应用RD-PCR技术制备HIV基因芯片探针 被引量：13

1

作者 李凌 马文丽 +5 位作者 祝骥 朱利娜 宋艳斌 吴清华 郭秋野 郑文岭 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期105-109,共5页

利用限制性显示 (RD PCR)技术快速分离HIV 1基因片段制备DNA芯片探针 .以Sau3AⅠ酶切HIV基因 ,得到许多大小适合芯片的限制性酶切片段 .然后在片段两端接上接头 ,根据酶切位点、接头的序列设计通用引物 .在该通用引物的 3′端分别延伸... 利用限制性显示 (RD PCR)技术快速分离HIV 1基因片段制备DNA芯片探针 .以Sau3AⅠ酶切HIV基因 ,得到许多大小适合芯片的限制性酶切片段 .然后在片段两端接上接头 ,根据酶切位点、接头的序列设计通用引物 .在该通用引物的 3′端分别延伸一个碱基后 ,通过引物间的两两组合 ,将PCR反应分成 10个亚组 .纯化各组PCR产物 ,克隆到T载体上 .阳性克隆经鉴定、扩大培养后提取质粒 .以质粒为模板扩增靶片段并进行序列分析 .每个亚型得到了十几个 10 0～ 10 0 0bp的HIV基因片段 .研究表明 ,RD 展开更多

关键词 rd-pcr HIV DNA芯片 基因芯片探针 制备

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应用RD-PCR方法制备K562细胞表达谱芯片基因探针 被引量：8

2

作者 毛向明 马文丽 +1 位作者 姜立 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期548-550,553,共4页

目的收集K562细胞表达谱芯片的基因片段。方法培养K562细胞,抽提其mRNA,反转录为cDNA,应用限制性显示PCR技术(RD-PCR)分离K562细胞不同组别的产物片段,分别行PCR扩增。结果制备了可用于基因芯片制作的基因探针片段。结论RD-PCR方法适合... 目的收集K562细胞表达谱芯片的基因片段。方法培养K562细胞,抽提其mRNA,反转录为cDNA,应用限制性显示PCR技术(RD-PCR)分离K562细胞不同组别的产物片段,分别行PCR扩增。结果制备了可用于基因芯片制作的基因探针片段。结论RD-PCR方法适合于基因芯片探针的收集。 展开更多

关键词 rd-pcr方法 K562细胞 表达谱 基因芯片 分子探针 幼红细胞白血病

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用RD-PCR技术获取IL-1β作用前后NIT-1细胞的差异表达基因 被引量：2

3

作者 付青姐 马文丽 +2 位作者 郑文岭 宋艳斌 吴曙光 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2003年第14期15-18,共4页

目的 :获取IL - 1β作用前后NIT - 1细胞的差异表达基因 ,为进行差异基因的克隆和鉴定奠定基础。方法 :利用转基因小鼠胰岛 β细胞系 (NIT - 1) ,通过应用一种改良的筛选差异基因的技术 (RestrictiondisplayPCR ,RD -PCR技术 )筛选cDNA... 目的 :获取IL - 1β作用前后NIT - 1细胞的差异表达基因 ,为进行差异基因的克隆和鉴定奠定基础。方法 :利用转基因小鼠胰岛 β细胞系 (NIT - 1) ,通过应用一种改良的筛选差异基因的技术 (RestrictiondisplayPCR ,RD -PCR技术 )筛选cDNA的差异表达条带。结果 :通过对比对照组与实验组凝胶电泳结果 ,找出 79条表达有差异的条带 ,包括实验组出现的新条带和实验组缺失的条带。结论 :应用RD -PCR技术成功分离了IL - 1β作用前后NIT - 1细胞的差异表达条带 ,为大量筛选、克隆与鉴定与 β细胞破坏机制相关的新基因奠定基础 ,有助于了解胰岛素依赖型糖尿病 (IDDM)发病的分子机制。 展开更多

