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RASSF1-A基因和RASSF1-C基因在胃癌组织及细胞中的表达
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作者 刘新法 陈明军 谢国柱 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2010年第12期66-69,共4页
目的探讨RASSF1-A基因和RASSF1-C基因在胃癌组织及细胞中的表达特点。方法采用http://www.ncbi.nl m.nih.gov/及DNAstar软件对80例胃癌(胃癌组)及相对应的癌旁组织(对照组)标本RASSF1-A基因和RASSF1-C基因进行生物信息学分析。采用半定... 目的探讨RASSF1-A基因和RASSF1-C基因在胃癌组织及细胞中的表达特点。方法采用http://www.ncbi.nl m.nih.gov/及DNAstar软件对80例胃癌(胃癌组)及相对应的癌旁组织(对照组)标本RASSF1-A基因和RASSF1-C基因进行生物信息学分析。采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测2组组织及胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901细胞中RASSF1-A mRNA、RASSF1-C mRNA相对表达量。结果经RT-PCR扩增后,RASSF1-C mRNA在肿瘤细胞系BGC-823、SGC-7901细胞中的相对表达量分别为0.62±0.07、0.66±0.08RASSF1-A mRNA在肿瘤细胞系BGC-823、SGC-7901细胞中的相对表达量分别为0.23±0.10、0.58±0.07,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。RASSF1-A mRNA在对照组组织中相对表达量为0.81±0.07,显著高于胃癌组0.31±0.03,差异有统计学意义(P<0.05)。RASSF1-C mRNA在胃癌组组织中相对表达量为0.87±0.04,对照组组织中相对表达量为0.84±0.03,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RASSF1-A、RASSF1-C基因在胃癌组织中的表达下调。 展开更多
关键词 胃癌 rassf1-a基因 rassf1-C基因 表达 半定量逆转录聚合酶链反应
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径向超声小探头技术联合SHOX2、RASSF1A基因甲基化检测在肺外周实性/亚实性结节中的诊断作用研究
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作者 李黎 任杰 +3 位作者 弓慧 麦日耶木姑丽·艾山 李菲菲 郑大勇 《影像科学与光化学》 2026年第1期21-27,共7页
目的:研究径向超声小探头技术联合Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因、矮小同源盒基因(SHOX2)甲基化检测在肺外周实性/亚实性结节中的诊断价值。方法:选取2021年7月至2023年10月我院收治的302例外周肺结节患者,经支气管镜行径向超声小探... 目的:研究径向超声小探头技术联合Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因、矮小同源盒基因(SHOX2)甲基化检测在肺外周实性/亚实性结节中的诊断价值。方法:选取2021年7月至2023年10月我院收治的302例外周肺结节患者,经支气管镜行径向超声小探头技术引导肺活检,并经实时荧光PCR检测肺泡灌洗液中RASSF1A、SHOX2基因的甲基化状态。结果:与径向超声小探头、RASSF1A、SHOX2基因甲基化单独诊断比较,联合诊断灵敏度(99.45%)、特异度(100.00%)、准确度(99.67%)较高(P<0.05);径向超声小探头+RASSF1A、SHOX2基因甲基化相对于细胞学可将恶性肺结节诊断灵敏度从50.82%提高至99.45%,特异度从97.48%提高至100.00%;径向超声小探头技术联合RASSF1A、SHOX2基因甲基化检测的阳性率在细胞学发现癌细胞组为100.00%,结果未明组为100.00%,未发现癌细胞组为43.10%;径向超声小探头+RASSF1A、SHOX2基因甲基化对亚实性恶性肺结节检出率高于径向超声小探头(P<0.05)。结论:径向超声小探头技术联合RASSF1A、SHOX2基因甲基化检测可有效提高肺外周实性/亚实性结节检出率,为临床早期筛查提供参考依据。 展开更多
关键词 外周肺结节 径向超声 小探头技术 SHOX2基因 rassf1A基因 诊断价值
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肺小结节中医易患体质与SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化的相关性研究 被引量:1
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作者 曹仁爽 王彬 +2 位作者 来薛 李珊 高峰 《中国中医药信息杂志》 2025年第8期146-152,共7页
