋白MYH9(nonmuscle myosin heavy chain IIa)与TRIF-GEFH1-Rho B信号途径的关系,通过实时定量PCR技术、si RNA干扰技术、激光共聚焦显微镜、流式细胞术以及基因敲除小鼠等,分析了MYH9与TRIF... 为探讨Rho B(ras homolog family member B)靶蛋白MYH9(nonmuscle myosin heavy chain IIa)与TRIF-GEFH1-Rho B信号途径的关系,通过实时定量PCR技术、si RNA干扰技术、激光共聚焦显微镜、流式细胞术以及基因敲除小鼠等,分析了MYH9与TRIF(TIR domain-containing adapter inducing IFNβ)途径、GEFH1(guanine nucleotide-exchange factors H1)以及MHCII(major histocompatibility complex II)的关系。结果显示,在LPS(lipopolysaccharide)刺激后,MYH9的m RNA表达在野生型小鼠的树突状细胞(dendritic cells,DCs)中增加,在TRIF基因敲除小鼠的DCs中则未被上调。在野生型小鼠中MYH9的m RNA上调可被GEFH1的si RNA明显抑制(P<0.01)。同时,在LPS刺激后,MYH9与MHCII在细胞内共定位。MYH9的si RNA还抑制了DCs中LPS介导的MHCII在细胞表面的表达(P<0.05)。这些结果表明,MYH9与TRIF-GEFH1-Rho B信号途径存在相关性。 展开更多

关键词 MYH9 TRIF-GEFH1-rhob信号途径 GEFH1 MHCII

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应激对小G蛋白RhoB的诱导作用

15

作者 刘亚萍 李溪 戴林 《中国疗养医学》 2010年第10期915-917,共3页

小G蛋白RhoB是一个早期反应基因,多种应激原如放射线、紫外线、缺氧、抗癌药(如5-氟脲嘧啶、顺铂)等均能迅速上调RhoB的mRNA和蛋白质水平和(或)激活RhoB。RhoB上调或被激活在细胞应激反应中具有重要的生物学意义,目前RhoB在应激中的作... 小G蛋白RhoB是一个早期反应基因,多种应激原如放射线、紫外线、缺氧、抗癌药(如5-氟脲嘧啶、顺铂)等均能迅速上调RhoB的mRNA和蛋白质水平和(或)激活RhoB。RhoB上调或被激活在细胞应激反应中具有重要的生物学意义,目前RhoB在应激中的作用渐受重视。本文就几种应激原对其影响作一介绍。 展开更多

关键词 小G蛋白 rhob 应激

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RhoB基因联合低剂量顺铂对小鼠A549肺癌的治疗作用

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作者 胡小红 吴文芳 +5 位作者 卿勇 宋丽芳 黄文 吴杨 李怡 吴晓华 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期475-479,共5页

目的构建人pVITRO2-RhoB重组质粒,探讨pVITRO2-RhoB重组质粒在体内外的抗肿瘤效果及其联合低剂量顺铂对小鼠A549肺癌的治疗作用。方法构建pVITRO2-RhoB重组质粒,将其转染A549细胞后,观察它在细胞中的表达情况以及对A549细胞的抑制作用... 目的构建人pVITRO2-RhoB重组质粒,探讨pVITRO2-RhoB重组质粒在体内外的抗肿瘤效果及其联合低剂量顺铂对小鼠A549肺癌的治疗作用。方法构建pVITRO2-RhoB重组质粒,将其转染A549细胞后,观察它在细胞中的表达情况以及对A549细胞的抑制作用。建立小鼠A549肺癌模型,用1,2-二油酰-3-三甲胺基丙烷(DOTAP)+胆固醇(CHOL)脂质体包裹pVITRO2-RhoB重组质粒制备脂质体质粒DNA复合体即Lip-RhoB。将30只荷瘤鼠分别分为空白组、脂质体-pVITRO2复合物(Lip-null)组、脂质体-RhoB复合物(Lip-RhoB)组、低剂量顺铂(DDP)组和联合治疗(RhoB+DDP)组。RhoB尾静脉给药,低剂量顺铂腹腔给药,观察各组肿瘤体积变化及小鼠的生存期,原位瘤进行TUNEL染色,测定凋亡率。结果成功构建了pVITRO2-RhoB重组质粒,该重组质粒在体外抑制了A549细胞生长并促进了该细胞的凋亡;pVITRO2-RhoB重组质粒治疗裸鼠A549肺癌皮下肿瘤模型后,荷瘤鼠肿瘤体积增长减慢,肿瘤凋亡细胞增加(P<0.05);基因联合低剂量顺铂治疗后,与Lip-RhoB组和DDP组相比能显著抑制荷瘤鼠肿瘤生长(P<0.05),延长荷瘤鼠生存期(P<0.05),提高肿瘤细胞原位凋亡(P<0.05)。结论 RhoB基因具有明显的体内外抗肿瘤效果及协同化疗药物的抗肿瘤作用,因此RhoB基因联合低剂量顺铂可能是一种有效的肺癌治疗新方法。 展开更多

