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CHO-Reg3a细胞株的构建及抑菌活性检测
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作者 代爽 秦达 +6 位作者 吴书音 王延涛 李国军 汪登奎 戴秀秀 余丽芸 侯喜林 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期115-121,共7页
为了利用中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)细胞稳定表达再生胰岛衍生蛋白3a(regenerating islet-derived protein 3a, Reg3a),并获得具有抑菌活性的抑菌蛋白,试验先通过PCR扩增Reg3a基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Reg3a-EGFP... 为了利用中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)细胞稳定表达再生胰岛衍生蛋白3a(regenerating islet-derived protein 3a, Reg3a),并获得具有抑菌活性的抑菌蛋白,试验先通过PCR扩增Reg3a基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Reg3a-EGFP后转染至对数生长期CHO细胞内,通过遗传霉素(G418)筛选阳性细胞,并采用有限稀释法进行单克隆细胞株筛选;随后利用Western-blot对细胞表达产物进行鉴定;最后使用纯化后的蛋白进一步进行抑菌活性试验。结果表明:重核真核表达载体pcDNA3.1-Reg3a-EGFP构建成功,连续传代20次仍正常表达。Western-blot鉴定显示在17.64 ku处有Reg3a特异性条带。纯化的Reg3a蛋白(0.8 mg/mL)可明显抑制产肠毒素性大肠杆菌C83912(ETEC-K99)、产肠毒素性大肠杆菌C83902(ETEC-K88)、产肠毒素性大肠杆菌C83916(ETEC-987p)及金黄色葡萄球菌,且对金黄色葡萄球菌的抑制效果更好。说明稳定表达Reg3a的CHO细胞株构建成功,且表达的Reg3a具有抑菌活性。 展开更多
关键词 reg3a CHO细胞 真核表达 抑菌活性 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌
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抑菌蛋白Reg3A的表达纯化与功能 被引量:2
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作者 高洋 郑文岭 +3 位作者 石嵘 彭翼飞 周琳华 马文丽 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1249-1255,共7页
利用原核表达系统表达人源抑菌蛋白Reg3A,经包涵体的复性和纯化获得有体外抑菌功能的活性抑菌蛋白,并对其体外抑菌功能进行初步研究。构建Reg3A原核表达载体PET-32a-Reg3A转化补充稀缺tRNA基因的表达菌株大肠杆菌BL21-Codonplus,阳性重... 利用原核表达系统表达人源抑菌蛋白Reg3A,经包涵体的复性和纯化获得有体外抑菌功能的活性抑菌蛋白,并对其体外抑菌功能进行初步研究。构建Reg3A原核表达载体PET-32a-Reg3A转化补充稀缺tRNA基因的表达菌株大肠杆菌BL21-Codonplus,阳性重组子采用诱导培养基诱导5h后,采用超声破碎的方法提取包涵体蛋白,经包涵体蛋白的纯化和透析复性后通过Ni-NTA亲和层析交换柱,获得纯度达95%的蛋白质。Western blot鉴定显示在15 kD处有特异性条带。使用纯化后的蛋白进一步进行抑菌圈实验和抑菌活性实验,对获得蛋白的体外抑菌活性进行评估,从而为进一步进行Reg3A蛋白功能的评估及应用奠定基础。 展开更多
关键词 抑菌蛋白reg3a 包涵体复性 抑菌活性
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REG3A defect caused by hyperglycemia delays wound healing in diabetes
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《Science Foundation in China》 CAS 2017年第1期15-15,共1页
