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RHCG基因在非小细胞肺癌中的表达及对细胞增殖的影响 被引量:3
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作者 张玉辉 高亚坤 +2 位作者 肖连波 杨明 周继梧 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期278-282,共5页
为了探讨Rh type C glycoprotein (RHCG)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖的影响及可能的作用机制,本研究使用荧光定量PCR法检测12对NSCLC及癌旁组织样本中RHCG mRNA的表达水平及pcDNA3.1-RHCG质粒对A549细胞R... 为了探讨Rh type C glycoprotein (RHCG)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖的影响及可能的作用机制,本研究使用荧光定量PCR法检测12对NSCLC及癌旁组织样本中RHCG mRNA的表达水平及pcDNA3.1-RHCG质粒对A549细胞RHCG m RNA的表达;采用CCK-8法检测细胞增殖能力;运用PI染色法检测细胞周期;使用免疫印迹法检p-PI3K、PI3K、p-AKT以及AKT蛋白表达水平。本研究发现,与癌旁组织比较,NSCLC中RHCG m RNA表达水平明显降低。RHCG过表达能抑制NSCLC细胞系A549细胞增殖能力。此外,RHCG过表达使A549细胞周期G1/S期转化发生阻滞。本研究还发现,RHCG过表达可下调A549细胞p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT水平。本研究表明,RHCG抑制NSCLC细胞增殖的作用与其抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 rhcg 增殖 PI3K/AKT信号通路
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GnRHa和rHCG诱导卵泡成熟在加强黄体支持治疗的拮抗剂方案中的疗效对比研究 被引量:2
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作者 李霞 田海清 +1 位作者 巩晓芸 腊晓琳 《新疆医科大学学报》 CAS 2014年第4期392-394,398,共4页
目的 比较在加强黄体支持治疗的拮抗剂促排卵方案中使用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)、重组绒毛膜促性腺激素(rHCG)诱导卵泡成熟治疗的安全性和有效性。方法回顾性分析2011年1月-2013年4月在新疆医科大学第一附属医院生殖医学... 目的 比较在加强黄体支持治疗的拮抗剂促排卵方案中使用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)、重组绒毛膜促性腺激素(rHCG)诱导卵泡成熟治疗的安全性和有效性。方法回顾性分析2011年1月-2013年4月在新疆医科大学第一附属医院生殖医学科因输卵管因素行GnRH拮抗剂方案治疗的162个IVF周期,依据HCG日最终诱发卵泡成熟药物的不同分为两组:A组皮下注射GnRHa0.2mg诱导卵泡成熟,共74个周期(其中71个周期进行了新鲜胚胎移植);B组皮下注射rHCG250p-g诱导卵泡成熟,共88个周期(其中82个周期进行了新鲜胚胎移植)。两组常规于用药后35~36h取卵并于当日行IVF受精。所有患者自取卵日起每日常规肌注黄体酮60mg、口服地屈孕酮20mg支持黄体功能,A组患者于取卵后第2天、第4天加用HCG2000U肌注加强黄体支持。取卵后3d在超声引导下移植胚胎1~3枚。比较两组的获卵率、MⅡ 卵子率、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、周期取消率及OHSS发生率。结果两组获卵率、MⅡ卵子率、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率差异无统计学意义(P〉0.05),A组周期取消率和OHSS发生率低于B组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论在加强黄体支持的GnRH拮抗剂促排卵方案中使用GnRHa诱导卵泡成熟可获得与rHCG相仿的获卵率、胚胎质量和临床妊娠率,但其可降低周期取消率和中重度OHSS发生率,故应用GnRHa诱导卵泡成熟是安全、有效的治疗选择。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa) 重组人绒毛膜促性腺激素(rhcg) 激发卵泡最终成熟 拮抗剂方案
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NH_4Cl对人肝细胞系LO2氨转运相关蛋白RHCG和AQP8表达的影响 被引量:1
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作者 关克磊 阚全程 +4 位作者 余祖江 李晶晶 司方莹 申珅 王彦芳 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第11期1484-1488,共5页