关键词 肺癌 rhob基因 顺铂 基因治疗 联合治疗

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血清外泌体miR-30d-5p靶向RHOB在三氯乙烯药疹样皮炎中的作用

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作者 蔡曙阳 王慧 +5 位作者 张雪松 左绪磊 马金茹 洪依婷 吴奇峰 朱启星 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第5期718-723,730,共7页

目的检测三氯乙烯药疹样皮炎(OMDT)患者血清外泌体中miR-30d-5p的表达水平及其与肝功能的相关性,再对miR-30d-5p进行生信分析并验证下游靶基因RHOB。方法收集6例OMDT患者和6例健康对照者血清样本提取血清外泌体。透射电镜、纳米粒子跟... 目的检测三氯乙烯药疹样皮炎(OMDT)患者血清外泌体中miR-30d-5p的表达水平及其与肝功能的相关性,再对miR-30d-5p进行生信分析并验证下游靶基因RHOB。方法收集6例OMDT患者和6例健康对照者血清样本提取血清外泌体。透射电镜、纳米粒子跟踪分析以及Western blot法对外泌体进行鉴定后提取miRNA,检测其中miR-30d-5p表达水平并与肝功能作相关性分析,用miRWalk及miRBD数据库预测miR-30d-5p的靶基因,进行功能聚类和途径富集分析,最后通过双荧光素酶报告基因实验验证靶基因RHOB。结果6例OMDT患者在发病高峰期时血清外泌体中miR-30d-5p表达水平明显降低(P<0.05),并且与肝功能指标丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰胺基转移酶水平均呈负相关(相关系数分别为:r_(s)=-0.943,P=0.005;r_(s)=-0.886,P=0.019;r_(s)=-0.886,P=0.019)。生信分析及双荧光素酶报告基因实验显示RHOB是miR-30d-5p的直接靶基因。结论OMDT患者血清外泌体miR-30d-5p表达降低,与肝功能指标呈负相关,并且可能通过靶向RHOB参与三氯乙烯所致肝损伤过程。 展开更多

关键词 三氯乙烯 外泌体 miR-30d-5p rhob

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肺癌细胞RhoA、RhoB和RhoC的表达及意义

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作者 狄松波 刘立荣 +2 位作者 曹奇峰 莫巍 王丹萍 《浙江中西医结合杂志》 2014年第9期761-764,I0002,共5页

目的通过研究RhoA、RhoB和RhoC在肺癌组织及细胞系中表达水平的变化,探讨Rho亚家族与肺癌发生、发展及转移的关系。方法应用荧光定量RT-PCR法、Western blotting法研究四种肺癌细胞系RhoA、RhoB和RhoC mRNA和蛋白表达水平变化,免疫组织... 目的通过研究RhoA、RhoB和RhoC在肺癌组织及细胞系中表达水平的变化,探讨Rho亚家族与肺癌发生、发展及转移的关系。方法应用荧光定量RT-PCR法、Western blotting法研究四种肺癌细胞系RhoA、RhoB和RhoC mRNA和蛋白表达水平变化,免疫组织化学法检测45例人肺癌组织RhoA、RhoB和RhoC蛋白表达。结果四种肺癌细胞系RhoA和RhoB mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组(P均<0.05),肺癌细胞系组间比较,表达水平差异无统计学意义(P均>0.05),各组间RhoC mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P均>0.05)。RhoA、RhoB蛋白在人肺癌组织呈阳性表达,中分化鳞癌组阳性率与非中分化鳞癌组阳性率差异无统计学意义(P均>0.05),而RhoC全部呈阴性表达。结论 RhoA、RhoB在肺癌组织中异常高表达,提示Rho亚家族参与了肺癌的发生、分化和转移过程。 展开更多