Subject Code:H10With the support by the National Natural Science Foundation of China,National Key Research and Development Program of China,and National Program for Support of Top-Notch Young Professionals,the researc... Subject Code:H10With the support by the National Natural Science Foundation of China,National Key Research and Development Program of China,and National Program for Support of Top-Notch Young Professionals,the research team led by Prof.Lai Yuping(赖玉平)at Shanghai Key Laboratory of Regulatory Biology,School of Life Sciences,East China Normal University,uncovered a critical role of regenerating islet- 展开更多
关键词 reg3a defect caused by hyperglycemia delays wound healing in diabetes
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REG3α、sST2、TNFR1在儿童异基因造血干细胞移植术后aGVHD危险分层及预后评估中的价值
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作者 柴玉洁 路娜丹 +4 位作者 李平 苏淑芳 魏会霞 徐岩 王叨 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1566-1570,共5页
目的:探讨外周血中REG3α、sST2、TNFR1对儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)术后aGVHD危险分层及预后评估的价值。方法:选取2020年1月至2022年3月在郑州大学第一附属医院儿科行allo-HSCT后发生aGVHD的70例患儿作为研究对象,将并发Ⅰ... 目的:探讨外周血中REG3α、sST2、TNFR1对儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)术后aGVHD危险分层及预后评估的价值。方法:选取2020年1月至2022年3月在郑州大学第一附属医院儿科行allo-HSCT后发生aGVHD的70例患儿作为研究对象,将并发Ⅰ-Ⅱ度aGVHD的50例患儿作为轻度aGVHD组,并发Ⅲ-Ⅳ度aGVHD的20例患儿作为重度aGVHD组,选取同期本院健康体检儿童30例作为对照组,通过Luminex平台检测aGVHD发生时REG3α、sST2、TNFR1蛋白表达水平采用单因素方差分析比较3组间差异;根据aGVHD治疗28 d内病情转归情况将患儿分为预后良好组58例,预后不良组12例,利用ROC曲线分析REG3α、sST2、TNFR1对aGVHD患儿预后的评估价值。结果:与对照组相比,轻度aGVHD组、重度aGVHD组外周血中REG3α、sST2、TNFR1水平均显著升高(P<0.05),且重度aGVHD组显著高于轻度aGVHD组(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组aGVHD患儿外周血中REG3α、sST2、TNFR1水平均显著升高(t=9.27,3.33 2.97;P<0.01);ROC曲线分析结果表明,REG3α、sST2和TNFR1联合检测评估aGVHD患儿预后的曲线下面积(AUC)、灵敏性、特异性均高于各项指标单独检测及各指标两两组合检测。结论:REG3α、sST2、TNFR1表达水平与aGVHD严重程度相关;REG3α、sST2和TNFR1联合对于aGVHD患儿预后评估有较高的临床价值,有望为临床上评估aGVHD患儿预后提供可靠参考。 展开更多
关键词 REG3α sST2 TNFR1 儿童 急性移植物抗宿主病
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甲型H1N1流感病毒感染致病候选基因的鉴定
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作者 刘慧 焦芹芹 +5 位作者 贺宏杰 韩哲 袁牡丹 张辉 徐福意 董浩 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期481-488,共8页
目的通过C57BL/6J(B6)和DBA/2J(D2)亲本品系小鼠流感感染后相关表型及杂交子代BXD小鼠肺脏转录本数据的系统性分析进行基因筛选,以找到在流感病毒感染中发挥作用的候选基因.方法共选取41个BXD小鼠及亲本品系B6和D2的雌性小鼠,在8~12周... 目的通过C57BL/6J(B6)和DBA/2J(D2)亲本品系小鼠流感感染后相关表型及杂交子代BXD小鼠肺脏转录本数据的系统性分析进行基因筛选,以找到在流感病毒感染中发挥作用的候选基因.方法共选取41个BXD小鼠及亲本品系B6和D2的雌性小鼠,在8~12周龄之间给予流感病毒甲型鼠肺适应株(H1N1,PR8M)得到相关表型及基因表达量数据,对基因表达量进行聚类分析及加权基因共表达网络分析,构建模块特征值与小鼠病毒载量的相关性,经表达数量性状座位分析,皮尔逊相关性分析,结合全基因组关联研究(GWAS)、小鼠基因组信息学(MGI)、国际小鼠表型联合会(IMPC)三个基因数据库中的信息分析筛选流感病毒感染相关的候选功能基因及确定该基因的遗传调控方式;最后将挑选出的基因进行通路富集分析.