目的检验氯化铵是否能够特异性地刺激肝细胞,使其内部与氨离子转运有关的RHCG和AQP8基因表达发生变化。方法培养人正常肝脏细胞(LO2)、甲状腺癌细胞(TPC-1)、卵巢癌细胞(SKOVR-3)和食管癌细胞(9706),NH4Cl(2.5、5、10、20、40和50 mmol... 目的检验氯化铵是否能够特异性地刺激肝细胞,使其内部与氨离子转运有关的RHCG和AQP8基因表达发生变化。方法培养人正常肝脏细胞(LO2)、甲状腺癌细胞(TPC-1)、卵巢癌细胞(SKOVR-3)和食管癌细胞(9706),NH4Cl(2.5、5、10、20、40和50 mmol/L)对4种细胞作用24 h后,MTT法检测细胞的增殖;荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测LO2细胞经5、10和20 mmol/L的NH4Cl处理不同时间(6、12和24 h)后,AQP8和RHCG基因及蛋白的表达;10 mmol/L的NH4Cl处理TPC-1、SKOVR-3和9706细胞不同时间(6、12和24 h)后,AQP8和RHCG基因及蛋白的表达。结果随着NH4Cl浓度的增加,氨对肝细胞LO2的增殖抑制率逐渐增加且明显大于其他细胞系;10 mmol/L NH4Cl作用于LO2细胞6 h时,RHCG基因表达量明显下调(P<0.05),而AQP8基因的表达量在作用12 h后较对照组明显增加(P<0.05);10 mmol/L NH4Cl作用于LO2细胞24 h时,AQP8蛋白表达量较对照组显著增加(P<0.0.5),而RHCG无变化;相同浓度NH4Cl作用其他细胞系相同时间时,AQP8和RHCG的基因和蛋白水平均未见显著性变化。结论在氨升高的环境中,人肝细胞通过调节氨转运相关蛋白AQP8和RHCG的量来维持对氨摄取的平衡,减少氨对肝细胞的特异性损伤,在其他细胞系中无此现象。 展开更多
关键词 氯化铵 氨转运体 rhcg AQP8
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Effects of Triggering Oocytes Maturation by rhCG 250 μg vs uhCG 10 000 IU on the Outcomes of IVF-ET Treatment in Chinese Population:A Cohort Study 被引量:1
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作者 Rui YANG Rong LI +3 位作者 Ping LIU Xin-na CHEN Cai-hong MA Jie QIAO 《Journal of Reproduction and Contraception》 CAS 2013年第1期21-29,共9页
Objective To compare the effects of recombinant hCG (rhCG) 250 μg and urinary hCG (uhCG) 10 000 1U on triggering oocyte maturation during COH/1VF-ET in Chinese women. Methods A retrospective cohort study which in... Objective To compare the effects of recombinant hCG (rhCG) 250 μg and urinary hCG (uhCG) 10 000 1U on triggering oocyte maturation during COH/1VF-ET in Chinese women. Methods A retrospective cohort study which included COH/1VF-ET cases at reproductive medical center of Peking University Third Hospital from March to May 2010 was performed. Analysis of covariance (ANCOVA) was taken for data analysis. Results There were 318 cycles (group A) using rhCG 250μg and 810 cycles (group B) using uhCG 10 000 1U for triggering. In 1VF procedure, there were no significant differences in the number of oocyte retrieval, 2PN fertilization rate, good-quality embryo rate, embryo implantation rate and clinical pregnancy rate between the two groups. The delivery weeks, mean neonatal birth weight and live birth rates were also similar between the two groups. There was no local allergic reaction after injection or neonatal birth defect in group A. Conclusion The rhCG 250 μg and uhCG 10 000 IU have equal effects on triggering oocyte maturation for patients with normal ovarian function in Chinese population. rhCG may have even lower local discomfort occurrence. 展开更多
关键词 recombinant hCG rhcg urinary hCG (uhCG) in vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET)
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Human RhCG Ammonia Conduction Mechanism
5
作者 Henry J. Hoyhtya Hanna J. Koster +1 位作者 Maggie M. Christiansen Ugur Akgun 《Computational Molecular Bioscience》 2020年第3期81-94,共14页
