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重组人RGD-sTRAIL的表达、纯化及抗肿瘤活性研究
被引量：
2
1
作者
赵丽红
范清林
+1 位作者
邹文艺
宋礼华
《生物技术通讯》
CAS
2004年第3期226-230,共5页
利用PCR技术构建RGD短肽与人肿瘤坏死因子凋亡配体穴胞外区114～281雪的融合基因,将该DNA片段克隆到原核表达载体pET-11a中。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后可表达相对分子质量约为20000的目的蛋白,占菌体蛋白的20%左右,且...
利用PCR技术构建RGD短肽与人肿瘤坏死因子凋亡配体穴胞外区114～281雪的融合基因,将该DNA片段克隆到原核表达载体pET-11a中。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后可表达相对分子质量约为20000的目的蛋白,占菌体蛋白的20%左右,且大多数重组蛋白以不溶的包涵体形式存在。Western印迹表明目的蛋白具有人sTRAIL的抗原性。表达产物经变性、复性、离子交换层析和分子筛等步骤,可以得到纯度大于95%的RGD-sTRAIL重组蛋白。肿瘤细胞体外实验发现,纯化后的RGD-sTRAIL重组蛋白能明显抑制人肺癌细胞A549生长,并呈剂量依赖性。研究结果表明,通过复性,包涵体中的RGD-sTRAIL蛋白得到正确的折叠,并在体外具有杀伤肿瘤细胞的活性,从而为进一步研究体内靶向性杀伤肿瘤细胞奠定了基础。
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关键词
重组
人
rgd-strail
表达
纯化
细胞凋亡
抗肿瘤活性
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职称材料
题名
重组人RGD-sTRAIL的表达、纯化及抗肿瘤活性研究
被引量：
2
1
作者
赵丽红
范清林
邹文艺
宋礼华
机构
安徽医科大学分子生物学实验室
安徽省生物研究所
安徽安科生物工程股份有限公司
出处
《生物技术通讯》
CAS
2004年第3期226-230,共5页
基金
安徽省自然科学基金项目(01043302)
文摘
利用PCR技术构建RGD短肽与人肿瘤坏死因子凋亡配体穴胞外区114～281雪的融合基因,将该DNA片段克隆到原核表达载体pET-11a中。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后可表达相对分子质量约为20000的目的蛋白,占菌体蛋白的20%左右,且大多数重组蛋白以不溶的包涵体形式存在。Western印迹表明目的蛋白具有人sTRAIL的抗原性。表达产物经变性、复性、离子交换层析和分子筛等步骤,可以得到纯度大于95%的RGD-sTRAIL重组蛋白。肿瘤细胞体外实验发现,纯化后的RGD-sTRAIL重组蛋白能明显抑制人肺癌细胞A549生长,并呈剂量依赖性。研究结果表明,通过复性,包涵体中的RGD-sTRAIL蛋白得到正确的折叠,并在体外具有杀伤肿瘤细胞的活性,从而为进一步研究体内靶向性杀伤肿瘤细胞奠定了基础。
关键词
重组
人
rgd-strail
表达
纯化
细胞凋亡
抗肿瘤活性
Keywords
RGDS-sTRAIL
cloning
expression
inclusion bodies
refolding
renaturation
apoptosis
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R979.1 [医药卫生—药品]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
重组人RGD-sTRAIL的表达、纯化及抗肿瘤活性研究
赵丽红
范清林
邹文艺
宋礼华
《生物技术通讯》
CAS
2004
2
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