结果通过聚类分析和加权基因共表达网络分析,将24219个基因分为23个模块;通过模块与表型的相关性分析,发现MEred、MEgreen、MEma-genta模块与感染密切相关,将其作为核心模块;对核心模块基因通过KEGG和MPO富集分析,结果显示流感病毒相关基因显著参与MAPK信号通路、TNF信号通路等多个细胞免疫相关通路;对核心模块内基因与BXD小鼠流感病毒感染的3种表型(体质量减轻,平均死亡时间和感染后体质量减轻中位数)进行相关性分析,共发现21个基因的肺mRNA表达水平与3种表型均相关(P<0.05);进一步通过GeneNetwork中GEMMA算法对这21个基因行表达数量性状座位分析,结果表明Acpl2受顺式遗传调控,Dusp12、Ovol2、Catsper4、Tmc5、Acsm 1、Fam81a、Rtn4、Rhpn1受反式遗传调控;通过结合MGI,IMPC,GWAS三个基因数据库中的信息分析发现部分基因在免疫通路方面发挥作用.结论通过系统遗传学分析,在小鼠基因组上鉴定了影响流感病毒感染相关的21个候选基因,后续可做进一步的功能验证来阐明其参与流感病毒感染的遗传调控机制. 展开更多
关键词 流感病毒 BXD小鼠 Reg3g 候选基因
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血浆Reg3α蛋白水平与肠道aGVHD的相关性研究 被引量:2
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作者 蔡成森 陈广华 +11 位作者 孙爱宁 乔曼 刘慧文 陈峰 王荧 仇惠英 韩悦 马骁 唐晓文 金正明 傅琤琤 吴德沛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期785-790,共6页
本研究探讨血浆Reg3α蛋白水平与异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后肠道急性移植物抗宿主病(GIaGVHD)的临床诊断及预后的相关性。以我院2011年12月至2012年12月行allo-HSCT的103例患者为研究对象。采集移植前9 d、0 d、移植后14 d、移... 本研究探讨血浆Reg3α蛋白水平与异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后肠道急性移植物抗宿主病(GIaGVHD)的临床诊断及预后的相关性。以我院2011年12月至2012年12月行allo-HSCT的103例患者为研究对象。采集移植前9 d、0 d、移植后14 d、移植后28 d、腹泻时多个时间点抗凝外周血,对发生aGVHD的患者进一步采集治疗1周及4周后抗凝外周血,采用ELISA方法检测血浆Reg3α蛋白浓度。结果表明,103例患者中无aGVHD17例,非aGVHD腹泻27例,单纯皮肤aGVHD 10例,Ⅰ-Ⅱ度肠道aGVHD(GI-aGVHD)17例,Ⅲ-Ⅳ度GI-aGVHD32例。GI-aGVHD患者和非aGVHD腹泻患者腹泻时血浆Reg3α蛋白水平分别为111.5(54.7-180.2)ng/ml和23.9(14.5-89.5)ng/ml(P<0.001)。Ⅲ-Ⅳ度GI-aGVHD患者治疗4周后,治疗有效组17例与治疗无效组7例血浆Reg3α蛋白水平分别为137.2(51.7-205.4)ng/ml和679.4(122.3-896.8)ng/ml(P=0.028)。治疗无效组7例全部死于aGVHD相关的多器官功能衰竭。血浆Reg3α蛋白浓度≥87.73 ng/ml时预测Ⅲ-Ⅳ度GI-aGVHD的鉴别效度即曲线下面积最大(AUC=0.902),其诊断Ⅲ-Ⅳ度GI-aGVHD敏感度为81.48%,特异性为82.86%。移植后Reg3α蛋白高水平组(≥87.73 ng/ml)患者Ⅲ-Ⅳ度GI-aGVHD发生率明显高于低水平组(<87.73 ng/ml)(P<0.001)。结论:移植后血浆Reg3α蛋白水平升高提示Ⅲ-Ⅳ度GI-aGVHD的发生,Ⅲ-Ⅳ度GI-aGVHD患者免疫抑制治疗后血浆Reg3α蛋白水平不降低与预后不良相关,血浆Reg3α蛋白水平可作为提示GI-aGVHD的生物学标志物。 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 急性移植物抗宿主病 Reg3α蛋白 血浆
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细粒棘球绦虫(中国大陆株)14-3-3重组蛋白的免疫保护力 被引量:6
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作者 李宗吉 雄英 +1 位作者 孙俊峰 赵巍 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期676-679,706,共5页