关键词 NIT-1细胞 rd-pcr技术 差异基因

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RD-PCR技术在酵母基因表达谱研究中的应用 被引量：1

4

作者 刘莉扬 马文丽 +2 位作者 宋艳斌 张宝 郑文岭 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期246-248,261,共4页

目的　应用RD PCR技术分离酵母基因。方法　首先提取酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)总RNA ,纯化mRNA ;然后 ,反转录成双链cDNA ;再用限制性内切酶Sau3AI酶切 ,在酶切片段上加上接头后 ,用通用引物U进行第一次PCR扩增 ,以这一产物... 目的　应用RD PCR技术分离酵母基因。方法　首先提取酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)总RNA ,纯化mRNA ;然后 ,反转录成双链cDNA ;再用限制性内切酶Sau3AI酶切 ,在酶切片段上加上接头后 ,用通用引物U进行第一次PCR扩增 ,以这一产物为模板用选择性引物(在通用引物的 3’端延伸两个碱基 )作第二次PCR扩增。 5 %PAGE胶分离基因片段 ,选择单带割胶回收 ,做第三次PCR扩增 ,与载体连接 ,最后进行测序分析。结果　采用这种方法分离得到的基因片段 ,经Blast检索分析 ,确为来自酿酒酵母基因的cDNA片段或表达序列标签 (EST)。结论　RD PCR技术可以有效地分离EST ,可用于酵母基因表达调控的研究。 展开更多

关键词 rd-pcr技术 基因表达谱 酿酒酵母 限制性显示技术 表达序列标签

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银染RD-PCR方法分离基因片段 被引量：1

5

作者 张宝 马文丽 +2 位作者 刘莉扬 宋艳斌 郑文岭 《生物技术通讯》 CAS 2002年第1期42-44,共3页

从正常培养的SH-SY5Y细胞中提取总RNA,经oligo(dT)纤维素柱纯化分离出mRNA,然后以oligo(dT18)为锚定引物反转录生成单链cDNA再以此为模板合成DNA的第二条链;将双链DNA经Sau3AI酶切之后,接上接头,经通用引物和选择性引物进行扩增;采用5%... 从正常培养的SH-SY5Y细胞中提取总RNA,经oligo(dT)纤维素柱纯化分离出mRNA,然后以oligo(dT18)为锚定引物反转录生成单链cDNA再以此为模板合成DNA的第二条链;将双链DNA经Sau3AI酶切之后,接上接头,经通用引物和选择性引物进行扩增;采用5%非变性PAGE胶电泳分离后,用银染的方法显示DNA条带;在直视下回收DNA带,经过扩增后克隆入pMD18-T载体中并鉴定。结果建立了非放射性同位素的银染RD-PCR方法,用于分离基因片段。 展开更多

关键词 银染色法 rd-pcr 基因层断 分离

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应用RD-PCR技术制备基因芯片靶基因片段

6

作者 张宝 马文丽 +4 位作者 李凌 石嵘 吴清华 宋艳斌 郑文岭 《生物技术》 CAS CSCD 2002年第4期2-3,共2页

应用RD -PCR技术分离SH -SY5Y细胞的基因片段。从正常培养的SH -SY5Y细胞中提取总RNA ,经oligo(dT)纤维素柱纯化分离出mRNA ,然后以oligo(dT1 8)为锚定引物反转录生成单链cDNA ,再以此为模板合成DNA的第二条链 ;将双链DNA经Sau3AI酶切之... 应用RD -PCR技术分离SH -SY5Y细胞的基因片段。从正常培养的SH -SY5Y细胞中提取总RNA ,经oligo(dT)纤维素柱纯化分离出mRNA ,然后以oligo(dT1 8)为锚定引物反转录生成单链cDNA ,再以此为模板合成DNA的第二条链 ;将双链DNA经Sau3AI酶切之后 ,接上接头 ,经通用引物和选择性引物进行扩增 ;然后与载体pMD1 8-T相连 ,克隆鉴定、筛选、测序。所分离的cDNA片段经过扩增后用于制备基因芯片的靶基因 ,杂交检测的结果表明 ,此种方法所分离的基因片段可以用于基因芯片的靶基因片段 。 展开更多