目的探讨肺小结节患者的中医易患体质与SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化水平阳性风险相关的影响因素。方法采用横断面研究方法,纳入2024年5-12月中国中医科学院望京医院呼吸科165例肺小结节患者,对患者的一般病史、结节影像报告、肺癌... 目的探讨肺小结节患者的中医易患体质与SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化水平阳性风险相关的影响因素。方法采用横断面研究方法,纳入2024年5-12月中国中医科学院望京医院呼吸科165例肺小结节患者,对患者的一般病史、结节影像报告、肺癌基因甲基化水平和中医体质判定等临床资料进行整理和统计。在单因素相关分析探讨各变量与肺癌基因甲基化阳性风险相关性基础上,采用二元Logistic回归模型进行独立危险因素分析。结果单因素相关性分析显示,年龄、性别、中医易患体质分数、肺小结节直径、右肺上叶与SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化阳性相关(P=0.03、P=0.02、P=0.01、P<0.01、P=0.03);二元Logistic回归分析显示,阳虚质、气虚质、气郁质和痰湿质4种肺小结节易患体质评分与SHOX2/RASSF1A/PTGER4基因甲基化阳性风险呈显著正相关,相较阳虚质,痰湿质和气郁质肺小结节患者基因甲基化阳性风险更高(P=0.04、P=0.02)。结论高龄、男性及中医易患体质与肺癌基因甲基化阳性风险具有相关性,其中痰湿质和气郁质是独立危险因素。 展开更多
关键词 肺小结节 SHOX2/rassf1A/PTGER4基因甲基化水平 中医易患体质 独立危险因素分析 前瞻性横断面研究
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5-Aza-CdR对子宫内膜癌中RASSF1A基因甲基化的作用 被引量:5
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作者 黄丽萍 陈晨 +1 位作者 王雪萍 刘辉 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期380-383,共4页
目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧脱苷(5-Aza-CdR)对子宫内膜癌中Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因甲基化的作用。方法取子宫内膜癌细胞株HEC-1-B细胞随机分组,用不同浓度(1.0×10-6,3.0×10-6,10.0×10-6 mol/L)的去甲... 目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧脱苷(5-Aza-CdR)对子宫内膜癌中Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因甲基化的作用。方法取子宫内膜癌细胞株HEC-1-B细胞随机分组,用不同浓度(1.0×10-6,3.0×10-6,10.0×10-6 mol/L)的去甲基化药物5-Aza-CdR处理后,采用甲基化特异性PCR、实时定量PCR、Western blot、TUNEL等技术,分析空白对照组及实验各组子宫内膜癌细胞株HEC-1-B中RASSF1A基因启动子区域甲基化情况、mRNA表达水平、蛋白表达和细胞凋亡的情况。结果人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B细胞中RASSF1A基因启动子区存在高甲基化,mRNA、蛋白低表达,以及细胞凋亡失控。不同浓度的5-Aza-CdR可逆转RASSF1A基因高甲基化状态,恢复mRNA、蛋白表达量,并可抑制HEC-1-B细胞的生长及诱导凋亡。结论子宫内膜癌异常甲基化RASSF1A基因作为治疗靶点,去甲基化药物5-Aza-CdR是基因治疗的有效途径。 展开更多
关键词 rassf1A基因 甲基化 子宫内膜癌
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贲门腺癌中RASSF1A基因甲基化与cyclin D1表达的关系 被引量:9
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作者 郭炜 杨植彬 +2 位作者 范立侨 邝钢 董稚明 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期164-167,共4页
目的:探讨贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)中RASSF1A基因的甲基化状态及其与cyclinD1蛋白表达之间的相关性。方法:分别应用甲基化特异性PCR(mothylation-specific PCR,MSP)方法和免疫组织化学SP法检测贲门腺癌组织及相应... 目的:探讨贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)中RASSF1A基因的甲基化状态及其与cyclinD1蛋白表达之间的相关性。方法:分别应用甲基化特异性PCR(mothylation-specific PCR,MSP)方法和免疫组织化学SP法检测贲门腺癌组织及相应癌旁组织的RASSF1A基因甲基化情况和cyclin D1蛋白表达情况。结果:92例贲门腺癌组织中有54例RASSF1A发生了甲基化,甲基化率为58.7%,显著高于癌旁正常组织(P<0.001)。Ⅲ期和Ⅳ期贲门腺癌患者中RASSF1A基因发生甲基化的比率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(P<0.05)。92例贲门腺癌组织中有72例(78.3%)cyclin D1蛋白表达阳性,与相应癌旁正常组织比较,cyclin D1在贲门癌组织中的表达显著升高(P<0.001);且随肿瘤分化程度的降低,cyclin D1的阳性表达率明显升高(P<0.05)。RASSF1A基因在贲门腺癌中的高甲基化与cyclinD1蛋白表达之间有明显的相关性(P<0.05)。结论:RASSF1A基因启动子区的高甲基化以及cyclin D1蛋白的过表达可能参与了贲门腺癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 胃肿瘤 贲门 DNA甲基化 基因 肿瘤抑制 细胞周期蛋白D1 基因 rassf1A