目的探讨细粒棘球蚴Eg14-3-3重组蛋白的免疫保护性及其伴随的免疫反应。方法 ICR小鼠随机分为rEg14-3-3蛋白免疫组和PBS佐剂对照组,每隔2周背部皮下免疫1次,连续免疫3次。在第3次免疫后6周,用细粒棘球蚴活的原头蚴进行攻击感染,感染后2... 目的探讨细粒棘球蚴Eg14-3-3重组蛋白的免疫保护性及其伴随的免疫反应。方法 ICR小鼠随机分为rEg14-3-3蛋白免疫组和PBS佐剂对照组,每隔2周背部皮下免疫1次,连续免疫3次。在第3次免疫后6周,用细粒棘球蚴活的原头蚴进行攻击感染,感染后24周杀鼠取脾,分离培养脾细胞,MTT检测淋巴细胞增殖率,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4水平,同时检获棘球蚴包囊数并计算减囊率,用ELISA法测定血清中IgG及其亚型和IgE水平。结果与佐剂对照组比较,rEg14-3-3蛋白免疫组小鼠的免疫保护力为84.47%,rEg14-3-3蛋白免疫组小鼠血清IgG、IgG1、IgG2a抗体水平高于对照组(P<0.05);IgE略低,但两组间差异无统计学意义;淋巴细胞增殖实验结果显示rEg14-3-3免疫组小鼠脾淋巴细胞特异抗原刺激后增殖显著,免疫组淋巴细胞培养上清中IFN-γ、IL-2分泌水平显著高于对照组,而IL-4、IL-10在两组间差异无统计学意义。结论 rEg14-3-3蛋白能诱导小鼠产生高水平的免疫保护力,是潜在的疫苗候选抗原分子。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 rEg14-3-3 疫苗 免疫保护力 IL-2 IFN-γ IL-10 IL-4 IgG IGE
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REG3γ的研究进展 被引量:2
8
作者 王健 吴洁 陈韬 《湖南畜牧兽医》 2016年第2期49-51,共3页
早期断奶仔猪的腹泻普遍性是养猪业的难题,Reg3γ是一种C型凝集素,主要在哺乳动物的肠道和皮肤的上皮组织表达,具有抗菌、抗炎和促进细胞增殖等多种功能,在断奶仔猪腹泻防治方面具有非常广阔的前景。文章对Reg3γ来源、表达以及作用机... 早期断奶仔猪的腹泻普遍性是养猪业的难题,Reg3γ是一种C型凝集素,主要在哺乳动物的肠道和皮肤的上皮组织表达,具有抗菌、抗炎和促进细胞增殖等多种功能,在断奶仔猪腹泻防治方面具有非常广阔的前景。文章对Reg3γ来源、表达以及作用机制等方面研究进展进行综述。 展开更多
关键词 Reg3γ 潘氏细胞 C型凝集素 糖识别区域 招募物
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Reg3β干扰载体的构建及在H9C2心肌细胞中的鉴定
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作者 易波 蔡玉立 +3 位作者 李俊峰 包艳 陈小琳 文重远 《医学研究杂志》 2020年第8期24-28,共5页
目的构建再生基因蛋白3β(regenerating islet-derived protein 3 beta,Reg3β)干扰载体,并在H9C2大鼠心肌细胞中优化转染条件,鉴定抑制效果,为深入探索Reg3β在心血管疾病的作用提供有利的工具。方法设计合成Reg3β干扰序列,在5'... 目的构建再生基因蛋白3β(regenerating islet-derived protein 3 beta,Reg3β)干扰载体,并在H9C2大鼠心肌细胞中优化转染条件,鉴定抑制效果,为深入探索Reg3β在心血管疾病的作用提供有利的工具。方法设计合成Reg3β干扰序列,在5'端加入一个Sac 1的酶切位点,3'端加人L0OP环序列和反向互补序列,构建pG1.2-Reg3βshRNA沉默载体。接着分别用Li-pofectamine2000和Lipofectamine3000优化摸索转染大鼠H9C2心肌细胞的效率,以q-PCR和Western blot法检测H9C2细胞内Reg3β的表达量。结果设计合成了3对Reg3β干扰序列,从中筛选出抑制效率最高达67.93%的序列.酶切和测序结果证实成功构建了pG1.2-Reg3βshRNA。经过优化比较发现,pG1.2-Reg3βshRNA沉默载体Lipofeetamine3000比例为1μg:3μl时,其转染效率最高(50%以上)。q-PCR和Western blot法检测结果显示,最佳干扰载体在最高转染条件下可使H9C2细胞Reg3β表达量降低50%以上。结论成功构建了pG1.2-Reg3βshRNA沉默载体,并在H9C2细胞中有效干扰Reg3β的表达,可用于探讨Reg3β在心血管疾病中的作用。 展开更多
关键词 Reg3β 基因短发夹 RNA载体构建H9C2 心肌细胞
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儿童异基因造血干细胞移植后血浆sST2/Reg3α蛋白水平与急性移植物抗宿主病的相关性 被引量:2
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作者 张爱萍 熊昊 +7 位作者 王卓 杨李 祁闪闪 聂应明 陈智 滕菊仙 吴沙 李建新 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1334-1339,共6页