关键词 rd-pcr 基因芯片 靶基因片段 制备

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应用RD-PCR技术构建溶藻弧菌的cDNA文库

7

作者 王蓓 吴灶和 +1 位作者 简纪常 鲁义善 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期731-736,共6页

应用限制性显示PCR(RD-PCR)技术构建溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库,筛选,收集巧妙地解决了由于细菌mRNA poly(A)化位点的高度多态性、用常规方法构建原核cDNA文库所遇到的文库大量重复冗余的难题。并进行筛选、收集cDNA片段进行测序... 应用限制性显示PCR(RD-PCR)技术构建溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库,筛选,收集巧妙地解决了由于细菌mRNA poly(A)化位点的高度多态性、用常规方法构建原核cDNA文库所遇到的文库大量重复冗余的难题。并进行筛选、收集cDNA片段进行测序,根据测序结果进行生物信息学分析和结果验证。实验结果表明,我们成功地构建了溶藻弧菌poly (A)化mRNA的cDNA文库,获得一百多个基因片段并对其中53个基因片段进行测序分析,获得了如细菌Ⅲ型分泌系统易位蛋白、趋药性传感器、类丝氨酸蛋白酶等毒力相关因子的基因片断。并且在一定程度上证实了poly(A)化在细菌中不是个别和偶然的现象。实验结果说明了我们所构建的溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库质量高,文库基因片段的重复性低,筛选基因片段效率高、目的性强。本文并探讨了限制性显示PCR技术在细菌poly(A)化mRNA的cDNA1文库构建中的应用价值。 展开更多

关键词 溶藻弧菌 CDNA文库 限制性显示PCR

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一种限制性cDNA文库的构建 被引量：14

8

作者 祝骥 马文丽 +2 位作者 李凌 姚汝华 郑文岭 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期174-176,共3页

利用本室创建的限制性显示技术RD -PCR ,建立的cDNA文库 ,我们称之为限制性cDNA文库。该方法构建的文库因经过了限制性分组扩增 ,每组均含有特定的cDNA 。

关键词 限制性cDNA文库 K562细胞 rd-pcr 构建

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精子细胞中基因表达谱的研究 被引量：8

9

作者 毛向明 马文丽 +1 位作者 彭翼飞 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期200-202,共3页

目的研究成熟精子细胞中的基因表达。方法采用限制性显示PCR(RD-PCR)获得大量正常和异常精子细胞中基因表达序列标签(EST)并以表达谱图的方式显示出来。结果通过RD-PCR技术得到大量正常精子细胞和异常精子细胞的EST及部分差异表达EST。... 目的研究成熟精子细胞中的基因表达。方法采用限制性显示PCR(RD-PCR)获得大量正常和异常精子细胞中基因表达序列标签(EST)并以表达谱图的方式显示出来。结果通过RD-PCR技术得到大量正常精子细胞和异常精子细胞的EST及部分差异表达EST。结论RD-PCR技术既能针对已知基因又能针对未知基因,快速收集大量长度适宜、大小均一、适于芯片制备的EST,较通过cDNA文库等方法得到靶基因片段具有独特的优势。关键词:精子;基因表达谱; 展开更多

关键词 精子 基因表达谱 限制性差异显示-聚合酶链反应 rd-pcr

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60mer长寡核苷酸微阵列构建的优化 被引量：2

10

作者 温颖 马文丽 +2 位作者 吴清华 李凌 郑文岭 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期460-462,共3页