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痰标本FHIT、P16、MGMT、RASSF1A、APC基因甲基化在肺癌诊断中的作用 被引量:9
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作者 亢春彦 王丹丹 +1 位作者 汤少鹏 肖红 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期869-873,共5页
目的探讨肺癌患者痰标本中FH IT、P16、MGMT、RASSF1A和APC等抑癌基因启动子异常甲基化及其联合检测在肺癌筛查及早期诊断中的价值。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法,检测47例肺癌组织及对应的痰标本FHIT、P16... 目的探讨肺癌患者痰标本中FH IT、P16、MGMT、RASSF1A和APC等抑癌基因启动子异常甲基化及其联合检测在肺癌筛查及早期诊断中的价值。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法,检测47例肺癌组织及对应的痰标本FHIT、P16,MGMT、RASSF1A和APC基因启动子区甲基化状态。24例肺良性疾病患者痰标本作为对照。结果 47例肺癌组织标本中FHIT、P16、MGMT、RASSF1A、APC基因启动子区甲基化检出率分别为40.4%(19/47)、53.2%(25/47)、36.2%(17/47)、21.3%(10/47)和38.3%(18/47);对照的痰标本中五者甲基化检出率分别为38.3%(18/47)、48.9%(23/47)、36.2%(17/47)、17.0%(8/47)和29.8%(14/47),两组甲基化检出率存在着一致性[P>0.05;κ(0.8~1.0)]。24例肺良性病变痰标本中未检测到任何异常甲基化,与肺癌组比较差异有统计学意义(P<0.05)。五项指标联合检测可明显提高肺癌检测的灵敏度(80.9%)和特异度(100.0%)。FHIT和P16基因痰标本甲基化检出率与患者吸烟指数有相关性(P<0.05)。结论痰标本中多个肺癌相关基因甲基化联合检测有望成为肺癌筛查、早期诊断简便有效的指标。 展开更多
关键词 肺肿瘤 FHIT基因 P16基因 MGMT基因 rassf1A基因 APC基因 甲基化
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三氧化二砷对前列腺癌DU-145细胞RASSF1A基因的去甲基化作用 被引量:8
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作者 倪渐凤 孙晓娟 +2 位作者 张伟杰 赵培荣 王留兴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期639-642,共4页
目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对激素非依赖性前列腺癌DU145细胞的生长抑制作用及对RASSF1A基因去甲基化和蛋白表达的影响。方法应用MTT法检测不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、12.0、20.0μmol/L)的As2O3不同作用时间... 目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对激素非依赖性前列腺癌DU145细胞的生长抑制作用及对RASSF1A基因去甲基化和蛋白表达的影响。方法应用MTT法检测不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、12.0、20.0μmol/L)的As2O3不同作用时间(24、48、72 h)对DU145细胞的生长抑制作用;应用甲基化特异性PCR(MSP)和West-ern blot检测As2O3对DU145细胞RASSF1A基因甲基化状态及蛋白表达的影响。结果 As2 O3可抑制DU145细胞的增殖,在一定范围内随着药物浓度的增高,抑制作用逐渐增强(F=838.089,P<0.05);同一浓度作用时间越长,抑制率越高(F=8.849,P<0.05);且As2O3可使RASSF1A基因甲基化逆转,蛋白重新表达。结论 As2O3可以逆转前列腺癌DU145细胞RASSF1A基因启动子CpG岛的异常甲基化,诱导该抑癌基因的重新表达,抑制前列腺癌DU145细胞的增殖。 展开更多
关键词 三氧化二砷 前列腺癌 甲基化 rassf1A基因
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RASSF1A基因启动子甲基化与非小细胞肺癌关系的meta分析 被引量:7
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作者 魏慧君 房念珍 +2 位作者 郭丽丽 吴志浩 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期443-450,共8页
