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外泌体介导miR-27a-3p/RGPD6轴改善心肌缺血再灌注损伤
1
作者
谢柏胜
陈兵
+1 位作者
陈凯飞
王军
《心脑血管病防治》
2026年第2期4-10,F0003,共8页
目的探究外泌体介导miR-27a-3p/RGPD6轴对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响。方法从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞(BMMSCs),将miR-NC、miR-27a-3p mimic、miR-27a-3p inhibitor转染至BMMSCs后检测转染效率,随后分离出衍生的外泌体并进...
目的探究外泌体介导miR-27a-3p/RGPD6轴对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响。方法从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞(BMMSCs),将miR-NC、miR-27a-3p mimic、miR-27a-3p inhibitor转染至BMMSCs后检测转染效率,随后分离出衍生的外泌体并进行鉴定。在小鼠体内构建心肌缺血再灌注(I/R)模型:36只SPF级雄性小鼠随机分为假手术组、I/R组、BMMSCs外泌体组、miR-NC组、miR-27a-3p mimic组以及miR-27a-3p inhibitor组,每组6只。除假手术组外,其余各组缺血30 min建立I/R模型。随后假手术组及I/R组注射30μL PBS,其余组分别注射30μL经相应转染处理的BMMSCs来源外泌体。B超检测小鼠左心室功能;HE和TUNEL染色观察小鼠心肌组织病理变化和凋亡情况;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中心肌损伤标志物心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)表达。Western blot检测cleaved caspase-3和RGPD6蛋白相对表达。在体外,将miR-NC、miR-27a-3p mimic、miR-27a-3p inhibitor转染至人原代心肌细胞并进行鉴定,qPCR检测miR-27a-3p及RGPD6的表达水平。双荧光素酶报告基因测定miR-27a-3p和RGPD6之间的结合关系。结果各鉴定结果表明成功分离出BMMSCs及转染后的相应外泌体。在体内,B超结果显示miR-27a-3p mimic可以提高左心室收缩能力;HE和TUNEL染色结果显示miR-27a-3p mimic抑制了心肌组织损伤和细胞凋亡;ELISA结果显示miR-27a-3p mimic降低了心肌损伤标志物的表达;Western blot结果显示miR-27a-3p mimic降低了心肌组织中cleaved caspase-3和RGPD6相对表达。而加入miR-27a-3p inhibitor后,上述指标均出现相反的结果。在体外也验证了上述结果。此外,双荧光素酶报告实验表明miR-27a-3p可以靶向RGPD6基因。结论间充质干细胞外泌体来源的miR-27a-3p可以靶向RGPD6基因,从而改善MIRI。
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关键词
miR-27a-3p
间充质干细胞
外泌体
心肌缺血再灌注损伤
心肌细胞
rgpd6
暂未订购
题名
外泌体介导miR-27a-3p/RGPD6轴改善心肌缺血再灌注损伤
1
作者
谢柏胜
陈兵
陈凯飞
王军
机构
浙江省杭州市中医院胸心外科
出处
《心脑血管病防治》
2026年第2期4-10,F0003,共8页
基金
浙江省医药卫生科技计划项目(2021KY255)。
文摘
目的探究外泌体介导miR-27a-3p/RGPD6轴对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响。方法从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞(BMMSCs),将miR-NC、miR-27a-3p mimic、miR-27a-3p inhibitor转染至BMMSCs后检测转染效率,随后分离出衍生的外泌体并进行鉴定。在小鼠体内构建心肌缺血再灌注(I/R)模型:36只SPF级雄性小鼠随机分为假手术组、I/R组、BMMSCs外泌体组、miR-NC组、miR-27a-3p mimic组以及miR-27a-3p inhibitor组,每组6只。除假手术组外,其余各组缺血30 min建立I/R模型。随后假手术组及I/R组注射30μL PBS,其余组分别注射30μL经相应转染处理的BMMSCs来源外泌体。B超检测小鼠左心室功能;HE和TUNEL染色观察小鼠心肌组织病理变化和凋亡情况;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中心肌损伤标志物心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)表达。Western blot检测cleaved caspase-3和RGPD6蛋白相对表达。在体外,将miR-NC、miR-27a-3p mimic、miR-27a-3p inhibitor转染至人原代心肌细胞并进行鉴定,qPCR检测miR-27a-3p及RGPD6的表达水平。双荧光素酶报告基因测定miR-27a-3p和RGPD6之间的结合关系。结果各鉴定结果表明成功分离出BMMSCs及转染后的相应外泌体。在体内,B超结果显示miR-27a-3p mimic可以提高左心室收缩能力;HE和TUNEL染色结果显示miR-27a-3p mimic抑制了心肌组织损伤和细胞凋亡;ELISA结果显示miR-27a-3p mimic降低了心肌损伤标志物的表达;Western blot结果显示miR-27a-3p mimic降低了心肌组织中cleaved caspase-3和RGPD6相对表达。而加入miR-27a-3p inhibitor后,上述指标均出现相反的结果。在体外也验证了上述结果。此外,双荧光素酶报告实验表明miR-27a-3p可以靶向RGPD6基因。结论间充质干细胞外泌体来源的miR-27a-3p可以靶向RGPD6基因,从而改善MIRI。
关键词
miR-27a-3p
间充质干细胞
外泌体
心肌缺血再灌注损伤
心肌细胞
rgpd6
Keywords
miR-27a-3p
Mesenchymal stem cells
Exosomes
Myocardial ischemia-reperfusion injury
Cardiomyocyte
rgpd6
分类号
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
暂未订购
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
外泌体介导miR-27a-3p/RGPD6轴改善心肌缺血再灌注损伤
谢柏胜
陈兵
陈凯飞
王军
《心脑血管病防治》
2026
0
暂未订购
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