目的　优化长寡核苷酸芯片方阵的构建。方法　采用4种不同玻片表面,4种点样液溶解经设计高度特异性探针,制备长寡核苷酸芯片。样品经RD -梯度PCR扩增标记后与芯片杂交,扫描芯片后进行统计学分析。结果　点样液3×SSC与丙烯酰胺聚合... 目的　优化长寡核苷酸芯片方阵的构建。方法　采用4种不同玻片表面,4种点样液溶解经设计高度特异性探针,制备长寡核苷酸芯片。样品经RD -梯度PCR扩增标记后与芯片杂交,扫描芯片后进行统计学分析。结果　点样液3×SSC与丙烯酰胺聚合物表面(国产玻片)联合使用杂交效果最佳。结论　该研究优化了长寡核苷酸芯片微阵列的构建,为芯片的下游技术发展提供支持。 展开更多

关键词 60mer长寡核苷酸 微阵列构建 rd-pcr 信噪比

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应用限制性差异显示技术制备实验用DNA标记物 被引量：1

11

作者 崔东 郑文岭 +3 位作者 马文丽 赵慧 叶长烂 赵林 《广东医学》 CAS CSCD 2002年第4期351-352,共2页

目的　建立实验室用DNA标记物。方法　依据PCR引物设计软件Oligo5设计通用引物 ,对质粒DNA进行PCR。结果　通过PCR反应 ,电泳后可见清晰的DNA条带 ,将已确定长度的DNA片段再进行PCR反应 ,与商用DNA标记物进行比较显示 ,用此法制备的DNA... 目的　建立实验室用DNA标记物。方法　依据PCR引物设计软件Oligo5设计通用引物 ,对质粒DNA进行PCR。结果　通过PCR反应 ,电泳后可见清晰的DNA条带 ,将已确定长度的DNA片段再进行PCR反应 ,与商用DNA标记物进行比较显示 ,用此法制备的DNA标记物可以作为实验室进行凝胶电泳的DNA标记物。结论　采用限制性差异显示技术制备DNA标记物 ,不仅操作简便、快捷、提高工作效益 ,且大大降低费用 。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 DNA标记物 rd-pcr 电泳 限制性差异显示技术

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利用RD技术对HCV-1b基因片段的克隆与分析 被引量：1

12

作者 孙朝晖 郑文岭 +2 位作者 彭翼飞 张宝 马文丽 《军医进修学院学报》 CAS 2004年第5期327-329,共3页

目的 :利用限制性显示 (RD)技术对丙型肝炎病毒 1b亚型 (HCV 1b)基因片段进行克隆与分析。方法 :用限制性内切酶Sau3AⅠ消化HCV 1bcDNA ,所得的限制性内切酶片段物进行RD PCR扩增 ,扩增后的产物克隆至 pMD18 T载体并进行快速鉴定。 结... 目的 :利用限制性显示 (RD)技术对丙型肝炎病毒 1b亚型 (HCV 1b)基因片段进行克隆与分析。方法 :用限制性内切酶Sau3AⅠ消化HCV 1bcDNA ,所得的限制性内切酶片段物进行RD PCR扩增 ,扩增后的产物克隆至 pMD18 T载体并进行快速鉴定。 结果 :得到 2 0个大小均一 (2 0 0～ 10 0 0bp)的限制性片段 ,测序结果表明 ,属于HCV 1b基因。结论 :RD技术能快速收集大量长度适宜、大小相对均一的病毒基因片段 。 展开更多

关键词 HCV-1B rd-pcr B基因 克隆 扩增 限制性内切酶 B亚型 片段 限制性显示 T载体

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应用70mer Oligo基因芯片从限制性cDNA片段中钓取目的基因

13

作者 石嵘 马文丽 +4 位作者 刘翠华 宋艳斌 吴清华 郭秋野 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第7期738-741,共4页

