Chen et al demonstrated that regulator of G protein signaling(RGS)4 promotes gastric cancer(GC)progression by activating the focal adhesion kinase/phospha-tidyl-inositol-3-kinase/protein kinase B pathway and inducing ...Chen et al demonstrated that regulator of G protein signaling(RGS)4 promotes gastric cancer(GC)progression by activating the focal adhesion kinase/phospha-tidyl-inositol-3-kinase/protein kinase B pathway and inducing epithelial-mesen-chymal transition.Although their multilevel approach integrating clinical data,functional assays,and xenograft models demonstrated a key role for RGS4 in GC pathogenesis,several limitations should be considered.The mechanism of the RGS4-focal adhesion kinase interaction remains unclear,specifically whether it involves direct binding or intermediaries.The clinical analysis of 90 patients lacks stratification by GC subtypes or immune features,potentially limiting generaliz-ability.Furthermore,fully validating RGS4’s oncogenic role requires additional studies,including functional assays in chemotherapy-resistant and metastatic cell lines,metastasis models including orthotopic implantation and tail vein injection,and comparison with other RGS family members.Addressing these via targeted mechanistic studies and expanded clinical validation could strengthen RGS4’s po-tential as a therapeutic target in GC.展开更多
目的构建pGEX4T-1-RGS4载体,并检测融合蛋白GST-RSG4在原核中的表达水平。方法采用RT-PCR方法,将克隆SD大鼠G蛋白信号转导调节因子(regulator of G protein signaling4,RGS4)基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pGEX4T-1中,IPTG诱...目的构建pGEX4T-1-RGS4载体,并检测融合蛋白GST-RSG4在原核中的表达水平。方法采用RT-PCR方法,将克隆SD大鼠G蛋白信号转导调节因子(regulator of G protein signaling4,RGS4)基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pGEX4T-1中,IPTG诱导原核表达,通过Western blot检测融合蛋白GST-RSG4的表达水平。结果成功构建了pGEX4T-1-RGS4载体;经IPTG的诱导,RGS4可与GST以融合蛋白的形式高效表达。pGEX4T-1-RGS4在原核内表达产物相对分子质量约为50×103,与预期融合蛋白大小一致。结论构建的重组质粒能够在大肠杆菌中高效表达。展开更多
目的：探讨G-蛋白信号转导调节子4（regulator of G-protein signaling-4，RGS4）基因与精神分裂症及临床症状的遗传关联。方法：应用病例对照关联研究设计，采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）和DNA测序方法，分析38...目的：探讨G-蛋白信号转导调节子4（regulator of G-protein signaling-4，RGS4）基因与精神分裂症及临床症状的遗传关联。方法：应用病例对照关联研究设计，采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）和DNA测序方法，分析386例精神分裂症患者和390例正常对照者中RGS4基因4个单核苷酸多态性（SNP）位点与精神分裂症的关联。并采用阳性和阴性症状量表（PANSS）评估患者的临床症状，进一步分析PANSS因子分与RGS4多态性的关联。结果：RGS4基因的两个多态性位点rs12753561（T〉G，χ^2=8．970，P=0．002）和rs10759（C〉A，χ^2=13．773，F=0．002，P=0．002）与精神分裂症关联，由上述4个SNPs组成的多个单体型如AAGA（χ^2=11．120，P=0．0008，OR=0．52，95％CI=0．36—0．77）和GGGC（χ^2=10．096，P=0．001，OR=1．43，95％CI=1．15—1．79）均与精神分裂症关联。PANSS量表的阴性症状因子分与rs12753561（t=2．216，P=0．029）和rs10759（t=2．543，P=0．012）关联。结论：RGS4基因多态性与精神分裂症及阴性和一般精神病理症状显著关联。展开更多
