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外泌体介导miR-27a-3p/RGPD6轴改善心肌缺血再灌注损伤
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作者 谢柏胜 陈兵 +1 位作者 陈凯飞 王军 《心脑血管病防治》 2026年第2期4-10,F0003,共8页
目的探究外泌体介导miR-27a-3p/RGPD6轴对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响。方法从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞(BMMSCs),将miR-NC、miR-27a-3p mimic、miR-27a-3p inhibitor转染至BMMSCs后检测转染效率,随后分离出衍生的外泌体并进... 目的探究外泌体介导miR-27a-3p/RGPD6轴对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响。方法从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞(BMMSCs),将miR-NC、miR-27a-3p mimic、miR-27a-3p inhibitor转染至BMMSCs后检测转染效率,随后分离出衍生的外泌体并进行鉴定。在小鼠体内构建心肌缺血再灌注(I/R)模型:36只SPF级雄性小鼠随机分为假手术组、I/R组、BMMSCs外泌体组、miR-NC组、miR-27a-3p mimic组以及miR-27a-3p inhibitor组,每组6只。除假手术组外,其余各组缺血30 min建立I/R模型。随后假手术组及I/R组注射30μL PBS,其余组分别注射30μL经相应转染处理的BMMSCs来源外泌体。B超检测小鼠左心室功能;HE和TUNEL染色观察小鼠心肌组织病理变化和凋亡情况;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中心肌损伤标志物心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)表达。Western blot检测cleaved caspase-3和RGPD6蛋白相对表达。在体外,将miR-NC、miR-27a-3p mimic、miR-27a-3p inhibitor转染至人原代心肌细胞并进行鉴定,qPCR检测miR-27a-3p及RGPD6的表达水平。双荧光素酶报告基因测定miR-27a-3p和RGPD6之间的结合关系。结果各鉴定结果表明成功分离出BMMSCs及转染后的相应外泌体。在体内,B超结果显示miR-27a-3p mimic可以提高左心室收缩能力;HE和TUNEL染色结果显示miR-27a-3p mimic抑制了心肌组织损伤和细胞凋亡;ELISA结果显示miR-27a-3p mimic降低了心肌损伤标志物的表达;Western blot结果显示miR-27a-3p mimic降低了心肌组织中cleaved caspase-3和RGPD6相对表达。而加入miR-27a-3p inhibitor后,上述指标均出现相反的结果。在体外也验证了上述结果。此外,双荧光素酶报告实验表明miR-27a-3p可以靶向RGPD6基因。结论间充质干细胞外泌体来源的miR-27a-3p可以靶向RGPD6基因,从而改善MIRI。 展开更多
关键词 miR-27a-3p 间充质干细胞 外泌体 心肌缺血再灌注损伤 心肌细胞 rgpd6
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