目的 探讨采用单一探针寡核苷酸阵列从经限制性显示方法制备的cDNA片段中钓取目的基因片段的方法。方法酵母经常规培养,抽提mRNA逆转录成cDNA后,经限制性显示技术制备成限制性cDNA片段,根据目的基因SSA1设计70mer特异性oligo片段并打印... 目的 探讨采用单一探针寡核苷酸阵列从经限制性显示方法制备的cDNA片段中钓取目的基因片段的方法。方法酵母经常规培养,抽提mRNA逆转录成cDNA后,经限制性显示技术制备成限制性cDNA片段,根据目的基因SSA1设计70mer特异性oligo片段并打印成为寡核苷酸阵列。采用荧光标记的通用引物对上述经限制性显示技术获得的限制性cDNA片段进行标记,与oligo阵列杂交,洗脱,扫描。然后进行杂交后剥除,收集剥除液,采用限制性通用引物扩增,产物克隆于PUC18T载体中,并转化至JM109大肠杆菌中培养,抽提质粒,进行测序鉴定。结果 测序结果BLAST同源性比较表明,用该方法成功的克隆出了目的基因片段。结论 采用70mer寡核苷酸芯片可以直接从限制性显示方法处理的cDNA片段中钓取目的基因,而无需构建cDNA文库。另外,本方法也可用于oligo芯片的杂交后对有表达差异的基因的获取及研究中。 展开更多

关键词 基因芯片 rd-pcr 荧光标记 芯片剥除

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国内外卡介菌的分子遗传学特性 被引量：8

14

作者 赵爱华 贾淑珍 +2 位作者 寇丽杰 乔来艳 王国治 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期583-587,共5页

目的比较我国生产用卡介菌上海菌株与国际常用卡介菌亚株(巴斯德1173P2株、法国F6株、丹麦1331株、丹麦2株、日本172株、Connaught)在分子遗传学上的差异。方法应用PCR和多重PCR方法,对国内外不同卡介菌的各缺失区(RD1、RD2、RD8、RD14... 目的比较我国生产用卡介菌上海菌株与国际常用卡介菌亚株(巴斯德1173P2株、法国F6株、丹麦1331株、丹麦2株、日本172株、Connaught)在分子遗传学上的差异。方法应用PCR和多重PCR方法,对国内外不同卡介菌的各缺失区(RD1、RD2、RD8、RD14、RD16、nRD18、RDDenmark/Glaxo)、插入序列IS6110拷贝数及基因座SenX3-Regx3串联重复序列拷贝数进行检测。结果我国生产用卡介菌上海菌株(BCG Chinese)缺失RD1和RD2,不缺失RD8、RD14、RD16、nRD18及RDDen-mark/Glaxo,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有3个串联重复序列,PCR产物为353bp;巴斯德1173P2株缺失RD1、RD2、RD14和nRD18,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列;法国F6株缺失RD1、RD2和nRD18,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列;丹麦1331株缺失RD1、RD2及RDDenmark/Glaxo,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列;丹麦2株与丹麦1331株相似,只是SenX3-Regx3基因座有2个串联重复序列和3个串联重复序列并存的现象;日本172株只缺失RD1,RD16只显示401bp的产物,含有2个IS6110插入序列;Connaught株缺失RD1、RD2、RD8及nRD18,含有1个IS6110插入序列,SenX3-Regx3基因座有1个串联重复序列。结论我国生产用卡介菌上海菌株与国外其他卡介菌亚株在分子遗传学特性上有一定的差异。 展开更多

关键词 BCG亚株 上海菌株 缺失区 多重PCR

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K562细胞经氯化高铁血红素诱导后分化相关基因的筛选 被引量：3

15

作者 姜立 马文丽 +1 位作者 郑文岭 薛社普 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期357-361,共5页

目的　研究K5 6 2细胞经氯化高铁血红素 (Hemin)诱导后在cDNA分子水平上的表达差异。　方法用限制性显示 (RD PCR)方法寻找K5 6 2细胞在经Hemin诱导后的cDNA差异表达片段。　结果　筛选到差异表达片段 4条 ,并进行了序列测定与同源性分... 目的　研究K5 6 2细胞经氯化高铁血红素 (Hemin)诱导后在cDNA分子水平上的表达差异。　方法用限制性显示 (RD PCR)方法寻找K5 6 2细胞在经Hemin诱导后的cDNA差异表达片段。　结果　筛选到差异表达片段 4条 ,并进行了序列测定与同源性分析。　结论　K5 6 2细胞分化是多基因参与的结果 ,这些分化相关基因的共同作用使K5 6 展开更多

