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PML::RARα融合蛋白对白介素6受体的转录调控研究
1
作者 赵玲玲 崔灿琦 糜坚青 《内科理论与实践》 2025年第2期146-151,共6页
目的:探讨PML::RARα融合蛋白对白介素6受体(interleukin-6 receptor,IL-6R)的调控机制,及IL-6R对急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞增殖和分化的影响。方法:采用GSE12662和GSE10358数据集分析APL细胞中IL-6... 目的:探讨PML::RARα融合蛋白对白介素6受体(interleukin-6 receptor,IL-6R)的调控机制,及IL-6R对急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞增殖和分化的影响。方法:采用GSE12662和GSE10358数据集分析APL细胞中IL-6R的表达水平;采用逆转录实时定量PCR(reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测全反式维A酸(all-trans retinoic acid,ATRA)处理前后的NB4细胞及Zn^(2+)诱导前后PR9细胞中IL-6R的mRNA表达;通过染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)-seq数据分析、ChIPqPCR实验及双荧光素酶报告基因活性检测,研究PML::RARα对IL-6R的调控机制;构建IL-6R过表达质粒并通过逆转录病毒转染至NB4细胞,利用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验检测细胞增殖,流式细胞术检测NB4细胞的分化情况。结果:GSE12662数据集分析结果显示,APL患者早幼粒细胞中IL-6R的表达水平(12.20±0.41)显著低于正常早幼粒细胞(13.14±0.47,t=4.289,P<0.001)和中性粒细胞(14.82±0.40,t=12.35,P<0.001);GSE10358数据集分析结果显示,APL患者白血病细胞中IL-6R表达水平(5.93±0.84)显著低于非APL急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者(6.50±0.87,t=3.91,P<0.001)。APL患者细胞中IL-6R表达受PML::RARα融合蛋白的抑制,在APL中呈低表达模式,其机制为PML::RARα直接结合在IL-6R启动子区域,从而抑制其转录。在APL细胞株NB4中过表达IL-6R后,细胞增殖显著被抑制,转染4 d后,CCK-8检测到的吸光度值分别为0.86±0.01和0.40±0.01(t=32.66,P<0.001);同时细胞分化显著增强,CD11b阳性细胞比例由(3.10±1.22)%升高至(14.4±1.11)%(t=11.84,P<0.001)。结论:IL-6R是PML::RARα的靶基因,PML::RARα通过直接结合IL-6R启动子抑制其转录;明确IL-6R通过抑制APL细胞增殖并诱导其部分分化发挥其生物学功能。 展开更多
关键词 白介素6受体 急性早幼粒细胞白血病 PML::rarα 细胞增殖 细胞分化
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胰腺癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平与其对术后早期复发的预测价值
2
作者 吴永融 揭毅 +2 位作者 陈义林 宋俊荣 覃远浩 《检验医学与临床》 2025年第13期1746-1751,1756,共7页
目的探讨胰腺癌组织微小RNA-340-5p(miR-340-5p)、线粒体精氨酸-tRNA合成酶(RARS2)基因、热休克转录因子1(HSF1)mRNA的表达水平,及其对胰腺癌患者术后早期复发的预测价值。方法选择该院2020年7月至2023年8月收治的行根治性R0切除术的19... 目的探讨胰腺癌组织微小RNA-340-5p(miR-340-5p)、线粒体精氨酸-tRNA合成酶(RARS2)基因、热休克转录因子1(HSF1)mRNA的表达水平,及其对胰腺癌患者术后早期复发的预测价值。方法选择该院2020年7月至2023年8月收治的行根治性R0切除术的195例胰腺癌患者作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平。根据术后1年内复发情况,将患者分为复发组和未复发组。比较2组一般资料及癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平。采用多因素Logistic回归分析腺癌患者术后复发的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA对腺癌患者术后复发的预测价值,采用DeLong检验比较曲线下面积(AUC)。结果随访结果显示,复发组有107例,未复发组有88例。复发组肿瘤最大径、T分期、N分期高于未复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。