目的:探讨儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后血浆sST2/Reg3α蛋白动态变化与急性移植物抗宿主病(aGVHD)的相关性。方法:收集2019年1月至2020年1月在武汉儿童医院血液肿瘤科接受allo-HSCT的患儿29例的临床资料。采集患者移植后14 d... 目的:探讨儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后血浆sST2/Reg3α蛋白动态变化与急性移植物抗宿主病(aGVHD)的相关性。方法:收集2019年1月至2020年1月在武汉儿童医院血液肿瘤科接受allo-HSCT的患儿29例的临床资料。采集患者移植后14 d和28 d外周血标本,使用Luminex方法检测血浆sST2/Reg3α蛋白浓度。结果:29例患儿中男性15例,女性14例,中位年龄53(29-117)个月。接受移植后0-I度aGVHD 18例,II-IV度aGVHD11例;皮肤aGVHD 6例,肠道aGVHD(GI-aGVHD)3例,肠道及皮肤aGVHD 5例。II-IV度aGVHD组与0-I度aGVHD组移植后28 d血浆sST2蛋白水平分别为101.81(73.94-150.77)ng/ml与48.97(28.82-56.69)ng/ml,差异具有统计学意义(P=0.021)。GI-aGVHD组与无aGVHD组患者移植后28 d血浆sST2蛋白水平分别为118.74(87.00-243.36)ng/ml和48.97(23.55-61.40) ng/ml,差异具有显著性(P=0.004)。当移植后28 d血浆sST2蛋白浓度≥65.34ng/ml时预测II-IV度aGVHD的敏感度为85.7%,特异性为87.5%;且移植后血浆sST2蛋白高水平组(≥65.34 g/ml)患者II-IV度aGVHD发生率显著高于低水平组(<65.34 ng/ml)(P=0.021)。Reg3α蛋白在II-IV度aGVHD组与无aGVHD组的差异无统计学意义。结论:儿童allo-HSCT后血浆sST2蛋白水平升高提示II-IV度aGVHD的发生。高水平sST2蛋白有望作为预测II-IV度aGVHD发生的生物学诊断标志。 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 sST2蛋白 Reg3α蛋白 急性移植物抗宿主病 儿童
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重组抗菌蛋白Reg3γ的表达、纯化及鉴定 被引量:2
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作者 刘彤 冯野 +1 位作者 高永建 丁大勇 《中国实验诊断学》 2016年第4期536-539,共4页
哺乳动物肠道内存在大量共生菌,这些共生菌对宿主的营养代谢有重要意义。宿主需要对肠腔内的细菌进行一定的动态防御,肠道内抗菌蛋白是肠道防御机制中重要的一项。再生蛋白3是一组由小肠paneth细胞分泌到肠腔的抗菌凝集素,大小约为16KD... 哺乳动物肠道内存在大量共生菌,这些共生菌对宿主的营养代谢有重要意义。宿主需要对肠腔内的细菌进行一定的动态防御,肠道内抗菌蛋白是肠道防御机制中重要的一项。再生蛋白3是一组由小肠paneth细胞分泌到肠腔的抗菌凝集素,大小约为16KD,包括小鼠Reg3γ和人HIP/PAP。目前,对于该类蛋白的表达和调控,各种功能的具体机制还不清楚。本文利用生物工程技术表达、 展开更多
关键词 抗菌蛋白 Reg3 胞分泌 共生菌 重组蛋白 技术表达 防御机制 宿主菌 包涵体 液体培养基
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重组胰腺再生蛋白Reg3β的制备及初步活性研究 被引量:1
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作者 杨孟奇 庾璐婷 +2 位作者 李想 罗晨 王旻 《药物生物技术》 CAS 2016年第1期1-6,共6页
构建重组p ET28a(+)-rReg3β表达质粒,转入T7 Expression E.coli表达菌,获得鼠源重组Reg3β表达菌株,经IPTG诱导后以包涵体形式表达重组Reg3β蛋白。重组Reg3β蛋白通过裂解菌体、镍柱亲和层析等方法进行分离纯化,纯化后透析复性,通过We... 构建重组p ET28a(+)-rReg3β表达质粒,转入T7 Expression E.coli表达菌,获得鼠源重组Reg3β表达菌株,经IPTG诱导后以包涵体形式表达重组Reg3β蛋白。重组Reg3β蛋白通过裂解菌体、镍柱亲和层析等方法进行分离纯化,纯化后透析复性,通过Western blot进行定性分析,SDS-PAGE及HPLC进行纯度分析。小鼠胰岛素瘤MIN6细胞系MTT检测显示重组Reg3β蛋白具有明显的促进细胞增殖作用,Western blot方法证明其能够显著提高Akt和Erk1/2信号分子的磷酸化水平从而刺激细胞增殖。结论:该课题成功构建和制备了重组Reg3β蛋白,并在体外实验中证实重组Reg3β具有促进胰岛β细胞系增殖的活性,并进一步探讨了其作用机制,可能在胰岛细胞的保护和再生领域具备较好前景。 展开更多
关键词 Reg3β蛋白 胰岛Β细胞 糖尿病 细胞增殖 包涵体表达 重组蛋白
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Trx、REG3G和AZGP1蛋白在^(60)Coγ射线全身辐照大鼠尿液中的表达和剂量相关性研究 被引量:1
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作者 向嘉琪 王成芳 +1 位作者 刘青杰 田梅 《中国工业医学杂志》 CAS 2021年第1期29-33,共5页