RGS(regulators of G protein signaling)是G蛋白偶联信号通路中一类重要的调节蛋白,通过加速Gα结合的GTP水解,即GAP(GTPase activating protein)活性,来中止G蛋白信号通路。RGS4是RGS蛋白家族中的重要成员之一,它能有效中止Gαq介导...RGS(regulators of G protein signaling)是G蛋白偶联信号通路中一类重要的调节蛋白,通过加速Gα结合的GTP水解,即GAP(GTPase activating protein)活性,来中止G蛋白信号通路。RGS4是RGS蛋白家族中的重要成员之一,它能有效中止Gαq介导的信号通路。作者研究了Gαq蛋白对RGS4蛋白的表达调控。当在HEK293细胞中共转染这两个蛋白时,持续性激活的Gαq能特异性地显著增加RGS4蛋白的表达。蛋白降解实验结果证明这种增强作用与RGS4的降解被抑制无关,而与RGS4 mRNA表达增强有关。进一步克隆RGS4蛋白的启动子区域并研究其与RGS4表达相互关系的实验结果又表明,持续性激活的Gαq能够显著增强RGS4启动子区的转录活性,且具有时间和浓度效应。同时,转录因子结合区突变体实验证明,ICE(inverted CCAAT box element)转录因子结合区的突变显著影响RGS4基因的转录活性。以上结果表明Gαq可能通过RGS4的启动子区调控其基因的表达,促进RGS4蛋白表达。展开更多
目的通过建立甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)依赖大鼠模型,检测其纹状体G蛋白信号调节因子4(regulator of G-protein signaling 4,RGS4)、多巴胺D2受体(dopamine receptor D2,DRD2)、抑制性G蛋白α亚基(inhibitory G proteinα-subuni...目的通过建立甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)依赖大鼠模型,检测其纹状体G蛋白信号调节因子4(regulator of G-protein signaling 4,RGS4)、多巴胺D2受体(dopamine receptor D2,DRD2)、抑制性G蛋白α亚基(inhibitory G proteinα-subunit,Gαi)和丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)的m RNA表达变化,探讨MA依赖对RGS4、D2信号通路的影响.方法通过腹腔注射MA,建立MA条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)1周组、2周组模型,应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)测定各组大鼠纹状体RGS4 m RNA、DRD2 m RNA、Gαi m RNA和MAPK m RNA的表达变化.结果与生理盐水对照组比较大鼠在伴药箱的平均停留时间MA依赖CPP-周组、2周组均延长,差异具有统计学意义(P<0.05),提示MA依赖大鼠CPP模型成功建立.与生理盐水对照组比较,RGS4m RNA在MA依赖CPP 1周组、2周组中表达均降低,且2周组下降趋势更明显,但差异无统计学意义(P>0.05);而与生理盐水对照组比较MA依赖CPP 2周组中DRD2 m RNA、Gαi m RNA和MAPK m RNA的表达均明显上调,差异有统计学意义(P<0.05).结论在MA依赖中,RGS4和D2受体信号通路发生变化,RGS4可能为D2信号通路的调节靶点.展开更多
目的探讨G-蛋白信号转导调节子4(regulator of G protein signaling 4,RGS4)基因多态性位点在精神分裂症患者和正常对照中的差异及其与利培酮血药浓度的关联。方法选取闽南地区精神分裂症患者132例和正常对照140名,检测患者利培酮的血...目的探讨G-蛋白信号转导调节子4(regulator of G protein signaling 4,RGS4)基因多态性位点在精神分裂症患者和正常对照中的差异及其与利培酮血药浓度的关联。方法选取闽南地区精神分裂症患者132例和正常对照140名,检测患者利培酮的血药浓度以及所有被试RGS4基因rs2842029、rs6678136和rs10799897位点的基因型。结果在患者组和对照组中,rs2842029位点只有1种基因型AA;rs6678136位点具有AA、AG、GG 3种基因型,基因型和等位基因频率分布在两组中的差异均具有统计学意义(P<0.05),3种基因型患者的利培酮血药浓度、剂量校正浓度和标准化浓度差异均无统计学意义(P>0.05);rs10799897位点具有AA、AG、GG 3种基因型,基因型和等位基因频率在两组中的差异均不具有统计学意义(P>0.05),3种基因型对应的血药浓度、剂量校正浓度和标准化浓度差异均具有统计学意义(P<0.05)。男女患者利培酮血药浓度和剂量校正浓度差异不具有统计学意义(P>0.05),而标准浓度的差异为男性低于女性(P=0.002)。结论 rs6678136位点可能与精神分裂症相关,rs10799897位点可能与利培酮的血药浓度有关。展开更多