背景与目的肿瘤发生、发展过程中,抑癌基因启动子区域Cp G岛异常甲基化起着重要的作用。已有研究显示RAS相关区域家族1A(Ras association domain family 1A,RASSF1A)基因,作为一个抑癌基因其启动子区域甲基化与非小细胞肺癌(non-small c... 背景与目的肿瘤发生、发展过程中,抑癌基因启动子区域Cp G岛异常甲基化起着重要的作用。已有研究显示RAS相关区域家族1A(Ras association domain family 1A,RASSF1A)基因,作为一个抑癌基因其启动子区域甲基化与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发生发展密切相关。在NSCLC患者癌组织中RASSF1A基因启动子往往表现为异常高甲基化。本研究采用meta分析的方法探讨RASSF1A基因启动子甲基化与NSCLC发生之间的关系。方法通过检索Medline、EMBASE、CNKI和万方数据库,按照已拟定的纳入与剔除标准筛选收集公开发表的关于RASSF1A基因启动子甲基化与NSCLC相关性的研究。以比值比(odds ratio,OR)和95%置信区间(confidence interval,CI)为效应指标,分析RASSF1A基因启动子甲基化与NSCLC的关系。结果共有23篇文献纳入本研究,RASSF1A基因启动子甲基化率在NSCLC患者肺部组织和对照组中分别为41.50%(95%CI:34%-49%)和5.58%(95%CI:2%-9%),meta分析显示肿瘤组织中的甲基化率高于对照组(OR=8.72,95%CI:4.88-15.58,P<0.05);亚组分析显示:肿瘤组织中的甲基化频率高于血浆(OR=10.99,95%CI:2.48-48.68)和正常对照组织(OR=8.74,95%CI:4.39-17.41)。结论 NSCLC患者肺癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化率高于对照组,组织中RASSF1A基因启动子甲基化率对肺癌的发生更具影响,RASSSF1A甲基化可能与肺癌的发生存在相关并可作为肺癌诊断的潜在标志物。 展开更多
关键词 肺肿瘤 rassf1A基因 甲基化 META分析
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诱导痰RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区甲基化在肺癌诊断中的价值 被引量:15
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作者 彭再梅 山长婷 王惠芳 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期247-253,共7页
目的:探讨诱导痰中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区异常甲基化及其联合检测在肺癌诊断中的价值。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)技术,检测82例肺癌患者诱导痰和对应肿瘤组织以及25例肺部良性病变组织中RASSF1A,p16和DAPK3种基因启动子区... 目的:探讨诱导痰中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区异常甲基化及其联合检测在肺癌诊断中的价值。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)技术,检测82例肺癌患者诱导痰和对应肿瘤组织以及25例肺部良性病变组织中RASSF1A,p16和DAPK3种基因启动子区甲基化改变,并分析三者与临床病理资料的关系。结果:肺癌病理组织中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区甲基化检出率分别为63.4%,59.8%和58.5%,对应的诱导痰三者甲基化检出率分别为54.9%,48.8%和51.2%;肺部良性病变组织中甲基化检出率均为零,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。RASSF1A基因甲基化检出率在中高分化和无淋巴结转移的肺癌中明显低于低分化和未分化及有淋巴结转移者(P<0.05),与年龄、性别、吸烟指数、临床分期及病理类型无关,而p16和DAPK基因甲基化检出率与上述因素均无明显相关性(P>0.05);联合检测3种基因甲基化的检出率为73.2%。结论:联合检测诱导痰中RASSF1A,p16和DAPK基因启动子区高甲基化有可能作为诊断肺癌及评估预后的简便有效的指标,并能提高检出率。 展开更多
关键词 DNA甲基化 甲基化特异性PCR 肺肿瘤 诊断 rassf1A基因 P16 DAPK基因
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RASSF1A基因在宫颈癌中的甲基化检测及 被引量:5
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作者 安锦霞 杨永秀 +1 位作者 王秀华 侯作贤 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期216-219,共4页