The structural differences between <em>E. coli</em> AmtB and the human RhCG as well as the Rh50 from <em>Nitrosomonas europaea</em> suggest different ammonia conduction mechanisms for the AmtB ... The structural differences between <em>E. coli</em> AmtB and the human RhCG as well as the Rh50 from <em>Nitrosomonas europaea</em> suggest different ammonia conduction mechanisms for the AmtB and the Rh proteins. This study investigates the mechanism differences by using molecular dynamics simulations on RhCG and Rh50NE structures. Unlike AmtB the Rh proteins lack the aromatic cage at the bottom of the periplasmic vestibule. This report establishes the periplasmic Glu residue as the N<span style="white-space:nowrap;"><span>H</span><sup>+</sup><sub style="margin-left:-10px;">4</sub> </span>binding site for Rh proteins, and the two Phe residues at the entrance of the pore as the NH<sub>3</sub> binding site. The <span style="white-space:nowrap;">N<span>H</span><sup>+</sup><sub style="margin-left:-10px;">4</sub></span> molecule pushed by another ammonium releases one of its protons on its way to the phenyl gate. This study also discovers that, unlike AmtB, the Rh protein pores allow water molecules, which eventually facilitates the NH<sub>3</sub> conduction from periplasm to cytoplasm. 展开更多
关键词 Rh Proteins rhcg Rh50 Rh50NE Ammonia Channel
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rhCG融合蛋白在CHO细胞中的表达、纯化与鉴定
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作者 房乾 《海峡药学》 2016年第7期257-260,共4页
为实现rh CG融合蛋白在CHO细胞中的高效表达,构建两个不同的His-tag rh CG融合蛋白真核表达载体,通过瞬时转染比较两个载体在CHO-dhfr-细胞中的表达量,选择表达量较高的载体稳定转染CHO-dhfr^-,并采用氨甲喋呤(MTX)进行加压筛选高表达... 为实现rh CG融合蛋白在CHO细胞中的高效表达,构建两个不同的His-tag rh CG融合蛋白真核表达载体,通过瞬时转染比较两个载体在CHO-dhfr-细胞中的表达量,选择表达量较高的载体稳定转染CHO-dhfr^-,并采用氨甲喋呤(MTX)进行加压筛选高表达单克隆细胞株。加压后,表达量由1日1300m IU·m L^(-1)提高至18000m IU·m L^(-1)(以10~6个细胞计)。该克隆株经传代50代以后,rh CG表达量未发生明显变化,表明该克隆为稳定克隆株。用Ni+螯合亲和层析及凝胶过滤层析分离纯化表达产物,获得纯度大于99%的rh CG融合蛋白,SDS-PAGE电泳及Western Blot结果表明rh CG得到正确及完整的表达,生物学活性测定结果表明样品比活为11000IU·mg^(-1)。 展开更多
关键词 rhcg 内部核糖体进入位点 CHO—dhfr^- MTX
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Prognostic implication and oncogenic role of RHCG in lung adenocarcinoma
7
作者 Yi-Dan Sun Xiao-Jiang Li +2 位作者 Pei-Ying Yang Min-Na Huang Ying-Jie Jia 《Precision Medicine Research》 2022年第3期15-30,共16页
Background:Previous studies have shown that the interaction of tumor cells and the microenvironment is critical for immunotherapy response.However,predicting clinical response to immunotherapy remains a challenging pr... Background:Previous studies have shown that the interaction of tumor cells and the microenvironment is critical for immunotherapy response.However,predicting clinical response to immunotherapy remains a challenging problem for clinicians.Therefore,this study aimed to investigate the relationship between the expression of Rh family,C glycoprotein(RHCG)in lung adenocarcinoma(LUAD)and prognosis and tumor-infiltrating immune cells.Methods:First,the expression of RHCG in LUAD tissues was detected by biological