目的:研究甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)依赖条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)实验大鼠纹状体G蛋白信号调节因子4(regulator of G-protein signal 4,RGS4)和多巴胺D2受体(dopamine receptor D2)信号通路相关分子...目的:研究甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)依赖条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)实验大鼠纹状体G蛋白信号调节因子4(regulator of G-protein signal 4,RGS4)和多巴胺D2受体(dopamine receptor D2)信号通路相关分子的表达变化。方法:建立METH依赖CPP大鼠1周组、2周组,应用蛋白质印迹(Western blot)测定各组大鼠纹状体RGS4和D2、抑制性G蛋白α亚基(inhibitory G proteinα-subunit,Gαi)、丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)蛋白表达的变化;应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组大鼠纹状体环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)含量的变化。结果:与生理盐水对照组相比,METH依赖1周组、2周组大鼠在伴药箱的平均停留时间明显延长(P<0.05)。与生理盐水对照组相比,RGS4蛋白在METH依赖1周、2周组的表达均明显下降(P<0.01),且与METH依赖1周组相比,2周组的下降更为明显(P<0.05);与生理盐水对照组相比,D2、Gαi、MAPK蛋白以及cAMP在METH依赖1周、2周组的表达均明显升高(P<0.01),且与METH依赖1周组相比,2周组的升高更为明显(P<0.05)。结论:在METH依赖的CPP大鼠纹状体中,RGS4和D2受体信号传导通路相关分子发生了改变,RGS4可能参与了METH依赖的CPP大鼠纹状体D2受体信号传导通路的调节。展开更多
文摘Chen et al demonstrated that regulator of G protein signaling(RGS)4 promotes gastric cancer(GC)progression by activating the focal adhesion kinase/phospha-tidyl-inositol-3-kinase/protein kinase B pathway and inducing epithelial-mesen-chymal transition.Although their multilevel approach integrating clinical data,functional assays,and xenograft models demonstrated a key role for RGS4 in GC pathogenesis,several limitations should be considered.The mechanism of the RGS4-focal adhesion kinase interaction remains unclear,specifically whether it involves direct binding or intermediaries.The clinical analysis of 90 patients lacks stratification by GC subtypes or immune features,potentially limiting generaliz-ability.Furthermore,fully validating RGS4’s oncogenic role requires additional studies,including functional assays in chemotherapy-resistant and metastatic cell lines,metastasis models including orthotopic implantation and tail vein injection,and comparison with other RGS family members.Addressing these via targeted mechanistic studies and expanded clinical validation could strengthen RGS4’s po-tential as a therapeutic target in GC.
文摘目的构建pGEX4T-1-RGS4载体,并检测融合蛋白GST-RSG4在原核中的表达水平。方法采用RT-PCR方法,将克隆SD大鼠G蛋白信号转导调节因子(regulator of G protein signaling4,RGS4)基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pGEX4T-1中,IPTG诱导原核表达,通过Western blot检测融合蛋白GST-RSG4的表达水平。结果成功构建了pGEX4T-1-RGS4载体;经IPTG的诱导,RGS4可与GST以融合蛋白的形式高效表达。pGEX4T-1-RGS4在原核内表达产物相对分子质量约为50×103,与预期融合蛋白大小一致。结论构建的重组质粒能够在大肠杆菌中高效表达。
文摘目的：探讨G-蛋白信号转导调节子4（regulator of G-protein signaling-4，RGS4）基因与精神分裂症及临床症状的遗传关联。方法：应用病例对照关联研究设计，采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）和DNA测序方法，分析386例精神分裂症患者和390例正常对照者中RGS4基因4个单核苷酸多态性（SNP）位点与精神分裂症的关联。并采用阳性和阴性症状量表（PANSS）评估患者的临床症状，进一步分析PANSS因子分与RGS4多态性的关联。结果：RGS4基因的两个多态性位点rs12753561（T〉G，χ^2=8．970，P=0．002）和rs10759（C〉A，χ^2=13．773，F=0．002，P=0．002）与精神分裂症关联，由上述4个SNPs组成的多个单体型如AAGA（χ^2=11．120，P=0．0008，OR=0．52，95％CI=0．36—0．77）和GGGC（χ^2=10．096，P=0．001，OR=1．43，95％CI=1．15—1．79）均与精神分裂症关联。PANSS量表的阴性症状因子分与rs12753561（t=2．216，P=0．029）和rs10759（t=2．543，P=0．012）关联。结论：RGS4基因多态性与精神分裂症及阴性和一般精神病理症状显著关联。
