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肿瘤新生血管靶向的顺磁性长循环纳米脂质体的构建
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作者 李玮 周彩存 +1 位作者 粟波 孟淑燕 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1215-1218,共4页
目的构建一种以肿瘤新生血管为靶向的顺磁性长循环纳米脂质体,并探讨其靶向肿瘤的能力。方法设计并采用FMOC(fluorenylmethyloxycarbonyl,FMOC)固相合成法合成RGD10肽(GARYCRGD-CFDG)-赖氨酸-甘氨酸-甘氨酸(lysine-glycine-glycine,KGG... 目的构建一种以肿瘤新生血管为靶向的顺磁性长循环纳米脂质体,并探讨其靶向肿瘤的能力。方法设计并采用FMOC(fluorenylmethyloxycarbonyl,FMOC)固相合成法合成RGD10肽(GARYCRGD-CFDG)-赖氨酸-甘氨酸-甘氨酸(lysine-glycine-glycine,KGG臂)-棕榈酸(Pal)复合物;采用薄膜超声分散法制备包封MRI(magnetic resonance lmaging,MRI)造影剂GD-DTPA(Gadopentetate Dimeglumine)的血管靶向顺磁性长循环纳米脂质体(neovessel-targeted PEGylated Gadopentetate Dimeglumine liposomes,T-PEG-GD-LP)和普通顺磁性长循环纳米脂质体(PEGylated Gadopentetate Dimeglumine liposomes,PEG-GD-LP),采用激光粒度分析仪和透射电子显微镜进行形貌表征测定,超滤离心法测定其包封率,MRI扫描测定其信号强度;为验证T-PEG-GD-LP与肿瘤组织的特异性亲和力,检测了HUVEC、A549细胞对其的摄取能力。结果透射电子显微镜显示T-PEG-GD-LP、PEG-GD-LP均呈规则的圆形或略呈椭圆形,粒径检测结果显示其平均粒径小于100nm,MRI测定T-PEG-GD-LP信号强度介于GD-DTPA与PEG-GD-LP之间,HU-VEC、A549两种细胞对T-PEG-GD-LP的摄取量均高于GD-DTPA和PEG-GD-LP(P<0.05)。结论构建的肿瘤新生血管靶向顺磁性长循环纳米脂质体具有良好的肿瘤靶向能力,可成为一种新型有效的肿瘤靶向MRI造影剂。 展开更多
关键词 肿瘤 新生血管 脂质体 rgd10 靶向
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RGD重组人IL-10的克隆、表达及其拮抗纤维化的初步研究 被引量：1
2
作者 石继红 石珊 +5 位作者 白晓智 官浩 陶克 胡晓龙 刘佳琦 胡大海 《中国生物工程杂志》 CSCD 北大核心 2012年第2期17-23,共7页
白细胞介素10(IL-10)是一种多效细胞因子,在炎症、免疫反应以及在疾病的发生过程中发挥着重要作用,RGD是能够特异与新生血管内皮细胞整合素结合的多肽序列。将RGD连接到IL-10的羧基端,期望构建新生血管内皮细胞特异导向结合型融合蛋白... 白细胞介素10(IL-10)是一种多效细胞因子,在炎症、免疫反应以及在疾病的发生过程中发挥着重要作用,RGD是能够特异与新生血管内皮细胞整合素结合的多肽序列。将RGD连接到IL-10的羧基端,期望构建新生血管内皮细胞特异导向结合型融合蛋白。以人外周血淋巴细胞cDNA为模板,扩增的PCR产物经克隆载体pMD18-T,连至原核表达载体pET-22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),构建了pET-IL10-RGD表达载体的重组菌(pET-IL10-RGD/BL21)。SDS-PAGE分析表明:在19.3 kDa处有明显的新生蛋白带,符合理论预期。Western blot分析表明:诱导表达、分离纯化的目的蛋白能够与IL-10抗体特异结合,且纯化产物IL10-RGD具有与IL-10相同的生物学活性。利用培养的人皮肤成纤维细胞,观察了IL10-RGD对TGF-β1刺激成纤维细胞的I型胶原(Col1)、III型胶原(Col3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结体组织生长因子(CTGF)蛋白水平及α-SMA免疫细胞化学的变化。结果表明:纯化产物IL10-RGD能够明显抑制TGF-β1刺激的成纤维细胞Col1、Col3、CTGF和α-SMA蛋白水平的升高;抑制TGF-β1诱导的成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化。可见,成功克隆、表达并纯化了IL10-RGD融合蛋白,该融合蛋白能够明显拮抗TGF-β1诱导的纤维化,预示着该蛋白在瘢痕增生及皮肤纤维化治疗方面有着较好的应用前景。 展开更多
关键词 白细胞介素.10新生血管内皮特异结合肽RGD 融合表达抗纤维化
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