复发组miR-340-5p表达水平低于未复发组,RARS2 mRNA和HSF1 mRNA表达水平高于未复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-340-5p表达水平升高是胰腺癌患者术后复发的独立保护因素(P<0.05),而RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平升高均是胰腺癌患者术后复发的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA单独及联合预测胰腺癌患者术后复发的AUC分别为0.794、0.790、0.765、0.949,且三者联合预测的AUC明显大于各指标单独预测(P<0.05)。结论癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平与胰腺癌术后的早期复发有关,均可作为复发的候选标志物,且三者联合应用时能进一步提高预测价值,可为临床个性化、精准化的预防干预提供重要的参考依据。 展开更多
关键词 miR-340-5p rarS2 HSF1 胰腺癌 术后早期复发 预测价值
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aMAP评分联合RAR及PIV构建慢性肝病患者肝细胞癌发生风险的预测模型 被引量：2
3
作者 蒋晓涵 曹杰 +2 位作者 刘丹丹 薛丹 郭志国 《天津医药》 2025年第1期42-46,共5页
目的基于aMAP评分联合RAR及PIV构建并验证慢性肝病患者肝细胞癌(HCC)发生风险的预测模型。方法143例慢性肝病患者按照是否发生HCC分为HCC组32例及非HCC组111例,比较2组一般临床资料、aMAP评分及外周血指标水平。采用多因素Logistic回归... 目的基于aMAP评分联合RAR及PIV构建并验证慢性肝病患者肝细胞癌(HCC)发生风险的预测模型。方法143例慢性肝病患者按照是否发生HCC分为HCC组32例及非HCC组111例,比较2组一般临床资料、aMAP评分及外周血指标水平。采用多因素Logistic回归分析住院慢性肝病患者发生HCC的影响因素,构建并验证列线图风险预测模型。结果与非HCC组比较,HCC组年龄大、男性比例高,总胆红素(TBIL)、红细胞分布宽度(RDW)、中性粒细胞计数(NEU)、单核细胞计数(MON)、aMAP评分、RDW与ALB比值(RAR)、泛免疫炎症值(PIV)水平高,白蛋白(ALB)、淋巴细胞计数(LYM)水平低(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,较高aMAP评分、RAR、PIV是住院慢性肝病患者HCC风险的独立危险因素(P<0.05);据此构建的列线图风险预测模型受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC)为0.823(95%CI:0.747~0.899),校准曲线显示预测值与实际观测值基本一致,Brier得分为0.125,决策曲线显示该模型具有明显的正向效益,Bootstrap法对预测模型进行内部验证的AUC为0.823(95%CI:0.820~0.825),提示模型具有良好的区分度。结论aMAP评分联合RAR及PIV构建的慢性肝病患者发生HCC的列线图风险预测模型预测性能良好,有助于指导个体化治疗及随访。 展开更多
关键词 癌 肝细胞 列线图 ROC曲线 aMAP评分 慢性肝病 红细胞分布宽度与白蛋白比值 泛免疫炎症值
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PML-RARα及RARα融合蛋白在三硫化二砷诱导的NB4细胞凋亡中的作用研究 被引量：12
4
作者 郝红缨 滕智平 陆道培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期108-111,共4页
为研究PML RARα及RARα融合蛋白在三硫化二砷 (As2 S3 )诱导的人早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞凋亡中的作用 ,本研究应用细胞形态观察、流式细胞术测定及DNA电泳等方法观察三硫化二砷对NB4细胞的诱导凋亡作用 ,用染色体G显带技术、反... 为研究PML RARα及RARα融合蛋白在三硫化二砷 (As2 S3 )诱导的人早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞凋亡中的作用 ,本研究应用细胞形态观察、流式细胞术测定及DNA电泳等方法观察三硫化二砷对NB4细胞的诱导凋亡作用 ,用染色体G显带技术、反转录PCR及Western印迹测定这一过程中PML RARα融合基因及其表达产物、野生型RARα蛋白的变化。结果表明 ,三硫化二砷在 0 .5 - 2 μmol/L之间能诱导NB4细胞凋亡 ,在此过程中PML RARα融合基因无明显变化 ,但PML RARα融合蛋白和野生型RARα蛋白明显减少。结论提示PML 展开更多
关键词 三硫化二砷 早幼粒细胞白血病细胞系 NB4细胞凋亡 PML-rarΑ融合蛋白 rarα融合蛋白 药理学
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RARα mRNA和RARβ mRNA在过量RA致神经管畸形发生中的表达 被引量：1