目的 探讨宫颈癌组织中RASSF1A(Ras association domain family1A)抑癌基因启动子甲基化状态及临床意义以及与高危型HPVs感染的关系。方法 甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测39例宫颈鳞癌及12例正常宫颈组织中RASSF1A基因甲基化... 目的 探讨宫颈癌组织中RASSF1A(Ras association domain family1A)抑癌基因启动子甲基化状态及临床意义以及与高危型HPVs感染的关系。方法 甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测39例宫颈鳞癌及12例正常宫颈组织中RASSF1A基因甲基化状态。聚合酶链反应(PCR)方法检测宫颈癌组织中HPV16、18型的感染状况。结果 39 例宫颈癌组织中有11 例可见异常甲基化(28.2%);12例正常宫颈组织均未见甲基化;宫颈癌组HPV感染率为69.2%;RASSF1A基因甲基化在淋巴结转移组(75.0%)高于淋巴结未转移组(9.1 %),P<0.05。RASSF1A甲基化在患者年龄、肿瘤大小、病理组织学分级、临床分期和HPVs感染组之间差异无统计学意义, P>0.05。结论 RASSF1A基因启动子区5′CpG岛的高甲基化是导致RASSF1A基因失活的重要机制,可能参与宫颈癌的发生过程。 展开更多
关键词 宫颈癌 基因 rassf1A 甲基化
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孕妇血浆中胎源性RASSF1A基因在无损性产前诊断中的应用研究 被引量:6
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作者 马玲 刘衍春 +3 位作者 郑凌 吴敏慧 刘毅 孙俊 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1301-1304,共4页
本研究旨在探讨运用非性别依赖的甲基化表观遗传学标记RASSF1A基因作为孕妇血浆中循环游离胎儿DNA存在的通用性标志的可行性。采用2种方法提取孕妇血浆游离DNA,选用其中效果较好的用磁珠法提取20例标本的游离DNA;采用RT-PCR方法扩增SRY... 本研究旨在探讨运用非性别依赖的甲基化表观遗传学标记RASSF1A基因作为孕妇血浆中循环游离胎儿DNA存在的通用性标志的可行性。采用2种方法提取孕妇血浆游离DNA,选用其中效果较好的用磁珠法提取20例标本的游离DNA;采用RT-PCR方法扩增SRY基因以及甲基化酶处理后的RASSF1A基因,且对酶处理后RASSF1A基因的扩增体系进行条件优化。结果表明,在20例标本中11例检测有SRY基因,且与胎儿出生后性别相符;选用优化后的PCR体系扩增甲基化酶处理后的RASSF1A基因,在18例标本中检测有RASSF1A基因,在2例标本中未检测到此基因。结论:甲基化RASSF1A基因与SRY基因相比,不受胎儿性别限制,可作为广泛性胎儿特异性表观遗传学标记物,用于临床无损性产前诊断。 展开更多
关键词 孕妇血浆 循环游离胎儿DNA rassf1A基因
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肝细胞癌患者癌组织中RASSF1A和WIF-1基因甲基化的临床意义 被引量:5
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作者 范海燕 张慧景 +1 位作者 郭占军 李胜棉 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2013年第5期89-93,104,共6页
目的观察肝细胞癌患者癌组织中RASSF1A基因甲基化状态的临床意义,阐明WIF-1基因甲基化在肝细胞癌发生发展中的作用。方法 97例肝细胞癌患者手术切除癌组织蜡块标本为肝细胞癌组,随机留取26例手术切除肝细胞癌旁肝硬化组织蜡块标本为肝... 目的观察肝细胞癌患者癌组织中RASSF1A基因甲基化状态的临床意义,阐明WIF-1基因甲基化在肝细胞癌发生发展中的作用。方法 97例肝细胞癌患者手术切除癌组织蜡块标本为肝细胞癌组,随机留取26例手术切除肝细胞癌旁肝硬化组织蜡块标本为肝硬化组。两组标本经蜡块组织DNA提取、亚硫酸盐甲基化修饰,并采用甲基化特异性PCR法对抑癌基因RASSF1A和WIF-1进行目的片段的扩增,扩增产物通过电泳凝胶成像系统进行甲基化结果分析判定;根据患者术前实验室检测是否感染HBsAg,将肝细胞癌组细分为HBsAg阳性组及HBsAg阴性组,分析抑癌基因RASSF1A和WIF-1甲基化的意义。结果 RASSF1A基因甲基化率肝细胞癌组(67.01%)高于肝硬化组(42.31%),差异有统计学意义(P=0.021);WIF-1基因甲基化率肝细胞癌组(46.39%)高于肝硬化组(7.69%),差异有统计学意义(P<0.05);肝细胞癌组中抑癌基因RASSF1A和WIF-1基因甲基化表达均阳性为35.05%,肝硬化组为7.69%,差异有统计学意义(P=0.006)。HBsAg阳性肝细胞癌组RASSF1A基因的甲基化阳性率(72.84%)高于HBsAg阴性组(23.08%),差异有统计学意义(P=0.001);WIF-1基因在HBsAg阳性(44.44%)和阴性肝细胞癌组(53.84%)差异无统计学意义(P=0.528)。肝细胞癌患者RASSF1A和WIF-1基因的甲基化状态与生存率比较差异无统计学意义(P=0.735,P=0.229)。结论肝细胞癌患者癌组织较肝硬化组织RASSF1A,WIF-1基因甲基化率高,提示抑癌基因RASSF1A和WIF-1的甲基化在肝细胞癌的发生中起到一定作用。 展开更多
关键词 肝细胞癌 抑癌基因 rassf1A WIF-1 甲基化
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原发性肝癌中RASSF1A基因表达失活及其临床意义 被引量:7
13
作者 周晓俊 薛万江 +1 位作者 秦磊 钱海鑫 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期24-27,共4页