文摘RGS(regulators of G protein signaling)是G蛋白偶联信号通路中一类重要的调节蛋白,通过加速Gα结合的GTP水解,即GAP(GTPase activating protein)活性,来中止G蛋白信号通路。RGS4是RGS蛋白家族中的重要成员之一,它能有效中止Gαq介导的信号通路。作者研究了Gαq蛋白对RGS4蛋白的表达调控。当在HEK293细胞中共转染这两个蛋白时,持续性激活的Gαq能特异性地显著增加RGS4蛋白的表达。蛋白降解实验结果证明这种增强作用与RGS4的降解被抑制无关,而与RGS4 mRNA表达增强有关。进一步克隆RGS4蛋白的启动子区域并研究其与RGS4表达相互关系的实验结果又表明,持续性激活的Gαq能够显著增强RGS4启动子区的转录活性,且具有时间和浓度效应。同时,转录因子结合区突变体实验证明,ICE(inverted CCAAT box element)转录因子结合区的突变显著影响RGS4基因的转录活性。以上结果表明Gαq可能通过RGS4的启动子区调控其基因的表达,促进RGS4蛋白表达。
文摘目的通过建立甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)依赖大鼠模型,检测其纹状体G蛋白信号调节因子4(regulator of G-protein signaling 4,RGS4)、多巴胺D2受体(dopamine receptor D2,DRD2)、抑制性G蛋白α亚基(inhibitory G proteinα-subunit,Gαi)和丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)的m RNA表达变化,探讨MA依赖对RGS4、D2信号通路的影响.方法通过腹腔注射MA,建立MA条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)1周组、2周组模型,应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)测定各组大鼠纹状体RGS4 m RNA、DRD2 m RNA、Gαi m RNA和MAPK m RNA的表达变化.结果与生理盐水对照组比较大鼠在伴药箱的平均停留时间MA依赖CPP-周组、2周组均延长,差异具有统计学意义(P<0.05),提示MA依赖大鼠CPP模型成功建立.与生理盐水对照组比较,RGS4m RNA在MA依赖CPP 1周组、2周组中表达均降低,且2周组下降趋势更明显,但差异无统计学意义(P>0.05);而与生理盐水对照组比较MA依赖CPP 2周组中DRD2 m RNA、Gαi m RNA和MAPK m RNA的表达均明显上调,差异有统计学意义(P<0.05).结论在MA依赖中,RGS4和D2受体信号通路发生变化,RGS4可能为D2信号通路的调节靶点.
文摘目的探讨G-蛋白信号转导调节子4(regulator of G protein signaling 4,RGS4)基因多态性位点在精神分裂症患者和正常对照中的差异及其与利培酮血药浓度的关联。方法选取闽南地区精神分裂症患者132例和正常对照140名,检测患者利培酮的血药浓度以及所有被试RGS4基因rs2842029、rs6678136和rs10799897位点的基因型。结果在患者组和对照组中,rs2842029位点只有1种基因型AA;rs6678136位点具有AA、AG、GG 3种基因型,基因型和等位基因频率分布在两组中的差异均具有统计学意义(P<0.05),3种基因型患者的利培酮血药浓度、剂量校正浓度和标准化浓度差异均无统计学意义(P>0.05);rs10799897位点具有AA、AG、GG 3种基因型,基因型和等位基因频率在两组中的差异均不具有统计学意义(P>0.05),3种基因型对应的血药浓度、剂量校正浓度和标准化浓度差异均具有统计学意义(P<0.05)。男女患者利培酮血药浓度和剂量校正浓度差异不具有统计学意义(P>0.05),而标准浓度的差异为男性低于女性(P=0.002)。结论 rs6678136位点可能与精神分裂症相关,rs10799897位点可能与利培酮的血药浓度有关。
文摘目的:研究甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)依赖条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)实验大鼠纹状体G蛋白信号调节因子4(regulator of G-protein signal 4,RGS4)和多巴胺D2受体(dopamine receptor D2)信号通路相关分子的表达变化。方法:建立METH依赖CPP大鼠1周组、2周组,应用蛋白质印迹(Western blot)测定各组大鼠纹状体RGS4和D2、抑制性G蛋白α亚基(inhibitory G proteinα-subunit,Gαi)、丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)蛋白表达的变化;应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组大鼠纹状体环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)含量的变化。结果:与生理盐水对照组相比,METH依赖1周组、2周组大鼠在伴药箱的平均停留时间明显延长(P<0.05)。与生理盐水对照组相比,RGS4蛋白在METH依赖1周、2周组的表达均明显下降(P<0.01),且与METH依赖1周组相比,2周组的下降更为明显(P<0.05);与生理盐水对照组相比,D2、Gαi、MAPK蛋白以及cAMP在METH依赖1周、2周组的表达均明显升高(P<0.01),且与METH依赖1周组相比,2周组的升高更为明显(P<0.05)。结论:在METH依赖的CPP大鼠纹状体中,RGS4和D2受体信号传导通路相关分子发生了改变,RGS4可能参与了METH依赖的CPP大鼠纹状体D2受体信号传导通路的调节。