5
作者 芦志红 刘凯 +1 位作者 高英茂 刘皓 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期159-163,共5页
目的探讨过量RA对金黄地鼠胚胎神经管RARα和RARβ mRNA表达的影响。方法采用原位杂交及图像分析,半定量分析正常及RA致畸金黄地鼠胚胎神经管中RARα和RARβ mRNA表达水平的变化。结果过量RA可使RARα和RARβ mRNA在金黄地鼠神经管中的... 目的探讨过量RA对金黄地鼠胚胎神经管RARα和RARβ mRNA表达的影响。方法采用原位杂交及图像分析,半定量分析正常及RA致畸金黄地鼠胚胎神经管中RARα和RARβ mRNA表达水平的变化。结果过量RA可使RARα和RARβ mRNA在金黄地鼠神经管中的表达水平呈现短时下降,随后又大幅上升的变化。结论过量RA引起的RARα和RARβ mRNA表达水平的变化与RA致金黄地鼠神经管畸形相关。 展开更多
关键词 rarα MRNA rarβ MRNA 维甲酸 神经管畸形 金黄地鼠
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维胺酯通过激活RBP4/RARγ途径缓解大鼠耳部痤疮表皮过度角化 被引量：2
6
作者 谢晶 陆凌怡 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第14期1312-1319,共8页
目的 探究维胺酯治疗大鼠耳部痤疮表皮过度角化的具体机制。方法 将30只雄性Sprague Dawley大鼠随机分成对照组、模型组和维胺酯治疗组。利用痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes,P.acnes)联合皮脂涂抹方法诱导大鼠耳部痤疮形成,建模... 目的 探究维胺酯治疗大鼠耳部痤疮表皮过度角化的具体机制。方法 将30只雄性Sprague Dawley大鼠随机分成对照组、模型组和维胺酯治疗组。利用痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes,P.acnes)联合皮脂涂抹方法诱导大鼠耳部痤疮形成,建模成功后,通过灌胃给药,每12 h 1次,持续30 d。给药结束后,取大鼠痤疮组织,免疫组化,苏木精-伊红染色法检测组织病理,转录组测序分析结合分子对接预测维胺酯作用靶标,最后通过免疫印迹验证维胺酯对角化蛋白的影响。随后通过培养人角质形成细胞HaCat,考察维胺酯对热灭活后的P.acnes诱导HaCat细胞增殖及角化水平的影响,并通过沉默视黄醇结合蛋白(retinol binding protein 4,RBP4)验证维胺酯与RBP4的靶向关系。结果 维胺酯治疗30 d后,可显著改善大鼠耳部红肿、表皮增厚、炎症反应等症状,并抑制角化相关蛋白波形蛋白(vimentin)和角蛋白(keratin 6,KRT6)表达。转录组分析结果显示,维胺酯对细胞角化生物途径具有显著调控作用。分子对接结果显示RBP4可能是维胺酯发挥作用的关键靶点。免疫印迹结果证实维胺酯能够上调痤疮大鼠RBP4/视黄酸受体-γ(retinoic acid receptor γ,RARγ)蛋白表达。细胞层面,维胺酯可显著抑制P.acnes诱导后HaCat细胞的异常增殖及角化蛋白vimentin和KRT6的表达,并下调丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(protein kinase B,也被称为Akt)蛋白磷酸化;而在转染RBP4 siRNA后,维胺酯对上述现象的调控作用均被显著逆转。结论 维胺酯通过激活RBP4/RARγ从而下调Akt蛋白磷酸化来抑制大鼠耳部表皮的过度角化来改善痤疮,并抑制由P.acnes诱导的人表皮角质形成细胞增殖及角化。 展开更多
关键词 维胺酯 痤疮 角化过度 视黄醇结合蛋白 视黄酸受体-γ
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中间偃麦草RAR1基因的分离及其在小麦背景中的功能分析 被引量：11
7
作者 廖勇 张增艳 +5 位作者 杜丽璞 徐惠君 姚乌兰 石建业 任正隆 辛志勇 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1667-1674,共8页
【目的】RAR1是大麦抗白粉病基因和多种植物抗病(resistance,R)基因介导的抗病信号途径中的重要信号元件。为明确RAR1在小麦抗白粉病反应中的作用,为小麦广谱抗病分子育种提供基因资源,开展了本研究。【方法】采用生物信息学技术、RT-PC... 【目的】RAR1是大麦抗白粉病基因和多种植物抗病(resistance,R)基因介导的抗病信号途径中的重要信号元件。为明确RAR1在小麦抗白粉病反应中的作用,为小麦广谱抗病分子育种提供基因资源,开展了本研究。【方法】采用生物信息学技术、RT-PCR和RACE方法分离克隆中间偃麦草RAR1基因,通过酶切和连接构建该基因的单子叶高效表达载体,采用基因枪法转化小麦,对转基因小麦植株进行分子检测、表达分析和抗病鉴定。【结果】分离克隆出中间偃麦草RAR1基因,其编码蛋白具有典型的RAR1功能结构域;构建了中间偃麦草RAR1基因的单子叶高效表达载体pUBI∷RAR1;用基因枪法轰击小麦推广品种扬麦12幼胚愈伤组织1545个,获得152株再生植株,通过PCR检测出阳性植株18株,转化率为1.17%;对T1、T2代转基因材料进行PCR检测、RT-PCR分析和白粉病抗病鉴定,结果表明转入的RAR1基因能够在小麦背景中遗传,RAR1基因的超量表达可提高小麦对白粉病菌的抗性、拓宽小麦的抗病谱。【结论】分离出中间偃麦草RAR1基因,RAR1基因在小麦中超量表达可提高小麦对白粉病菌的抗性、拓宽其抗病谱,可以作为小麦白粉病广谱抗性分子育种的潜在的重要基因资源。 展开更多