关键词 限制性显示-PCR 氯化高铁血红素 K562细胞 白血病 HEMIN

原文传递

纯化探针降低基因芯片杂交结果的背景 被引量：3

16

作者 张宝 马文丽 +3 位作者 石嵘 吴清华 宋艳斌 郑文岭 《生物技术》 CAS CSCD 2002年第2期5-6,共2页

研究探针的纯化对基因芯片杂交结果的影响。将乙醇沉淀的探针和用DNA纯化试剂盒纯化的探针分别与基因芯片杂交 ,在同等条件下进行杂交后清洗和芯片扫描检测。结果表明 ,纯化的探针与基因芯片杂交结果的背景低 ,而未纯化的探针背景强 ,... 研究探针的纯化对基因芯片杂交结果的影响。将乙醇沉淀的探针和用DNA纯化试剂盒纯化的探针分别与基因芯片杂交 ,在同等条件下进行杂交后清洗和芯片扫描检测。结果表明 ,纯化的探针与基因芯片杂交结果的背景低 ,而未纯化的探针背景强 ,阳性信号界限比较模糊。运用基因芯片进行基因表达谱研究 ,要求杂交检测的结果必须低背景。 展开更多

关键词 纯化探针 基因芯片 杂交结果 靶基因片断

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SARS冠状病毒检测60mer寡核苷酸基因芯片的设计及应用

17

作者 广东省防治非典型肺炎科技攻关病原分离组 石嵘 +7 位作者 马文丽 吴清华 张宝 宋艳斌 郭秋野 肖维威 王艳 郑文岭 《广东医学》 CAS CSCD 2003年第z1期14-17,共4页

目的 设计并应用60 mer寡核苷酸基因芯片实现对SARS冠状病毒的检测。方法 根据寡核苷酸基因芯片的设计原则设计出3O条60mer的寡核苷酸片段,覆盖SARS冠状病毒(以TOR2株为参考序列,GENEBANK索取号:AY274119)全基因组,点样制备成12×1... 目的 设计并应用60 mer寡核苷酸基因芯片实现对SARS冠状病毒的检测。方法 根据寡核苷酸基因芯片的设计原则设计出3O条60mer的寡核苷酸片段,覆盖SARS冠状病毒(以TOR2株为参考序列,GENEBANK索取号:AY274119)全基因组,点样制备成12×12的寡核苷酸基因芯片,将临床诊断SARS患者痰液标本抽提病毒RNA,采用限制性显示技术进行标记,将标记好的样品与芯片杂交,洗脱,扫描。初步探索寡核苷酸芯片诊断SARS冠状病毒的敏感性及特异性,并对芯片做进一步的优化。结果 来自SARS患者样品与芯片上的多个SARS探针杂交,出现了明显的荧光信号;阴性和空白对照探针上没有杂交信号,而对照样品仅与一个SARS探针有杂交。结论 采用60 mer寡核苷酸基因芯片可以从基因水平实现对SARS冠状病毒多段序列的平行检测,对于提高检出率有一定意义,此外,尚可用于监测在发病过程的各个阶段中病毒基因的活动状况。 展开更多

关键词 SARS冠状病毒 寡核苷酸基因芯片 rd-pcr 荧光标记 分子杂交

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应用rDNA ITS2区段基因序列分析对浙江省传疟媒介的鉴定 被引量：7

18

作者 姚立农 夏生荣 +8 位作者 阮卫 夏弟明 徐惠庆 王祖主 莫根强 杨道余 陆锦明 余可根 陈华良 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第3期217-218,228,共3页