目的研究肝癌组织中的抑癌基因RASSF1A的表达情况和由于启动区异常甲基化导致其基因外失活的状况,并分析DNA异常甲基化与肝癌临床相关因素之间的关系。方法利用RT-PCR和MS-PCR的方法,结合DNA测序和TaqⅠ酶切消化法,分析24例肝癌标本、4... 目的研究肝癌组织中的抑癌基因RASSF1A的表达情况和由于启动区异常甲基化导致其基因外失活的状况,并分析DNA异常甲基化与肝癌临床相关因素之间的关系。方法利用RT-PCR和MS-PCR的方法,结合DNA测序和TaqⅠ酶切消化法,分析24例肝癌标本、4株肝癌细胞株中RASSF1A基因的表达情况,以及其基因启动区异常甲基化的情况。采用甲基化抑制剂5′-Aza-CdR处理肝癌细胞株,观察RASSF1A重新表达的情况。结果66·7%的肝癌组织未表达RASSF1A;4株肝癌细胞株中仅1株检测到RASSF1A的表达。83·3%的肝癌组织及4株肝癌细胞株都发生了异常甲基化,而正常肝组织和正常肝细胞株(L02)中却未发现甲基化。甲基化与肝硬化、乙肝表面抗原、肿瘤分化程度及血管浸润和远处转移有相关性。原来RASSF1A表达失活的3株肝癌细胞株经甲基化抑制剂5′-Aza-CdR处理后,又重新恢复了表达。结论基因转录启动区的异常甲基化是导致肝癌中RASSF1A表达失活的主要原因。检测RASSF1A启动区异常甲基化可作为一种有潜在应用价值的生物分子指标来用于肝癌的早期发现、早期诊断以及预后的判断。 展开更多
关键词 抑癌基因 rassf1A肝癌 甲基化 5'-aza-CdR
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喉鳞状细胞癌中RASSF1A基因启动子区甲基化及蛋白表达 被引量:7
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作者 许承弼 滕博 +1 位作者 李长青 金春顺 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期326-329,共4页
目的:探讨RASSF1A基因启动子区甲基化与喉癌的关系。方法:运用甲基化特异性PCR,检测RASSF1A基因在48例喉癌组织、相对应癌旁组织及48例正常人外周血中的启动子区甲基化情况。用Westernblotting方法检测喉癌组织、癌旁组织及正常人外周血... 目的:探讨RASSF1A基因启动子区甲基化与喉癌的关系。方法:运用甲基化特异性PCR,检测RASSF1A基因在48例喉癌组织、相对应癌旁组织及48例正常人外周血中的启动子区甲基化情况。用Westernblotting方法检测喉癌组织、癌旁组织及正常人外周血中RASSF1A表达情况。结果:在48例喉癌组织、相对应的癌旁组织和48份正常人外周血中,RASSF1A基因启动子区分别有34例(70.83%)、11例(22.92%)和6例(12.50%)发生了甲基化,喉癌组织甲基化程度明显高于癌旁组织和正常人外周血(P<0.05)。在48例喉癌组织中27例(56.25%)不能正常表达RASSF1A蛋白,而相对应癌旁组织中仅有8例(16.67%),喉癌组织中RASSF1A蛋白的表达程度明显低于癌旁组织(P<0.01)。启动子区发生甲基化的34例喉癌组织中共有25例(73.53%)呈弱阳性,而7例未发生甲基化的喉癌组织中为1例(14.29%),两组间比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:RASSF1A基因启动子区甲基化与喉癌的发生有关,有望成为喉癌诊断的分子标志。 展开更多
关键词 喉肿瘤 rassf1A基因 DNA甲基化 甲基化特异性PCR
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肺泡灌洗液中SHOX2和RASSF1A基因甲基化联合检测对肺癌的诊断价值 被引量:16
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作者 张毅敏 王明丽 +4 位作者 吴杰 单绿虎 张剑英 熊娟 徐笑红 《肿瘤学杂志》 CAS 2016年第12期1032-1036,共5页
[目的]评估肺泡灌洗液(BALF)中SHOX2和RASSF1A基因甲基化联合检测(任意阳性)在肺癌诊断中的临床价值。[方法]收集经病理确诊的580例患者,其中肺癌261例,良性肺部疾病293例,非肺部的恶性肿瘤26例。将良性肺部疾病和非肺部的恶性肿瘤患者... [目的]评估肺泡灌洗液(BALF)中SHOX2和RASSF1A基因甲基化联合检测(任意阳性)在肺癌诊断中的临床价值。[方法]收集经病理确诊的580例患者,其中肺癌261例,良性肺部疾病293例,非肺部的恶性肿瘤26例。将良性肺部疾病和非肺部的恶性肿瘤患者共319例作为对照组。对全部580例患者的BLAF样本,采用实时荧光PCR(RT-PCR)与测序法检测BALF中SHOX2和RASSF1A两种基因甲基化情况,比较两种检测方法的一致性。以病理诊断为金标准,对277例具有细胞学结果的患者(肺癌组130例,对照组147例),比较采用RT-PCR法SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测与细胞学检测对肺癌诊断的敏感性和特异性。[结果]RT-PCR法与测序法两种方法检测580例患者BLAF样本SHOX2基因和RASSF1A基因甲基化结果的一致率分别是97.5%和98.0%。580例BLAF样本采用RT-PCR法检测SHOX2和RASSF1A基因甲基化任意阳性对肺癌诊断的敏感性和特异性分别是74.3%和87.1%。在277例有细胞学结果的患者中,RT-PCR法SHOX2和RASSF1A基因甲基化检测任意阳性对肺癌诊断的敏感性和特异性分别为83.2%和92.5%,与细胞学检测(44.6%和98.6%)相比,敏感性显著提高,但特异性有所降低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。基因甲基化联合检测(任意阳性)阳性率在细胞学发现癌细胞组为98.2%(57/58),结果未明组为100.0%(35/35),未发现癌细胞组为37.8%(14/37)。[结论]采用RT-PCR法进行BALF中SHOX2和RASSF1A基因甲基化联合检测,可以作为肺癌细胞学检查的补充,特别是在细胞学检测结果未明或阴性时。 展开更多