关键词 rar1 分离 小麦 转基因 PCR检测 抗病性
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实时定量PCR检测46例初诊急性早幼粒细胞白血病患者PML/RARα mRNA的分子表达 被引量：10
8
作者 主鸿鹄 刘艳荣 +6 位作者 秦亚溱 李金兰 常艳 王亚哲 单福香 江滨 陆道培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期1-5,共5页
本研究探讨实时定量PCR(Q-PCR)检测PML/RARαmRNA的方法学,并对46例初诊急性早幼粒细胞白血病(APL)患者骨髓标本进行检测。构建PML/RARα的bcr1型和bcr3型转录本以及内参照abl基因转录本的阳性标准品质粒;利用ABI Prism7500型Q-PCR仪对4... 本研究探讨实时定量PCR(Q-PCR)检测PML/RARαmRNA的方法学,并对46例初诊急性早幼粒细胞白血病(APL)患者骨髓标本进行检测。构建PML/RARα的bcr1型和bcr3型转录本以及内参照abl基因转录本的阳性标准品质粒;利用ABI Prism7500型Q-PCR仪对46例初诊APL患者和40例非APL患者骨髓标本进行检测,PML/RARαmRNA定量结果以校正比值(NQ)表示,NQ=PML/RARαmRNA拷贝数/ABLmRNA拷贝数;应用四色流式细胞术检测免疫表型。结果显示,Q-PCR结果的日间差和日内差平均变异系数(CV)分别为1.58%和0·88%。可重复敏感度为可以检测5copies/100ng RNA。40例非APL患者PML/RARαmRNA均为阴性。46例初诊APL患者PML/RARαmRNA表达量NQ中位值为0.450(0.084-1.082)。比较32例bcr1型和14例bcr3型两组患者的特征表明,PML/RARαmRNA NQ中位值分别为0.454(0.084-1.082)和0.386(0.151-0.848)(P>0·05)。形态学诊断M3v的患者比例分别为9.40%和48.96%(P<0.05);初诊时WBC中位数分别为2.15(0.2-59.6)和9·35(0.91-122.8)(P<0.05),而在性别、年龄、初诊时血红蛋白和血小板计数、骨髓中APL细胞比例、DIC指标等方面无差异。流式细胞仪术检测时,CD45/SSC射门情况下,APL细胞群分布可以分为两类:高侧向角(L-SSC,粗颗粒)和非高侧向角(NL-SSC,细颗粒)两类。bcr1型患者中85.70%表现为L-SSC,而bcr3型患者中64·29%表现为NL-SSC。结论:建立的Q-PCR方法稳定可靠,敏感度高;bcr1型和bcr3型APL患者的PML/RARαmRNA表达量无差异,bcr3型APL患者中形态学M3v比例和WBC数比bcr1型患者高;PML/RARα不同转录本类型和免疫表型以及细胞形态学之间有一定的相关性。 展开更多
关键词 白血病 急性早幼粒细胞白血病 实时定量PCR PML/rarΑ
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急性早幼粒细胞白血病PML/RARα异型的临床意义 被引量：8
9
作者 孙爱宁 周海侠 +3 位作者 吴德沛 王玮 金正明 仇惠英 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期500-502,共3页
为评价急性早幼粒细胞白血病(APL)PML/RARα异型与临床治疗及预后的相关性,对71例诱导治疗的APL患者定期进行血像、骨髓像检查,用巢式RT-PCR检测PML/RARα不同转录本。结果表明:短型(S)和V型白细胞总数比长型(L型)显著升高,所以较易早... 为评价急性早幼粒细胞白血病(APL)PML/RARα异型与临床治疗及预后的相关性,对71例诱导治疗的APL患者定期进行血像、骨髓像检查,用巢式RT-PCR检测PML/RARα不同转录本。结果表明:短型(S)和V型白细胞总数比长型(L型)显著升高,所以较易早期发生严重的出血合并症。S型和V型PML/RARα患者的复发率高于L型患者。结论:APL患者PML/RARα异型可作为独立的预后因素。 展开更多
关键词 APL PML/rarα异型 白血病
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杂交山猪骨骼肌PPARγ、RARα基因与脂代谢关系的研究 被引量：6
10
作者 龚兰 金邦荃 +4 位作者 章熙霞 尹强 袁咏刚 赵莎莎 朱云 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第S1期62-67,共6页