目的探索^(60)Coγ射线全身照射后大鼠尿液中硫氧还蛋白(Trx)、再生胰岛来源3γ蛋白(REG3G)和锌-α2糖蛋白(AZGP1)表达水平变化。方法30只Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为0、0.5、1、3、5、8 Gy共6组,每组5只,给予^(60)Coγ射线照射(剂... 目的探索^(60)Coγ射线全身照射后大鼠尿液中硫氧还蛋白(Trx)、再生胰岛来源3γ蛋白(REG3G)和锌-α2糖蛋白(AZGP1)表达水平变化。方法30只Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为0、0.5、1、3、5、8 Gy共6组,每组5只,给予^(60)Coγ射线照射(剂量率1.0 Gy/min),收集照射后1 d、3 d、5 d大鼠尿液,用ELISA方法定量检测尿液中Trx、REG3G和AZGP1蛋白的表达水平。结果照射后1 d,三种蛋白表达水平均升高,且与照射剂量有关。Trx蛋白5 Gy组照射后1 d较0 Gy组表达增高,8 Gy组照射后3 d、5 d较0 Gy组表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。REG3G蛋白5Gy组照射后3 d较0 Gy组表达增高,8 Gy组照射后5 d较0 Gy组表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。AZGP1蛋白5 Gy组照射后1 d较0 Gy组表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠尿液中Trx和REG3G蛋白在全身照射后特定时间点有较为良好的剂量-效应关系。 展开更多
关键词 生物标志物 电离辐射 剂量-效应关系 硫氧还蛋白(Trx) 再生胰岛来源3γ蛋白(REG3G)
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猪Reg3基因的克隆与序列分析
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作者 李文林 陈福伟 +5 位作者 王伟杰 韩立强 王月影 李宏基 刘红亮 杨国宇 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期55-57,共3页
在猪的肠道组织中克隆Reg3基因,提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD-19T载体连接后转化E.coliJM109,检测阳性克隆、测序并进行序列分析。结果表明:克隆的猪Reg3基因与人、绵羊、马的同源性分别为83.7%,82.3%,82.2%;克隆了... 在猪的肠道组织中克隆Reg3基因,提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD-19T载体连接后转化E.coliJM109,检测阳性克隆、测序并进行序列分析。结果表明:克隆的猪Reg3基因与人、绵羊、马的同源性分别为83.7%,82.3%,82.2%;克隆了猪Reg3全长基因并注册GenBank注册号为Accession.FJ531494。 展开更多
关键词 Reg3基因 克隆 序列分析
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Reg3b在大鼠耳蜗的分布及噪声刺激后的表达变化
15
作者 邓力山 毛小波 +3 位作者 王烨 韩宇 张建波 赵鑫 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第29期5610-5613,共4页
目的:探讨Reg3b在大鼠耳蜗中的分布情况及在噪声刺激前后的表达变化,为治疗噪声性聋提供新思路。方法:30只健康成年SD大鼠,分为噪声暴露组和正常对照组,利用110 dB SPL宽频稳态白噪声对噪声组进行噪声暴露,通过免疫组织荧光技术,观察Re... 目的:探讨Reg3b在大鼠耳蜗中的分布情况及在噪声刺激前后的表达变化,为治疗噪声性聋提供新思路。方法:30只健康成年SD大鼠,分为噪声暴露组和正常对照组,利用110 dB SPL宽频稳态白噪声对噪声组进行噪声暴露,通过免疫组织荧光技术,观察Reg3b在正常及噪声刺激后成年SD大鼠耳蜗内的分布情况。采用实时定量PCR技术(Real time-PCR)方法检测大鼠接受噪声刺激前后Reg3b在耳蜗内的表达变化。结果:免疫组织荧光技术提示,Reg3b在噪声暴露后主要表达于大鼠耳蜗的内毛细胞、外毛细胞,以及螺旋神经节处,而正常大鼠耳蜗中Reg3b表达不明显或呈阴性表达。与噪声刺激前相比,噪声刺激后,Reg3b在mRNA水平表达较噪声前明显提高。结论:Reg3b在耳蜗内的分布及在噪声刺激后的表达显著升高提示其在噪声诱导的细胞死亡及对抗噪声损伤方面具有一定作用,可能成为治疗感音神经性聋的新靶点。 展开更多
关键词 Reg3b 噪声暴露 大鼠 耳蜗
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ST2联合Reg3α的ROC曲线预测儿童急性移植物抗宿主病的预后
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作者 刘露 刘畅 +5 位作者 李泊涵 田园园 刘琦 李捷 何海龙 胡绍燕 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2023年第6期356-361,共6页