关键词 肺癌 RHOA rhob RHOC

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RhoB的翻译后修饰与细胞命运

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作者 曾涛玲 王洪睿 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第5期900-906,共7页

RhoB作为Rho家族的一员,其生物学活性和蛋白质水平的调控与其他成员有着较大的不同,在肿瘤的发生发展中也起着独特的作用。RhoB作为抑癌蛋白在肿瘤的靶向治疗上受到越来越多的关注,然而在有些类型的肿瘤中RhoB却起着促进肿瘤生长的作用... RhoB作为Rho家族的一员,其生物学活性和蛋白质水平的调控与其他成员有着较大的不同,在肿瘤的发生发展中也起着独特的作用。RhoB作为抑癌蛋白在肿瘤的靶向治疗上受到越来越多的关注,然而在有些类型的肿瘤中RhoB却起着促进肿瘤生长的作用,其中的分子机理还不清楚,亟待研究阐明。可逆的翻译后修饰是快速与精细调控RhoB功能的重要分子机制,对于维持正常细胞的生长、抑制细胞的早期癌变及肿瘤的发生发展至关重要。本文就RhoB翻译后修饰的研究,特别是其泛素化和SUMO化修饰之间的转化在肿瘤细胞命运决定中的作用进行综述,以期为探索RhoB的调控与肿瘤发生发展的机制,以及以RhoB为靶点的癌症治疗提供线索和思路。 展开更多

关键词 rhob 翻译后修饰 脂化修饰 磷酸化 泛素化 SUMO化

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miR-223靶向RhoB抑制Aβ_(1-42)诱导的海马神经元凋亡

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作者 张峪涵 付晖 +2 位作者 刘翠娟 廖成钜 罗昊栋 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2021年第5期586-593,共8页

目的:探讨miR-223抑制β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导海马神经元凋亡的分子机制。方法:体外培养新生SD大鼠的海马神经元,随机分为空白组(不作任何转染处理)、阴性组(转染miR-NC)、miR-223-m组(转染miR-223 mimics)、miR-223-m+LV组... 目的:探讨miR-223抑制β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导海马神经元凋亡的分子机制。方法:体外培养新生SD大鼠的海马神经元,随机分为空白组(不作任何转染处理)、阴性组(转染miR-NC)、miR-223-m组(转染miR-223 mimics)、miR-223-m+LV组(转染miR-223 mimics+慢病毒骨架)、miR-223-m+LV-RhoB组(转染miR-223 mimics+RhoB过表达载体)。qRT-PCR和Western blotting检测Aβ_(1-42)诱导的海马神经元中miR-223和RhoB的表达水平;MTT法检测不同浓度Aβ_(1-42)诱导海马神经元的存活率;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;双荧光素酶报告基因检测细胞的荧光活性。结果:Aβ_(1-42)可显著抑制海马神经元的存活率,且具有一定的剂量依赖性;同时其可导致海马神经元miR-223相对表达量下降,同时RhoB表达水平升高。选择30μmol·L^(-1) Aβ_(1-42)寡聚肽片段作用48 h用于后续分组实验。经流式细胞术检测,经Aβ_(1-42)30.0μmol·L^(-1)孵育48 h后,与空白组及阴性组相比,miR-223-m组细胞凋亡率降低;而与miR-223-m组及miR-223-m+LV组相比,miR-223-m+LV-RhoB组细胞凋亡率升高(P<0.05)。经Western blotting法检测,与空白组及阴性组相比,miR-223-m组细胞RhoB、Bax和caspase-3蛋白表达降低,同时Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);而与miR-223-m组及miR-223-m+LV组相比,miR-223-m+LV-RhoB组细胞RhoB、Bax和caspase-3蛋白表达升高,同时Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因分析结果显示,miR-223 mimics和野生型RhoB 3′UTR共转染后可抑制荧光素酶活性(P<0.05)。结论:miR-223可通过靶向RhoB抑制Aβ_(1-42)诱导的海马神经元细胞凋亡。 展开更多

关键词 miR-223 β-淀粉样蛋白1-42 rhob 海马神经元 凋亡

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