以3个山猪杂交组合为对象,分别测定18头猪的体脂和背最长肌(LD)脂代谢表观性状及LD肌细胞上PPARγ和RARα基因,研究上游基因对脂代谢的调控作用。首先优化该基因扩增条件,并采用qRT-PCR荧光定量技术检测LD肌细胞上PPARγ和RARα基因表... 以3个山猪杂交组合为对象,分别测定18头猪的体脂和背最长肌(LD)脂代谢表观性状及LD肌细胞上PPARγ和RARα基因,研究上游基因对脂代谢的调控作用。首先优化该基因扩增条件,并采用qRT-PCR荧光定量技术检测LD肌细胞上PPARγ和RARα基因表达量。结果表明,PPARγ和RARα基因均可在骨骼肌细胞上有效表达并与体脂和IMF代谢间呈一定关联度。1/2山猪血统母猪骨骼肌细胞PPARγ和RARα基因表达量均较高,且呈现PPARγ基因为主导的脂肪合成代谢倾向,表现为皮下和肌内BF和IMF明显增加,肉质改善(p<0.05和p<0.01)。1/4山猪血统的杂交公猪和母猪骨骼肌细胞PPARγ基因表达量趋于下降,在雄性激素伴随下DDS的RARα基因升高,呈现RARα基因主导下抑制皮下或肌内脂肪原母细胞分化,脂肪沉积量明显减少。 展开更多
关键词 PPARΓ rarα 脂代谢 背最长肌 杂交山猪
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COX-2、RAR-β_2在食管鳞状细胞癌组织中的表达及相互关系 被引量：11
11
作者 唐曼 吴强 +2 位作者 吴正升 张瑰红 徐晓春 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第4期450-453,共4页
目的研究环氧化酶-2(COX-2)、维甲酸受体β2(RAR-β2)在食管鳞状细胞癌(ESCC)及周围正常黏膜组织中差异表达状况,探讨两者间相互关系及在ESCC中的作用。方法常规抽提33例食管癌及相应正常食管黏膜组织中总RNA,采用实时荧光定量PCR检测3... 目的研究环氧化酶-2(COX-2)、维甲酸受体β2(RAR-β2)在食管鳞状细胞癌(ESCC)及周围正常黏膜组织中差异表达状况,探讨两者间相互关系及在ESCC中的作用。方法常规抽提33例食管癌及相应正常食管黏膜组织中总RNA,采用实时荧光定量PCR检测33例新鲜食管癌组织和正常黏膜组织中COX-2和RAR-β2基因的表达情况。结果与正常食管黏膜组织相比,食管癌组织中COX-2的表达明显上调,而RAR-β2的表达下调(P<0.05)。Ⅰ-Ⅱ级ESCC组织中RAR-β2mRNA的表达明显高于Ⅲ级ESCC组织(P<0.05);且RAR-β2mRNA的表达与患者是否喜好热烫饮食(T≥70℃)关系密切(P<0.05)。而COX-2 mRNA的表达与患者是否喜好腌制食物显著相关(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌与RAR-β2、COX-2的表达有密切相关性。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 实时荧光定量PCR COX-2 rar-β2
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RARβ在胃癌细胞生长调节中的作用 被引量：4
12
作者 吴乔 陈正明 +2 位作者 刘苏 陈玉强 苏文金 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第5期689-693,共5页
为探讨 RARβ受体介导全反式视黄酸 ( ATRA)抑制胃癌细胞生长的作用机理 ,用 Northern印迹测定 RARβ m RNA表达水平 ,脂质体介导的转染方法将含有 RARβ基因的表达载体转染MKN- 45细胞并稳定表达 ,MTT和软琼脂集落形成等实验测定细胞... 为探讨 RARβ受体介导全反式视黄酸 ( ATRA)抑制胃癌细胞生长的作用机理 ,用 Northern印迹测定 RARβ m RNA表达水平 ,脂质体介导的转染方法将含有 RARβ基因的表达载体转染MKN- 45细胞并稳定表达 ,MTT和软琼脂集落形成等实验测定细胞生长速率和生长状态 ,氯霉素乙酰转移酶活性 ( CAT)测定视黄酸应答元件βRARE的转录活性以及 AP- 1 ( activator protein- 1 )活性 .RARβ在 ATRA敏感细胞株 MGC80 - 3、BGC- 82 3和 SGC- 790 1中表达 ,而在 ATRA抗性细胞株 MKN- 45中不表达 .当 RARβ基因转染 MKN- 45细胞时 ,细胞变为 ATRA敏感 ,由此导致ATRA抑制 MKN- 45细胞生长和软琼脂集落形成 .ATRA可以加强诱导 MGC80 - 3、BGC- 82 3和SGC- 790 1细胞βRARE的转录活性 ,但对 MKN- 45细胞影响不大 ,不能抑制细胞 AP- 1活性 .当RARβ基因转染 MKN- 45细胞后 ,ATRA则能够诱导细胞 βRARE的转录活性 ,并抑制细胞的 AP-1活性 .RARβ表达与 ATRA抑制胃癌细胞生长密切相关 .ATRA诱导 βRARE转录活性和抑制AP- 1活性可能是其调控胃癌细胞生长的机制之一 . 展开更多
关键词 胃癌 细胞生长 抑制作用 rarβ受体 ATRA
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胃癌细胞中AP-1活性与RARα介导的相关性 被引量：7