关键词 SHOX2 rassf1A 基因甲基化 肺泡灌洗液 肺肿瘤
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骨肉瘤中RASSF1A基因的甲基化状态研究 被引量:4
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作者 牛军涛 褚尤彪 +2 位作者 蒋继亮 李颖 范广丽 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第3期560-563,597,共5页
目的:分析骨肉瘤组织中RASSF1A基因甲基化状况。方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)分别检测44例骨肉瘤组织及相应的癌旁组织中RASSF1A基因启动子甲基化状态并分析其临床病理意义。结果:骨肉瘤组织中RASSF1A基因异常甲基化率(61.4%)显著高... 目的:分析骨肉瘤组织中RASSF1A基因甲基化状况。方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)分别检测44例骨肉瘤组织及相应的癌旁组织中RASSF1A基因启动子甲基化状态并分析其临床病理意义。结果:骨肉瘤组织中RASSF1A基因异常甲基化率(61.4%)显著高于癌旁正常骨组织中RASSF1A基因的异常甲基化率(20.5%),二者之间差异具有统计学意义(P<0.05)。RASSF1A基因异常甲基化导致组织中RASSF1A基因mRNA和蛋白表达水平均显著降低。另外,RASSF1A基因异常甲基化和肿瘤组织分化程度及全身有无转移情况有相关性(P值分别为0.022和0.016),而与患者年龄、性别、肿瘤位置及大小等临床特征无关(P值分别为0.6944,0.977,0.786和0.831)。结论:RASSF1A基因启动子高甲基化可能是导致其在骨肉瘤中表达水平降低的分子机制之一,有望成为骨肉瘤早期辅助诊断的一个重要分子标志物。 展开更多
关键词 骨肉瘤 rassf1A基因 启动子甲基化 基因表达
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RASSF1A基因在前列腺癌中甲基化检测及其表达 被引量:6
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作者 张家浩 姜昊文 +1 位作者 顾静文 张元芳 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期366-369,共4页
目的探讨RASSF1A基因在中国人前列腺癌和前列腺增生组织中的表达及其甲基化检测。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测33例前列腺癌、28例前列腺增生和5例癌旁组织中的RASSF1AmRNA表达,并采用甲基化特异性PCR法分析其甲基化状态。结... 目的探讨RASSF1A基因在中国人前列腺癌和前列腺增生组织中的表达及其甲基化检测。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测33例前列腺癌、28例前列腺增生和5例癌旁组织中的RASSF1AmRNA表达,并采用甲基化特异性PCR法分析其甲基化状态。结果48.5%的前列腺癌组织和17.9%的前列腺增生组织中RASSF1A表达缺失,66.7%的肿瘤组织中发现甲基化,高前列腺特异性抗原(PSA)和高TNM者启动子区甲基化的频率明显高于低PSA和低TNM者(P=0.01和0.049)。启动子区甲基化与发病年龄、细胞分化不相关,仅在2例前列腺增生组织中发现甲基化。结论RASSF1A甲基化可作为一个分子标志物,成为诊断肿瘤和预后的新方法。 展开更多
关键词 rassf1A基因 前列腺癌 甲基化检测 基因表达 分子标志物
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结直肠癌患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化状态观察 被引量:4
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作者 何樱 黄维甄 +1 位作者 欧阳考滨 袁霞 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第31期9-12,共4页
目的观察结直肠癌(CRC)患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化状态。方法 CRC患者50例(肿瘤组)、结直肠良性病变者50例(良性组)、健康体检者50例(正常组),采用甲基化特异度PCR的方法检测各组粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基... 目的观察结直肠癌(CRC)患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化状态。方法 CRC患者50例(肿瘤组)、结直肠良性病变者50例(良性组)、健康体检者50例(正常组),采用甲基化特异度PCR的方法检测各组粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化检出率,并分析其与CRC临床病理参数的关系。