目的探索异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后患儿血浆生物标记物水平对急性移植物抗宿主病(aGVHD)预后的影响,为aGVHD的早期干预提供依据。方法收集2020年1月—2021年6月在苏州大学附属儿童医院进行首次造血干细胞移植的98例患儿资料,... 目的探索异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后患儿血浆生物标记物水平对急性移植物抗宿主病(aGVHD)预后的影响,为aGVHD的早期干预提供依据。方法收集2020年1月—2021年6月在苏州大学附属儿童医院进行首次造血干细胞移植的98例患儿资料,采集移植后100d内的外周血,检测血清中的生物标记物的浓度。结果98例患者中,有47例在移植后+10d到+98d之间发生aGVHD,中位发生时间为+53d,截止至随访时间,共有11例(11.2%)病人死亡。与对照组比较,发生aGVHD的病例组其sST2、Reg3α、TNFR1均较高,且存在统计学差异。logistics回归分析发现联合sST2及Reg3α的诊断模型更优。根据cut-off值分别将sST2和Reg3α分为高低水平组,再将两指标联合分为双高(高)、一高一低(中)和双低(低)水平组。在累积发生率中,单一指标分组及两指标联合分组均存在组间统计学差异,但联合分组差异更为显著;在总体生存率中,单一指标分组无组间差异;但两指标联合分组存在统计学差异(P=0.045)。结论sST2联合Reg3α可以作为aGVHD预后的预测指标。 展开更多
关键词 sST2 Reg3α AGVHD 累积发生率 总体生存率
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脑创伤后Reg3g的表达及对早期癫痫发作的作用研究 被引量:2
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作者 周天钧 程赛宇 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期386-392,共7页
目的探讨Reg3g信号激活在创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)脑组织中的时空表达规律和对TBI早期癫痫发作敏感性的影响。方法采用控制性皮质撞击(controlled cortical impact,CCI)制备TBI模型,在分子与形态学实验中,60只C57BL/6... 目的探讨Reg3g信号激活在创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)脑组织中的时空表达规律和对TBI早期癫痫发作敏感性的影响。方法采用控制性皮质撞击(controlled cortical impact,CCI)制备TBI模型,在分子与形态学实验中,60只C57BL/6N野生型(wild type,WT)小鼠按照随机数字表法分为4组:sham组、CCI 24 h组、CCI 72 h组、CCI 1周组。通过RT-PCR、Western blot、免疫荧光等方法检测Reg3g的时空表达规律。采用海人酸(kainic acid,KA)诱导癫痫,在脑创伤癫痫发作实验中,WT小鼠和Reg3g KO小鼠各30只,按照随机数字表法分组,每组15只,分别为WT(CCI)+NS组、Reg3g KO(CCI)+NS组、WT(CCI)+KA组、Reg3g KO(CCI)+KA组。在CCI基础上进行癫痫诱导发作,并记录在体脑电结果。结果①与sham组相比,CCI损伤侧皮层24 h、72 h、1周后,Reg3g基因和蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);②免疫荧光结果显示,在CCI小鼠皮层组织,Reg3g与NeuN-阳性神经元完全共表达;③在生理盐水注射的WT和Reg3g基因敲除小鼠,并没有观察到明显的癫痫波。而在KA注射的WT小鼠和Reg3g基因敲除小鼠,可观察到明显的癫痫波。与WT小鼠相比,KA注射的Reg3g基因敲除小鼠潜伏期明显缩短,总发作时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Reg3g对TBI后早期癫痫发作起着明显的保护作用,Reg3g可能是抑制TBI早期癫痫发作的重要调控靶点。 展开更多
关键词 脑创伤 Reg3g 癫痫发作 敏感性
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鼠源REG3α二聚体蛋白的体外表达及抗肝癌细胞功能
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作者 陶佳丽 郭夏斐 +4 位作者 范阔海 张亮 段马魁 王志瑞 姜俊兵 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第5期112-117,共6页