13
作者 吴乔 陈正明 苏文金 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第5期684-688,共5页
为确定全反式视黄酸 ( ATRA)抑制胃癌细胞 AP- 1活性过程中 RARα介导的作用机理 ,利用 Northern印迹和 Western印迹测定 RARα基因和 c Jun、c Fos蛋白表达水平 ;氯霉素乙酰转移酶活性 ( CAT)分析 AP- 1活性 ;以及 MTT法检测细胞生长速... 为确定全反式视黄酸 ( ATRA)抑制胃癌细胞 AP- 1活性过程中 RARα介导的作用机理 ,利用 Northern印迹和 Western印迹测定 RARα基因和 c Jun、c Fos蛋白表达水平 ;氯霉素乙酰转移酶活性 ( CAT)分析 AP- 1活性 ;以及 MTT法检测细胞生长速率 .结果表明 ,ATRA能够诱导 RARα表达 ,抑制 c Jun和 c Fos蛋白表达和 AP- 1活性 ,由此导致胃癌细胞生长抑制 .结果证实 ,ATRA抑制胃癌细胞 AP- 1活性是抑制细胞生长的重要途径之一 ,并与 RARα介导密切相关 . 展开更多
关键词 AP-1活性 rarα 胃癌 细胞生长 抑制作用
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实时定量PCR监测急性早幼粒细胞白血病患者PML/RARα融合基因的临床意义 被引量：7
14
作者 丁士华 秦慧 +2 位作者 翟志敏 吴凡 熊述道 《山东医药》 CAS 2014年第1期34-36,共3页
目的探讨实时定量PCR检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML/RARα融合基因表达水平的意义。方法用扩增培养的NB4细胞的PML/RARα融合基因进行梯度稀释作为标准品,ABL作为内参,建立标准曲线。采用Taq Man法进行实时定量PCR,并对方法的可靠... 目的探讨实时定量PCR检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML/RARα融合基因表达水平的意义。方法用扩增培养的NB4细胞的PML/RARα融合基因进行梯度稀释作为标准品,ABL作为内参,建立标准曲线。采用Taq Man法进行实时定量PCR,并对方法的可靠性、可重复性及灵敏性进行测定。对14例APL患者在初治、诱导缓解及巩固治疗3个时期的PML/RARαmRNA转录本水平进行动态定量监测,结果以NQ表示,NQ=PML/RARαmRNA的拷贝数/ABL mRNA的拷贝数×105。结果实时定量PCR方法可以检测出1×10-5μg NB4细胞cDNA中PML/RARα的融合基因,其重复性和稳定性Ct值变异系数分别为1.77%和2.11%。14例患者初治时骨髓PML/RARα融合基因平均水平为3 731,经全反式维甲酸、三氧化二砷双诱导缓解时PML/RARα融合基因平均水平为231,化疗与维甲酸序贯巩固治疗2个疗程后PML/RARα融合基因平均水平为116。治疗前后比较,PML/RARα基因转录本水平明显下降(P<0.05)。结论实时定量PCR检测PML/RARα融合基因表达敏感性好、特异性高、重复性好,可用于急性早幼粒细胞的诊断和微小残留病的检测。 展开更多
关键词 白血病 早幼粒细胞 急性 实时定量PCR PML rarα融合基因 微小残留病
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ATRA对甲状腺鳞癌细胞生长及RARβ和p21mRNA表达的影响 被引量：3
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作者 肖建英 李男 +3 位作者 张秀梅 赵颂 王翠瑶 崔明宇 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期759-762,共4页
目的观察全反式维甲酸(ATRA)对甲状腺鳞癌SW579细胞株生长增殖及维甲酸受体β(RARβ)和p21表达的影响,进而探讨维甲酸的抗癌作用机制。方法甲状腺鳞癌SW579细胞株经不同浓度ATRA作用48h后,在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化;MT... 目的观察全反式维甲酸(ATRA)对甲状腺鳞癌SW579细胞株生长增殖及维甲酸受体β(RARβ)和p21表达的影响,进而探讨维甲酸的抗癌作用机制。方法甲状腺鳞癌SW579细胞株经不同浓度ATRA作用48h后,在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化;MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR方法检测细胞RARβ及p21mRNA的表达。结果随着ATRA的升高,SW579细胞的生长呈显著抑制状态,细胞生长滞留在G1期,RARβ和p21mRNA表达水平均显著上调,呈剂量依赖性。结论 ATRA在一定浓度范围内对甲状腺鳞癌SW579细胞株有剂量依赖性的增殖抑制作用,其机制可能与提高细胞RARβ基因的表达、进而再上调p21的表达有关。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 甲状腺鳞癌 维甲酸受体rarβ P21