目的对浙江省传疟媒介种类进行鉴定,以指导疟疾防治工作。方法针对媒介按蚊核糖体核酸内转录间隔2(rDNAITS2)区段基因特征,应用PCR基因鉴别技术,对浙江省现场捕捉的按蚊与嗜人按蚊、八代按蚊、中华按蚊、雷氏按蚊实验室标本进行基因鉴... 目的对浙江省传疟媒介种类进行鉴定,以指导疟疾防治工作。方法针对媒介按蚊核糖体核酸内转录间隔2(rDNAITS2)区段基因特征,应用PCR基因鉴别技术,对浙江省现场捕捉的按蚊与嗜人按蚊、八代按蚊、中华按蚊、雷氏按蚊实验室标本进行基因鉴别和比较。结果浙江省现场捕捉的按蚊DNA样本的PCR扩增产物均为250bp,与实验室中华按蚊标本一致。结论中华按蚊目前仍是浙江省的主要传疟媒介,现场调查未发现嗜人按蚊。 展开更多

关键词 中华按蚊 嗜人按蚊 核糖体核酸内转录间隔2(ITS2) 聚合酶链反应

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限制性差异显示RT-PCR技术对大鼠脑缺血相关基因表达的研究 被引量：2

19

作者 臧林泉 邱鹏新 颜光美 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期232-234,共3页

目的研究大鼠急性局灶性脑缺血时缺血与非缺血组织中基因表达的差异,以及差异表达基因随时间变化的规律,为临床寻找新的防治脑缺血的靶点奠定基础。方法采用线栓法制备大鼠不同时间脑缺血动物模型,采用限制性差异显示RTPCR技术(restrict... 目的研究大鼠急性局灶性脑缺血时缺血与非缺血组织中基因表达的差异,以及差异表达基因随时间变化的规律,为临床寻找新的防治脑缺血的靶点奠定基础。方法采用线栓法制备大鼠不同时间脑缺血动物模型,采用限制性差异显示RTPCR技术(restrictiondisplayRTPCR,RDRTPCR),研究在大鼠局灶性脑缺血过程中差异基因的表达。结果在缺血后各时间点分别出现上调的EST片段有32条、下调的有13条。其中7条在缺血0.5、1.0、4.0小时均出现变化,分别系同一对引物所扩增且分子量相同,其在脑缺血中的表达具有一定的规律性。结论利用RDRTPCR技术成功获取了大鼠脑缺血过程中差异表达的基因,并揭示了部分基因在脑缺血过程中呈现的规律性变化,为进一步筛选、鉴定与克隆表达这些与脑缺血密切相关的基因,阐明脑缺血发病机制奠定基础。 展开更多

关键词 局灶性脑缺血 限制性差异显示RT—PCR 大鼠

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两种检测方法对EV71病毒监测结果的影响研究 被引量：6

20

作者 梁英 怀清杰 +4 位作者 张炳丽 梁爽 任莉娜 范荣军 李晓鹏 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第7期1590-1592,共3页

目的:比较RT-PCR法与RD细胞病毒分离法两种检测方法对监测EV71病毒结果的影响。方法:将151份标本分别经RT-PCR法与RD细胞病毒分离法检测出的阳性标本按不同分类及标本总阳性率进行数据统计,比较两种检验方法间的差异。结果:RT-PCR法与R... 目的:比较RT-PCR法与RD细胞病毒分离法两种检测方法对监测EV71病毒结果的影响。方法:将151份标本分别经RT-PCR法与RD细胞病毒分离法检测出的阳性标本按不同分类及标本总阳性率进行数据统计,比较两种检验方法间的差异。结果:RT-PCR法与RD细胞病毒分离法检测出的阳性标本按不同分类统计比较后,两者无明显差异,无统计学意义(P>0.05);两种方法检测出的标本总阳性率RD细胞病毒分离法为38.41%,而RT-PCR法为26.49%,差异有统计学意义(2χ=4.89,P(0.05)。结论:RT-PCR法检测结果可以作为手足口EV71病毒监测结果进行分类数据统计分析,而标本监测年度总阳性率应以RD细胞病毒分离检测结果统计。 展开更多

关键词 RT-PCR法 RD细胞病毒分离法 肠道病毒71型 监测结果 对比研究

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