根据肠镜病理诊断结果进行验证,比较粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A单独及联合检测诊断CRC的敏感度和特异度。结果肿瘤组、良性组、正常组粪便p16INK4a基因甲基化检出率分别为74%、28%、14%,MGMT基因甲基化检出率分别为56%、24%、12%,RASSF1A基因甲基化检出率分别为72%、20%、10%,肿瘤组分别与正常组、良性组比较,P均<0.05。p16INK4a基因甲基化状态与CRC分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关,MGMT基因甲基化状态与CRC淋巴结转移相关,RASSF1A基因甲基化状态与CRC分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关,P均<0.05。三者联合检测诊断CRC的敏感度为95.8%,特异度为83.4%,ROC曲线下面积为0.816(95%CI 0.739%~0.894%)。结论 CRC患者粪便p16INK4a、MGMT、RASSF1A基因甲基化检出率明显高于结直肠良性病变者及健康体检者,联合检测上述指标有助于CRC患者的早期诊断及其生物学行为的判断。 展开更多
关键词 结直肠癌 p16INK4a基因 MGMT基因 rassf1A基因 基因甲基化
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RASSF1A在无损性孕妇外周血浆中胎儿ABO基因分型中的运用 被引量:3
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作者 马玲 刘衍春 +2 位作者 张若洋 周小玉 许进明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期1211-1215,共5页
目的:探讨甲基化表观遗传标志RASSF1A在O型孕妇外周血浆中胎儿ABO基因分型中的运用,以无损性预测产前胎儿ABO血型。方法:首先提取O型孕妇外周血浆游离DNA,扩增SRY及甲基化RASSF1A作为胎儿DNA存在的标志;检测血浆游离DNA中B及非O预测胎儿... 目的:探讨甲基化表观遗传标志RASSF1A在O型孕妇外周血浆中胎儿ABO基因分型中的运用,以无损性预测产前胎儿ABO血型。方法:首先提取O型孕妇外周血浆游离DNA,扩增SRY及甲基化RASSF1A作为胎儿DNA存在的标志;检测血浆游离DNA中B及非O预测胎儿ABO血型;并将基因分型结果与胎儿分娩后血清学结果进行比对,以评价该方法的准确性。结果:20例标本中,11例检测出SRY,检测结果与胎儿出生后性别相符;其余9例标本酶切后均扩增出RASSF1A,证实胎儿游离DNA存在。对血浆游离DNA进行ABO基因检测,20例标本中8例标本同时扩增出非O和B,提示为B血型;5例标本只扩增出非O,未扩增出B,提示为A型;7例标本均未扩增出非O及B,提示为O型。上述预测结果与胎儿出生后ABO血清学血型一致。结论:初步建立了基于RASSF1A的O型孕妇血浆中游离DNA中胎儿ABO基因的检测程序,可用于临床无损性产前胎儿ABO血型的预测。 展开更多
关键词 循环游离胎儿DNA ABO基因分型 rassf1A
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沉默DNMT1和DNMT3b基因对胰腺癌BxPC-3细胞p16,RASSF1A基因启动子甲基化的影响 被引量:3
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作者 肖卫东 李勇 +4 位作者 邹叶青 李学明 蔡军 曾林山 胡伟 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期322-326,共5页
目的:探讨沉默DNMT1和DNMT3b基因对胰腺癌BxPC-3细胞p16,RASSF1A基因启动子甲基化的影响。方法:将胰腺癌BxPC-3细胞分为5组:DNMT1干扰组(转染DNMT1-siRNA),DNMT3b干扰组(转染DNMT3b-siRNA),双重干扰组(转染DNMT1+DNMT3b-siRNA),阴性对照... 目的:探讨沉默DNMT1和DNMT3b基因对胰腺癌BxPC-3细胞p16,RASSF1A基因启动子甲基化的影响。方法:将胰腺癌BxPC-3细胞分为5组:DNMT1干扰组(转染DNMT1-siRNA),DNMT3b干扰组(转染DNMT3b-siRNA),双重干扰组(转染DNMT1+DNMT3b-siRNA),阴性对照组(转染阴性siRNA)和空白对照组(转染脂质体)。转染48 h后,应用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测细胞中DNMT1和DNMT3b的mRNA及蛋白的表达水平;甲基化特异性PCR法检测p16和RASSF1A基因启动子甲基化。结果:与空白对照组和阴性对照组比较,各干扰组目的基因的mRNA及蛋白表达量均明显降低(均P<0.01)。空白对照组与阴性对照组p16和RASSF1A基因甲基化阳性;DNMT1干扰组和双重干扰组p16基因甲基化阴性,RASSF1A基因部分甲基化;DNMT3b干扰组p16基因部分甲基化,RASSF1A基因甲基化阳性。结论:DNMT1单干扰对胰腺癌BxPC-3细胞p16和RASSF1A基因的去甲基化作用优于DNMT3b单干扰,DNMT1和DNMT3b双重干扰无明显的协同效应;提示DNMT1是胰腺癌去甲基化治疗的一个有效靶点。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 DNA甲基化 RNA干扰 基因 p16 基因 rassf1A
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