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RAR-β_2基因启动子异常甲基化与散发性乳腺癌的关系 被引量：4
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作者 谢飞 向希映 +2 位作者 张吉才 陶建蜀 冯景 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期408-410,415,共4页
目的探讨RAR-β2基因(retinoic acid receptor β2 gene)在散发性乳腺癌中启动子异常甲基化状况,进而探讨在散发性乳腺癌早期诊断中的检测价值。方法用甲基化特异性PCR(MSP)法和实时荧光定量PCR法对62例散发性乳腺癌病人的癌组织,15例... 目的探讨RAR-β2基因(retinoic acid receptor β2 gene)在散发性乳腺癌中启动子异常甲基化状况,进而探讨在散发性乳腺癌早期诊断中的检测价值。方法用甲基化特异性PCR(MSP)法和实时荧光定量PCR法对62例散发性乳腺癌病人的癌组织,15例增生的乳腺组织,10例正常乳腺组织进行RAR-β2基因的异常甲基化的检测。结果散发性乳腺癌癌组织中50%(31/62)发生了RAR-β2基因甲基化,增生的乳腺组织标本中20%(3/15)发生了RAR-β2基因启动子甲基化,正常的乳腺组织中均未检测到RAR-β2基因的甲基化。散发性乳腺癌癌组织中甲基化率与年龄、绝经与否无相关性,与淋巴结转移和临床分期有相关性(P<0.05);散发性乳腺癌与增生的乳腺组织和正常的乳腺组织间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RAR基因甲基化可能参与了乳腺癌的发生发展过程,与乳腺癌的病理分期和预后评估等方面有关。 展开更多
关键词 散发性乳腺癌 DNA甲基化 rar-β2基因 甲基化特异性PCR
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焦磷酸测序检测RARβ2基因启动子甲基化方法的建立 被引量：4
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作者 李宏伟 李慎 +8 位作者 梁平 赵锦荣 黄启超 郭晏海 雷小英 刘永兰 隋文君 张菊 颜真 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第14期1285-1288,共4页
目的:建立基因启动子甲基化的焦磷酸测序检测方法,为基因启动子甲基化标志物的检测奠定基础.方法:从正常人全血中提取基因组DNA.采用复合巢式PCR的方法扩增目的基因,克隆构建对照标准品质粒.使用甲基化特异性焦磷酸测序检测RARβ2基因... 目的:建立基因启动子甲基化的焦磷酸测序检测方法,为基因启动子甲基化标志物的检测奠定基础.方法:从正常人全血中提取基因组DNA.采用复合巢式PCR的方法扩增目的基因,克隆构建对照标准品质粒.使用甲基化特异性焦磷酸测序检测RARβ2基因启动子CpG岛的5个甲基化位点,双脱氧测序验证.将阳性和阴性对照标准品质粒PCR扩增产物按不同比例混合后进行焦磷酸测序,检测每个点的甲基化程度,制作校正曲线.结果:构建了甲基化特异性焦磷酸测序阴性对照和阳性对照标准品.经焦磷酸测序检测后,阴性对照标准品甲基化程度为0%,阳性对照标准品甲基化程度为100%,与双脱氧测序结果一致.经对混合样品检测,甲基化频率符合线性关系,线性相关性大于0.99,斜率约为1,并且所有位点的标准偏差约为1%.结论:成功构建了甲基化特异性焦磷酸测序检测RARβ2启动子区域甲基化阳性对照和阴性对照标准品质粒.建立了甲基化特异性焦磷酸测序检测基因启动子甲基化的方法. 展开更多
关键词 rarβ2 启动区(遗传学) 甲基化 焦磷酸测序
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组蛋白乙酰化修饰调控RAR-β2表达与宫颈病变的相关性 被引量：3
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作者 伍娇娇 冯定庆 +3 位作者 田园 徐汉杰 李兵 凌斌 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期300-304,共5页
目的：探讨组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达及宫颈病变发生发展的关系。方法：收集正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ-Ⅲ和宫颈鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）组织，分别采用免疫组... 目的：探讨组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达及宫颈病变发生发展的关系。