database.Chi-square test,Kaplan-Meier,univariate and multivariate Cox regression analysis were used to analyze the clinical significance of RHCG expression.To investigate the correlation between RHCG expression and the level of tumor-infiltrating immune cells in LUAD tissues.Receiver operating characteristic analysis was used to compare the predictive power of RHCG with other common immune-related markers.Results:In a TCGA cohort,we found that RHCG was upregulated in LUAD and increased with tumor grade.High RHCG expression was significantly associated with poor clinicopathological features and poor survival,which was further confirmed by clinical correlation analysis and survival analysis results.Furthermore,multivariate analysis indicated that RHCG was an independent prognostic biomarker for LUAD.Significantly,RHCG overexpression was associated with higher infiltration levels of CD4+T cells,CD8+T cells,B cells,macrophages and neutrophils in LUAD.Conclusions:We found that RHCG is upregulated as a biomarker of poor prognosis in LUAD.Importantly,RHCG overexpression correlated with the immune infiltration level of B cells,CD4+T cells,CD8+T cells,macrophages,neutrophils and other immune cells,and was closely related to the overall immune infiltration level of LUAD.These results suggest that RHCG may be a potential biomarker for assessing prognosis and immune infiltration in LUAD. 展开更多
关键词 lung adenocarcinoma rhcg PROGNOSIS immune implication TCGA oxidative stress AUTOPHAGY
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GnRH激动剂联合小剂量HCG诱发排卵在IVF拮抗剂方案新鲜周期中的运用 被引量:3
8
作者 王馥新 孟庆霞 +2 位作者 张艳 邹琴燕 李红 《中国社区医师》 2016年第35期95-96,98,共3页
目的:探讨Gn RH激动剂联合小剂量HCG诱发排卵在IVF拮抗剂方案新鲜周期中的运用。方法:收治行拮抗剂方案治疗的IVF/ICSI新鲜移植周期125个,分为两组。A组给予Gn RH-a、HCG扳机治疗,B组给予r HCG扳机治疗,比较两组获卵率、MⅡ卵子率、生... 目的:探讨Gn RH激动剂联合小剂量HCG诱发排卵在IVF拮抗剂方案新鲜周期中的运用。方法:收治行拮抗剂方案治疗的IVF/ICSI新鲜移植周期125个,分为两组。A组给予Gn RH-a、HCG扳机治疗,B组给予r HCG扳机治疗,比较两组获卵率、MⅡ卵子率、生化妊娠率、临床妊娠率、种植率及中重度卵巢过度刺激综合征发生率。结果:两组获卵率、MⅡ卵子率、生化妊娠率、种植率、临床妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:促性腺激素释放激素激动剂(Gn RH-a)联合小剂量绒毛膜促性腺激素(HCG)诱发排卵在正常反应人群行拮抗剂方案新鲜移植周期中可获得与HCG扳机相似的获卵率、成熟卵率和临床妊娠率。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa) 重组人绒毛膜促性腺激素(rhcg) 拮抗剂方案 黄体支持
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第1批重组人绒促性素(生物测定用)国家标准品的制备与协作标定
9
作者 李湛军 梁誉龄 +12 位作者 李懿 胡馨月 胡宇驰 曹春然 魏霞 祝清芬 张娟 冯润东 王莉芳 何丽秀 李晶 张慧 梁成罡 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期68-77,共10页
目的:制备并标定第1批重组人绒促性素(recombinant human chorionic gonadotrophin,rHCG)国家标准品(生物测定用)。方法:以WHO第5批绒促性素国际标准品07/364效价为162 IU·瓶^(-1)作为标准,采用2020年版《中华人民共和国药典》四部... 目的:制备并标定第1批重组人绒促性素(recombinant human chorionic gonadotrophin,rHCG)国家标准品(生物测定用)。方法:以WHO第5批绒促性素国际标准品07/364效价为162 IU·瓶^(-1)作为标准,采用2020年版《中华人民共和国药典》四部1209绒促性素生物测定法,联合5个实验室对第1批rHCG待标品进行生物活性协作标定。对待标品原液进行了等电点、肽图、相对分子质量测定等结构确认。对待标品进行了紫外分光光度法蛋白含量测定、SEC-HPLC法纯度和聚体分析、RP-HPLC法氧化亚基分析等关键理化性质分析,并进行了稳定性考察。结果:,rHCG素待标品经协作标定,最终定值其生物效价为6400 IU·瓶^(-1);,rHCG素含量约为290μg·瓶^(-1),SEC-HPLC纯度约为100%。结构确认结果符合要求;聚体、解离亚基、氧化亚基等各项理化指标符合规定;稳定性考察结果满足要求。结论:本批待标品可作为第1批rHCG国家标准品,以供rHCG及相关制剂的生物效价测定用,定值为6400 IU·瓶^(-1)。 展开更多