利用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统对鼠源胰岛再生源蛋白(regenerating islet-derived protein,REG)REG3α二聚体进行表达,并对其体外抗肝癌细胞作用进行初步研究。通过DNA重组技术构建密码子优化的重组质粒pwPICZalpha-REG... 利用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统对鼠源胰岛再生源蛋白(regenerating islet-derived protein,REG)REG3α二聚体进行表达,并对其体外抗肝癌细胞作用进行初步研究。通过DNA重组技术构建密码子优化的重组质粒pwPICZalpha-REG3α二聚体,用电转化的方法将线性化的重组质粒pwPICZalpha-REG3α二聚体导入毕赤酵母,经甲醇诱导表达重组蛋白,并用Ni-NTA Resin柱和阴离子交换柱对其进行纯化,用纯化后的蛋白进行体外抗肝癌细胞试验,通过MTT法测REG3α二聚体蛋白对肝癌细胞的半数有效浓度。SDS-PAGE和Western blot鉴定结果显示在29.6 ku处有特异性条带,并且以剂量和时间依赖的方式抑制人肝癌细胞SMMC-7721的活性。研究表明获得了具有生物活性的鼠源重组REG3α二聚体蛋白,为进一步研究REG3α二聚体蛋白功能提供理论依据。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 REG3α二聚体 表达 纯化 抗肝癌细胞
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芦可替尼联合脐带间充质干细胞治疗难治性重度肠道急性移植物抗宿主病的疗效及安全性分析
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作者 马悦 余喆 +3 位作者 李欣 韩天洁 李丽君 芦璐 《中华炎性肠病杂志(中英文)》 2022年第2期133-137,共5页
目的分析芦可替尼联合脐带间充质干细胞(UC-MSC)治疗难治性重度肠道急性移植物抗宿主病(GI-aGVHD)患者的有效性和安全性。方法回顾性纳入山东大学附属山东省立第三医院2018年3月至2020年1月收治的4例诊断为难治性重度GI-aGVHD患者, 在... 目的分析芦可替尼联合脐带间充质干细胞(UC-MSC)治疗难治性重度肠道急性移植物抗宿主病(GI-aGVHD)患者的有效性和安全性。方法回顾性纳入山东大学附属山东省立第三医院2018年3月至2020年1月收治的4例诊断为难治性重度GI-aGVHD患者, 在原有的免疫抑制剂基础上加用芦可替尼口服(5 mg, bid)联合UC-MSC输注(5×10^(6)/kg, 每周1次), 根据临床症状及Reg3α蛋白水平酌情停用UC-MSC, 并逐渐减量芦可替尼至停用。描述性分析患者的临床资料、疗效和不良反应。结果 4例患者治疗后达到完全缓解的中位时间12(10 ~ 14) d, 且肠道黏膜充血水肿减轻和Reg3α蛋白水平持续下降至正常。减停免疫抑制剂及芦可替尼后病情平稳、肠道症状无反复。其中1例在口服芦可替尼减量至5 mg/d时因耶氏肺孢子菌肺炎死亡, 其余均存活。结论芦可替尼联合UC-MSC用于难治性重度GI-aGVHD起效快、疗效确切, 不良反应轻。 展开更多
关键词 肠道急性移植物抗宿主病 干细胞移植 芦可替尼 间充质干细胞 脐带 Reg3α蛋白
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囊性包虫重组14-3-3脂质体疫苗的制备及理化性质的检测
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作者 李元 李宗吉 丁淑琴 《当代畜牧》 2018年第12期24-27,共4页
笔者制备了囊性包虫重组14-3-3脂质体疫苗(Recombinant Echinoccocus granulosus 14-3-3,r Eg14-3-3),观察并分析脂质体疫苗的脂质体形态、疫苗抗原包封率及动物使用的安全性,确定囊性包虫重组14-3-3脂质体疫苗的制备工艺。笔者以DOPC、... 笔者制备了囊性包虫重组14-3-3脂质体疫苗(Recombinant Echinoccocus granulosus 14-3-3,r Eg14-3-3),观察并分析脂质体疫苗的脂质体形态、疫苗抗原包封率及动物使用的安全性,确定囊性包虫重组14-3-3脂质体疫苗的制备工艺。笔者以DOPC、DOPG、MPBL等磷脂物质为原料,采用薄膜分散法制成均匀脂质薄膜,脂膜与14-3-3和MPLA水合、超声后制备出包载14-3-3蛋白和MPLA的多层交联脂质体疫苗。采用电子显微镜测定脂质体的形态。采用BCA蛋白定量法检测r Eg14-3-3脂质体疫苗的抗原包封率。将r Eg14-3-3脂质体疫苗和空脂质体分别注射入5只6周龄ICR小鼠皮下,观察其生物安全性,并在0周、2周、4周、6周和10周从尾部静脉采血,收集血清,用ELISA法检测14-3-3脂质体疫苗免疫后特异性Ig G抗体水平。制备的脂质体疫苗为乳白色形态较均一的球形,疫苗包封率为72.45%,体外释放缓慢,性状稳定,对小鼠无明显毒副作用。14-3-3脂质体免疫组小鼠Ig G水平在免疫后2周后迅速升高,与空白脂质体组相比差异显著。薄膜分散-超声法制备囊性包虫多层交联脂质体疫苗,抗原包封率高、性状稳定、安全无毒。该脂质体疫苗可有效诱导机体特异性免疫应答。 展开更多
关键词 rEg14-3-3蛋白 磷酰脂质A 脂质体 包封率
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