方法：收集正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ-Ⅲ和宫颈鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）组织，分别采用免疫组织化学和WesternBlot方法检测AcH3、RAR—B：和Involucrin的表达；分析组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达及宫颈病变程度的关系。结果：随着宫颈病变的进展，AcH3、RAR-β2和Involucrin的表达逐渐降低，甚至缺失，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达呈正相关（r=0．797，P〈0．05），AcH3和RAR-β2的表达均与宫颈病变程度呈负相关[r=-0．5479（Ach3）,r=-0．585（RAR-β2），P〈0．05]。结论：组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达调控有关，并可能参与宫颈癌的发生。 展开更多
关键词 组蛋白乙酰化修饰 rar-β2 宫颈上皮内瘤变 宫颈鳞状细胞癌 分化
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动态监测PML-RARα融合基因对急性早幼粒细胞白血病的临床意义 被引量：2
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作者 刘敏 吕晓东 +5 位作者 魏旭东 岳寒 范瑞华 徐本玲 姚金晓 黄琛 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第44期13-14,共2页
目的动态监测急性早幼粒细胞白血病(APL)特有的PML-RARα基因,并探讨其临床意义。方法15例APL患者用全反式维甲酸(ATRA)和其他化疗药物进行诱导缓解、巩固和维持治疗,并进行随访,在病程的不同阶段采集骨髓标本进行形态学检查,并采用实... 目的动态监测急性早幼粒细胞白血病(APL)特有的PML-RARα基因,并探讨其临床意义。方法15例APL患者用全反式维甲酸(ATRA)和其他化疗药物进行诱导缓解、巩固和维持治疗,并进行随访,在病程的不同阶段采集骨髓标本进行形态学检查,并采用实时定量PCR(RQ-PCR)技术检测PML-RARα基因表达。结果15例APL患者入院时PML-RARα均为阳性,治疗中死亡1例、完全缓解14例(93%)。14例完全缓解患者中2例复发,13例在病程中PML-RARα转为阴性。2例复发患者中,1例PML-RARα持续阳性,1例在病程中由阴性转为阳性。13例仍生存者中,至少已连续3次PML-RARα为阴性。结论对APL患者跟踪检测PML-RARα融合基因可早期发现复发病例;RQ-PCR检测PML-RARα对APL诊断、疗效判定及微小残留病变监测是一种有力手段。 展开更多
关键词 白血病 早幼粒细胞 急性 PML—rarα 实时定量PCR 复发
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急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因筛查及实时定量检测平台的建立 被引量：3
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作者 康志杰 崔嵩 +6 位作者 李莉 高贝贝 黄丹 陈雪瑜 高源 杨岩 闫金松 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第7期1522-1526,共5页
目的:针对90%以上的急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者表达的PML/RARα融合基因,设计引物及探针。对APL患者进行基因筛查,并构建PML/RARα环形质粒作为标准品,建立APL患者PML/RARα融合基因检测及微小残留病... 目的:针对90%以上的急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者表达的PML/RARα融合基因,设计引物及探针。对APL患者进行基因筛查,并构建PML/RARα环形质粒作为标准品,建立APL患者PML/RARα融合基因检测及微小残留病变监测的诊断平台,为APL患者的诊治提供分子生物学依据。方法:设计PML/RARα及ABL引物及Taqman探针,对APL患者进行基因筛查。并以PML/RARαL型及S型阳性的APL患者cDNA为模板,应用PCR技术扩增出453bp和550bp基因片段,构建pMD 18TPML/RARα(L)及pMD 18T-PML/RARα(S)标准品。实时荧光定量(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)技术对该基因转录本水平的变化情况进行监测。结果:成功构建pMD 18T-PML/RARα质粒标准品,应用RQ-PCR技术,以ABL为内参,应用Taqman探针法,对APL患者标本进行检测,技术可行,数据稳定。结论:成功构建APL融合基因检测及微小残留病变监测的诊断平台,应用于临床病人的基因诊断,为APL的诊治提供了可靠的分子依据。 展开更多
关键词 PML rarα 标准品 基因筛查 实时荧光定量 诊断平台 急性早幼粒细胞白血病
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