关键词 重组人绒促性素(rhcg) 国家标准品 体内生物测定 生物效价 协作标定 理化测定 结构确认
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氨转运蛋白Rh C型糖蛋白在低蛋白饮食大鼠肾脏的表达
10
作者 刘伟 罗静 《中国药物与临床》 CAS 2014年第11期1471-1473,共3页
目的观察氨转运蛋白Rh C型糖蛋白(Rhcg)在低蛋白饮食大鼠肾脏皮质部、内髓部和外髓部的表达。方法利用蛋白印迹法分别检测低蛋白饮食组和正常对照组氨转运蛋白Rhcg在大鼠肾脏皮质、内髓部、外髓部的表达。结果低蛋白饮食不能改变Rhcg在... 目的观察氨转运蛋白Rh C型糖蛋白(Rhcg)在低蛋白饮食大鼠肾脏皮质部、内髓部和外髓部的表达。方法利用蛋白印迹法分别检测低蛋白饮食组和正常对照组氨转运蛋白Rhcg在大鼠肾脏皮质、内髓部、外髓部的表达。结果低蛋白饮食不能改变Rhcg在大鼠肾脏皮质部、内髓和外髓的表达(P>0.05)。结论饮食中蛋白的限制不能影响Rhcg在大鼠肾脏的表达。 展开更多
关键词 氨转运蛋白 肾皮质 膳食 限制蛋白质
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饲料中添加沸石对慢性肾衰犬结肠尿素转运蛋白B及氨转运体蛋白Rh表达的影响 被引量:3
11
作者 朱道仙 刘莉 +3 位作者 陆江 梅素红 袁华根 赵学刚 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2243-2248,共6页
本研究旨在探究沸石对慢性肾衰犬结肠尿素转运蛋白B及氨转运体蛋白Rh表达的影响。选取15条2岁左右的中华田园犬,采用肾动脉结扎制作慢性肾衰(CRF)模型,另取5只犬仅腹壁切开作为假手术对照组(SOG)。造模成功后,随机等分成3组:模型组(MD)... 本研究旨在探究沸石对慢性肾衰犬结肠尿素转运蛋白B及氨转运体蛋白Rh表达的影响。选取15条2岁左右的中华田园犬,采用肾动脉结扎制作慢性肾衰(CRF)模型,另取5只犬仅腹壁切开作为假手术对照组(SOG)。造模成功后,随机等分成3组:模型组(MD)、低剂量沸石组(LCD)和高剂量沸石组(HCD),SOG组与MD组饲喂基础饲料,LCD组为1%沸石饲料,HCD为5%沸石饲料,试验连续4周。用自动化血液生化仪检测血清尿素氮(BUN)和粪尿素氮(FUN),用谷氨酸脱氢酶法测定门静脉血氨,用尿素检测试剂盒测定尿尿素量(uUrea),qRT-PCR检测结肠黏膜尿素转运蛋白B(UT-B)、氨转运体蛋白b(Rhbg)与氨转运体蛋白c(Rhcg)mRNA表达,Western blot法检测UT-B、Rhbg与Rhcg的蛋白表达。结果显示,MD组的BUN、FUN及门静脉血氨均高于SOG组,uUrea降低(P<0.01),与MD组比较,HCD组的BUN、FUN、门静脉血氨均显著降低(P<0.05);MD组Rhbg、Rhcg的mRNA表达显著高于SOG组(P<0.05),与MD组比较,HCD组Rhbg、Rhcg及LCD组Rhcg的mRNA表达显著下调(P<0.05),各组间UT-B的mRNA表达无显著变化(P>0.05);MD组Rhbg、Rhcg的蛋白表达显著高于SOG组(P<0.05),与MD组比较,HCD组Rhbg、Rhcg的表达降低,MCD组Rhcg表达降低,差异显著(P<0.05),各组间UT-B表达无差异;Pearson相关性分析发现,慢性肾衰犬BUN水平与Rhcg呈强的正相关(r=0.855,P<0.05),与Rhbg呈中等正相关(r=0.769,P<0.05)。以上结果表明,沸石具有促进CRF犬BUN经肠排泄的作用,与结肠黏膜Rhbg、Rhcg的表达下调有关,以添加5%剂量最佳。 展开更多
关键词 沸石 慢性肾衰 尿素转运蛋白B 氨转运体蛋白b(Rhb) 氨转运体蛋白c(Rhc)
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一种新型长效重组绒毛膜促性腺激素的表达、活性和药代动力学研究
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作者 黄虎 杨凡 +3 位作者 吴茂柏 张玉杰 钟翎 侯永敏 《实验动物与比较医学》 CAS 2014年第2期113-119,共7页
目的 构建含有Fc片段的绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)新型长效重组hCG-Fc融合蛋白,可显著延长其在血液中的半衰期,有利于提高患者用药依从性.方法 首次将Fc DNA片段有序连接到hCG基因3'端,构建hCG-Fc表达载体... 目的 构建含有Fc片段的绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)新型长效重组hCG-Fc融合蛋白,可显著延长其在血液中的半衰期,有利于提高患者用药依从性.方法 首次将Fc DNA片段有序连接到hCG基因3'端,构建hCG-Fc表达载体并将其稳定表达在哺乳动物细胞,通过无血清悬浮细胞培养和基于亲和层析的蛋白纯化,制备了新型重组hCG-Fc融合蛋白.检测其分子量、ELISA免疫活性和体内生物活性,并测定其在大鼠体内血循环半衰期.结果 重组融合蛋白分子量与理论推断值相当,ELISA活性为2 965 IU/mg,体内生物活性为2 288 IU/mg,消除半衰期为174 h.结论 hCG-Fc融合蛋白构建表达成功,且具有显著的体内外活性,药代动力学分析显示hCG-Fc重组融合蛋白半衰期是重组hCG的近6倍.这种新型长效融合蛋白在临床上可大大减少注射次数,提高患者用药依从性,具有显著的社会和经济效益. 展开更多
关键词 重组绒毛膜促性腺激素(γhCG) FC融合蛋白 长效 药代动力学
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